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文檔簡介
2025屆吉林省撫松五中等高三第二次診斷性檢測生物試卷注意事項1.考試結束后,請將本試卷和答題卡一并交回.2.答題前,請務必將自己的姓名、準考證號用0.5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置.3.請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符.4.作答選擇題,必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑;如需改動,請用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案.作答非選擇題,必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律無效.5.如需作圖,須用2B鉛筆繪、寫清楚,線條、符號等須加黑、加粗.一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.某種動物種群的Nt與Nt+1/Nt的關系如圖所示,Nt為該種群第t代的種群數(shù)量.Nt+1為該種群第t+1代的種群數(shù)量。不考慮遷入與遷出。下列推斷錯誤的是()A.當Nt為a時,該種群的出生率小于死亡率B.當Nt為c時,該種群的數(shù)量最多C.當Nt為d時,該種群的年齡組成為增長型D.當Nt為b時,該種群第t+1代的種群數(shù)量與第t代相同2.研究發(fā)現(xiàn)協(xié)助物質進出細胞的轉運蛋白包括載體蛋白和通道蛋白,且載體蛋白協(xié)助物質進出細胞時可能消耗能量,也可能不消耗能量,而通道蛋白協(xié)助物質進出細胞時不消耗能量。下列有關物質進出細胞的方式敘述,不合理的是()A.無轉運蛋白參與的物質進出細胞方式都是自由擴散B.Na+不能通過通道蛋白的協(xié)助逆濃度梯度運出細胞C.在主動運輸中協(xié)助物質進出細胞的蛋白質是載體蛋白D.物質依靠通道蛋白進出細胞的方式屬于被動運輸3.將成熟的雄性小白鼠的甲狀腺摘除,從第三周開始,每周注射激素a,結果激素a和激素b在血液中濃度變化如下圖,下列表述正確的是A.a(chǎn)曲線代表促甲狀腺激素,由垂體分泌B.b曲線代表促甲狀腺激素,由甲狀腺分泌C.a(chǎn)曲線代表甲狀腺激素,由甲狀腺分泌D.b曲線代表甲狀腺激素,由垂體分泌4.蝗蟲的體細胞中染色體數(shù)目較少(雌蝗蟲2N=24,雄蝗蟲2N=23),它由X染色體數(shù)決定性別(雌性XX,雄性XO)?,F(xiàn)有一個進行正常分裂的蝗蟲細胞,顯微觀察發(fā)現(xiàn),含有12條染色體,呈現(xiàn)12種不同的形態(tài)結構。下列敘述正確的是()A.該細胞含有同源染色體,存在等位基因B.該細胞如果在體內(nèi)完成分裂后可以進入下一個細胞周期C.該細胞的染色體數(shù)與DNA分子數(shù)之比為1:1D.該細胞可能取自卵巢,也可能取自精巢5.圖表示某動物細胞進行分裂的部分過程。請根據(jù)相關信息,判斷以下相關敘述中,不正確的是()A.該細胞來自雌性動物的卵巢B.圖中RNR排列在一起的原因是基因重組C.有“偏向”的染色體分離不利于遺傳多樣性D.染色體分離的極性依賴于微管蛋白的排列6.榕樹隱頭花序(俗稱榕果)的苞片可以防止小蜂進入其內(nèi)產(chǎn)卵。傳粉榕小蜂能撕咬并鉆過苞片進入榕果產(chǎn)卵,并幫助榕樹傳粉。楊氏榕樹金小蜂通常利用傳粉榕小蜂咬出的通道才能進入榕果并完成產(chǎn)卵??蒲腥藛T研究榕果內(nèi)的不同種類的產(chǎn)卵小蜂對榕果種子產(chǎn)量以及它們后代數(shù)量的影響,結果如下表所示。對實驗的分析不正確的是()榕果內(nèi)產(chǎn)卵小蜂的種類榕果內(nèi)種子數(shù)量傳粉榕小蜂后代數(shù)量楊氏榕樹金小蜂后代數(shù)量傳粉榕小蜂5.5408.50傳粉榕小蜂和楊氏榕樹金小蜂10.010.580.7A.楊氏榕樹金小蜂與傳粉榕小蜂體型可能相似B.楊氏榕樹金小蜂進入榕果內(nèi)產(chǎn)卵有助于榕樹傳粉C.榕果內(nèi)傳粉榕小蜂比楊氏榕樹金小蜂的競爭力強D.傳粉榕小蜂與榕樹之間的關系為互利共生二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)探究在適合生長的氮濃度范圍內(nèi),不同氮素水平對青花菜葉片光合作用的影響,實驗結果如表所示:氮素水平(mmol?L-1)葉綠素含量(μg?cm-2)凈光合速率(μmol?m-2?s-1)氣孔導度(mmol?m-2?s-1)胞間CO2濃度(μL?L-1)5(低氮)8619.40.6830810(中氮)9920.70.8430415(偏高)10321.40.8530120(高氮)10322.00.84295請回答:(1)表中凈光合速率是采用葉齡一致的葉片,在________相同的實驗條件下,測得的單位時間、單位葉面積______的吸收量。(2)光合作用過程中,葉綠素主要吸收____光,光合色素吸收的光能一部分用于將水分解為____,還有一部分轉移到ATP中。(3)從表中可知,隨著氮素水平的增高,葉片凈光合速率逐漸____,氣孔導度____(填“限制”或“不限制”)凈光合速率的變化。(4)高氮組比偏高組葉片凈光合作用速率高,而葉綠素含量相同,推斷其主要原因可能是參與光合作用的酶____。(5)為使實驗數(shù)據(jù)更可靠,在控制好無關變量的基礎上,應針對每個氮素水平條件下設置________。8.(10分)如下圖小麥種子萌發(fā)過程中鮮重的變化曲線。(1)階段Ⅰ和Ⅲ小麥種子的鮮重增加明顯。階段Ⅲ中,種子胚細胞內(nèi)水的主要存在形式是__________。(2)從細胞膜組成和結構的角度來推測,水分可經(jīng)過細胞膜中的______、______從細胞外進入細胞內(nèi)。(3)在階段Ⅱ,種子吸水速率_____(填“大于”、“小于”或“等于”)階段Ⅰ,呼吸速率_______(填“大于”、“小于”或“等于”)階段Ⅰ。(4)據(jù)測定小麥種子萌發(fā)初期以無氧呼吸為主,欲測定無氧呼吸產(chǎn)物是否含有酒精,所用的試劑是______。(5)有研究表明,某種小麥在輕度干旱脅迫下,葉片凈光合作用速率下降了38%。為探究其原因,某興趣小組分別測定小麥葉片在輕度干旱脅迫和供水充足兩種條件下的氣孔張開程度(氣孔導度)與葉肉細胞胞間CO2濃度。結果發(fā)現(xiàn),輕度干旱脅迫組的氣孔導度和胞間CO2濃度均小于供水充足組的,由此可以得出的合理結論是__________________。9.(10分)溫室大棚養(yǎng)殖蔬菜瓜果,最重要的是水肥管理。為探究施肥及CO2濃度對藍莓凈光合速率的影響,科研人員進行了相關實驗,結果如下圖所示:(注:NPK指添加氮、磷肥和鉀肥;NP指添加氮和磷肥)?;卮鹣铝袉栴}:(1)據(jù)圖分析,實驗的自變量不止一個,除CO2濃度外,還有________________________。(2)a點所代表的含義為________________。(3)CO2濃度為2.0×10-2時,根據(jù)圖表可知,_____組促進藍莓的凈光合速率最低。在CO2濃度為3.0×10-2時,單獨施用鉀肥藍莓凈光合速率低的原因是:很多與光合作用過程直接相關的物質的合成離不開N、P等元素,如__________(至少寫兩種)。(4)中耕松土能促進無機鹽的吸收,其原因是________________________。10.(10分)草甘膦是一種除草劑,科研人員利用基因工程技術獲得抗草甘膦轉基因水稻。操作過程如下圖所示。請回答下列問題:注:GUS基因表達產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍色(1)構建基因表達載體首先需用能產(chǎn)生不同________的限制性核酸內(nèi)切酶分別處理草甘膦抗性基因和Ti質粒,這種處理的目的是________________________,再用________________處理。Ti質粒的功能是________________________________________。(2)用含潮霉素的培養(yǎng)基進行圖中篩選1的目的是________________________,篩選2的目的是_________________________。(3)取某品種水稻的幼胚,先進行________處理,然后接種到含________的培養(yǎng)基中,誘導形成愈傷組織,用于獲得目的植株。(4)將大腸桿菌用Ca2+溶液處理,是否完成了轉化?________(填“是”或“否”),理由是________________________________________________________。11.(15分)玉米是C4植物,由于葉肉細胞中含有PEP羧化酶(CO2“泵”),對CO2的親和力很強,可以把大氣中含量很低的CO2以C4的形式固定下來。下圖是某興趣小組對影響光合速率的因素的研究結果,據(jù)圖回答下列相關問題:(1)圖1實驗的自變量為_____________________,無關變量為__________________。(2)光照強度為P時,植物細胞中可以產(chǎn)生ATP的細胞器有____________________,該實驗條件下葉綠體固定的CO2來源是_______________________(場所),小麥植株的CO2固定速率___________(填“小于”、大于”、等于”)玉米植株的CO2固定速率,判斷依據(jù)是______________。(3)由圖2可知在胞間CO2濃度較低時(A點之前),玉米比小麥的光合作用強度高,原因是____________________。一般來說,玉米CO2補償點和CO2飽和點均______(填“高于”“等于”“低于”)小麥。(4)玉米植株葉片細胞內(nèi)的葉綠體有兩種類型,其中葉肉細胞內(nèi)的葉綠體具有基粒和基質,而維管束鞘細胞內(nèi)的葉綠體只有基質,沒有基粒。由此可知,光合作用的光反應發(fā)生于玉米葉片的________(填“葉肉和維管束鞘”、“維管束鞘”、“葉肉”)細胞中。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、B【解析】
分析曲線圖:Nt+1與Nt的比值>1說明種群數(shù)量在增加,出生率大于死亡率;Nt+1與Nt的比值=1說明種群數(shù)量維持穩(wěn)定,出生率等于死亡率;Nt+1與Nt的比值<1說明種群數(shù)量在減少,出生率小于死亡率,據(jù)此答題?!驹斀狻緼、當Nt為a時,Nt+1/Nt小于1,后一年的種群數(shù)量少于前一年,說明該種群的出生率小于死亡率,A正確;B、由b~eNt+1/Nt大于1,種群數(shù)量越來越多,當Nt為e時,該種群的數(shù)量最多,B錯誤;C、當Nt為d時,Nt+1/Nt大于1,種群數(shù)量越來越多,推知該種群的年齡組成為增長型,C正確;D、當Nt為b時,Nt+1/Nt等于1,該種群第t+1代的種群數(shù)量與第t代相同,D正確。故選B。2、A【解析】
1、小分子物質跨膜運輸?shù)姆绞胶吞攸c:名稱運輸方向載體能量實例自由擴散(簡單擴散)高濃度低濃度不需不需水、CO2、O2、甘油,苯、酒精等協(xié)助擴散(易化擴散)高濃度低濃度需要不需紅細胞吸收葡萄糖主動運輸?shù)蜐舛雀邼舛刃枰枰∧c絨毛上皮細胞吸收氨基酸、葡萄糖等2、大分子的運輸方式:胞吞和胞吐:大分子物質進出細胞的方式,不需要載體,但需要能量,體現(xiàn)了細胞膜的流動性。【詳解】A、無轉運蛋白參與的物質進出細胞方式有自由擴散和胞吞、胞吐,A錯誤;B、Na+通過載體蛋白的協(xié)助逆濃度梯度運出細胞,通道蛋白只能進行順濃度梯度運輸,B正確;C、在主動運輸中協(xié)助物質進出細胞的蛋白質是載體蛋白,C正確;D、物質依靠通道蛋白進出細胞的方式是協(xié)助擴散,屬于被動運輸,D正確。故選A。3、C【解析】
由題文的描述可知:該題考查學生對甲狀腺激素分泌的分級調節(jié)的知識的識記和理解能力。【詳解】依題意可知:切除甲狀腺后,小白鼠血液中的甲狀腺激素的含量會下降,對垂體的抑制作用減弱,導致垂體分泌的促甲狀腺激素增多;當人為地補充甲狀腺激素后,小白鼠血液中的甲狀腺激素的含量會上升,對垂體的抑制作用增強,導致垂體分泌的促甲狀腺激素減少。據(jù)此,依題意和分析曲線的變化趨勢可知:a曲線代表由甲狀腺分泌的甲狀腺激素,b曲線代表由垂體分泌的促甲狀腺激素,A、B、D均錯誤,C正確?!军c睛】解題的關鍵是熟記并理解甲狀腺激素分泌的分級調節(jié)(實線箭頭所示)和反饋調節(jié)過程(虛線箭頭所示)。4、D【解析】
雌性蝗蟲的性染色體組成為XX,產(chǎn)生的卵細胞為X型,雄性蝗蟲的性染色體組成為XO型,產(chǎn)生的精子可能為X或O型,雄蝗蟲產(chǎn)生的精子和雌蝗蟲產(chǎn)生的卵細胞中染色體數(shù)相同或者比卵細胞少1條?!驹斀狻炕认x體細胞中的染色體數(shù)目為24或23條,現(xiàn)有一個進行正常分裂的蝗蟲細胞,顯微觀察發(fā)現(xiàn),含有12條染色體,呈現(xiàn)12種不同的形態(tài)結構,說明該細胞為減數(shù)分裂的細胞,可能是含有染色單體的減數(shù)第二次分裂前期、中期,也可能是不含染色單體的減數(shù)第二次分裂的末期,由于減數(shù)第一次分裂同源染色體分離時等位基因分離,所以該細胞不含等位基因,且減數(shù)分裂沒有細胞周期。若為減數(shù)第二次分裂前期、中期的圖像,細胞中染色體數(shù):核DNA數(shù)=1:2。由于卵細胞和精子形成的過程中,都能形成含X的染色體數(shù)為12條的配子,即減數(shù)第二次分裂都會出現(xiàn)含12條染色體,呈現(xiàn)12種不同的形態(tài)的細胞,綜上分析,D符合題意,ABC不符合題意。故選D。5、C【解析】
從圖中看出經(jīng)過減數(shù)第一次分裂后(MⅠ)后,形成了一個含有R和NR的姐妹染色體單體的染色體,在經(jīng)過減數(shù)第二次分裂時(MⅡ)是不均等分裂形成2個子細胞,所以該過程發(fā)生在雌性動物體內(nèi)?!驹斀狻緼、從圖中看出MⅡ細胞是不均等分裂的,所以該動物是雌性,則該細胞來自雌性動物的卵巢,A正確;B、圖中一條染色體上含有重組的非重組的姐妹染色單體,所以RNR排列在一起的原因是基因重組(同源染色體非姐妹染色單體發(fā)生交叉互換),B正確;C、有“偏向”的染色體分離造成了重組的染色體形成了卵細胞,參與受精作用,增加了遺傳多樣性,C錯誤;D、染色體著絲點分開后,依賴于紡錘絲將染色體移向兩極,而紡錘絲的組成成分是微管蛋白,所以染色體分離的極性依賴于微管蛋白的排列,D正確。故選C?!军c睛】本題需要從圖中看出這是不均等的分裂,同時染色體發(fā)生了重組,結合減數(shù)分裂和基因重組的知識進行解答。6、C【解析】
表格分析:比較榕果內(nèi)產(chǎn)卵小蜂只有傳粉榕小蜂時和榕果內(nèi)產(chǎn)卵小蜂有楊氏榕樹金小蜂、傳粉榕小蜂時,可以看出,有兩種小蜂的榕果內(nèi)種子數(shù)量較多,傳粉小蜂后代數(shù)量減少,而楊氏榕樹金小蜂后代數(shù)量增多,說明楊氏榕樹金小蜂和傳粉榕小蜂共同存在有利于榕果內(nèi)種子數(shù)量的增加,同時這兩種小蜂存在競爭關系,并且是楊氏榕樹金小蜂在競爭中占優(yōu)勢?!驹斀狻緼、由題干信息“楊氏榕樹金小蜂可以利用傳粉格小蜂咬出的通道進入榕果并完成產(chǎn)卵”,說明楊氏榕樹金小蜂與傳粉榕小蜂體型可能相似,A正確;B、由表格分析可知,楊氏榕樹金小蜂和傳粉榕小蜂共同存在有利于榕果內(nèi)種子數(shù)量的增加,說明楊氏榕樹金小蜂進入榕果內(nèi)產(chǎn)卵有助于榕樹傳粉,B正確;C、由上分析可知,榕果內(nèi)楊氏榕樹金小蜂比傳粉榕小蜂具有更強的資源競爭能力,C錯誤;D、榕樹依靠傳粉榕小蜂為之傳粉,傳粉榕小蜂在榕樹榕果中產(chǎn)卵,為其幼體唯一的棲息場所和食物來源,說明是互利共生關系,D正確。故選C。二、綜合題:本大題共4小題7、光照強度、CO2濃度、溫度CO2紅光和藍紫氧氣和[H]提高不限制數(shù)量較多(活性較強)(至少有3個平行)重復實驗【解析】
由表中數(shù)據(jù)可知,隨著氮素水平升高,葉綠素的含量先增加,后穩(wěn)定在103μg?cm-2,凈光合速率不斷提高,胞間CO2濃度不斷降低;氣孔導度在低氮時較小,在中氮、偏高和高氮條件下氣孔導度接近相同?!驹斀狻浚?)凈光合速率可以用CO2的吸收量、O2的釋放量或有機物的積累量來表示。該實驗的凈光合速率是用測得的單位時間、單位葉面積CO2的吸收量表示,自變量是氮素水平,需控制其他無關變量,光照強度、CO2濃度、溫度等實驗條件必須相同。(2)葉綠素主要吸收紅光和藍紫光,類胡蘿卜素主要吸收藍紫光。在光反應階段,光合色素吸收的光能一部分用于水的光解,將水分解為氧氣和[H],還有一部分用于合成ATP。(3)據(jù)表分析可知,隨著氮素水平的增高,葉片凈光合速率逐漸提高。在中氮、偏高和高氮三種情況下,氣孔導度大體相同,而凈光合速率有所提高,說明氣孔導度不限制凈光合速率的變化。(4)影響光合速率的因素有外因(光照強度、CO2濃度、溫度等)和內(nèi)因(葉綠素的含量、酶等)兩個方面。高氮組比偏高組葉片凈光合作用速率高,而葉綠素含量相同,實驗設置外因相同,其影響因素不是外因,而是內(nèi)因,主要原因可能是參與光合作用的酶數(shù)量較多(活性較強)。(5))為使實驗數(shù)據(jù)更可靠,在控制好無關變量的基礎上,要遵循實驗設計的平行重復原則,故應針對每個氮素水平條件下設置多個重復實驗。【點睛】答題關鍵在于運用光合作用過程、影響光合作用的因素及光合速率的表示方法等知識,分析表格數(shù)據(jù)得出結論。8、自由水磷脂(或脂質)雙分子層水通道小于大于酸性的重鉻酸鉀在輕度干旱脅迫條件下,葉片氣孔關閉導致CO2供應不足,使暗反應受阻,凈光合作用速率下降【解析】
1、水分是種子萌發(fā)的條件之一,干種子萌發(fā)時吸收水分,細胞內(nèi)自由水含量增加,細胞代謝旺盛。形成幼苗之前,植物不能進行光合作用,增加的重量是水分,有機物總量下降。2、無氧呼吸產(chǎn)生的酒精可以用酸性的重鉻酸鉀檢測,溶液由橙色變?yōu)榛揖G色。3、影響光合作用的主要環(huán)境因素:(1)溫度對光合作用的影響:在最適溫度下酶的活性最強,光合作用強度最大,當溫度低于最適溫度,光合作用強度隨溫度的增加而加強,當溫度高于最適溫度,光合作用強度隨溫度的增加而減弱。(2)二氧化碳濃度對光合作用的影響:在一定范圍內(nèi),光合作用強度隨二氧化碳濃度的增加而增強。當二氧化碳濃度增加到一定的值,光合作用強度不再增強。(3)光照強度對光合作用的影響:在一定范圍內(nèi),光合作用強度隨光照強度的增加而增強。當光照強度增加到一定的值,光合作用強度不再增強?!驹斀狻浚?)階段Ⅰ和階段Ⅲ種子的鮮重增加明顯,增加的物質主要是種子吸收的水分。階段Ⅲ中,細胞內(nèi)水的存在形式是自由水;由于該階段自由水與結合水的比值高,因此細胞代謝旺盛。(2)細胞膜的主要成分是蛋白質和脂質,從細胞膜組成和結構的角度來推測,水分可經(jīng)過細胞膜中的磷脂雙分子層、水通道從細胞外進入細胞內(nèi)。(3)據(jù)圖示可知,在階段II,種子含水量沒有多大變化,故種子吸水速率小于階段I;而隨著自由水含量的增加,代謝強度大大增加,故呼吸速率大于階段I。(4)無氧呼吸中如果產(chǎn)生酒精,可以用酸性的重鉻酸鉀試劑檢測,顏色由橙色變成灰綠色。(5)研究顯示,干旱脅迫下植物葉片凈光合作用速率下降,輕度干旱脅迫組的氣孔導度和胞間CO2濃度均小于供水充足組,這種相關性說明在輕度干旱條件下該植物凈光合作用速率降低的原因是氣孔關閉,導致氣孔導度下降,引起胞間CO2供應不足,暗反應中CO2還原受阻,凈光合作用速率下降,澆水可解除干旱脅迫?!军c睛】本題旨在考查學生理解水的存在形式和功能、光合作用的過程以及影響光合作用的環(huán)境因素等方面的知識,要求考生能夠識記種子萌發(fā)過程中物質的變化,并學會分析處理實驗數(shù)據(jù)獲取結論。.9、施肥(不同)種類(也可以是否含鉀肥)及鉀肥濃度添加N肥和P肥時(NP組)的CO2的補償點(光合速率等于呼吸速率時的CO2濃度)NP(CK)酶、ATP、[H]、葉綠素等中耕松土促進根細胞有氧呼吸,有利于主動運輸吸收無機鹽【解析】
影響光合作用的環(huán)境因素:光照、二氧化碳濃度、溫度、水、礦質元素等;由題圖可知,該實驗的自變量是礦質元素的種類和二氧化碳度,因變量是凈光合作用強度因此實驗的目的是探究礦質元素和二氧化碳濃度對光合作用強度的影響;分析實驗的過程應該遵循對照原則和單一變量原則?!驹斀狻浚?)由分析可知,自變量是施肥種類及鉀肥濃度和二氧化碳濃度,光照強度、溫度等屬于無關變量,無關變量應該保持一致且適宜。(2)NP組中,a點凈光合速率為0,即光合作用固定的二氧化碳與呼吸作用產(chǎn)生的二氧化碳相等,a點對應的二氧化碳濃度是二氧化碳的補償點。(3)看圖可知,CO2濃度為2.0×10-2時,NP組藍莓的凈光合速率最低。光合作用過程中,需要N、P等元素參與的物質有酶、ATP、[H]、葉綠素等。(4)植物根細胞吸收無機鹽的方式是主動運輸,需要消耗能量,中耕松土促進根細胞有氧呼吸,有利于主動運輸吸收無機鹽。【點睛】本題考查學生理解礦質元素、二氧化碳濃度對凈光合作用的影響,學會按照實驗的對照原則和單一變量的原則分析實驗結果、獲取結論。解答該題要注意對長句答案的描述準確性、簡潔性、完整性。10、黏性末端防止經(jīng)同一種限制酶切割后,具有相同黏性末端的目的基因和目的基因相連接、Ti質粒和Ti質粒相連接DNA連接酶Ti質粒有T-DNA片段,將目的基因整合到受體細胞染色體DNA獲得含基因表達載體的農(nóng)桿菌篩選目的基因表達的愈傷組織消毒植物激素否大腸桿菌用Ca2+
溶液處理,只成為了感受態(tài)細胞,無目的基因進入受體細胞、維持穩(wěn)定和進行表達的過程【解析】
1、基因工程技術的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成.(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等.(3)將目的基因導入受體細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣.將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法.(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術.個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等.2、目的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程,稱為轉化?!驹斀狻浚?)在構建基因表達載體時,為了避免因用同一種限制酶切割后,具有相同黏性末端的目的基因和目的基因相連接、Ti質粒和Ti質粒相連接的情況出現(xiàn),所以用能產(chǎn)生不同黏性末端的限制性核酸內(nèi)切酶分別處理草甘膦抗性基因和Ti質粒,再用DNA連接酶處理以便獲得目的基因和質粒正確連接的基因表達載體,Ti質粒有T-DNA片段,能將目的基因整合到受體細胞染色體DNA,這樣目的基因就可以隨著受體細胞染色體DNA的復制而復制。(2)為了獲得含基因表達載體的農(nóng)桿菌,根據(jù)目的基因表達載體上含有的標記基因,用含潮霉素的培養(yǎng)基進行篩選1,由于含有目的基因表達載體的農(nóng)桿菌具有對潮霉素的抗性,因此能在該培養(yǎng)基上生長,篩選2的目的是要篩選出目的基因表達的愈傷組織,然后用該愈傷組織經(jīng)過組織培養(yǎng)獲得目的植株。(3)為獲得目的植株,首先取某品種水稻的幼胚進行消毒處理
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