無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件

無菌工藝和驗(yàn)證

無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第1頁(yè)指導(dǎo)思想：產(chǎn)品質(zhì)量是檢驗(yàn)出來標(biāo)志：抽樣檢驗(yàn)理論關(guān)注點(diǎn)：樣品檢驗(yàn)質(zhì)量管理基本方法一：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第2頁(yè)抽樣檢驗(yàn)應(yīng)用

抽樣檢驗(yàn)：經(jīng)過樣本，推斷整體。抽樣檢驗(yàn)是數(shù)理統(tǒng)計(jì)分支，它用盡量少樣本盡可能反應(yīng)全部產(chǎn)品質(zhì)量。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第3頁(yè)抽樣檢驗(yàn)應(yīng)用

抽樣檢驗(yàn)：經(jīng)過樣本，推斷整體。抽樣檢驗(yàn)是數(shù)理統(tǒng)計(jì)分支，它用盡量少樣本盡可能反應(yīng)全部產(chǎn)品質(zhì)量。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第4頁(yè)樣品抽樣檢驗(yàn)結(jié)果是判別藥品質(zhì)量唯一法定依據(jù)。樣品按USP(美國(guó)藥典)和USP-NF（國(guó)家處方集）要求檢驗(yàn)合格，即判合格；反之，則判為不合格。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第5頁(yè)FDA觀點(diǎn)：一個(gè)科學(xué)、龐大抽樣計(jì)劃，經(jīng)過擴(kuò)大抽樣檢驗(yàn)方法能夠?qū)崿F(xiàn)確保藥品質(zhì)量目標(biāo)。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第6頁(yè)FDA面臨新挑戰(zhàn)-樣品是否有代表性-抽樣檢驗(yàn)不可能發(fā)覺藥品生產(chǎn)中污染/

混同-低劑量高活性藥品混合是否均勻-無菌藥品滅菌是否有效……無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第7頁(yè)抽樣檢驗(yàn)困境：抽查批號(hào)產(chǎn)品、其對(duì)應(yīng)原料、半成品及成品均經(jīng)過抽樣檢驗(yàn)且檢驗(yàn)結(jié)果符合標(biāo)準(zhǔn)，抽樣和檢驗(yàn)方法方面毫無問題。但FDA查不到所采取工藝能一直如一地生產(chǎn)出符合要求質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品證據(jù)。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第8頁(yè)FDA官員感嘆：“我們這些藥政管理官員，經(jīng)歷了許多年經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)之后終于明白，我們?cè)谥朴喎ㄒ?guī)過程中并沒真正研究過工藝過程本身，……我們以往立足點(diǎn)是在質(zhì)量檢驗(yàn)上，而不是在質(zhì)量確保上”。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第9頁(yè)FDA結(jié)論：“工藝驗(yàn)證應(yīng)該是我們立足點(diǎn)?！碑a(chǎn)品質(zhì)量是生產(chǎn)出來，不是靠檢驗(yàn)來。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第10頁(yè)無菌無菌工藝無菌檢驗(yàn)無菌工藝和無菌檢驗(yàn)無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第11頁(yè)沒有活體微生物（細(xì)胞繁殖體）存在。無菌：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第12頁(yè)

無菌藥品是指法定藥品標(biāo)準(zhǔn)中列有沒有菌檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)制劑和無

菌原料藥，包含注射劑、眼用制劑、無菌軟膏劑、

無菌混懸液等。比如：大容量注射劑、小容量注射劑、無菌粉針、無菌凍干粉針、無菌眼藥水、無菌混懸劑、無菌原料藥等。無菌藥品：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第13頁(yè)1、濕熱滅菌法2、干熱滅菌法3、輻射滅菌法4、氣體滅菌法5、過濾滅菌法6、無菌生產(chǎn)工藝怎樣到達(dá)無菌？

《中國(guó)藥典》年版附錄ⅩⅤⅡ

滅菌法無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第14頁(yè)1.殘余概率法（Bioburdenbasedprocess）

2.過分殺滅法（Overkillprocess）3.生物指示劑/殘余概率相結(jié)合滅菌工藝（Biologicalindicator/bioburdencombinedprocess）USP滅菌方式:

32版1222章無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第15頁(yè)

以生物負(fù)荷（產(chǎn)品滅菌前微生物污染水平）為基礎(chǔ)方法，用于生產(chǎn)過程中極少檢出芽孢，產(chǎn)品穩(wěn)定性較差，只能適度滅菌產(chǎn)品。殘余概率法

Bioburdenbasedprocess無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第16頁(yè)

適合用于穩(wěn)定性很好，能經(jīng)受苛刻滅菌條件產(chǎn)品。

過分殺滅法

Overkillprocess無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第17頁(yè)過分殺滅法VS殘余概率法無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第18頁(yè)滅菌抉擇樹：能否121℃、15分鐘濕熱滅菌能否采取F0≥8濕熱滅菌，SAL≤10-6否121℃、15分鐘濕熱滅菌是采取F0≥8濕熱滅菌，SAL≤10-6能否對(duì)藥液除菌過濾否是無菌原料、無菌配制、無菌灌封藥液除菌過濾及無菌灌封否是無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第19頁(yè)滅菌工藝選擇：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第20頁(yè)滅菌工藝與生物負(fù)荷關(guān)系：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第21頁(yè)1、終端滅菌工藝

2、無菌生產(chǎn)工藝無菌藥品生產(chǎn)工藝無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第22頁(yè)能夠最終用熱力學(xué)方法除去微生物生產(chǎn)工藝。

如：大容量注射劑、水針等產(chǎn)品生產(chǎn)。終端滅菌生產(chǎn)工藝無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第23頁(yè)嚴(yán)格原料微生物標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格控制微生物污染、制訂滅菌前生物負(fù)荷程度標(biāo)準(zhǔn)控制藥液存放溫度和時(shí)間藥液取樣、污染菌判別目標(biāo)：控制生物負(fù)荷終端滅菌生產(chǎn)工藝質(zhì)量確保：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第24頁(yè)空載熱分布滿載熱分布熱穿透試驗(yàn)微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)……終端滅菌生產(chǎn)工藝驗(yàn)證關(guān)鍵點(diǎn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第25頁(yè)過濾除菌工藝無菌分裝工藝如：凍干粉針、粉針、無菌原料藥、生物疫苗、血液制品等產(chǎn)品生產(chǎn)。無菌生產(chǎn)工藝：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第26頁(yè)對(duì)進(jìn)入無菌區(qū)物料充分滅菌，消除污染源。全部接觸經(jīng)除菌過濾藥液設(shè)備都經(jīng)過清潔和滅菌驗(yàn)證防止人員直接接觸除菌后藥液、容器預(yù)防人員活動(dòng)干擾層流目標(biāo)：以預(yù)防污染為目標(biāo)，消除生產(chǎn)工藝中潛在污染各種可能性。無菌生產(chǎn)工藝質(zhì)量確保：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第27頁(yè)終端滅菌工藝VS無菌生產(chǎn)工藝無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第28頁(yè)無菌工藝模擬或培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證無菌生產(chǎn)工藝工藝驗(yàn)證關(guān)鍵點(diǎn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第29頁(yè)P(yáng)rocessSimulationTestingforAsepticallyFilledProducts

無菌灌裝產(chǎn)品工藝模擬試驗(yàn)解讀：PDATechnicalReportN0.22

無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第30頁(yè)評(píng)價(jià)無菌工藝操作能力最有效方法。完全模擬工藝配制和灌裝工藝，用一個(gè)能夠促進(jìn)微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基替換無菌產(chǎn)品。確認(rèn)無菌生產(chǎn)工藝無菌確保水平（SAL）方法。工藝模擬試驗(yàn)（培養(yǎng)基灌裝）無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第31頁(yè)證實(shí)采取無菌工藝生產(chǎn)無菌產(chǎn)品能力無菌工藝人員資質(zhì)和確保符合現(xiàn)行GMP要求無菌工藝模擬目標(biāo)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第32頁(yè)安裝干擾容器尺寸容器密封灌裝速度灌裝體積灌裝連續(xù)時(shí)間生產(chǎn)批量、工藝模擬批量工藝模擬試驗(yàn)原理1無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第33頁(yè)手動(dòng)灌裝培養(yǎng)條件培養(yǎng)基選擇容器檢驗(yàn)惰性氣體設(shè)施考慮人員考慮工藝模擬試驗(yàn)原理2無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第34頁(yè)工藝人員設(shè)備環(huán)境

培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證包含：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第35頁(yè)模擬工藝定義:使用促微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基，及與無菌物料生產(chǎn)相同方法評(píng)定無菌工藝方法。包含工藝全部步驟，從藥品成份、賦形劑（假如有）、容器、密封滅菌到產(chǎn)品密封。在無菌灌裝之前無菌藥品容器和密封后放置最長(zhǎng)時(shí)間必須包含在模擬范圍內(nèi)。工藝無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第36頁(yè)非無菌物料進(jìn)入無菌區(qū)域“切入點(diǎn)”。未經(jīng)滅菌或消毒物料，滅菌后進(jìn)入灌裝間保護(hù)手工操作進(jìn)入灌裝間前防護(hù)。設(shè)備：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第37頁(yè)生產(chǎn)環(huán)境一直符合無菌產(chǎn)品生產(chǎn)要求確保系統(tǒng)和設(shè)備按照設(shè)定目標(biāo)正常運(yùn)轉(zhuǎn)無菌確?！h(huán)境監(jiān)測(cè)無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第38頁(yè)取樣點(diǎn)選擇取樣頻率行動(dòng)限和警戒線方法學(xué)和數(shù)據(jù)解釋GMP附錄1：無菌藥品第十條（二）：

A級(jí)區(qū)監(jiān)測(cè)頻率及取樣量，應(yīng)能及時(shí)發(fā)覺全部些人為干預(yù)、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)損壞。環(huán)境監(jiān)測(cè)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第39頁(yè)最長(zhǎng)無菌生產(chǎn)、操作時(shí)間無菌生產(chǎn)中每次發(fā)生干預(yù)事件冷凍干燥設(shè)備無菌組裝人員數(shù)目和活動(dòng)無菌條件轉(zhuǎn)移交接班改變、中止和衣物更換模擬無菌工藝應(yīng)該包含（1）：

（FDA提議）無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第40頁(yè)無菌設(shè)備連接和斷開無菌樣品搜集生產(chǎn)線速度和配置重量檢驗(yàn)設(shè)備、容器密閉檢驗(yàn)SOP特殊要求模擬無菌工藝應(yīng)該包含（2）：

（FDA提議）無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第41頁(yè)滅菌系統(tǒng)潔凈環(huán)境系統(tǒng)公用輔助系統(tǒng)生產(chǎn)控制系統(tǒng)設(shè)備清洗模擬工藝還包括：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第42頁(yè)（一）選擇標(biāo)準(zhǔn)：

促生長(zhǎng)能力、低選擇性、澄明度、中等濃度和過濾性。

培養(yǎng)基：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第43頁(yè)促生長(zhǎng)能力

支持少許微生物復(fù)壯和生長(zhǎng)，10-100CFU或更少。低選擇性

1、適應(yīng)廣譜微生物生長(zhǎng)，細(xì)菌、霉菌和酵母菌都能夠生長(zhǎng)。

2、企業(yè)自己菌種庫(kù)（環(huán)境中分離微生物）培養(yǎng)基：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第44頁(yè)澄明

清澈，假如發(fā)生渾濁，能夠觀察到

中等濃度

遵照供給商提議。其它濃度或經(jīng)過驗(yàn)證過濾性

培養(yǎng)基應(yīng)該能夠穿過生產(chǎn)過程所使用一樣級(jí)別過濾器培養(yǎng)基無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第45頁(yè)（二）培養(yǎng)基靈敏度檢驗(yàn)：1、將無菌培養(yǎng)基分裝到一定數(shù)量無菌試管。2、制備好菌懸液（枯草桿菌、白色念珠菌）

10-100cfu/mL。3、加入上述菌懸液1mL進(jìn)準(zhǔn)備好培養(yǎng)基內(nèi)，每份培養(yǎng)基最少加2管。4、培養(yǎng)7天。5、每種培養(yǎng)基50%發(fā)生渾濁，長(zhǎng)菌。培養(yǎng)基：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第46頁(yè)1、培養(yǎng)基儲(chǔ)罐滅菌，移入無菌區(qū)域。2、滅菌后連接件、閥門、過濾器等和培養(yǎng)

基儲(chǔ)罐無菌連接。3、滅菌后培養(yǎng)基經(jīng)過濾器和儲(chǔ)罐無菌連接。4、儲(chǔ)罐另一端和灌裝機(jī)相連，連接時(shí)無菌。〈USP〉培養(yǎng)基制備：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第47頁(yè)1、培養(yǎng)基無菌檢驗(yàn)

滅菌后，灌裝前培養(yǎng)基取樣，進(jìn)行無菌檢驗(yàn)。確認(rèn)培養(yǎng)基是無菌

微生物檢驗(yàn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第48頁(yè)2、瓶子、瓶蓋和膠塞無菌檢驗(yàn)

灌裝前瓶子、瓶蓋和膠塞取樣，進(jìn)行無菌檢驗(yàn)。確認(rèn)進(jìn)入灌裝線瓶子、瓶蓋和膠塞是無菌。

微生物檢驗(yàn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第49頁(yè)3、灌裝后培養(yǎng)基靈敏度檢驗(yàn)

同培養(yǎng)基靈敏度檢驗(yàn)。確認(rèn)滅菌后培養(yǎng)基靈敏度符合要求。

微生物檢驗(yàn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第50頁(yè)4、瓶子培養(yǎng)和破損檢驗(yàn)

灌裝培養(yǎng)基瓶子編號(hào)后，按照預(yù)定培養(yǎng)溫度培養(yǎng)至14天。統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)結(jié)果。

微生物檢驗(yàn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第51頁(yè)1、FDA：

20-35℃，目標(biāo)值±2.5℃，不少于14天；如選擇兩個(gè)溫度，則每一溫度下最少培養(yǎng)7

天，從低溫開始。2、PIC：

20-35℃下最少14天?；蛳?0-25℃下7天，然后30-35℃下7天。培養(yǎng)時(shí)間：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第52頁(yè)

發(fā)覺微生物生長(zhǎng)瓶子污染百分比=100%

灌裝瓶數(shù)–破損瓶數(shù)評(píng)定結(jié)果：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第53頁(yè)生產(chǎn)部人員

灌裝人員（灌裝、膠塞、清洗瓶等）、清潔人員質(zhì)量部人員

QA（IPC、監(jiān)測(cè)人員）、QC(取樣、檢驗(yàn))工程部人員運(yùn)行人員、維護(hù)人員人員：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第54頁(yè)上崗前：最少參加一次無菌工藝模擬考核，為其上崗資質(zhì)主要內(nèi)容。年度資質(zhì)確認(rèn)：無菌崗位操作員工每年至少參加一次無菌工藝模擬。

人員資質(zhì)無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第55頁(yè)禁止“非無菌”儀器或器材接觸無菌材料。遲緩、有目標(biāo)移動(dòng)。操作中身體一直處于A級(jí)層流之外無菌操作確保無菌工作服不受污染……無菌操作人員行為：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第56頁(yè)接收培訓(xùn)人員

生產(chǎn)部人員、質(zhì)量部人員、工程部人員人員培訓(xùn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第57頁(yè)首次驗(yàn)證

最少連續(xù)成功灌裝3個(gè)批次。年度驗(yàn)證

每條生產(chǎn)線每年不得少于2次。

6個(gè)月生產(chǎn)期間沒有有目標(biāo)停頓生產(chǎn)無菌生產(chǎn)區(qū)域生產(chǎn)線退伍驗(yàn)證

生產(chǎn)線退伍前必須進(jìn)行一次無菌工藝模擬。驗(yàn)證頻率：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第58頁(yè)環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)水系統(tǒng)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)無菌檢驗(yàn)數(shù)據(jù)關(guān)鍵工藝變更、空調(diào)系統(tǒng)變更以上趨勢(shì)評(píng)定，決定了周期性培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證次數(shù)。培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證次數(shù)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第59頁(yè)

方案、匯報(bào)和調(diào)查無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第60頁(yè)定義被模擬工藝定義使用房間定義使用灌裝線和設(shè)備使用容器和密封類型線速度灌裝單位數(shù)量干擾和中止數(shù)目和類型一起參加人數(shù)使用培養(yǎng)基模擬方案內(nèi)容1：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第61頁(yè)灌裝到容器內(nèi)培養(yǎng)基體積培養(yǎng)條件同時(shí)環(huán)境監(jiān)測(cè)批統(tǒng)計(jì)復(fù)印件全部測(cè)試可接收標(biāo)準(zhǔn)最終匯報(bào)描述選擇“最差條件”原理陽(yáng)性數(shù)量和編號(hào)促生長(zhǎng)試驗(yàn)要求和結(jié)果模擬方案內(nèi)容2：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第62頁(yè)測(cè)試方法應(yīng)該盡可能模擬工藝選擇方法和程度必須理由充分而且文件化試驗(yàn)方法必須足夠靈敏，程度時(shí)能夠到達(dá)全部陽(yáng)性都應(yīng)該判別全自動(dòng)生產(chǎn)線發(fā)生污染率靠近于零在舊設(shè)施中生產(chǎn)或是較長(zhǎng)生優(yōu)點(diǎn)理步驟或是手工操作情況下，污染率不應(yīng)該超出1個(gè)（3000灌裝單位內(nèi)）。在少于3000瓶批量中，工藝模擬數(shù)量最少要等于批量，因?yàn)樾∨康挽`敏度，不允許有陽(yáng)性出現(xiàn)。大于3000瓶批量，能夠接收陽(yáng)性數(shù)量計(jì)算是應(yīng)該慎重。建立可接收程度標(biāo)準(zhǔn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第63頁(yè)是一組到達(dá)工藝極限值上限或下限情況，和那些在SOP范圍內(nèi)，但與理想情況相比時(shí)有最大可能造成工藝或產(chǎn)品失敗情況。最差條件不一定會(huì)造成產(chǎn)品或工藝失敗。最差條件：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第64頁(yè)使用原料、組件和密封在無菌工藝區(qū)域保留時(shí)間超出范圍無菌操作人員數(shù)量，超出正常生產(chǎn)所需人員數(shù)量在特殊線上，以最快速度灌裝最少數(shù)量（操作困難），以最慢速度灌裝最大數(shù)量（最大暴露）促生長(zhǎng)培養(yǎng)基有抑制性或保護(hù)性處方……“最差條件”類型無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第65頁(yè)污染容器應(yīng)仔細(xì)調(diào)查其完整性。陽(yáng)性應(yīng)該判定到種、屬。全方面取樣，查找污染源。確定潛在污染源，污染源是怎樣進(jìn)入工藝?；仡櫳a(chǎn)統(tǒng)計(jì)。回顧關(guān)鍵系統(tǒng)：HVAC等對(duì)全部程序和工藝變更進(jìn)行回顧。失敗調(diào)查無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第66頁(yè)失敗原因：能夠指定。污染為一個(gè)清楚、單一起源。

糾正辦法：立刻糾正，而且文件化。調(diào)查結(jié)果1：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第67頁(yè)失敗原因：不能夠指定。含糊指定，各種系統(tǒng)和工藝共同作