第9章 球菌課件

第9章球菌主講人北華大學(xué)臨床微生物學(xué)教授海南醫(yī)學(xué)院特聘教授李影林2010.10第一節(jié)葡萄球菌屬（Staphylococcus）

第二節(jié)鏈球菌屬(Streptococcus)第三節(jié)腸球菌屬（E.enterococcus）第四節(jié)奈瑟菌屬(Neisseria)

第9章球菌_1一、掌握1.葡萄球菌的主要生物學(xué)性狀、分類(lèi)、葡萄球菌的致病性。2.鏈球菌的分類(lèi)及主要生物學(xué)性狀、致病物質(zhì)及所致疾病，ASO試驗(yàn)。3.肺炎鏈球菌的生物學(xué)特性。4.腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的生物學(xué)特性；淋病奈瑟菌的致病性和防治原則。二、熟悉1.葡萄球菌的分布、微生物學(xué)檢查法、免疫性；葡萄球菌感染的防治原則；2.肺炎鏈球菌的致病性。3.鏈球菌的免疫性。三、了解1.球菌的分類(lèi)。2.凝固酶陰性葡萄球菌致病性。3.肺炎鏈球菌微生物學(xué)檢查法及防治原則。4.其他鏈球菌的致病性；微生物學(xué)檢查法。5.腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的免疫性。目的要求第9章球菌_1

第一節(jié)葡萄球菌屬

（Staphylococcus）

一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與染色1.G+球菌

2.固體培養(yǎng)基呈典型的葡萄狀。

3.無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛，不能運(yùn)動(dòng)，80%幼齡致病菌可形成微莢膜。

第9章球菌_1（二）培養(yǎng)特點(diǎn)

1.對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高。2.致病性菌株耐鹽性較強(qiáng)3.普通瓊脂平板37℃24～48h可形成光滑、濕潤(rùn)、隆起、不透明、邊緣整齊菌落。固體培養(yǎng)基上形成脂溶性色素。4.血平板－絕大多數(shù)菌出現(xiàn)溶血環(huán)。第9章球菌_1（三）生化反應(yīng)－不如腸道菌活潑

1.多數(shù)菌株能分解某些糖類(lèi)（如葡、麥蔗）產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。2.80%以上的致病菌株分解甘露醇。3.致病性葡萄球菌血漿凝固酶試驗(yàn)多陽(yáng)性。4.所有金黃色葡萄球菌可形成大量核酸酶，故核酸酶試驗(yàn)陽(yáng)性。5.觸酶陽(yáng)性第9章球菌_1（四）抗原構(gòu)造

1.蛋白質(zhì)抗原，其特點(diǎn)：

（1）是完全性Ag，本屬細(xì)菌都有，具有屬特異性，而無(wú)型特異性。（2）電鏡下觀(guān)察主要是細(xì)胞壁表面的蛋白質(zhì)成分，即蛋白質(zhì)Ag，稱(chēng)為葡萄球菌A蛋白（StaphylococcalProteinA，SPA)。第9章球菌_1

膿液標(biāo)本直接涂片（革蘭染色）第9章球菌_1（3）SPA的作用①A蛋白可與正常人或多種動(dòng)物的IgG（IgG1、IgG2、IgG4）的Fc段發(fā)生非特異性結(jié)合。②在動(dòng)物體中SPA和γ-球蛋白在細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中可釋放到介質(zhì)中。與吞噬細(xì)胞爭(zhēng)奪調(diào)理素的Fc段產(chǎn)生抗吞噬作用。③可與IgGFc段結(jié)合，其復(fù)合物可固定補(bǔ)體。④SPA是良好的分裂源，可促進(jìn)淋巴細(xì)胞分裂，向淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化。⑤對(duì)金葡菌噬菌體的吸附有影響，呈負(fù)相關(guān)。第9章球菌_12.莢膜多糖抗原3.多糖Ag：存在于細(xì)胞壁，具有群特異性A群多糖抗原－為磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺核糖醇的殘基（可從S.aureus中提出）。B群多糖抗原－為磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺甘油殘基（可從S.epidermidis提出）。第9章球菌_1（五）分類(lèi)

1.根據(jù)Bergey’s鑒定細(xì)菌學(xué)手冊(cè)（第9版）記載葡萄球菌分為32個(gè)種、15個(gè)亞種。

2.古典分類(lèi)法

3.分型（1）血清學(xué)分型（2）噬菌體分型（3）凝固酶分型第9章球菌_1（六）抵抗力

較強(qiáng)

1.耐干燥

2.對(duì)熱的抵抗力在無(wú)芽胞菌株中，它最強(qiáng)。3.對(duì)一般消毒劑較敏感。4.對(duì)苯胺類(lèi)染料敏感。第9章球菌_1（七）耐藥性變異90%的菌株耐青霉素。尤其耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistantS.aureus,MRSA)已成為醫(yī)院內(nèi)感染最常見(jiàn)的細(xì)菌機(jī)理:它是攜帶mecA基因、編碼低親和力青霉素結(jié)合蛋白導(dǎo)致耐甲氧西林。注意:衛(wèi)生部規(guī)定在臨床上,若藥敏試驗(yàn)是甲氧西林耐藥菌株,則報(bào)告該菌株耐所有青霉素、頭孢菌素、碳青霉烯類(lèi)、β-內(nèi)酰胺藥、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。同時(shí)對(duì)氨基糖苷類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)和四環(huán)素類(lèi)也耐藥!!!第9章球菌_1二、致病性(一)致病物質(zhì)侵襲性酶類(lèi)1.凝固酶:包括游離血漿凝固酶和結(jié)合性血漿凝固酶兩種.游離血漿凝固酶:類(lèi)似凝血酶原凝血酶原樣物質(zhì)纖維蛋白原纖維蛋白

凝聚因子:纖維蛋白原纖維蛋白

由致病性葡萄球菌產(chǎn)生，可使液態(tài)纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成固態(tài)纖維蛋白，沉積在菌體表面和病灶周?chē)Ｊ辜?xì)菌不易被吞噬細(xì)胞吞噬，阻止抗菌物質(zhì)的殺傷和抑制細(xì)菌的作用，有利于細(xì)菌在局部增殖。激活第9章球菌_12.其他酶類(lèi)纖維蛋白溶酶耐熱核酸酶透明質(zhì)酸酶酯酶第9章球菌_11.葡萄球菌溶素主要為α毒素(外毒素)(1)對(duì)多種哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞有溶血作用(2)對(duì)白細(xì)胞、血小板、肝細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞均有損傷作用2.殺白細(xì)胞毒素只攻擊中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞作用部位主要主要在白細(xì)胞膜。首先細(xì)胞膜中三磷酸肌醇發(fā)生構(gòu)型改變膜穿孔后膜通透性K+丟失白細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力喪失細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的顆粒排出細(xì)胞死亡3.腸毒素作用機(jī)制刺激嘔吐中樞引起嘔吐4.皮膚剝脫毒素引起燙傷樣皮膚綜合征5.毒素休克綜合征毒素-1引起發(fā)熱、休克及脫屑性皮疹、增加對(duì)內(nèi)毒素的敏感性。引起多個(gè)器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒素休克綜合征毒素第9章球菌_1(二)所致疾病性第9章球菌_1?????íì----??蜂窩組織通過(guò)淋巴感染皮下組織癰多個(gè)口癤一個(gè)口毛囊炎局部化膿性炎癥局部感染1.皮膚創(chuàng)傷2.全身感染3.葡萄球菌性食物中毒4.偽膜性腸炎

5.燙傷樣皮膚綜合征6.毒性休克綜合征入血菌血癥、敗血癥膿毒血癥、骨髓炎第9章球菌_1

癰第9章球菌_1

蜂窩組織炎第9章球菌_1

燙傷樣皮膚綜合征第9章球菌_1

骨髓炎第9章球菌_1

毒性休克綜合征第9章球菌_1

癤第9章球菌_1三、微生物學(xué)檢查法

（一）標(biāo)本的采集化膿病灶——膿汁膿毒血癥、敗血癥——血液食物中毒——食物、嘔吐物偽膜性腸炎——糞便糞便檢查做復(fù)合用，看噬菌體型是否一致。第9章球菌_1標(biāo)本采集第9章球菌_1（二）檢驗(yàn)程序膿汁、滲出物咽拭、腦脊液血液增菌分離培養(yǎng)（血平板）可疑菌落純培養(yǎng)鑒定試驗(yàn)（涂片、血漿凝、甘露醇等）E報(bào)告直接涂片染色初報(bào)糞便、嘔吐物高鹽甘露醇平板（分離培養(yǎng)）第9章球菌_1第二節(jié)鏈球菌屬（Streptococcus）2.根據(jù)群特異性Ag（“C”Ag）分為20個(gè)群。對(duì)人致病菌株90%為A群。A群又根據(jù)表面Ag（M、S、T、R），主要是M抗原。根據(jù)M抗原不同可分為100個(gè)型。3.生化反應(yīng)分類(lèi)4.根據(jù)對(duì)氧的需要5.噬菌體分型法及細(xì)菌素分型法。傳統(tǒng)分類(lèi)法1.根據(jù)溶血性分類(lèi)①甲（α）型溶血性鏈球菌；②乙（β）型溶血性鏈球菌③丙（γ）型鏈球菌當(dāng)代分類(lèi)法伯杰分類(lèi)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)（Bergey’sManualofsystematicBacteriology，SecodEditionRelease5.0，May2004

）收集4000余種模式菌株的16SrRNA序列力求細(xì)菌分類(lèi)學(xué)模式和種系發(fā)育模式的一致性。第9章球菌_1（一）生物學(xué)性狀

1.形態(tài)與染色

（1）G+球菌（球形或卵圓形）呈鏈狀排列

（2）在液體培養(yǎng)基中呈典型的長(zhǎng)鏈（與葡萄球菌區(qū)別）。

（3）無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛，大多數(shù)幼齡菌有莢膜，菌細(xì)胞壁外有菌毛，但被莢膜所包裹

一、A群鏈球菌第9章球菌_1鏈球菌掃描電鏡圖第9章球菌_1化膿性鏈球菌革蘭染色第9章球菌_12.培養(yǎng)特點(diǎn)

(1)對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高

(2)需O2或兼性厭O2，少數(shù)為專(zhuān)性厭O2(3)在液體培養(yǎng)基（如血清肉湯）中，管底是絮狀或顆粒狀沉淀，上層液體澄清。(4)在血平板上，形成灰白色半透明或不透明，表面光滑、濕潤(rùn)，有乳光凸起的菌落。有的菌落周?chē)遣煌耆苎械某释耆匀苎?，有的不溶血?/p>

第9章球菌_1

化膿性鏈球菌菌落特征（β溶血）第9章球菌_1

草綠色鏈球菌菌落特征（α溶血）第9章球菌_1γ鏈球菌菌落特征（γ溶血）第9章球菌_1

鏈球菌的抗原結(jié)構(gòu)第9章球菌_13.生化反應(yīng)

(1)葡萄糖+（產(chǎn)生的酸為乳酸和少量的甲酸、乙酸與乙醇）。(2)除某些草綠色菌株外（如乳房鏈球菌）一般均不分解菊糖。(3)除腸球菌、牛鏈球菌、馬腸鏈球菌等外，一般多不被膽汁或100g/L膽鹽所溶解。(4)α-溶血性鏈球菌對(duì)optochin敏感。(5)A群鏈球菌對(duì)桿菌肽敏感。

(6)B群鏈球菌CAMP試驗(yàn)陽(yáng)性。(7)七葉苷試驗(yàn)用于鑒定D群鏈球菌。不同的鏈球菌對(duì)糖的發(fā)酵作用不同，其共同點(diǎn)：與肺炎鏈球菌相區(qū)別第9章球菌_14.Ag構(gòu)造

(1)核Pr抗原（簡(jiǎn)稱(chēng)“P”Ag），因此無(wú)特異性，不能用于分類(lèi)。(2)群特異性（簡(jiǎn)稱(chēng)“C”Ag）。（3）型特異性Ag（4）G蛋白據(jù)1973年Kornvall報(bào)告A、C、G群鏈球菌的很多菌株的細(xì)胞壁及培養(yǎng)上清液中含有能與IgGFc段相結(jié)合的蛋白，稱(chēng)為鏈球菌G蛋白。

SPG與葡萄球菌A蛋白（SPA）相比有顯著不同。①它能與人及幾乎所有其他哺乳動(dòng)物的單克隆或多克隆IgG的Fc段相結(jié)合，而且親和力遠(yuǎn)比SPA強(qiáng)

②SPG對(duì)IgM、IgA、IgE、IgD無(wú)親和力，而SPA也能結(jié)合其他Ig。

第9章球菌_1(三)致病性致病物質(zhì)1.細(xì)胞壁成分2.外毒素3.侵襲性酶類(lèi)4.超抗原5.抵抗力——不強(qiáng)

第9章球菌_1細(xì)胞壁成分1.脂磷壁酸圍繞在M蛋白外層,與M蛋白一起組成菌毛結(jié)構(gòu)2.M蛋白細(xì)胞壁中的表面蛋白質(zhì)組分.(1)抗吞噬(2)抵抗吞噬細(xì)胞內(nèi)的殺菌作用(3)與心肌腎小球基底膜有共同抗原3.肽聚糖有致熱,溶解血小板,提高血管通透性4.細(xì)胞壁受體胞壁上有很多蛋白質(zhì)和纖維素受體,可與纖維素蛋白質(zhì)、IgG、IgA等結(jié)合,有利于細(xì)菌黏附于宿主細(xì)胞5.F蛋白具有纖維粘連蛋白的受體,能與上皮細(xì)胞表面的纖維粘連蛋白結(jié)合,使鏈球菌黏附到上皮細(xì)胞表面第9章球菌_1外毒素類(lèi)-?íì-毒素猩紅熱毒素又叫即由此毒素引起猩紅熱患者出現(xiàn)的皮疹損害可引起組織選擇性特殊毒性強(qiáng)群產(chǎn)生的外毒素紅疹毒素溶血毒素毒害心臟殺害白重點(diǎn)溶解紅溶血毒素溶血毒素、Dick，，，，ASC，C，O第9章球菌_1?????????íì??----降低大為使膿性滲出液的粘筒性多核苷酸核中的DNA分解C鏈道酶血塊等治療提純后用于溶解血栓于細(xì)菌在組織內(nèi)擴(kuò)散有助溶解血塊阻止血漿凝固酶元變成血漿Pr酶使血漿Pr鏈激酶又叫擴(kuò)散因子使細(xì)菌易在組織中擴(kuò)散的滲透性增進(jìn)組織使其水解皮下組織間的透明質(zhì)酸溶解皮膚透明質(zhì)酸酶、。，，，，，，，

侵襲性酶類(lèi)第9章球菌_1

所致疾病1.2.?????????íì???íì-)(，12舞蹈癥風(fēng)濕熱腦病關(guān)節(jié)炎心臟病風(fēng)濕熱腎炎型鏈球菌人們公認(rèn)為型要特別引起注意其中急性腎小球腎炎變態(tài)反應(yīng)性疾病第9章球菌_1癰第9章球菌_1蜂窩織炎第9章球菌_1膿皰瘡第9章球菌_1淋巴管炎（丹毒）第9章球菌_1猩紅熱第9章球菌_1大葉性肺炎大葉性肺炎（左肺）治療痊愈第9章球菌_1扁桃體炎第9章球菌_1肺膿腫第9章球菌_1化膿性腦膜炎（白色膿液）第9章球菌_1乳突炎第9章球菌_1（二）微生物學(xué)檢查法

1.標(biāo)本的采集

根據(jù)臨床疾病類(lèi)型不同，采集適當(dāng)標(biāo)本（1）通常采集的標(biāo)本（2）疑敗血癥或心內(nèi)膜炎——血液。（3）風(fēng)濕癥患者——取血做抗鏈球菌溶血素“O”試驗(yàn)。

第9章球菌_12.檢驗(yàn)程序第9章球菌_13.檢驗(yàn)方法（1）膿汁、咽拭或炎性分泌物①標(biāo)本→直接涂片→Gram染色②分離培養(yǎng)第9章球菌_1a.甲鏈－菌落似針尖狀，周?chē)歇M窄的草綠色溶血環(huán)b.乙鏈－灰白色小菌落，周?chē)苎h(huán)寬而又透明c.丙鏈－灰白色干燥周?chē)鸁o(wú)溶血環(huán)d.糞鏈－灰白色較大菌落，較濕潤(rùn)，甲、乙、丙三型溶血均有e.厭鏈－灰白色小菌落呈綠色溶血環(huán)或不溶血③生化反應(yīng)－鑒別意義不大，可供參考④鑒定試驗(yàn)菌落鑒別要點(diǎn)：第9章球菌_1鑒定試驗(yàn)a.鏈激酶試驗(yàn)－A群+（致病性）b.馬尿酸水解試驗(yàn)－B群有馬尿酸水解酶，使馬尿酸水解為苯甲酸及乙氨酸苯甲酸+FeCl3→三苯甲酸鐵↓（有色）c.牛乳美藍(lán)試驗(yàn)牛乳美藍(lán)試驗(yàn)對(duì)溶血性鏈球菌有抑制作用，對(duì)糞鏈、乳鏈無(wú)抑制作用d.耐鹽試驗(yàn)?zāi)c球菌、牛鏈、B群（80%）耐鹽e.桿菌肽敏感試驗(yàn)－A群敏感f.七葉苷分解試驗(yàn)－D群可分解g.甲鏈肺炎鏈菊糖膽汁－－＋＋第9章球菌_1（2）抗鏈“O”試驗(yàn)測(cè)定抗鏈球菌溶血素“O”效價(jià)，可輔助診斷活動(dòng)性風(fēng)濕、急性腎小球腎炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎效價(jià)＜1:200陰性＞1:400陽(yáng)性效價(jià)在1:500以上或逐步升高，即有診斷參考價(jià)值。（3）熒光抗體快速鑒定鏈球菌第9章球菌_1二、肺炎鏈球菌（S.pneumonia）

（一）生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色

（1）G+球菌：成雙排列，如矛頭狀

.（2）痰、膿汁、肺臟病變：?jiǎn)蝹€(gè)、成雙或短鏈狀。（3）液體培養(yǎng)基中，短鏈多見(jiàn)，故易與鏈球菌相混。（4）無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，在人或動(dòng)物體內(nèi)形成莢膜。（5）本菌有自溶酶，在此酶作用下菌體自溶。第9章球菌_1肺炎鏈球菌革蘭染色第9章球菌_1肺炎鏈球菌莢膜染色第9章球菌_12.培養(yǎng)特點(diǎn)

（1）兼性厭O2菌10%CO2環(huán)境中生長(zhǎng)更好，最適溫度37.5℃（25~41℃），最適pH7.6~8.0，較酸性的環(huán)境迅速死亡。

（2）營(yíng)養(yǎng)要求較高

（3）在各種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況。①液體培養(yǎng)基－先混濁后澄清

原因：a.有自溶酶

b.酸性自凝。②血平板a.通常形成0.5~1mm圓形、細(xì)小、扁平有光澤灰白半透明菌落，菌落周?chē)胁菥G色溶血環(huán)與甲鏈相似。

培養(yǎng)2~3d菌落中心凹陷，邊緣隆起，呈臍窩狀。b.Ⅲ型肺炎鏈球菌因產(chǎn)生較厚的莢膜而形成直徑2~3mm的粘液樣菌落。

第9章球菌_1肺炎鏈球菌菌落特征第9章球菌_13.生化反應(yīng)

能分解多種糖類(lèi)，其中有鑒別意義的:

肺炎

甲鏈

（1）菊糖

+（有的-）-（2）膽汗溶解T+-（3）optochin（對(duì)乙基氫化羥基奎寧）

+-（4）對(duì)小白鼠毒性

+-第9章球菌_14.Ag構(gòu)造與分型

（1）特異性Ag①菌體種屬特異性Aga.構(gòu)造－菌體多糖b.有種屬特異性c.該Ag又叫肺炎鏈球菌“C”物資，可與正常血清中所含的一種蛋白質(zhì)－“C”反應(yīng)蛋白，出現(xiàn)沉淀反應(yīng)，（C-reactiveprotein，CRP），它不是Ab，在炎癥活動(dòng)期，如風(fēng)濕熱患者，CRP的數(shù)量↑。第9章球菌_1②型特異性Aga.構(gòu)造－莢膜多糖多聚體b.有型特異性用凝集、沉淀、莢膜腫脹T可將其分為85個(gè)血清型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ……c.可溶于水，故又稱(chēng)為特異性可溶物質(zhì)，簡(jiǎn)稱(chēng)SSSd.不同型致病力不同e.有些同型菌株，莢膜多糖的組成也不同，故Ag也不同，第9章球菌_1（2）非特異性Ag菌體核蛋白Ag5.抵抗力

較弱

第9章球菌_16.變異性

（1）莢膜變異有莢膜的光滑型無(wú)莢膜的粗糙型(2)（3）型的轉(zhuǎn)化變異肺炎鏈球菌的型別可以互相變異轉(zhuǎn)化（4）耐藥性變異－某些菌株大多數(shù)對(duì)P－C敏感

第9章球菌_1（二）微生物學(xué)檢查法

1.標(biāo)本的采集

2.檢驗(yàn)程序

3.檢驗(yàn)方法（1）直接涂片檢查

第9章球菌_1肺炎鏈球菌腦脊液涂片（革蘭染色）第9章球菌_1（2）莢膜腫脹T（3）培養(yǎng)檢查

①增菌培養(yǎng)（血液、腦脊液）

第9章球菌_1②分離培養(yǎng)－血平板觀(guān)察菌落特點(diǎn)、溶血情況等（4）鑒定試驗(yàn)①莢膜腫脹試驗(yàn)②膽汁溶菌試驗(yàn)第9章球菌_1三、其他醫(yī)學(xué)相關(guān)鏈球菌（一）B群鏈球菌（學(xué)名無(wú)乳鏈球菌）早期新生兒暴發(fā)性敗血癥；晚期化膿性腦膜炎。（二）D群鏈球菌多見(jiàn)老年人、中青年女性、衰弱或腫瘤病人。（三）甲型溶血型鏈球菌感染性亞急性心內(nèi)膜炎。（四）變異鏈球菌常與齲齒有關(guān)。第9章球菌_1第三節(jié)

腸球菌屬（Enterococus）

一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與染色

1.G+球菌呈鏈狀排列；2.無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛、無(wú)莢膜

糞腸球菌革蘭染色第9章球菌_1

（二）培養(yǎng)特點(diǎn)

1.需O2/兼性厭O22.對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高——含血清培養(yǎng)基生長(zhǎng)好3.血平板灰白，不透明，表面光滑，直徑0.5~1mm，圓形小菌落，不同菌株表現(xiàn)不同溶血現(xiàn)象。選擇性瓊脂疊氮膽汁七葉苷瓊脂(分離培養(yǎng)）→抑制G-桿菌生長(zhǎng)腸球菌為黑色菌落

第9章球菌_1

糞腸球菌菌落特征第9章球菌_1

（三）生化反應(yīng)耐高鹽和膽汁

對(duì)多種抗菌藥物表現(xiàn)為固有耐藥膽汁七葉苷試驗(yàn)1.生長(zhǎng)溫度:10℃、45℃均能生長(zhǎng)2.65g/LNaCl生長(zhǎng)試驗(yàn)(+)3.膽汁七葉苷試驗(yàn)(+)PYR(吡咯烷酮β-萘基酰胺)試驗(yàn)(+)第9章球菌_1（四）分類(lèi)腸球菌科（Enterococcaceae）腸球菌屬（Enterococcus）糞腸球菌（E.faecalis）屎腸球菌（E.faecium）堅(jiān)忍腸球菌（E.durans）第9章球菌_1二、致病性

（一）致病物質(zhì)1.碳水化合物黏附素可吸附在腸道、尿路上皮細(xì)胞及心臟細(xì)胞。2.聚合物因子能聚集供體與受體菌，以利質(zhì)粒轉(zhuǎn)移。3.細(xì)胞溶素腸球菌質(zhì)粒編碼，可加重感染程度。4.多形核白細(xì)胞趨化因子糞腸球菌產(chǎn)生，可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。5.腸球菌能誘發(fā)血小板聚集及細(xì)胞因子依賴(lài)?yán)w維蛋白的產(chǎn)生與腸球菌心內(nèi)膜炎發(fā)病機(jī)制有關(guān)。耐藥性腸球菌已是醫(yī)院感染的重要致病菌！第9章球菌_1（二）腸球菌的耐藥性腸球菌細(xì)胞壁堅(jiān)厚對(duì)多種抗生素表現(xiàn)為固有耐藥攜帶萬(wàn)古霉素耐藥基因質(zhì)粒的傳播可引起難治性感染??！1.對(duì)青霉素耐藥機(jī)制腸球菌青霉素結(jié)合蛋白（PBP）對(duì)青霉素敏感產(chǎn)生當(dāng)與青霉素的親和力耐藥少數(shù)情況產(chǎn)生大量青霉素酶引起耐藥2.對(duì)氨基糖苷類(lèi)的耐藥性（1）腸球菌細(xì)胞壁堅(jiān)厚所致滲透障礙可導(dǎo)致中等耐藥。（2）質(zhì)粒介導(dǎo)的氨基糖苷類(lèi)鈍化酶可導(dǎo)致高度耐藥。3.對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥性腸球菌含有抗萬(wàn)古霉素的基因，分別為：VanA、VanB、VanC、VanD、VanE5個(gè)型。其中VanA基因位于轉(zhuǎn)座子上，其它抗藥基因位于染色體上。第9章球菌_11.尿路感染最常見(jiàn)，其中大部分為醫(yī)院感染2.腹部盆腔的創(chuàng)傷和外科感染3.敗血癥

常合并心內(nèi)膜炎

4.腦膜炎

罕見(jiàn)，主要為新生兒5.呼吸道感染

(三)所致疾病第9章球菌_1三、防治原則病人防御機(jī)制正常時(shí)，經(jīng)治療可獲痊愈。1.尿路感染的病原菌可單獨(dú)用青霉素、氨芐西林、萬(wàn)古霉素。大部分腸球菌對(duì)呋喃妥因敏感！2.心內(nèi)膜炎、腦膜炎的治療，常用青霉素或氨芐西林與氨基糖苷類(lèi)藥物聯(lián)合用藥。3.對(duì)耐萬(wàn)古霉素的腸球菌感染的散布要實(shí)施嚴(yán)格的隔離及合理、謹(jǐn)慎使用萬(wàn)古霉素！第9章球菌_1第四節(jié)

奈瑟菌屬根據(jù)Bergey’s鑒定細(xì)菌學(xué)手冊(cè)（第9版）記載，奈瑟菌科歸于群4。

???????????íì--?íì-不動(dòng)桿菌屬金氏菌屬莫拉菌屬卡他布蘭漢菌主要致病菌布蘭漢菌屬腦膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌主要致病菌奈瑟菌屬奈瑟菌科第9章球菌_1一、腦膜炎奈瑟球菌（Neisseriamenigititds）

（一）生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色（1）G-雙球菌，如腎形、蠶豆形、凹面相對(duì)。（2）無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，但有菌毛（pili），從病人新分離出的菌株有莢膜。第9章球菌_1腦脊液標(biāo)本直接涂片（革蘭染色）第9章球菌_1腦膜炎奈瑟菌革蘭染色第9章球菌_1腦膜炎奈瑟菌透射電鏡圖第9章球菌_1（3）人工培養(yǎng)后形態(tài)不規(guī)則24h培養(yǎng)物涂片常見(jiàn)一些不規(guī)則形態(tài)，首色不均勻。（4）病人腦脊液中，常見(jiàn)于嗜中性粒C胞漿內(nèi)，呈腎形、豆形，G-菌成雙排列，凹面相對(duì)——立即診斷。但就形態(tài)而言，不易與其他奈瑟菌區(qū)別。（5）本菌有自溶酶，故取陳舊培養(yǎng)物涂片可見(jiàn)膨脹或破碎的菌體。

第9章球菌_12.培養(yǎng)特性

（1）專(zhuān)性需O2，初次分離需10%CO2

（2）溫度要求嚴(yán)格<30>40℃均不長(zhǎng)，最適溫度35~36℃，最適pH7.4~7.6。（3）營(yíng)養(yǎng)要求高，一般培養(yǎng)基及室溫均不長(zhǎng)，必須在含有血液、血清、葡萄糖、肝浸液、腹水或卵黃培養(yǎng)基上才能發(fā)育，常用巧克力色瓊脂平板和血平板。（4）在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況

①巧克力色瓊脂平板

第9章球菌_1

形成直徑為1~2mm藍(lán)灰色半透明光滑濕潤(rùn)又扁平，銀灰閃光邊緣整，露滴狀菌落。②血平板不溶血，無(wú)色素，比較柔軟，易乳化，延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間，由于自溶酶作用菌落可變成酪樣或膠樣。③MH瓊脂形成半透明，色澤似彩虹的菌落。④卵黃雙抗瓊脂（EPV）菌落較大，扁平，無(wú)色，光滑濕潤(rùn)邊緣整齊。⑤血清肉湯中度混濁，微沉淀

第9章球菌_13.生化反應(yīng)

能力弱

4.Ag構(gòu)造及分型（1）莢膜多糖特異性Ag：根據(jù)莢膜多糖Ag不同，13個(gè)血清群。致病菌主要為A、B、C、Y群。流行菌株-目前我國(guó)仍以A群以為。（2）外膜蛋白型特異性Ag本質(zhì)是高分子量的脂蛋白-脂多糖復(fù)合物5.抵抗力

很弱

第9章球菌_1（二）致病性1.致病物質(zhì)（1）莢膜抗吞噬（2）菌毛黏附咽喉黏膜表面。（3）LOS菌體死亡或自溶而釋放出。作用于小血管和毛細(xì)血管，引起壞死、出血、導(dǎo)致皮膚瘀斑和微循環(huán)障礙。嚴(yán)重?cái)⊙Y時(shí)引起腎上腺出血，并因大量LOS釋放，可造成DIC及中毒性休克。第9章球菌_12.所致疾病人是唯一的自然突主，主要引起流腦。臨床上分3型：普通型、暴發(fā)型、慢性敗血癥型。

流行性腦脊髓膜炎

第9章球菌_1（三）免疫性以體液免疫為主。血清中的群特異多糖抗體和型特異外膜蛋白抗體在補(bǔ)體存在下，能殺傷腦膜炎奈瑟菌。6個(gè)月嬰兒可通過(guò)母體獲得抗體。第9章球菌_1（四）微生物學(xué)檢查法

1.標(biāo)本的采集根據(jù)臨床病程不同，采集的標(biāo)本也有所不同。（1）菌血癥-采血液3～5ml（2）出血點(diǎn)、瘀斑-取瘀斑滲出液（3）有腦膜刺激癥狀者-抽取腦脊液3ml（4）上呼吸道感染期的疑似病人和帶菌者-鼻咽腔分泌物要求：（1）采集標(biāo)本應(yīng)特別注意保暖，防止干燥和日光照射，接種于預(yù)溫的培養(yǎng)基上。（2）立即送檢。（3）分離培養(yǎng)最好在床邊進(jìn)行。（4）不能在冰箱（4℃）保存標(biāo)本或菌種，在冰箱中比在室溫中死的更快。

第9章球菌_12.檢驗(yàn)方法（1）直接檢查法②瘀斑（出血點(diǎn)）

皮膚酒精消毒70%干燥后刺破瘀血點(diǎn)擠出帶血的組織液印片張(2)滅菌小皮試注射器美藍(lán)染色陽(yáng)性率

Grams70％~80%′接種分離培養(yǎng)min第9章球菌_1（2）分離培養(yǎng)檢查法①常規(guī)法

②安瓿法

置第9章球菌_14.鑒定依據(jù)（1）形態(tài)染色特點(diǎn)（2）菌落特征（3）生化反應(yīng)能力強(qiáng)，葡麥+氧化酶+（4）血清凝集試驗(yàn)陽(yáng)性（5）G+Cmol%50~52第9章球菌_1二、淋病奈瑟菌（Neisseriagonorrhceae）

（一）生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色（1）G-雙球菌，球形或腎形，兩球菌接觸面平坦，形似一對(duì)黃豆。（2）無(wú)芽胞無(wú)鞭毛，有莢膜，有的淋病奈瑟菌有菌毛。（3）急性患者尿道膿汁標(biāo)本中，可見(jiàn)細(xì)菌被吞噬于中性粒細(xì)胞內(nèi)，慢性淋病時(shí)多在細(xì)胞外。第9章球菌_12.培養(yǎng)特點(diǎn)（1）營(yíng)養(yǎng)要求高