兩種血栓彈力圖檢測試劑比對結(jié)果分析

兩種血栓彈力圖檢測試劑比對結(jié)果分析

[摘要]目的通過30組臨床枸櫞酸抗凝全血標本進行血栓彈力圖檢測，驗證以下內(nèi)容：評價YZ5000型血栓彈力圖儀及其配套活化凝血檢測試劑和HaemoscopeCorporation生產(chǎn)的TEG5000型血栓彈力圖儀及其配套的活化凝血檢測試劑具有良好的相關(guān)性。結(jié)果30例血標本分別用兩種廠家試劑進行試驗，實驗結(jié)果通過統(tǒng)計分析具有相關(guān)性。結(jié)論陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的YZ5000型血栓彈力圖儀及其配套活化凝血檢測試劑和已經(jīng)獲得國家醫(yī)療器械注冊證HaemoscopeCorporation生產(chǎn)的TEG5000型血栓彈力圖儀及其配套的活化凝血檢測試劑具有良好的相關(guān)性。[關(guān)鍵詞]TEG；YZ5000型血栓彈力圖儀；TEG5000型血栓彈力圖儀1948年，Hartert最早描述血栓彈力圖（Throm-belastography,TEG），當時用于檢測單個血樣的整體凝血功能[1]。TEG的設(shè)備體積小，測量速度快，可在30min內(nèi)檢測出血小板功能和凝血狀態(tài)。TEG主要由一次性盛血樣的燒杯、自由懸針及其上的扭力絲組成。將0.36ml血樣加入小燒杯中，小燒杯溫度保持在37℃，并以4°45′角旋轉(zhuǎn)，每轉(zhuǎn)持續(xù)10s。在旋轉(zhuǎn)過程中，纖維蛋白在燒杯壁與扭力絲之間發(fā)生多聚反應，凝血過程開始，凝血塊逐漸形成。通過自由懸針和扭力絲將凝血過程中凝血塊機械阻抗的變化記錄到電腦上，并與時間相對應，繪制成圖像，即為TEG[2-3]。傳統(tǒng)的實驗室凝血檢查主要針對凝血過程的某個孤立的部分，而TEG反應了全血的凝血及纖溶能力。所以，TEG可以更好地為臨床服務[3]。資料與方法標本要求30例符合凝血檢測要求的枸櫞酸抗凝全血（建議BDVacutainer注冊證號國食藥監(jiān)械（進）字2011第2412553號，吸入后3小時內(nèi)使用），按照抗凝管刻度抽滿2管，未離心、新鮮血樣。儀器與試劑實驗組：陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的YZ5000型血栓彈力圖儀及其配套活化凝血檢測試劑（以下簡稱國產(chǎn)試劑）對照組：HaemoscopeCorporation生產(chǎn)的TEG5000型血栓彈力圖儀及其配套的活化凝血檢測試劑（以下簡稱進口試劑）其他耗材：

樣品杯：陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)0.2M氯化鈣：陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司實驗室配制試驗設(shè)計本次試驗采用自身對照配對設(shè)計方法，即將符合要求的同一血樣分別獲得國產(chǎn)試劑檢測結(jié)果與該血樣的進口試劑檢測結(jié)果，每個血樣得到國產(chǎn)試劑的檢測結(jié)果及該血樣的進口試劑檢測結(jié)果形成配對數(shù)據(jù)。本次臨床試驗目的是評價兩種檢測TEG的試劑是否具有相關(guān)性，故采用自身對照配對設(shè)計使得試驗產(chǎn)品檢測結(jié)果與該血樣的真實數(shù)據(jù)形成直接對比的配對結(jié)果，通過兩個結(jié)果的對比評價試驗產(chǎn)品檢測TEG的準確性。1.儀器準備TEG5000型血栓彈力圖儀美國HaemoscopeCorporation生產(chǎn)正常保養(yǎng)后對應兩通道簡稱為I1、I2YZ5000型血栓彈力圖儀陜西醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)正常保養(yǎng)后對應兩通道簡稱為D1、D22.試驗操作步驟2.1按照血栓彈力圖操作要求，使TEG5000血栓彈力圖儀與YZ5000型血栓彈力圖儀4個通道基線值保持一致，進行化學質(zhì)控操作并符合質(zhì)控要求。2.2按照血栓彈力圖操作指南要求在I1、I2、D1、D2上裝載樣品杯，分別加入0.2M氯化鈣20ul，待檢。2.3將一管送檢未離心枸櫞酸抗凝全血上下顛倒5次混勻后，用移液器吸取1ml加入到復溫到室溫的進口試劑中再上下顛倒5次靜止兩分鐘備用。為高嶺土激活血樣。2.4再同一管血中進行國產(chǎn)試劑操作，步驟同3）2.5從進口試劑中分別取0.34ml高嶺土激活血樣，加入到I1、D1的樣品杯中，控制桿移到Test位置，軟件立即點擊開始按鈕開始檢測。2.6國產(chǎn)試劑加樣至I2、D2通道步驟同5）2.7當檢測到MA值出現(xiàn)后停止檢測。2.8重復步驟3-7，到測試樣本數(shù)達到要求為止。2.9分別導出R，K，Angle，MA進行分析，保留原始圖形。3.注意事項3.1操作人員應嚴格按照血栓彈力圖儀操作手冊進行操作3.2獻血者應無抗凝藥物使用，不在輸血或溶栓等對凝血產(chǎn)生影響治療過程中。3.3儀器每通道基線與彈力（同一標尺）調(diào)節(jié)應該均在正常范圍內(nèi)，化學質(zhì)控結(jié)果在正常范圍內(nèi)且每通道結(jié)果CV在15%以內(nèi)。3.4多儀器通道間調(diào)試應符合第2條注意事項。3.5活化凝血檢測試劑應保證足夠的復溫時間（建議20分鐘）3.6枸櫞酸抗凝管應為1：9抗凝濃度（推薦BD），抗凝管中至少應有2ml標本，實驗前應檢查抗凝管中血樣是否均質(zhì)，有無凝塊，如已靜置分層應顛倒混均；如有凝塊，應廢棄重抽標本。3.7應盡量縮短兩次1ml標本的吸取和注入時間，混勻和顛倒等操作應保持一致。3.8加樣時應將移液器吸頭沿樣品杯壁緩緩注入，不應產(chǎn)生氣泡，加樣后應迅速開始檢測，兩通道檢測應保持相同節(jié)奏，盡量縮短兩通道間檢測開始時間。3.臨床試驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析方法以I1為因變量，以I2、D1、D2為自變量對R、K、Angle、MA分別應用SPSS軟件進行相關(guān)回歸分析，計算斜率、截距和相關(guān)系數(shù)，并根據(jù)以上指標進行顯著性分析。具體方法如下：病人比對實驗用相關(guān)系數(shù)r值計算：設(shè)對進口試劑測定結(jié)果為，國產(chǎn)試劑測定結(jié)果為值。按公式計算出r值。判定r值的顯著性采用統(tǒng)計學的p值，p值是將觀察結(jié)果認為有效即具有總體代表性的犯錯概率。根據(jù)費希爾的理論，當p值小于0.05時在統(tǒng)計上是顯著的。0.05≥P>0.01被認為是具有統(tǒng)計學意義，而0.01≥P≥0.001被認為具有高度統(tǒng)計學意義。設(shè)定進口試劑的測定結(jié)果為,國產(chǎn)試劑的測定結(jié)果為值?；貧w方程的一般形式是Y=a+bx，其中x為自變量，一般為資料中能精確測定和控制的量，Y為應變量，指在x規(guī)定范圍內(nèi)隨機變化的量。a為截距，是回歸直線與縱軸的交點，b為斜率，意為x每改變一個單位時,Y的變化量?；貧w方程的顯著性檢驗表1方差分析表離差名稱平方和自由度均方差回歸RSSKRSS/k（k個解釋變量）殘差ESSn-k-1ESS/n-k-1總離差TSSn-1檢驗：Y與解釋變量x1，x2，…,xk之間的線性關(guān)系是否顯著。(1)H0：b1=b2=……bk=0H1：bi不全為0（i=1，２，…,k）(2)

或(3)查F分布表，得：(4)若,拒絕H0，回歸方程顯著,接受H0，回歸方程不顯著4.關(guān)于臨床試驗樣本量的說明陜西裕澤毅醫(yī)療科技有限公司在產(chǎn)品活化凝血檢測試劑盒(以下簡稱試劑盒)的臨床對比方案中，我們選擇的是等效試驗。將入選的同一臨床血樣，分別用試劑盒和已經(jīng)上市的試劑HaemoscopeCorporation活化凝血檢測試劑盒在已上市的HaemoscopeCorporation公司生產(chǎn)的血栓彈力圖儀器上進行檢測，對結(jié)果進行相關(guān)性統(tǒng)計。樣本量確定的依據(jù)基于在符合《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導原則》的前提下，應符合定量樣本計算的統(tǒng)計學要求。對于上述的統(tǒng)計學要求，我們對實驗組和對照組的結(jié)果進行相關(guān)回歸分析，計算斜率、截距和相關(guān)系數(shù)，并根據(jù)以上指標進行顯著性分析。具體方法如下：病人比對實驗用相關(guān)系數(shù)r值計算：設(shè)對照試杯測定結(jié)果為，HaemoscopeCorporation公司生產(chǎn)的測定結(jié)果為值。按公式計算出r值。判定r值的顯著性采用統(tǒng)計學的p值，p值是將觀察結(jié)果認為有效即具有總體代表性的犯錯概率。根據(jù)費希爾的理論，當p值小于0.05時在統(tǒng)計上是顯著的。0.05≥P>0.01被認為是具有統(tǒng)計學意義，而0.01≥P≥0.001被認為具有高度統(tǒng)計學意義。在統(tǒng)計學上樣本量確定多少有統(tǒng)計學意義，具體計算如下：線性回歸樣本量計算公式：N=1+M+M*F2*(1/R2-1)M:自變量的個數(shù),本試驗中M值為1F：本試驗中取α=0.05F=1.96R：相關(guān)系數(shù)，相關(guān)系數(shù)越大，樣本量越小，當R大于0.8時，可認為高度相關(guān)。本試驗中R均大于0.8，按R=0.8計算最小樣本量。N=1+1+1*1.962*(1/0.82-1)=4.2取N=5因此，在本試驗中，樣本數(shù)大于5即有統(tǒng)計學意義。3討論和結(jié)論本次研究，共計完成30例合格血樣檢測。經(jīng)統(tǒng)計學分析，國產(chǎn)試劑和進口試劑檢測結(jié)果有高度統(tǒng)計學意義，試驗樣本數(shù)也符合統(tǒng)計學要求，因此，YZ5000型血栓彈力圖儀及其配套活化凝血檢測試劑和HaemoscopeCorporation生產(chǎn)的TEG5000型血栓彈力圖儀及其配套的活化凝血檢測試劑具有良好的相關(guān)性。試驗產(chǎn)品未出現(xiàn)影響可用性能的評價結(jié)果，表明試驗產(chǎn)品具有良好的臨床可用性能。參考文獻[1]BischofD,DalbertS,ZollingerA,etal.Thrombelastographyinthesurgicalpatient.MinervaAnestesiol，2010,76(2):131-137.[2]GanterMT，HoferCK.Coagulationmonitoring:currenttechniquesa