檢驗樣本采集手冊

檢驗樣本采集手冊

第一章檢驗標(biāo)本采集總則

1.目的

對檢驗申請、患者的狀態(tài)、臨床標(biāo)本的采集與運輸過程等各環(huán)節(jié)進行控制以保證

分析前標(biāo)本的質(zhì)量。

2.范圍

適用于檢驗科受理的標(biāo)本

3.職責(zé)

3.1臨床醫(yī)師負責(zé)檢驗項目的申請，醫(yī)護人員負責(zé)臨床標(biāo)本的采集以及指導(dǎo)患者

如何正確留取標(biāo)本。特殊標(biāo)本由臨床醫(yī)生采集。3.2檢驗科工作人員負責(zé)部分標(biāo)

本采集，并提供標(biāo)本采集、運送等的相關(guān)咨詢服務(wù)。

4.工作程序

4.1檢驗申請

4.1.1檢驗項目選擇臨床醫(yī)師根據(jù)患者病情需要和檢驗項目的敏感度、特異性來

正確選擇檢驗項目；檢驗科人員可為臨床提供檢驗項目的咨詢，幫助合理選擇檢

驗項目。

4.1.2檢驗申請單

4.121紙質(zhì)申請單檢驗申請單填寫應(yīng)包括以下內(nèi)容:

a）患者的唯一性標(biāo)識：包括患者的姓名、性別、年齡、住院的科別、床號、住院

號、初步診斷等；

b）樣本類型；

c）申請檢驗項目或項目的組合；

①申請日期；

e）申請者姓名。

4.1.2.2HIS申請

臨床醫(yī)生只需在HIS的檢驗申請單中點擊相應(yīng)的組合項目即可自動生成上述要

求的內(nèi)容。

4.1.3檢驗申請單中的特別說明：

a）對檢驗項目的特別要求，如注意細胞形態(tài)等；

b）特殊傳染病病人標(biāo)本（如HIV、霍亂等）應(yīng)在檢驗申請單上注明。

4.2患者狀態(tài)

患者狀態(tài)是影響檢驗結(jié)果的內(nèi)在的因素，包括固定因素和可變因素兩個方面。

4.2.1固定的因素如年齡、性別、民族等，他們的參考區(qū)間是不同的。分析前階

段的質(zhì)量保證工作考慮的主要不是這方面的因素。

4.2.2為了使檢驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠，臨床醫(yī)護人員和檢驗人員應(yīng)了解標(biāo)本收集前影

響檢測結(jié)果的非病理性因素，如飲食、標(biāo)本采集時間、體位和體力活動、情緒狀

態(tài)、病人用藥等對標(biāo)本采集的影響。要求患者予以配合的內(nèi)容，采取切實措施,

保證采集的標(biāo)本符合疾病的實際情況。原則上患者應(yīng)在平靜、休息狀態(tài)采集標(biāo)本,

尤其是血液標(biāo)本。

4.3臨床標(biāo)本采集程序

4.3.1采樣人員采樣人員必須經(jīng)過培訓(xùn)合格后，方可進行采樣，對于患者自行收

取標(biāo)本，須接受專業(yè)人員的指導(dǎo)。

4.3.2采樣準(zhǔn)備在采樣前，采樣人員根據(jù)申請者申請的檢驗項目的要求，在HIS

中打印檢驗條碼綁定在相應(yīng)的容器上。要注意樣品標(biāo)識必須與檢驗申請單相符合,

嚴(yán)防標(biāo)記錯誤。

4.3.3采樣實施（靜脈血、動脈血、末梢血、足跟血等）采樣人員必須根據(jù)檢驗

項目的要求和計劃以及醫(yī)囑要求執(zhí)行的時間，選擇恰當(dāng)?shù)牟课?，按相?yīng)標(biāo)本采集

的作業(yè)指導(dǎo)書采取適當(dāng)?shù)臉悠妨俊?/p>

4.4標(biāo)本收集、運送與儲存

4.4.1每天早晨病房采集標(biāo)本后，按標(biāo)本的種類分別放在指定的位置，標(biāo)本放置

處應(yīng)有明顯的標(biāo)識并符合生物安全的要求。

4.4.2實驗室負責(zé)收集標(biāo)本的工人核對標(biāo)本后，將標(biāo)本轉(zhuǎn)入專用的、密閉無滲漏

的標(biāo)本運輸箱內(nèi)。運輸箱內(nèi)試管架應(yīng)可靠固定，以防盛裝體液的試管發(fā)生泄漏。

4.4.3檢查運輸箱蓋是否已完全蓋好，確認后將標(biāo)本運送至實驗室。按檢測項目

分別分送至各專業(yè)組。

4.4.4標(biāo)本轉(zhuǎn)運途中如果發(fā)生泄漏，應(yīng)立即按生物安全應(yīng)急預(yù)案的相關(guān)條款進行

處置并進行書面記錄。

4.4.5定期對運輸箱內(nèi)壁和表面進行消毒處理。

4.4.6標(biāo)本采集后應(yīng)及時送檢。

4.4.7本實驗室主要對以下標(biāo)本進行儲存：生化組檢測項目對不能及時完成檢測

的標(biāo)本放置2-8。（2冰箱保存，不超過二天；免疫組檢測項目對不能及時完成檢測

的標(biāo)本放置2-8。（:冰箱保存，不超過二天。生化組完成檢測的標(biāo)本放置標(biāo)本架上,

放入專用標(biāo)本存放冰箱（2-8P）保存3天，以備復(fù)查；免疫組完成檢測的標(biāo)本

放置標(biāo)本架上，放入專用標(biāo)本存放冰箱（2-8P）保存7天，以備復(fù)查；血液組

檢測標(biāo)本完成檢測后血型標(biāo)本室溫保存7天，其余項目室溫保存24h;分子生

物學(xué)標(biāo)本完成檢測后血液原始標(biāo)本置于2-8。（:冰箱保存7天,體液、組織原始樣

本置于-2CTC冰箱保存7天；HBV、HCV除保留原始樣本外還應(yīng)分離血清或血

漿樣本進行唯一編號（采用樣本自身唯一編號）后-20或-8CTC保存3個月，其他

樣本的DNA提取物置于-20或-8CTC冰箱凍存一個月，對檢驗結(jié)果有疑問、或

有爭議、或被投訴時，取用存放標(biāo)本進行復(fù)檢。

4.5臨時申請附加或刪除檢驗項目

臨床需要臨時申請附加或刪除檢驗項目時，應(yīng)與檢驗科聯(lián)系并告之原因，經(jīng)同意

后實施。

4.6抗凝劑選擇

461含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測定K+、Na+的標(biāo)本。

4.6.2EDTA、氟化物、草酸鹽等不能用于測定Ca2+的標(biāo)本，因為Ca2+可與它

們形成不溶性物質(zhì)。

4.6.3草酸鹽、氟化物不能用于測定酶和用酶法測定的標(biāo)本，因為它們有激活或

抑制某些酶活性的作用，如草酸鹽可抑制AMY、ACP、LDH的活性，氟化物則

有激活尿素酶、AMY的作用。

4.6.4草酸鉀氟化鈉混合抗凝劑：專供葡萄糖測定用，氟化鈉1g,草酸鉀3g,混

合劑4mg抗凝1ml血。

4.6.5肝素：是一種粘多糖體，可抑制凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，使纖維蛋白原不

能轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。以15±2.5IU抗凝血液1ml。肝素抗凝血不影響紅細胞體積，

可用于生化及血液學(xué)檢驗標(biāo)本，但不可用于篩選DIC的3P和TT試驗，因肝素

與魚精蛋白作用，發(fā)生沉淀，使3P出現(xiàn)假陽性以及肝素的抗凝血酶作用產(chǎn)生干

擾。

4.6.6EDTA與鈣離子絡(luò)合而抗凝通常血液學(xué)常規(guī)檢驗應(yīng)用其鉀鹽EDTA-K2,

EDTA-K3。

4.6.7使用抗凝劑要注意血與抗凝劑的比，如血沉取106mmol/L的枸椽酸鈉

0.4ml抽1.6ml血；凝血象枸椽酸鈉0.2ml,抽1.8ml血;血常規(guī)用EDTA抗凝

管抽1.5ml血；血生化用肝素抗凝管抽3ml血等。

4.7警告：潛在的生物危害性

所有采集的標(biāo)本都應(yīng)視為具有潛在的生物危害性。對此類標(biāo)本處理都應(yīng)遵循本科

室生物安全相關(guān)規(guī)定。

5.臨床檢驗標(biāo)本拒收準(zhǔn)則

5.1標(biāo)本容器和/或檢驗申請單上信息不符或缺失

5.1.1標(biāo)本容器無標(biāo)識、標(biāo)識不清、樣本與申請單上信息不符、申請單信息缺失

（包括患者唯一性標(biāo)識及檢測項目缺失）。

5.1.2檢驗申請單送檢項目檢驗科未開展。

5.2標(biāo)本不合要求

5.2.1未使用合適標(biāo)本容器，標(biāo)本容器破損、滲漏，抗凝劑選擇不當(dāng)，標(biāo)本類型

不當(dāng)，標(biāo)本采集后保存不當(dāng)?shù)取?/p>

5.2.2中度以上溶血、脂血，抗凝血中有凝塊，量不夠，距離檢驗時間過長等。

5.2.3體液不能用一次性注射器抽取后送檢，體液常規(guī)用紫色抗凝管，體液生化、

免疫用黃色促凝管，體液一般細菌涂片，結(jié)核桿菌涂片置于無菌杯中送檢。

6.讓步檢驗

對極難獲得的標(biāo)本（如新生兒、重度燒傷病人、休克病人）所致的標(biāo)本質(zhì)量不符

合檢驗要求（如量不夠、溶血等）時，檢驗科可以做讓步檢驗，提示所得結(jié)果僅

供臨床醫(yī)生參考。

第二章一般檢驗標(biāo)本采集

（一）靜脈血采集

1.紫頭管標(biāo)本采集（血常規(guī)、腎素醛固酮、網(wǎng)織紅細胞、瘧原蟲、微絲蝴ABO、

RH血型、糖化血紅蛋白、地中海貧血篩查及基因分型、人類白細胞抗原B27測

定、血兒茶酚胺等）

1.1血常規(guī)

1.1.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負壓管（EDTA-K2抗凝）采集靜脈血至

2ml刻度，立即輕輕顛倒混勻5次，采集后盡快送檢。

1.1.2注意事項a）防止標(biāo)本溶血。b）應(yīng)與抗凝劑充分混合，應(yīng)避免劇烈振搖。c）

抽取標(biāo)本時不能從輸液管中或輸液部位的同側(cè)靜脈采血。d）標(biāo)本室溫保存不得大

于4小時。e）患者的活動情況和精神狀態(tài)、藥物、年齡、性別、標(biāo)本采集時間等

會影響檢測結(jié)果。故采血前因使患者盡量減少運動以保持平靜。

1.2腎素醛固酮

1.2.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負壓管（EDTA-K2抗凝）采集靜脈血至

2ml刻度，立即輕輕顛倒混勻5次，記錄采血時間，采集后盡快送檢。

1.2.2注意事項a）臣M立：病人需在平靜狀態(tài)下平臥2小時采血。b）立位：病人需

在平靜狀態(tài)下站立2小時采血。c）切忌不能將標(biāo)本放于2-8。（2冰箱放置。

1.3ABO、RH血型

1.3.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負壓管（EDTA-K2抗凝）采集靜脈血至

2ml刻度,立即輕輕顛倒混勻5次，立即送檢。

1.3.2注意事項

a）采血部位皮膚應(yīng)完整，無燒傷、凍瘡、發(fā)絹、水腫或炎癥等。

b）穿刺皮膚要有一定深度，不要用力擠壓采血部位，避免組織液混入。c）由于采

血量較少，主要用于門診或/和急診病人的血常規(guī)檢測。

d）乙醇消毒皮膚待全干后方可采血，否則流出的血液不呈圓滴狀，可導(dǎo)致溶血。

1.4網(wǎng)織紅細胞、瘧原蟲、微絲蜘檢查

1.4.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負壓管（EDTA-K2抗凝）采集靜脈血至

2ml刻度，立即混勻。

1.4.2標(biāo)本送檢要求記錄采血時間，采集后盡快送檢。

1.4.3標(biāo)本采集時機的特殊要求a）微絲蜘采血時間以新鮮全血抗凝血（推薦使用

EDTA抗凝），夜間9:00至次晨2:00時采血。b）瘧原蟲分為間日瘧原蟲、三日

瘧原蟲、惡性瘧原蟲、卵形瘧原蟲四種，間日瘧宜在發(fā)作后數(shù)小時采血；惡性瘧

在發(fā)作初期可見大量環(huán)狀體，一周后可見配子體。

1.4.4注意事項靜脈血與抗凝劑應(yīng)充分混合，避免劇烈振搖。

1.5糖化血紅蛋白

1.5.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負壓管（EDTA-K2抗凝）采集靜脈血至

2ml刻度，立即輕輕顛倒混勻。

1.5.2標(biāo)本送檢要求采集后盡快送檢。

1.6地中海貧血基因分型

1.6.1標(biāo)本采集及量用帽蓋為紫色的真空負壓管（EDTA-K2抗凝）采集靜脈血至

2ml刻度，立即輕輕顛倒混勻。

1.7人類白細胞抗原B27測定

1.7.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為紫色的真空負壓管（EDTA-K2抗凝）采集靜脈血至2ml刻度，立即輕

輕顛倒混勻。

2.藍頭管標(biāo)本采集（凝血四項及凝血全套、血小板相關(guān)抗體測定）

2.1凝血項

2.1.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為藍色的真空負壓管（枸椽酸鈉1:9）采集空腹靜脈血至2ml刻度，立

即輕輕顛倒混勻5次。

2.1.2標(biāo)本送檢要求記錄采血時間，采集后盡快送檢（凝血試驗應(yīng)于4小時內(nèi)完

成），避免高溫下送檢。

2.1.3注意事項

a）抽血順利、不應(yīng)有溶血和凝血，血液與抗凝劑應(yīng)充分混勻，避免劇烈振搖，采

血后立即送檢不宜久置。

b）某些藥物（如抗凝類藥物）會對凝血象檢測結(jié)果有影響。

3.黑頭管標(biāo)本采集（血沉）

3.1血沉

3.1.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為黑色的真空負壓管（枸椽酸鈉1:4）采集空腹靜脈血至2ml刻度，輕

輕顛倒混勻5次，室溫保存。

3.1.2注意事項

a）采集足夠量的血液標(biāo)本，采集量在兩個刻度線之間。

b）及時送檢，采血后3小時內(nèi)檢測完畢。

c）存放時間超過3小時的樣品，結(jié)果會有假性增加。

4.綠頭管標(biāo)本采集（微量元素、血流變等）

4.1微量元素

4.1.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為綠色的真空負壓管（專用耗材）采集空腹靜脈血至3-5ml刻度,輕輕顛

倒混勻5次，采集后盡快送檢。

4.1.2注意事項

用肝素抗凝管（綠帽），嚴(yán)格防止標(biāo)本有凝集，及時送檢。

4.2血流變

4.2.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為綠色的真空負壓管（肝素抗凝）采集空腹靜脈血至4ml刻度，輕輕顛

倒混勻5次，室溫保存。

4.2.2注意事項

用肝素抗凝管（綠帽），嚴(yán)格防止標(biāo)本有凝集，及時送檢。

5.黃/紅頭管標(biāo)本采集

5.1生化項目（肝功、腎功、血脂、血糖、電解質(zhì)、血淀粉酶、心肌酶譜、風(fēng)濕全

套、補體抗體、降鈣素原等）

5.1.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為黃色的真空負壓管（促凝劑）采集空腹靜脈血至3-5ml刻度.輕輕顛倒

混勻5次，采集后盡快送檢。

5.1.2注意事項

a）標(biāo)本避免溶血、脂血，壓脈帶壓迫時間不得超過一分鐘，混勻時避免劇烈振遙，

避免全血直接低溫凍存及反復(fù)凍融，避免室溫長時間放置。

b）多種藥物，如抗癲癇藥、某些抗生素可使某些酶的活力升高。

c）飲食的方式、年齡、性別等生理性因素對TG水平影響均較大，不同年齡血清

的堿性磷酸酶活性差異大，劇烈運動或妊娠使堿性磷酸酶活性升高。

d）空腹采血

e）糖耐量實驗需空腹10-16小時后，抽取靜脈血，測定血葡萄糖濃度，將75g

無水葡萄糖溶于250-300ml水中，5分鐘之內(nèi)飲完，期間不可喝咖啡、濃茶、

吸煙或進食，兒童按1.75g/kg體重計算口服葡萄糖用量，總量不超過乃g,服糖

后，每隔30分鐘、1小時、2小時、3小時分別采集一次靜脈血。

5.2免疫項目（HIV、梅毒、甲肝、乙肝、丙肝、丁肝、戊肝、結(jié)核抗體、幽門

螺旋桿菌、優(yōu)生優(yōu)育、自身抗體類等）

5.2.1標(biāo)本采集及量

帽蓋為紅色的真空負壓管（促凝劑）采集靜脈血至3-5ml刻度，輕輕顛倒混勻5

次，采集后盡快送檢。

5.2.2注意事項

a）標(biāo)本避免溶血、脂血、反復(fù)凍融。

b）結(jié)果為陽性或可疑時應(yīng)進行隨訪。

c）HIV初篩結(jié)果：HIV抗體待復(fù)查，通知患者復(fù)印身份證及聯(lián)系方式，現(xiàn)場核對

身份信息后，采集第二次血樣，若檢測結(jié)果為HIV抗體待復(fù)查，送第二次血樣

到疾控中心做確診實驗；結(jié)果回報日期為10個工作日。

d）標(biāo)本要求：血清標(biāo)本應(yīng)新鮮，血清分離后置于2-8T須在48小時內(nèi)使用,超

過48小時應(yīng)置于-2CTC保存，盡快送檢。

5.3化學(xué)發(fā)光項目（腫瘤標(biāo)志物、性激素、唐氏篩查、甲功、C肽、皮質(zhì)醇、BNP、

PTH等）

5.3.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為紅色的真空負壓管（促凝劑）采集空腹靜脈血至3-5ml刻度，輕輕顛

倒混勻5次，采集后盡快送檢。

5.3.2注意事項

a）標(biāo)本避免溶血、脂血、反復(fù)凍融。

b）標(biāo)本要求：血清標(biāo)本應(yīng)新鮮，血清分離后置于2-8。（：須在48小時內(nèi)使用，超

過48小時應(yīng)置于-20。（：保存，盡快送檢。

c）接受生物素或者鏈霉親和素治療的患者對本檢測結(jié)果有較大的影響

5.4EB病毒4項

5.4.1標(biāo)本采集及量

用帽蓋為紅色的真空負壓管（促凝劑）采集空腹靜脈血至3-5ml刻度，各項不

單獨檢測。

6.特殊類真菌G實驗、內(nèi)毒素、結(jié)核T細胞、胎兒染色體非整倍儂T21/T18/T13）

篩查）

6.1真菌G實驗、內(nèi)毒素、結(jié)核T細胞

6.1.1標(biāo)本采集及量真菌G實驗和內(nèi)毒素檢測用帽蓋為紅色的真菌G專用管采集

空腹靜脈血至3-5ml刻度，結(jié)核T細胞檢測用綠色T細胞BD專用管采集空腹

靜脈血至4ml刻度，輕輕顛倒混勻5次，采集后盡快送檢。

6.1.2注意事項

a）標(biāo)本避免溶血、脂血、反復(fù)凍融。

b）標(biāo)本要求：血清標(biāo)本應(yīng)新鮮，置于2-8。（：須在48小時內(nèi)使用，超過48小時

應(yīng)置于-2（TC保存，盡快送檢。

6.2胎兒染色體非整倍體（T21/T18/T13）篩查

6.2.1標(biāo)本采集及量

EDTA抗凝管5ml或StreckCell-FreeDNABCT采血管5ml。

6.2.2注意事項

a）標(biāo)本避免溶血、脂血、反復(fù)凍融。

b）采血管需在產(chǎn)科醫(yī)生處領(lǐng)取，周一至周六采集標(biāo)本。

c）要用?？茖Ｓ蒙暾垎?，信息填寫全面，以便診斷和留檔。

e）在采集標(biāo)本時詢問患者是否正在服用抗生素過程中，是否大量飲酒或有酗酒習(xí)

慣等對外周血培養(yǎng)效果會產(chǎn)生較大影響的因素，盡量避免此類因素。

6.3骨代謝、登革熱、高血壓檢查

6.3.1標(biāo)本采集及量

骨代謝、登革熱檢查用帽蓋為紅色的真空負壓管（促凝劑）采集空腹靜脈血至

3-5ml刻度,采兩管送檢；高血壓檢查患者采集兩管紫管（EDTA抗凝），記錄

患者采血姿勢（立/臥位）。

（二）動脈血采集

1.血氣分析

1.1標(biāo)本采集及量

皮膚嚴(yán)格消毒后，穿刺股動脈、肱動脈或模動脈，用2ml專用血氣注射器按無

菌手術(shù)原則抽取l-2ml,動脈血壓力推動空針活塞，不能有氣泡。抽出后取下針

頭蓋好，隔絕空氣。將注射器放在手中，來回搓動，立即送檢。

1.2注意事項

1.2.1填寫血氣分析申請單時要求寫出病史、診斷、用藥情況、抽血時的體溫、

是否用氧及其流量，為分析檢測結(jié)果提供依據(jù)。

1.2.2每管l-2ml。由醫(yī)護人員采集，及時送檢，如不能及時送檢應(yīng)放入冰水中

保存（一般可保存2小時），注意切勿用冰塊，以避免破壞紅細胞而溶血。

（三）末梢血采集

1.血常規(guī)+CRP

1.1標(biāo)本采集及量

用75%的酒精消毒手指端或耳垂部位，待消毒液干后用一次性采血針刺入皮膚,

將第一滴血拭去，輕輕擠壓采血部位，用一次性微量吸管采集血液少許（^120

3）注入裝有抗凝劑的PE管中，輕輕吹打混勻，蓋緊管蓋，水平放置10分鐘

后進行檢測。特殊患者（如燒傷、嬰幼兒）必要時可從足跟部兩側(cè)的中部或后部

或大拇指采血，針刺深度不應(yīng)超過2mm。

2.微量元素

2.1標(biāo)本采集及量

用75%的酒精消毒手指末端或耳垂部位，待消毒液干后用一次性采血針刺入皮

膚，將第一滴血拭去，輕輕擠壓采血部位，用一次性微量吸管采集血液少許（準(zhǔn)

確采集至40|jl刻度），輕輕打入采集微量元素專用的子彈頭內(nèi)，顛倒混勻5次，

采集后盡快送檢。

（四）體液標(biāo)本采集

1.尿液理化檢查

1.1標(biāo)本留取時間

1.1.1收集常規(guī)尿液分析的尿標(biāo)本：應(yīng)留取新鮮尿，以清晨第一次尿為宜，較濃

縮，條件恒定，易檢出異常，便于對比。

1.1.2收集急診患者尿液分析的尿標(biāo)本：可隨時留?。S機尿）。

1.1.3收集特殊檢驗?zāi)蛞悍治龅哪驑?biāo)本

a）收集計時尿標(biāo)本：應(yīng)告知患者留尿起始和終止時間；留取前應(yīng)將尿液排空，

然后收集該時段內(nèi)（含終止時間點）排出的所有尿液。

b）收集使用防腐劑的尿標(biāo)本：應(yīng)建議患者先將尿液收集于未加防腐劑的干凈容

器內(nèi)，然后小心地將尿液倒入實驗室提供的含防腐劑容器中。

c）收集多項檢測尿標(biāo)本：應(yīng)針對不同檢測項目分別留取尿標(biāo)本（可分次留取，

也可一次留取分裝至不同容器中）。

d）收集特定時段內(nèi)尿標(biāo)本：尿液應(yīng)保存于2-8。（2條件下。

e）收集時段尿尿標(biāo)本：如總尿量超過單個容器的容器時，須用兩個容器，檢測

前必須充分混勻兩個容器內(nèi)的尿液，最常用的方法是在兩個尿容器之間來回相互

傾倒尿標(biāo)本；第二個容器收集的尿量一般較少，故注意加入防腐劑的量相應(yīng)減少。

f）收集臥床導(dǎo)尿患者的尿標(biāo)本：將尿袋置于冰袋上；如患者可走動，應(yīng)定期排

空尿袋，將尿液存放在2-8T條件下。

1.1.4尿液防腐與保存

1.1.4.1通常，尿標(biāo)本采集后應(yīng)在2小時內(nèi)完成檢驗，避免使用防腐劑；如尿標(biāo)

本不能及時完成檢測，則宜置于2-8攝氏度條件下保存，但不能超過6小時，

（微生物學(xué)檢查標(biāo)本在24小時內(nèi)仍可進行培養(yǎng)）。根據(jù)檢測項目特點，尿標(biāo)本

可采用相應(yīng)的防腐劑防腐，而無需置冰箱保存。

1.2各種尿標(biāo)本采集與量

1.2.1晨尿：以首次晨尿或第2次晨尿為宜，可用于尿液形態(tài)學(xué)和化學(xué)成分分析

（尿常規(guī)、尿HCG等），采集量10ml,急診和門診病人可留取隨機中段尿送

檢。

1.2.2餐后尿：通常收集餐后2h的尿液，這種標(biāo)本有利于檢出病理性糖尿、蛋

白尿或尿膽原，主要用于了解葡萄糖代謝情況。

1.2.324h尿：患者上午8時排尿一次，排空膀胱，此后收集各次排出的尿液，

直至次日上午8時最后一次排尿的所有尿液，記錄總尿量，取第一次尿后加入防

腐劑（濃鹽酸）混勻后取適量送檢。主要用于分析如肌酊、兒茶酚胺、17-羥、

17-酮、總蛋白、電解質(zhì)，尿結(jié)核菌等檢查。

1.2.4尿三杯：多用于男性下尿路及生殖系統(tǒng)疾病定位初步判斷。

1.3標(biāo)本送檢要求

用清潔的一次性容器隨時留取中段尿液，收集于尿液試管中，容器應(yīng)清潔有蓋，

明確標(biāo)記，記錄留取時間及時送檢。

1.4注意事項

1.4.1避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便等混入。

1.4.2采集后立即送檢，避免細菌繁殖、細胞溶解等。

1.5標(biāo)本送檢要求

采集后盡快送檢。

2.24小時尿蛋白定量

2.1標(biāo)本采集及量

2.1.1患者可留取晨尿或隨機中段尿5-10ml,收集于清潔有蓋容器內(nèi)。

2.1.2留取24h尿，記錄總體積，混勻后取5—10ml于清潔容器中并注明尿量。

注意在收集24小時尿時需加入防腐劑（1000ml尿中加5ml甲苯）。

2.2標(biāo)本送檢要求

采集后盡快送檢。

2.3注意事項

a）在整個留尿過程中，按平時正常飲水，停用利尿劑。

b）避免劇烈運動。

c）在整個留尿過程中，留尿容器須放置在冰箱內(nèi)。

3尿微量白蛋白/尿肌肝

3.1標(biāo)本采集及量

3.1.1患者可留取晨尿或隨機中段尿5-lOml,收集于清潔有蓋容器內(nèi)。

3.2標(biāo)本送檢要求

采集后盡快送檢。

3.3注意事項

a）避免劇烈運動。

4糞便標(biāo)本采集與處理

4.1常規(guī)檢驗采集及量

采集糞便的方法因檢查目的不同而有差別，如常規(guī)檢驗留取新鮮指頭大小（約

5g）即可，放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內(nèi)送檢。不應(yīng)采取尿壺、便

盆中的糞便標(biāo)本，應(yīng)標(biāo)本中混入尿液和消毒劑等，可破壞糞便的有形成分，糞便

標(biāo)本檢測時，應(yīng)選擇其中膿血粘液等病理成分，若無病理成分可多部位取材，采

集后應(yīng)在1小時內(nèi)完成檢查，否則可因PH及消化酶等影響，使糞便中細胞成分

破壞分解。

4.2寄生蟲檢驗采集及量

糞便必須新鮮，送檢時間一般不宜超過24小時，如檢查腸內(nèi)原蟲滋養(yǎng)體，應(yīng)于

排便后立即送檢，立即檢食冬季需采取保溫（35-37攝氏度）措施。血吸蟲毛

物孵化應(yīng)留新鮮便，不少于30g。檢查寄生蟲體及蟲卵計數(shù),須用潔凈、干燥的

容器，并防止污染；糞便不可混入尿液及其他體液等，以免影響檢查結(jié)果。

4.3化學(xué)檢驗采集及量

采用化學(xué)法做隱血試驗應(yīng)囑患者于收集標(biāo)本前3天氣禁食動物性和含過氧化物

酶類食物（如蘿卜、西紅柿、韭菜、木耳、花菜、黃瓜、蘋果、柑橘、香蕉等），

并禁服鐵劑和維生素c等，以免假陽性反應(yīng)，連續(xù)檢查3天，并選取外表及內(nèi)

層糞便；收集標(biāo)本后須迅速送檢，以免因長時間放置使隱血反應(yīng)的敏感度降低。

5其它體液標(biāo)本留取與采集

5.1前列腺液標(biāo)本

5.1.1標(biāo)本采集前禁欲3天：若一次采集失敗或檢查結(jié)果為陰性但臨床指征明確

者，可于3-5天后復(fù)查。

5.1.2采集方式：由臨床醫(yī)生行前列腺按摩術(shù)采集。一般用于慢性前列腺炎癥；

疑有前列腺急性炎癥、膿腫、結(jié)核或腫瘤且壓痛明顯者，應(yīng)慎重采集標(biāo)本。按摩

時用力要均勻適當(dāng)，并按一定方向進行，避免因反復(fù)強力按壓造成不必要的損傷。

5.1.3所用容器：采集于清潔玻片上或無菌廣口容器內(nèi)。采集時應(yīng)棄去流出的第

一滴前列腺液，并立即送檢。

5.2精液標(biāo)本

5.2.1在臨床醫(yī)生指導(dǎo)下患者自行采集。采集前禁欲時間：2—7天；如需多次采

集標(biāo)本，每次禁欲時間天數(shù)均應(yīng)盡可能一致。3個月內(nèi)至少應(yīng)檢杳2次，2次間

隔時間＞7天，但不能超過3周。

5.2.2采集方式：手淫法（最為理想的方法）；應(yīng)將一次射精精液全部送檢。如

標(biāo)本不完整，應(yīng)在檢驗報告中注明。

5.2.3所用容器：使用專用或指定清潔干燥廣口帶刻度容器；

5.2.4室溫保存：20℃—37℃O采集后應(yīng)立即保溫送檢，送檢時間不超過30分

鐘。

5.3陰道分泌物標(biāo)本

5.3.1采集方式：由臨床醫(yī)生負責(zé)采集，一般采用生理鹽水浸濕的棉拭子于陰道

深部或陰道后穹隆、宮頸口等處取材，標(biāo)記采集部位，采取標(biāo)本后應(yīng)立即送檢。

5.3.2所用容器：使用專用采集管或一次性棉拭子。

5.3.3注意事項：檢測滴蟲應(yīng)立即送檢，冬季需采取保溫措施。月經(jīng)期不宜進行

陰道分泌物檢驗。

5.4腦脊液標(biāo)本

5.4.1采集方式：由臨床醫(yī)生嚴(yán)格無菌操作采集，一般行腰椎穿刺。必要時從小

腦延髓或側(cè)腦室穿刺采集。

采集容器：分別收集每管腦脊液培養(yǎng)：第一管先收集于廣口

5.4.2l-2mloCSF

無菌培養(yǎng)杯中，對兒童瓶蓋嚴(yán)格無菌消毒后，用注射器抽取無菌杯中CSF打入

兒童瓶中，及時送檢。腦脊液生化及免疫：第二管CSF收集于黃頭管中，立即

送檢。腦脊液常規(guī)檢查：第三管CSF收集供細胞學(xué)檢查，置于帽蓋為紫色的抗

凝試管中，記錄留取時間立即送檢，不超過1小時。

5.5漿膜腔積液標(biāo)本

5.5.1包括胸腔積液、腹腔積液、心包積液、關(guān)節(jié)腔積液，由臨床相關(guān)科室醫(yī)生

穿刺獲取。采集標(biāo)本分三管留取，每管漿膜腔積液培養(yǎng)：第一管供細菌

l-2mlo

學(xué)檢查，穿刺后的液體注入到瓶蓋消毒后的兒童瓶中。漿膜腔積液生化：第二管

供生化及免疫學(xué)檢查，置于黃頭管中。漿膜腔積液常規(guī)檢查：第三管供細胞學(xué)檢

查，置于帽蓋為紫色的抗凝試管中。

5.5.2注意事項：若無法及時送檢，可加入10%乙醇置于2-4。（：保存，不宜超過

2小時。

5.6胃液標(biāo)本

標(biāo)本采集：由臨床醫(yī)生采集。取胃液于廣口無菌培養(yǎng)杯中立即送檢。

5.7支氣管肺泡灌洗液

標(biāo)本采集：由臨床醫(yī)生行纖維支氣管鏡檢時采集。采集后置于無菌專用容器中立

即送檢。

5.8痰液標(biāo)本

5.8.1標(biāo)本采集：囑患者晨起用0.9%生理鹽水漱口后用力咳出1-2口痰液（咳

出深部痰液）。

5.8.2標(biāo)本容器：置于廣口無菌容器內(nèi)，及時送檢。

5.8.3注意事項：痰液標(biāo)本收集法因檢驗?zāi)康牟煌?，主要用自然咳痰法?/p>

a）一般收集新鮮痰，以清晨第一口痰為宜。用力咳出氣管深處呼吸道分泌物，勿

混入唾液、鼻咽分泌物和漱口水，及時送檢。適用于常規(guī)檢驗、一般細菌檢驗、

結(jié)核菌檢查。

b）細胞學(xué)檢查用深咳痰液及時送檢，應(yīng)盡量送含血痰液。

c）濃縮法找抗酸桿菌應(yīng)留24小時痰（量不少于5ml），細菌檢驗應(yīng)避免口腔、鼻

咽分泌物污染。

d）幼兒痰液收集困難時，可用消毒拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采集標(biāo)

本。

e）對無痰或少痰患者可用生理鹽水霧化吸入，促使痰液咳出；對小兒可清壓胸骨

柄上方，誘導(dǎo)咳痰；昏迷患者可清潔口腔后用負壓吸引法吸取痰液。

f）標(biāo)本不能及時送檢，可暫時冷藏保存，但不能超過24小時。

第三章分子生物學(xué)標(biāo)本采集

1.乙型肝炎病毒核酸定量檢測（HBV-DNA）

1.1標(biāo)本類型：血漿、血清、乳汁（禁用肝素抗凝劑）

1.2標(biāo)本采集：

1.2.1血清-用一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血2毫升，注入無菌的干燥管,

室溫（22-25。。放置30—60分鐘，血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集析出血清，或直接使用

水平離心機,1500rpm離心5分鐘，吸取上層血清，轉(zhuǎn)移至L5ml滅菌離心管。

1.2.2血漿-用一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血2毫升，注入含EDTA-2Na

（乙二胺四乙酸二鈉）或枸椽酸鈉抗凝劑的玻璃管，立即輕輕顛倒混勻，5—10

分鐘后即可分離出血漿，轉(zhuǎn)移至1.5ml滅菌離心管。

1.3標(biāo)本儲存和運輸

室溫放置不超過8小時，4-8T不超過72小時，-20T保存期6個月，長期保存

于-7CTC.應(yīng)避免反復(fù)凍融。8小時內(nèi)室溫運輸，超過8小時冷藏運輸。

1.4拒收標(biāo)本:

1.4.1污染、嚴(yán)重溶血或脂血標(biāo)本不能作測定。

1.4.2未按規(guī)定時間和溫度放置。

1.4.3采血量不足。

1.4.4標(biāo)本無信息。

145信息與申請單不符。

1.4.6肝素抗凝標(biāo)本。

2.人乳頭瘤病毒基因分型檢測（HPV-DNA）

2.1標(biāo)本類型：宮頸脫落細胞樣本和生殖泌尿道分泌物。

2.2標(biāo)本采集：

2.2.1宮頸脫落細胞將宮頸刷中間細長的部分伸入宮頸管，外側(cè)部分抵住宮頸外

口，同一方向360。旋轉(zhuǎn)3-5圈，進行取材。

2.2.2生殖泌尿道分泌物男性一用細小棉拭子伸入尿道約2~4厘米，捻動拭子

采集分泌物，將棉拭子置無菌管，密閉送檢（采集分泌物前2小時禁小便）。女性

生殖道一用無菌生理鹽水棉球洗去宮頸外分泌物，再用無菌棉拭子插入宮頸內(nèi)，

停5秒鐘后旋動棉拭子采集宮頸分泌物，將棉拭子置入無菌玻璃管，密閉送檢。

女性尿道一用無菌生理鹽水棉球洗凈尿道口，再用無菌棉拭子插入尿道約2厘

米，捻動拭子采集分泌物，將棉拭子置入無菌玻璃管，密閉送檢。

2.3標(biāo)本儲存和運輸：標(biāo)本可立即用于測試，也可保存于-2CTC待測，保存期為6

個月。標(biāo)本運送時應(yīng)采用0℃冰壺。

2.4拒收標(biāo)本：

2.4.1污染標(biāo)本不能作測定。

2.4.2未按規(guī)定時間和溫度放置。

2.4.3標(biāo)本無信息。

244信息與申請單不符。

3.其他標(biāo)本類型的采集

3.1痰標(biāo)本：用帶蓋的無菌一次性塑料瓶收集清晨第一口痰標(biāo)本送檢。（對于無

痰或少痰的患者，（生理鹽水）可用45。（：加溫的100g/LNaCL水溶液霧化吸入

或改變體位以使痰液易于咳出；對于小兒可以輕壓胸骨柄上方以誘導(dǎo)咳痰，用無

菌棉拭子刺激喉嚨部引起咳嗽反射，用無菌棉拭子采集標(biāo)本。）

3.2生殖道拭子：尿道或陰道分泌物由醫(yī)生用專用的取樣拭子（滅菌，一次性）

采集樣本，及時送檢。采集生殖道拭子標(biāo)本，要求病人在采樣前2小時內(nèi)不能排

尿，采樣時，將棉拭子伸入男性尿道及女性宮頸口2-3cm,轉(zhuǎn)動一周以獲得上

皮細胞，將取樣后的棉拭子放入1.0ml無菌生理鹽水中漂洗片刻，在壁上擠干

后丟棄，避免采集過多富含白細胞的膿液標(biāo)本。

3.3咽拭子：由醫(yī)生用專用的取樣拭子（滅菌，一次性），適度用力拭抹咽后壁

和兩側(cè)扁桃體部位，應(yīng)避免觸及舌部；迅速將棉拭子放入裝有1ml生理鹽水的

采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。

3.4皰疹液：先用75%酒精對皰疹周圍的皮膚進行消毒，待干后，用消毒針刺破

皰疹，用棉簽蘸取皰疹液后，迅速將棉拭子放入裝有1ml生理鹽水的采樣管中，

在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。

3.5尿液：由病人自行留取中段尿液于無菌封閉的杯中送檢。

3.6乳汁：按無菌取材要求留取乳汁3-4ml于無菌試管或無菌瓶中送檢。

3.7其他體液及組織標(biāo)本：由臨床醫(yī)生采集后放入消毒的容器中及時送檢。

第四章臨床微生物標(biāo)本采集

1.目的

采集標(biāo)本以做臨床微生物檢驗。

2.適用范圍

適用于本科做臨床微生物項目所需標(biāo)本的采集。

3.物品準(zhǔn)備

無菌培養(yǎng)容器、血培養(yǎng)瓶、一次性無菌拭子等。

4.檢驗申請單填寫要求

4.1檢驗申請單采用電子申請或化驗單申請，化驗單申請用鋼筆填寫,使用正楷

字，字跡清楚，填寫完整。

4.2電子申請LIS條碼或申請的化驗單上包括內(nèi)容：受檢者姓名、性別、年齡、

臨床診斷、送檢標(biāo)本、檢驗項目、標(biāo)本采集年月日時、申請醫(yī)生及采樣者簽名。

5.常見微生物培養(yǎng)標(biāo)本的采集

5.1血培養(yǎng)或骨髓培養(yǎng)標(biāo)本的采集

5.1.1采血指征患者出現(xiàn)以下一種或同時具備幾種臨床表現(xiàn)時可作為血培養(yǎng)的重

要指征：①發(fā)熱（＞38℃）或低溫（＜36℃）,以間歇馳張型多見，革蘭陰性桿

菌，如大腸埃希菌引起的感染可見雙峰熱；②寒戰(zhàn)；③白細胞增多（＞10.0xl09/L,

特別是有“核左移"時）；④粒細胞減少（＜L0X109/L）;⑤血小板減少；⑥

皮膚、黏膜出血，常見于溶血性鏈球菌感染的菌血癥，傷寒病人第4-10天可出

現(xiàn)玫瑰疹，斑疹傷寒第4-6天可出現(xiàn)暗紅色斑丘血疹；⑦昏迷；⑧多器官衰竭；

⑨血壓降低；⑩呼吸加快（呼吸率＞20/分或CO2分壓＜32mmHg）;以及肝

脾腫大；關(guān)節(jié)疼痛；C反應(yīng)蛋白、內(nèi)毒素、降鈣素原升高等。對新生兒可疑菌血

癥，還應(yīng)同時做尿液和腦脊液培養(yǎng)。

5.1.2血培養(yǎng)采集時間：只要懷疑患者有血流感染的可能，在考慮使用抗菌藥物

之前，都應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。若患者已行抗菌藥物治療，則應(yīng)選擇含有抗菌

藥物吸附物的培養(yǎng)瓶，并在下一次抗菌藥物應(yīng)用前或者血藥濃度最低時采血培養(yǎng)。

患者寒戰(zhàn)或者發(fā)熱初期采血，超過發(fā)熱峰值之后，病原菌會逐漸被機體免疫系清

除，從而降低檢出率。實驗數(shù)據(jù)表明細菌入血后約1小時，寒戰(zhàn)和發(fā)燒開始出現(xiàn)

2小時內(nèi)，此時為采集血培養(yǎng)標(biāo)本進行病原菌培養(yǎng)的最佳時機。在不同的時間點

采血只有以下情況才有必要：疑似感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)（如導(dǎo)管相關(guān)性

感染）感染患者的連續(xù)性菌血癥。要求：對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考

慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。

5.1.3血培養(yǎng)采集次數(shù):

5.1.3.1對懷疑血流感染患者應(yīng)至少從2個部位分2次采集血液標(biāo)本進行培養(yǎng)，

以提高陽性培養(yǎng)率

5.1.3.2可疑急性心內(nèi)膜炎患者要立即取血作血培養(yǎng)，應(yīng)在1-2小時內(nèi)完成3套

血培養(yǎng)的采集，采集后立即進行抗菌藥的經(jīng)驗治療。如果24小時內(nèi)報告陰性,

則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。

5.1.3.3可疑的亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至lh采集1套，連續(xù)采集3

套標(biāo)本。如果24小時內(nèi)報告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。說明：血培養(yǎng)不能

在二至五天內(nèi)進行重復(fù)，因為在抗生素治療開始后血液中的細菌不會立即清除。

研究[1]表明，只做1套血培養(yǎng)，病原菌的檢出率僅為65%，兩套血培養(yǎng)為80%,

三套血培養(yǎng)為96%。單瓶或單套血培養(yǎng)不僅檢出率不高，而且難以區(qū)分污染導(dǎo)

致的假陽性，結(jié)果很難做出臨床解釋。通常情況菌血癥或真菌血癥的患者可通過

臨床表現(xiàn)來判斷療效，無需復(fù)查血培養(yǎng)或者連續(xù)續(xù)監(jiān)測血培養(yǎng)。然而有兩個例外:

第一是感染性心內(nèi)膜炎病人，對于他們的菌血癥或真菌血癥是否被清除可被用于

評估和指導(dǎo)治療：第二是與感染性心內(nèi)膜炎無關(guān)的金黃色葡萄球菌血癥，對其陽

性血培養(yǎng)的48小時至96小時追蹤可以很好地預(yù)測復(fù)雜的金黃色葡萄球菌血癥

[2]0

5.1.4血、骨髓培養(yǎng)的采集量：

5.1.4.1成人采血量8-10ml/瓶最少5ml，如果采血量不足5ml或者大于10ml,

在報告單上備注：采血量不足5ml/大于10ml,對檢驗結(jié)果有影響。

5.1.4.2兒童的采血量不能超過其總血容量的1%，可按年齡或體重分別采足夠的

血量：

對于新生兒敗血癥，最低的采血量不確定，通常0.75-1.0ml的血量是推薦的。

說明：血標(biāo)本采集的量是影響病原菌檢出率的重要的因素［3,4,5,6］,病原菌

檢出率與采血量成正比例增長［3,4,6］,每瓶力口1ml的血液，病原菌的檢出率

就會相應(yīng)增加。兒童患者同樣有數(shù)據(jù)表明檢出率與血容量成正比相關(guān)［7］。

5.1.4.3骨髓標(biāo)本：用骨髓穿刺針一般從骼骨采集；骨髓采集量：l-2ml即可。

5.1.4.4成人一份血培養(yǎng)為2瓶，即1個需氧瓶和1個厭氧瓶，一次穿刺采血即為

一份標(biāo)本。采集第二份應(yīng)從另外一個穿刺點獲得。成人采血要求采集左右雙側(cè)各

一份標(biāo)本，總共4瓶，注明采集部位。兒童一般只做需氧培養(yǎng)，只采集一個兒童

專用血培養(yǎng)瓶即可。采血量不足時應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶，90%以上的感染為需氧菌

或兼性厭氧菌。

5.1.5血培養(yǎng)皮膚及培養(yǎng)瓶消毒

5.1.5.1皮膚消毒:消毒重點是足夠量的消毒劑、足夠的消毒面積和作用時間。a）

三步法：75%酒精擦拭靜脈穿刺部位,自然待干30秒以上，1%-2%碘酊作用

30秒或10%碘酊作用60秒，從穿刺點向外劃圈消毒至消毒區(qū)域直徑達3cm以

上,75%酒精脫碘，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后采血。對碘過敏的患者，采用

70%異丙醇或者70%乙醇消毒60秒，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后采血。b）其

他皮膚消毒方法：洗必泰一步法：0.5%葡萄糖酸洗必素作用30s或者70%酒精

消毒后自然干燥30秒鐘。嚴(yán)格按照皮膚消毒步驟操作消毒外周靜脈穿刺部位,

消毒劑至少作用1分鐘以上（推薦使用氯乙口定或2%碘酊2月齡兒童不推薦氯乙

咤）o安爾碘使用方法：原液均勻涂擦二遍，或用原液直接噴于消毒部位二次。

作用1-2分鐘。

5.1.6培養(yǎng)瓶消毒：去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋，75%酒精用力擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮

塞子表面60秒，自然待干，將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶內(nèi)，輕輕顛倒混勻標(biāo)本，以避免

血液凝集。在懷疑炭疽芽胞桿菌或絲狀真菌時使用碘液消毒瓶塞。注意：兒童采

血量少，更應(yīng)注意顛倒混勻。

5.1.7采集部位要求：推薦從外周靜脈采集血液標(biāo)本。說明：不建議采集動脈血，

因其診斷價值沒有比靜脈血更大。盡量避免從靜脈留置導(dǎo)管采血培養(yǎng)，因其常伴

有高污染率[8,9,10]。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時從外周靜脈采集

另外一個血培養(yǎng)標(biāo)本以幫助陽性結(jié)果的判讀。

5.1.8采集方法要求：a）在采血之前，血培養(yǎng)瓶的橡皮塞需使用75%酒精消毒

并干燥，然后再嚴(yán)格按照皮膚消毒步驟操作進行穿刺部位的皮膚消毒。并等待足

夠的消毒時間。b）嚴(yán)格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈，除非帶

有無菌手套。c）不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭，采用真空采血裝

置能降低污染率。說明：無論采用何種采血方法，血培養(yǎng)可接受的污染率通常是

<3%[ll]o

5.1.9血培養(yǎng)標(biāo)本的運送要求：采血后應(yīng)該立即送檢。如不能立即送檢，需室溫

保存，切勿冷藏。標(biāo)本接種到培養(yǎng)瓶后，需輕輕顛倒混勻以防血液凝固。說明：

血培養(yǎng)瓶在接種前、接種后均不得冷藏或冷凍，否則會導(dǎo)致某些病原微生物死亡。

接種后的培養(yǎng)瓶最好立即送到實驗室，最遲不能超過2小時

5.1.10血培養(yǎng)標(biāo)本的拒收標(biāo)準(zhǔn)

a）血培養(yǎng)瓶上無條碼，無信息。

b）用過期培養(yǎng)瓶采集標(biāo)本，采血量不足。

c）血培養(yǎng)瓶破裂、滲漏、明顯污染、血液凝固等。

d）血標(biāo)本采集后放置12小時以上，冷藏保存的標(biāo)本。

注：（1）導(dǎo)管尖端培養(yǎng)應(yīng)該與外周靜脈血培養(yǎng)配套送檢。

（2）血培養(yǎng)宜同時做尿液和腦脊液培養(yǎng)。

5.1.11幾種特殊要求的血培養(yǎng)

5.1.11.1導(dǎo)管相關(guān)的性血流感染（CRBSI）

5.1.11.1.1短期外周導(dǎo)管要求：通過靜脈穿刺獲得病人的2份（套）外周血培養(yǎng)

（不同點）。無菌操作拔去導(dǎo)管并用Maki半定量方法［14］培養(yǎng)。

說明：Maki半定量法是先用75%酒精清潔導(dǎo)管周圍皮膚，然后無菌移動導(dǎo)管,

剪取導(dǎo)管末端5cm置于無菌容器中，立即送至實驗室（為防止干燥，常規(guī)培養(yǎng)

送檢時間不得超過15min,4。（：保存不得超過2小時）。實驗室人員用無菌銀子

將導(dǎo)管在血瓊脂平板上交叉滾動4次，然后棄之，將接種后的培養(yǎng)基置C02孵

箱35P過夜培養(yǎng)，平板上菌落數(shù)不少于15個為陽性。

培養(yǎng)結(jié)果的解釋：

—假如一套或多套血培養(yǎng)陽性，而且導(dǎo)管片段也是陽性（半定量N15個菌落）

并且為同一菌：提示CRBSL

——假如一套或多套血培養(yǎng)陽性，而且導(dǎo)管片段陰性：不可以下定論;但是如果

結(jié)果是金黃色葡萄球菌或念珠菌屬，而且排除其他任何可鑒別來源的感染則提示

CRBSI。

——假如血培養(yǎng)陰性，而且導(dǎo)管片段陽性，盡管有菌落計數(shù)，仍然提示導(dǎo)管定

植而非CRBSL

一假如血培養(yǎng)陽性，而且導(dǎo)管片段也是陰性，則不可能是CRBSL

5.1.11.1.2中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口（VAP）有兩種方法，其中方法一適用于

想保留導(dǎo)管的患者，如果已經(jīng)決定要拔除導(dǎo)管，則方法二更合適。

a）方法一

要求：對懷疑患CRBSI的病人采集至少兩套血培養(yǎng)，其中至少一套采集來自外

周血靜脈穿刺并做好標(biāo)記，另一套應(yīng)該同時或短時間間隔內(nèi)從導(dǎo)管口或VAP隔

膜無菌采集，采集時間應(yīng)與外周血血培養(yǎng)相近，并做好標(biāo)記。

培養(yǎng)結(jié)果的解釋：

——如果兩套血培養(yǎng)陽性且為同一種細菌，并排除其它任何來源的感染，提示

為CRBSL

——如果兩套血培養(yǎng)陽性且為同一種細菌，而且來自導(dǎo)管的血培養(yǎng)報陽時間比

外周靜脈血培養(yǎng)早120分鐘，提示為CRBSIO如果排除其他任何來源的感染，

兩套血培養(yǎng)報陽差異時間小于120分鐘，并且為同一種細菌，耐藥譜也一致，

也提示可能為CRBSL

如果兩套血培養(yǎng)陽性，而且來自導(dǎo)管的血培養(yǎng)細菌數(shù)量至少5倍于外周靜

脈血培養(yǎng)的CFUs/ml,如果排除其他任何來源的感染，也提示可能為CRBSK適

用于手工定量血培養(yǎng)系統(tǒng)，比如溶解/離心濃縮方法）。

——如果僅有來自外周靜脈的血培養(yǎng)為陽性,不能確定為CRBSI,但是如果培

養(yǎng)出的微生物是金黃色葡萄球菌或假絲酵母菌，并且缺乏其他感染的證據(jù)，則提

示可能為CRBSL確定為CRBSI還需要定量或半定量導(dǎo)管片段培養(yǎng)出相同微生

物。

一假如只有從導(dǎo)管抽血的那套是陽性的：不能得出CRBSI的結(jié)論，提示導(dǎo)管

定植菌或者是血培養(yǎng)采集過程中的污染。

——如果兩套血培養(yǎng)均為陰性，不是CRBSL

b）方法二

要求：通過獨立的外周靜脈穿刺無菌采集兩套血培養(yǎng)；拔出可疑導(dǎo)管，剪取5cm

的導(dǎo)管遠端的片段送實驗室進行Maki's半定量培養(yǎng)或振蕩/超聲后定量培養(yǎng)。

培養(yǎng)結(jié)果的解釋：

——如果一套或多套血培養(yǎng)陽性，同時導(dǎo)管末端培養(yǎng)陽性，而且通過菌種鑒定

和藥敏試驗結(jié)果比對確定為同一株微生物，貝II很可能是CRBSI。

——如果一套或多套血培養(yǎng)陽性，而導(dǎo)管末端培養(yǎng)為陰性，如果培養(yǎng)出的微生

物是金黃色葡萄球菌或假絲酵母菌，并且缺乏其他感染的證據(jù)，則提示可能為

CRBSI。確定為CRBSI還需其他結(jié)果支持。

——如果血培養(yǎng)陽性而導(dǎo)管末端培養(yǎng)陽性，提示為導(dǎo)管定植菌，不是CRBSL

——如果血培養(yǎng)和導(dǎo)管末端培養(yǎng)均為陰性，則不會是CRBSL

5.1.11.2感染性細菌性心內(nèi)膜炎

5.1.11.2.1血培養(yǎng)的采集時間要求：對于可能的心內(nèi)膜炎患者，起初采集3套血

培養(yǎng)，如果在24小時仍報告為陰性，則繼續(xù)連續(xù)采集2套血培養(yǎng)，一共采集5

套血培養(yǎng)。

a）急性感染性心內(nèi)膜炎：

要求：在經(jīng)驗性抗生素治療前30min之內(nèi)采血培養(yǎng)（1?2小時內(nèi)操作完畢）。

說明：對于疑似或已知高毒力病原菌（如金黃色葡萄球菌）所致感染性心內(nèi)膜炎

患者，需要在第一時間立即采血培養(yǎng)以避免治療上不必要的延誤。

b）亞急性感染性心內(nèi)膜炎：

要求：每隔15min左右收集血液，采集數(shù)套血培養(yǎng)。

說明：適當(dāng)?shù)臅r間間隔有助于證明為持續(xù)性菌血癥，尤其是當(dāng)心電圖正常或模棱

兩可時具有更高的臨床價值。

c）對疑似亞急性感染性心內(nèi)膜炎的患者，不一定必須在經(jīng)驗性抗生素治療前采血

培養(yǎng)，對這些患者，嘗試確定微生物學(xué)診斷更為重要。由于大多數(shù)感染性心內(nèi)膜

炎患者菌血癥持續(xù)存在，使血培養(yǎng)的時間選擇相對不是那么重要。

5.1.11.2.2需要的血培養(yǎng)數(shù)量

要求：先采集3套血培養(yǎng)。如果這些血培養(yǎng)在24小時內(nèi)均為陰性，則需再采集

2套血培養(yǎng)，總共需采集5套血培養(yǎng)。

說明：在采集懷疑有感染性心內(nèi)膜炎病人血培養(yǎng)時皮膚消毒是相當(dāng)重要的。在具

有亞急性感染性心內(nèi)膜炎或人工心臟瓣膜的病人，主要的病原菌是皮膚菌群，比

如凝血酶陰性的葡萄球菌，因此，特別重要的是血培養(yǎng)需要通過靜脈穿刺獲得，

而不是通過留置于血管內(nèi)的裝置。來源于導(dǎo)管的血培養(yǎng)增加了的污染的危險因素,

從而導(dǎo)致感染性心內(nèi)膜炎的錯誤結(jié)論。

有研究表明：造成感染性心內(nèi)膜炎"培養(yǎng)陰性”的另一個可能原因是被稱為：營

養(yǎng)變異的鏈球菌"（NVS）的存在。它們生長需要維生素B6或半胱氨酸。目前

商品化血培養(yǎng)瓶中都已經(jīng)添加了這些物質(zhì)。如果血培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)種時發(fā)現(xiàn)有鏈狀排列

的革蘭陽性球菌，符合鏈球菌的特征，但在羊血瓊脂平板上不生長，則可能存在

營養(yǎng)變異鏈球菌。據(jù)估計，5~6%的心內(nèi)膜炎患者存在營養(yǎng)變異鏈球菌［14］。

52尿液培養(yǎng)標(biāo)本采集

5.2.1采集方法：注意盡量采集晨尿標(biāo)本，應(yīng)保證尿液在膀胱內(nèi)停留4h以上。

留尿前，盡可能減少因液體攝入稀釋尿液所指的尿細菌計數(shù)偏低。

5.2.2清潔中段尿：最好留取早晨清潔中段尿標(biāo)本，囑咐患者睡前少飲水，清晨

起床后，女性用肥皂水清洗會陰部，男性應(yīng)翻上包皮，仔細清洗，再用清水沖洗

尿道口周圍；自然排尿,讓尿液不間斷，將前段尿排去，中段尿約10ml直接排

入專用的無菌培養(yǎng)杯中，立即送檢，2h內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用

的尿培養(yǎng)標(biāo)本收集方法，但很容易受到會陰部細菌污染，應(yīng)由醫(yī)護人員采集或在

醫(yī)護人員指導(dǎo)下由患者正確留取。

5.2.3直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對會陰局部進行消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插人

膀胱，棄去剛開始導(dǎo)出的15ml尿液后再收集培養(yǎng)的尿液，可減少尿液標(biāo)本污染,

準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道細菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一

般不提倡使用。

5.2.4留置導(dǎo)尿管收集尿液：利用留置導(dǎo)尿管采集標(biāo)本時，應(yīng)先用75%乙醇消毒

導(dǎo)口及尿管外部，待干后，夾住導(dǎo)管口10-20分鐘，按無菌操作方法用注射器

從導(dǎo)管口抽取5-10ml尿液，穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液，操作時應(yīng)防止混入消毒劑，

注意不能從尿液收集袋中采集尿液。

5.2.5恥骨上聯(lián)合穿刺法：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸

取尿液，是評估膀胱內(nèi)細菌感染的"金標(biāo)準(zhǔn)”方法，但有一定的痛苦?；颊唠y以

接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集。

標(biāo)本采集量、收集容器及運送：標(biāo)本采集量用無菌痰杯收集尿

5.2.65-10mlo

標(biāo)本。標(biāo)本采集后應(yīng)及時送檢、及時接種，室溫下保存時間不得超過2h（夏季

保存時間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存），4（冷藏保存時間不得超過24h,但應(yīng)注意

冷藏保存的標(biāo)本不能用于淋病奈瑟菌培養(yǎng)。

5.3糞便培養(yǎng)標(biāo)本采集

5.3.1送檢指征：當(dāng)腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一種情況時建議采集糞便標(biāo)本，進行

細菌培養(yǎng)：

5.3.2糞便涂片鏡檢白細胞＞5/HP;

5.3.3重癥腹瀉；

5.3.4體溫大于38.5℃;

5.3.5血便;

5.3.6便中有膿液；

5.3.7未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉患者；

5.3.8來自疫區(qū)的患者。

5.3.9標(biāo)本采集

5.3.10標(biāo)本采集盡可能在發(fā)病早期和使用抗菌藥物治療之前。在不同的時間采集

2~3個標(biāo)本可以提高致病菌的分離率。

5.3.11自然排便采集糞便標(biāo)本時取有膿血、粘液、組織碎片部分的糞便3g。

液體糞便則取絮狀物，一般取l~3ml,裝入無菌培養(yǎng)杯內(nèi)送檢。如需培養(yǎng)志賀

菌應(yīng)于獲取糞便標(biāo)本后30分鐘內(nèi)送檢