廣東省增城中學高三第三次模擬考試新高考生物試卷及答案解析

廣東省增城中學高三第三次模擬考試新高考生物試卷注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．細胞有絲分裂和減數(shù)分裂都可能產(chǎn)生可遺傳的變異，其中僅發(fā)生在減數(shù)分裂過程的變異是A．染色體不分離或不能移向兩極，導致染色體數(shù)目變異B．非同源染色體自由組合，導致基因重組C．染色體復制時受誘變因素影響，導致基因突變D．非同源染色體某片段移接，導致染色體結(jié)構(gòu)變異2．離體培養(yǎng)的小鼠造血干細胞經(jīng)紫外線誘變處理后對甘氨酸的吸收功能喪失，其它功能不受影響，且這種特性在細胞多次分裂后仍能保持。下列分析正確的是（）A．造血干細胞產(chǎn)生的這種變異是不可遺傳變異B．細胞發(fā)生變異后合成蛋白質(zhì)不再需要甘氨酸C．紫外線誘發(fā)了細胞中的ATP合成酶基因突變D．細胞膜上相應(yīng)載體蛋白缺失或結(jié)構(gòu)發(fā)生變化3．科學研究中經(jīng)常用到建構(gòu)模型法、同位素標記法、熒光蛋白標記法、類比推理法、假說一演繹法等方法或技術(shù)。下列研究中，使用的方法或技術(shù)不相同的一組是（）A．T2噬菌體侵染實驗和肺炎雙球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實驗B．摩爾根的果蠅雜交實驗和孟德爾的豌豆雜交實驗C．制作生物膜模型和制作真核細胞三維結(jié)構(gòu)模型D．人鼠細胞融合實驗和現(xiàn)代生物學將基因定位在染色體上4．科學研究發(fā)現(xiàn)有些人可能具有抵抗HIV侵染的能力，原因是其細胞中含有HLAB57基因，能使身體內(nèi)產(chǎn)生更多功能強大的某種免疫細胞，該種免疫細胞能產(chǎn)生大量可束縛HIV的蛋白質(zhì)。下列有關(guān)人體免疫調(diào)節(jié)的說法比較合理的是（）A．被HIV感染的人就是HIV患者B．機體只能依賴漿細胞產(chǎn)生的抗體消滅HIVC．艾滋病病人的直接死因是B細胞被攻擊受損D．含有HLAB57基因的某些細胞可能具有識別HIV的能力5．在晴朗的夏季，將一正常生長的綠色植物放入密閉的透明玻璃罩內(nèi)，室外繼續(xù)培養(yǎng)。每隔一段時間用C02濃度檢測儀測定玻璃罩內(nèi)C02濃度，繪制成如圖所示曲線（水平虛線：實驗開始時玻璃罩內(nèi)CO2濃度）。據(jù)圖得出的正確判斷是A．FG段表明氣孔關(guān)閉，不進行光合作用B．E點時植物體內(nèi)的有機物含量比A點時多C．D點開始進行光合作用，H點光合作用消失D．該植物體內(nèi)的有機物在一晝夜內(nèi)有所增加6．某同學進行“制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型”活動，現(xiàn)提供六種不同形狀和顏色的材料分別代表核苷酸的三個組成部分，還有一些小棒用以連接各種化合物，若要制作一個含10對堿基（C有6個）的DNA雙鏈模型，則需要的小棒數(shù)目為（）A．68 B．78 C．82 D．84二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）前不久，某生物公司的百白破疫苗檢驗不符合規(guī)定。為生產(chǎn)高效價疫苗和簡化計劃免疫程序，科學家研制出基因工程乙肝—百白破（rHB-DTP）四聯(lián)疫苗，經(jīng)各項檢測均通過rHB-DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原和百日咳桿菌、白喉桿菌、破傷風桿菌的類毒素。請分析回答：（1）為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細胞中提取對應(yīng)mRNA，在________的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的CNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列________（填“相同”或“不同”）。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用________，然后通過PCR技術(shù)大量擴增，此技術(shù)的前提是已知________。（3）把目的基因?qū)胧荏w細胞時，科學家采用了改造后的腺病毒作為載體，寫出你認為科學家選它的理由：________（寫出兩點）。（4）研究發(fā)現(xiàn)，如果將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼幔庖咝Ч茫埻晟拼朔N技術(shù)的基本流程：從預期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→________→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。（5）實驗證明，一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的________細胞數(shù)量增多，當同種抗原再次侵入人體時二次免疫的特點是________。8．（10分）人t-PA蛋白能高效溶解血纖維蛋白凝聚的血栓。用傳統(tǒng)基因工程生產(chǎn)的t-PA給心?；颊叽髣┝孔⑸鋮s會誘發(fā)顱內(nèi)出血，原因在于其與血纖維蛋白結(jié)合的特異性低，但若將其第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，就能顯著降低出血副作用。據(jù)此，科學家對人t-PA基因進行序列改造，再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該突變基因，制造出了高性能的t-PA突變蛋白。（1）人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA。絲氨酸的密碼子為UCU，突變基因中對應(yīng)該氨基酸密碼子的堿基序列應(yīng)設(shè)計為______。（2）上述獲得突變目的基因的基本途徑是___。（3）如圖所示t-PA突變基因、質(zhì)粒，用__________限制酶切開該質(zhì)粒較好。（4）將相應(yīng)的重組質(zhì)粒導入大腸桿菌中，含t-PA突變基因的細胞應(yīng)具有的性狀是______。（5）上述生物工程技術(shù)是以_______為基礎(chǔ)的，首先通過________，再進行______，以滿足醫(yī)療需求的。9．（10分）某種細菌可以分解石油殘存物(含有C、H、O元素)，現(xiàn)要分離、培養(yǎng)該細菌，操作步驟為：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布樣品到培養(yǎng)基→選擇菌落。請據(jù)此回答：（1）細菌與真菌最主要的區(qū)別在于：細菌___________________________________。（2）石油殘存物可以為該種細菌提供的營養(yǎng)物質(zhì)是________________，分離該細菌的培養(yǎng)基從功能上叫做_____________培養(yǎng)基。（3）取樣時用到的一切工具均需要__________________。梯度稀釋、涂布樣品到培養(yǎng)基則必須在_____________________(填場所)進行。（4）若需要對細菌計數(shù)，常用的簡便方法是_______________，該方法測得的數(shù)目往往比實際值________________(填“大”或“小”)。10．（10分）鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在，可造成土壤酸化而影響植物生長。鋁能抑制植物根尖細胞的分裂，破壞根組織。某植物甲的根毛細胞的細胞膜上存在蘋果酸通道蛋白（ALMT），該通道蛋白能將蘋果酸轉(zhuǎn)運到細胞外來緩解鋁毒?？蓪⒖刂艫LMT的基因?qū)氩荒弯X的植物中，最終獲得耐鋁植物。請回答下列問題：（1）下表是運載體上出現(xiàn)的幾種限制酶的識別序列及切割位點。用表中的限制酶切割DNA后能形成相同黏性末端的是_____。限制酶識別序列和切割位點EcoRIG1AATTCBamHIG1GATCCHindIIIA1AGCTTXhoIC1TCGAGNdeICA1TATGSalIG1TCGAC（2）欲獲得ALMT基因的cDNA，科研人員從_______細胞中獲取總mRNA，在相應(yīng)酶作用下獲得多種cDNA，再利用ALMT基因制作出特異性________，通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。（3）啟動子是_______識別并結(jié)合的位點，能調(diào)控目的基因的表達。ALMT基因的啟動子有兩種類型，其中α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導下表達，β啟動子能使ALMT基因高效表達而無需酸性誘導。在獲得轉(zhuǎn)ALMT基因耐鋁植物時應(yīng)使用_______啟動子，不使用另外一種啟動子的原因是_____________________。（4）科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，首先將ALM基因?qū)胫参锛毎⒄系绞荏w細胞染色體的DNA上，再通過_____技術(shù)成功獲得了耐鋁植株。若將一株耐鋁植株與普通植株雜交，得到的后代中耐鋁植株：普通植株約為3：1，則可判斷這株耐鋁植株細胞至少轉(zhuǎn)入了_____個ALMT基因，轉(zhuǎn)入的基因在染色體上的位置關(guān)系是：______；若使這株耐鋁植株自交，后代中耐鋁植株：普通植株約為_______。11．（15分）色氨酸是大腸桿菌合成蛋白質(zhì)所必需的一種氨基酸。研究人員發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中無論是否添加色氨酸，都不影響大腸桿菌的生長。（1）研究發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌有5個與色氨酸合成有關(guān)的基因。在需要合成色氨酸時，這些基因通過__________（過程）合成相關(guān)酶。大腸桿菌對色氨酸需求的響應(yīng)十分高效，原因之一是由于沒有核膜的界限，__________。（2）進一步發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中增加色氨酸后，大腸桿菌相關(guān)酶的合成量大大下降。經(jīng)過測序，研究者發(fā)現(xiàn)了大腸桿菌色氨酸合成相關(guān)基因的結(jié)構(gòu)（圖1）。①由圖1可知，在培養(yǎng)基中有__________的條件下，trpR指導合成的抑制蛋白能夠結(jié)合在操縱序列，從而阻止__________與啟動子的結(jié)合，從而抑制色氨酸相關(guān)酶的合成。②隨著研究的深入，研究者發(fā)現(xiàn)，色氨酸合成相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄后形成的mRNA的5’端有一段“無關(guān)序列”編碼出的多肽不是色氨酸合成酶，但將這段多肽對應(yīng)基因序列敲除后，發(fā)現(xiàn)色氨酸合成酶的合成出現(xiàn)了變化（圖2）。由此可知，圖1中的抑制蛋白的抑制作用是__________（填“完全的”或“不完全的”），推測“無關(guān)序列”的作用是__________。“無關(guān)序列”包含具有一定反向重復特征4個區(qū)域，且其中富含色氨酸的密碼子。當核糖體在mRNA上滑動慢時，2、3區(qū)配對；相反，3、4區(qū)配對形成一個阻止mRNA繼續(xù)合成的莖—環(huán)結(jié)構(gòu)（圖3）。進一步研究發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中有色氨酸時，色氨酸合成相關(guān)基因能夠轉(zhuǎn)錄出一個很短的mRNA分子，該段分子只有1—4區(qū)的長度。結(jié)合上述研究，“無關(guān)序列”完成調(diào)控的機制是__________。（3）“無關(guān)序列”在控制大腸桿菌代謝的過程中起到了一種“RNA開關(guān)”功的能，令其能夠響應(yīng)外界代謝物的含量變化，避免了__________。請?zhí)岢鲇嘘P(guān)這種“RNA開關(guān)”調(diào)控機制的一種研究或應(yīng)用前景：__________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

有絲分裂和減數(shù)分裂都可以發(fā)生染色體不分離或不能移向兩極，從而導致染色體數(shù)目變異，A錯誤；非同源染色體自由組合，導致基因重組只能發(fā)生在減數(shù)分裂過程中，B正確；有絲分裂和減數(shù)分裂的間期都發(fā)生染色體復制，受誘變因素影響，可導致基因突變，C錯誤；非同源染色體某片段移接，導致染色體結(jié)構(gòu)變異可發(fā)生在有絲分裂和減數(shù)分裂過程中，D錯誤。2、D【解析】

造血干細胞吸收甘氨酸的過程屬于主動運輸過程，需要載體蛋白的協(xié)助，同時需要消耗能量；離體培養(yǎng)的造血干細胞，經(jīng)紫外線誘變處理后，可能導致控制合成運輸甘氨酸的載體的基因發(fā)生基因突變，對甘氨酸的吸收功能喪失?！驹斀狻緼、根據(jù)題干信息“這種特性在細胞多次分裂后仍能保持”，可知造血干細胞產(chǎn)生的這種變異是可遺傳變異，A錯誤；B、細胞發(fā)生變異后合成蛋白質(zhì)仍需要甘氨酸，B錯誤；C、由題意知，紫外線照射后，細胞仍能進行細胞分裂等耗能過程，因此細胞中催化ATP合成的相關(guān)酶系沒有被破壞，C錯誤；D、紫外線照射后，對甘氨酸的吸收功能喪失，可能是控制合成運輸甘氨酸的載體的基因發(fā)生基因突變，導致細胞膜上相應(yīng)的載體蛋白缺失或結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，D正確。故選D?！军c睛】本題旨在考查學生理解所學自身的要點，把握知識的內(nèi)在聯(lián)系，并運用相關(guān)知識對某些生物學問題進行解釋、推理、判斷、獲取結(jié)論的能力。3、A【解析】

遺傳學中常見的科學的研究方法有：

（1）假說-演繹法：在觀察和分析基礎(chǔ)上提出問題以后，通過推理和想像提出解釋問題的假說，根據(jù)假說進行演繹推理，再通過實驗檢驗演繹推理的結(jié)論。如果實驗結(jié)果與預期結(jié)論相符，就證明假說是正確的，反之，則說明假說是錯誤的。例如孟德爾的豌豆雜交實驗、摩爾根研究的伴性遺傳等。

（2）類比推理法：類比推理指的是根據(jù)兩個或兩類對象在某些屬性上相同，推斷出它們在另外的屬性上（這一屬性已為類比的一個對象所具有，另一個類比的對象那里尚未發(fā)現(xiàn)）也相同的一種推理。薩頓的假說“基因在染色體上”運用了類比推理法。

（3）模型構(gòu)建法：模型是人們?yōu)榱四撤N特定的目的而對認識對象所做的一種簡化的概括性的描述，這種描述可以是定性的，也可以是定量的；有的借助具體的實物或其它形象化的手段，有的則抽象的形式來表達。模型的形式很多，包括物理模型、概念模型、數(shù)學模型等。以實物或圖畫形式直觀的表達認識對象的特征，這種模型就是物理模型。沃森和克里克制作的著名的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，就是物理模型。

（4）放射性同位素標記法：放射性同位素可用于追蹤物質(zhì)運行和變化的規(guī)律，例如噬菌體侵染細菌的實驗。【詳解】A、T2噬菌體侵染細菌的實驗所用的方法為同位素標記法，而肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗沒有用該方法，A符合題意；B、摩爾根的果蠅雜交實驗和孟德爾的豌豆雜交實驗都運用了假說—演繹法，B不符合題意；C、制作生物膜模型和制作真核細胞三維結(jié)構(gòu)模型都用到了構(gòu)建模型的方法，C不符合題意；D、人鼠細胞融合實驗和現(xiàn)代生物學將基因定位在染色體上都運用了熒光標記技術(shù)，D不符合題意。故選A。【點睛】本題考查科學實驗的實驗方法，掌握不同階段各科學家的實驗過程、實驗現(xiàn)象及實驗結(jié)論，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項。4、D【解析】

關(guān)于“艾滋病”，考生可以從以下幾方面把握：（1）艾滋病的中文名稱是獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS），其病原體是人類免疫缺陷病毒（HIV）。（2）艾滋病的致病原理：HIV病毒進入人體后，與人體的T淋巴細胞結(jié)合，破壞T淋巴細胞，使免疫調(diào)節(jié)受到抑制，使人的免疫系統(tǒng)癱瘓，最后使人無法抵抗其他細菌、病毒的入侵，讓人死亡。（3）艾滋病的傳播途徑包括：血液傳播、性傳播、母嬰傳播?！驹斀狻緼、被HIV感染的人可能是HIV攜帶者，不一定是患者，A錯誤；B、正常機體應(yīng)該依賴細胞免疫和體液免疫共同消滅侵入人體的抗原，B錯誤；C、由于T細胞被攻擊受損，免疫力降低，艾滋病病人大多死于其他病原微生物的感染或惡性腫瘤，C錯誤；D、當HIV侵入人體時，能引起含有HLAB57基因的細胞產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)，推測應(yīng)該是具有識別HIV的能力，D正確。故選D。5、D【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：由于正常生長的綠色植物放入了密閉的透明玻璃罩內(nèi)，因此玻璃罩內(nèi)CO2濃度上升表示呼吸作用大于光合作用或只進行呼吸作用；當玻璃罩內(nèi)CO2濃度下降時，表示光合作用大于呼吸作用．圖中D點和H點時表示光合作用強度等于呼吸作用強度．【詳解】A、FG段原因是光照強，氣溫高，導致蒸騰作用強，水分散失多，氣孔關(guān)閉，CO2供應(yīng)不足，光合作用略有下降，但仍能進行光合作用，A錯誤；B、E點時，透明玻璃罩內(nèi)的CO2濃度與A點時相等，所以E點時植物體內(nèi)的有機物含量與A點時一樣多，B錯誤；C、D點和H點時表示光合作用強度等于呼吸作用強度，C錯誤；D、K點與A點相比，璃罩內(nèi)CO2濃度有所降低，說明有一定的有機物積累，因此該植物體內(nèi)的有機物在一晝夜內(nèi)有所增加，D正確．故選D．6、D【解析】

DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)：①DNA分子是由兩條反向平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成的。②DNA分子中的脫氧核糖和磷酸交替連接，排列在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架，堿基在內(nèi)側(cè)。③兩條鏈上的堿基通過氫鍵連接起來，形成堿基對且遵循堿基互補配對原則（A-T之間有2個氫鍵，C-G之間有3個氫鍵）?！驹斀狻吭撃Ｐ椭泻?0對堿基（C有6個），則C-G堿基對6個，A-T堿基對4個，其中A和T之間有2個氫鍵，C-G之間有3個氫鍵；又由于每個脫氧核苷酸內(nèi)部有兩個化學鍵，脫氧核苷酸之間有1個化學鍵，則需要2×4+3×6+20×2+（10-1）×2=84個小棒。綜上所述，D正確，A、B、C錯誤。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、逆轉(zhuǎn)錄酶不同化學方法人工合成（人工化學合成）一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物能自主復制、有多個限制酶切位點、有標記基因、對宿主細胞無害（答出其中兩個即可）設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)記憶短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細胞，免疫預防作用更強?！窘馕觥?/p>

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。2、記憶細胞使得二次免疫反應(yīng)快而強。【詳解】（1）由mRNA合成cDNA的過程屬于逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶。獲得的cDNA片段只包含基因的編碼區(qū)，沒有非編碼區(qū)，因此與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用化學方法人工合成，然后通過PCR技術(shù)大量擴增。通過PCR技術(shù)大量擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。（3）改造后的腺病毒具有能自主復制、有多個限制酶切位點、有標記基因、對宿主細胞無害等特點，故可用做載體。（4）將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼釋儆诘鞍踪|(zhì)工程的范疇。其基本流程是從預期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。（5）一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細胞數(shù)量增多，當同種抗原再次侵入人體時，記憶細胞會立即增殖分化，產(chǎn)生漿細胞或者效應(yīng)T細胞發(fā)揮免疫效應(yīng)。二次免疫的特點是短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細胞，免疫預防作用更強?！军c睛】本題考查基因工程的基本工具和基本步驟、蛋白質(zhì)工程的步驟，二次免疫過程，要求考生識記基因操作工具的作用、目的基因獲取的方法、蛋白質(zhì)工程的操作步驟、二次免疫的特點，結(jié)合題干分析答題。8、AGA從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的基因脫氧核苷酸序列Xmal、Bg/II新霉素抗性且呈白色蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或制造新的蛋白質(zhì)【解析】

本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識。基因工程的基本操作步驟：獲取目的基因→構(gòu)建基因表達載體→導入受體細胞→得到轉(zhuǎn)基因生物→目的基因檢測與鑒定。蛋白質(zhì)工程可以通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進行改造，或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。【詳解】（1）人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA，根據(jù)轉(zhuǎn)錄過程堿基互補配對原則，絲氨酸的密碼子為UCU，則其模板鏈編碼序列為AGA，要將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，故需將編碼序列變?yōu)锳GA；（2）蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；（3）由于目的基因的兩端的堿基序列分別是CCGG、CTAG，所以應(yīng)用XmaI和BgII兩種限制酶切割，以便于把目的基因連接到質(zhì)粒pCLY11上；（4）由圖1可知，將連接好的DNA分子導入大腸桿菌中，由于限制酶切割質(zhì)粒破壞了mlacZ基因，所以含t-PA突變基因重組DNA分子的細胞應(yīng)具有的表型是新霉素抗性且呈白色；（5）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。【點睛】本題綜合性較強，難度較大。理清轉(zhuǎn)錄中堿基互補配對原則及基因工程的核心步驟即基因表達載體的構(gòu)建是解題的關(guān)鍵。需要注意的是：蛋白質(zhì)工程是通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。9、沒有以核膜為界限的細胞核碳源選擇滅菌酒精燈火焰旁稀釋涂布平板法小【解析】

常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌；微生物的分離是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要環(huán)節(jié)。土壤中的微生物很多，要從土壤中獲得分解石油的細菌，接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落，用途：一般多用于從菌種的純化；稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞，計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)?！驹斀狻浚?）原核生物和真核生物的本質(zhì)區(qū)別是有無以核膜為界的細胞核，細菌屬于原核生物，真菌屬于真核生物，因此細菌與真菌相比的區(qū)別在于細菌沒有以核膜為界限的細胞核。（2）微生物的生長需要碳源、氮源、水和無機鹽等，石油可為該細菌的生長繁殖提供碳源。分離細菌的培養(yǎng)基從功能上屬于選擇培養(yǎng)基。（3）微生物培養(yǎng)需要無菌環(huán)境，因此取樣時用到的一切工具需要進行滅菌處理，使用稀釋涂布平板法對微生物進行分離培養(yǎng)時，梯度稀釋、涂布樣品到培養(yǎng)基等操作需要在酒精燈火焰旁進行。（4）對細菌計數(shù)，常用的簡便方法是稀釋涂布平板法，由于兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落，因此該方法統(tǒng)計到的菌落數(shù)往往比實際值偏小?！军c睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、測定某種微生物的數(shù)量等知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分；能采用稀釋涂布平板法對微生物進行計數(shù)，并能對實驗結(jié)果進行分析和簡單的計算。10、XhoI與SalI植物甲的根（根毛）細胞引物RNA聚合酶αβ啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉(zhuǎn)運有機酸，導致正常土壤酸化，并影響植物自身的生長植物組織培養(yǎng)2分別位于兩條非同源染色體上15：1【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成?；虮磉_載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)??抗原?抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）根據(jù)圖示中限制酶的識別序列和酶切位點可判斷XhoI與SalI切割DNA后都能形成TCGA的黏性末端。（2）根據(jù)“某植物甲的根毛細胞的細胞膜上存在蘋果酸通道蛋白（ALMT）”可知，ALMT基因在根毛細胞中表達，所以欲獲得ALMT基因的cDNA，科研人員應(yīng)從植物甲的根（根毛）細胞中獲取總mRNA，在相應(yīng)酶作用下獲得多種cDNA，再利用ALMT基因制作出特異性的引物，通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。（3）啟動子是RNA聚合酶特異性識別并結(jié)合的位點，能調(diào)控目的基因的表達。ALMT基因的啟動子有兩種類型，其中α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導下表達，β啟動子能使ALMT基因高效表達而無需酸性誘導。鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在，可造成土壤酸化而影響植物生長，而α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導下表達，則在獲得轉(zhuǎn)ALMT基因耐鋁植物時應(yīng)使用α啟動子，不使用另外一種啟動子的原因是β啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉(zhuǎn)運有機酸，導致正常土壤酸化，并影響植物自身的生長。（4）科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，首先將ALM基因?qū)胫参锛毎⒄系绞荏w細胞染色體的DNA上，再通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)成功獲得了耐鋁植株。若將一株耐鋁植株與普通植株雜交，由于該雜交相當于測交，所以若得到的后代中耐鋁植株：普通植株約為3：1，則可判斷這株耐鋁植株細胞至少轉(zhuǎn)入了2個ALMT基因，且轉(zhuǎn)入的基因分別位于兩條非同源染色體上；若使這株耐鋁植株（基因型相當于AaBb，A和B均為ALMT基因）自交，后代中耐鋁植株：普通植株約為15：