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B16中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)進境百合種球疫情監(jiān)測規(guī)程Gv國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會ⅠGB/T38362—2019本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC271)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心、云南省植保植檢站。1GB/T38362—2019進境百合種球疫情監(jiān)測規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進境百合種球的監(jiān)測對象、監(jiān)測時期、監(jiān)測方法等。本標(biāo)準(zhǔn)適用于進境百合種球的疫情監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。NY/T1217—2006境外引進植物隔離檢疫規(guī)程危險性有害生物可隨百合種球進行遠距離傳播。百合上主要危險性有害生物的形態(tài)特征、生物學(xué)特性和危害癥狀(參見附錄A)是其監(jiān)測的重要依據(jù)。4監(jiān)測對象百合種球“國(境)外引進農(nóng)業(yè)種苗檢疫審批單”中提出的檢疫性有害生物,以及潛在的具重大威脅的其他有害生物。5監(jiān)測工具及試劑5.9變色硅膠,用于保障采集樣品干燥。6監(jiān)測時期種球儲藏期、苗期、花期各監(jiān)測1次。2GB/T38362—20197監(jiān)測方法7.1種球儲藏期監(jiān)測每批次每個品種抽取10粒~100粒,封樣立即送檢。7.2生長期監(jiān)測按NY/T1217—2006第4章規(guī)定的隔離檢疫程序進行疫情監(jiān)測。7.2.2集中種植疫情監(jiān)測在苗期和花期進行踏查。發(fā)現(xiàn)植株矮化、萎蔫、黃化等生長不良,或者出現(xiàn)花葉、斑駁、皺縮、斑點、腐爛等典型癥狀,整株取樣。8室內(nèi)鑒定填寫“取樣記錄表”(參見附錄B),將樣品送至實驗室檢測鑒定,出具鑒定報告。9疫情監(jiān)測報告記錄監(jiān)測結(jié)果并填寫“疫情監(jiān)測記錄表”(見附錄C)。植物檢疫機構(gòu)依據(jù)監(jiān)測結(jié)果出具“境外引進種苗植物疫情監(jiān)測報告”。10樣本保存各項調(diào)查監(jiān)測的原始記錄,以及其他材料按照檔案管理有關(guān)規(guī)定妥善保存于植物檢疫機構(gòu)。3GB/T38362—2019附錄A(資料性附錄)主要危險性有害生物的形態(tài)特征、生物學(xué)特性和危害癥狀南芥菜花葉病毒Ass南芥菜花葉病毒屬于豇豆花葉病毒科(Comoviridae)線蟲傳多面體病毒屬(成員。南芥菜花葉病毒在百合上不顯示癥狀,但是其在受感染的葉片、芽和分枝上病毒含量分布不平衡。番茄環(huán)斑病毒番茄環(huán)斑病毒,寄主范圍廣,可侵染35科105屬157種以上單子葉和雙子葉植物。常見的自然寄主有葡萄、桃、李、櫻桃、蘋果、榆樹等及果園雜草。病菌在種子和病殘體上越冬,成為下茬或翌年病害的主要初侵染源。種子上病菌一般可存活到翌年的生長季節(jié);在土壤和田間病殘體中的病菌可存活2a~3a;在其他廢棄物中能存活10個月左右,也可隨多年生茄科雜草寄主存活。ToRSV粒子為等軸對稱球狀20面體,直徑20nm。經(jīng)蔗糖剃度離心純化,分成三個組分,即上、下層個組分沉降系數(shù)分別為119S(M)、127S(B)。上層為無RNA的蛋白外殼,中、下層比率為1∶1,經(jīng)密度剃度離心和氯化鈍沉降厚,中、下組分形成兩條近距離條帶。番茄環(huán)斑病毒是一種直徑約28nm的等軸顆粒和含有RNA二重基因組的病毒,其沉降物含有三種成分。番茄環(huán)斑病毒容易被樹液接種傳播。并且其宿主范圍較廣,包括木本和草本植物。它通過美洲劍線蟲和其他密切相關(guān)的劍線蟲傳播。自然傳播的學(xué)術(shù)報告很大程度上局限于北美,但感染病毒已經(jīng)傳播到許多其他國家的植物。病毒在自然界主要發(fā)生在多年生作物。在這些線蟲害也發(fā)生的北美地區(qū)會導(dǎo)致嚴(yán)重的疾病問題。最嚴(yán)重的疾病是桃樹或其他李屬的黃芽花葉。大多數(shù)被感染的植物會表現(xiàn)出毀滅性的癥狀和反應(yīng)。慢性感染植物通常不會有明顯的癥狀,但在生產(chǎn)力上會表現(xiàn)出一定量的衰退。一定跡象表明病毒在北美流行。煙草環(huán)斑病毒煙草環(huán)斑病毒能自然侵染豆類、瓜類及花卉等寄主的危險性植物病毒,可以通過種子及鱗球、塊莖、苗木等無性繁殖材料遠距離傳播。煙草環(huán)斑病毒可在2年生或多年生雜草寄主以及煙草和大豆種子上越冬,其帶毒的越冬寄主和帶毒種子都可成為初侵染源。病害在煙田可通過汁液摩擦、煙蚜、線蟲及煙薊馬等傳播,造成再侵染和田間傳播。煙草環(huán)斑病毒(TRsV)感染大豆最明顯癥狀是病株頂芽卷曲,其他芽變褐色并且脆弱;在莖和復(fù)葉葉柄上產(chǎn)生褐色條紋;豆莢發(fā)育不良,甚至不生長而死亡;侵染前結(jié)的莢上產(chǎn)生暗色斑。大豆花期或花前感染TRSV,病株重量也減輕,種子成熟延緩,產(chǎn)量顯著下降。病株種子還有較高比例的紫著色現(xiàn)象。大豆田間病株常晚熟,健株衰老黃化時病株仍為綠色,在健株成熟期可以通過1000m高空航空攝影檢測疫情發(fā)生區(qū)。草莓潛隱環(huán)斑病毒草莓潛環(huán)斑病毒是歐洲病毒。寄主范圍比較廣,自然條件下,在許多野生和栽培植物中都存在,可4GB/T38362—2019以隱癥侵染大范圍種植的草本測試植物。在機械接種的167種雙子葉植物中,受侵染的高達126種,這126種分屬27個家族(Schmelzer,1969)。絕大多數(shù)是系統(tǒng)性侵染但不表現(xiàn)癥狀。分離物的毒性各不相同覆盆子歐洲甜櫻桃桃西洋接骨木黃瓜等死菜豆煙草香杏昆諾阿藜和穆拉爾藜引起壞死斑。百合無癥病毒(carla℃irus)。在病株各部位的細胞質(zhì)中均有分布,但大量分布在分生組織細胞中。在葉片細胞中的含量明顯比根和莖干細胞高。在正常條件下,多數(shù)百合品種在受到LSV侵染時,并不會引起產(chǎn)生明顯癥狀,僅表現(xiàn)鱗莖縮小、切花壽命減短。但有些品種在一定溫度下能顯癥狀,如東方百合(Liliumlongiflorum病株在15℃以下2~3個月后,葉片呈現(xiàn)扭曲和白色條紋(Allen,1972)。當(dāng)受到LSV和CMV的復(fù)合侵染時,百合會出現(xiàn)壞死斑。有些百合品種,如mid-centuryhybrids,在感染LSV和郁金香碎色病毒(Tulipbreaking-℃irus,TBV)時,鱗莖上產(chǎn)生褐斑;而有的百合品種,如L.speciosum,感染的葉片上會產(chǎn)生條紋。目前,已知百合條斑病是由TBV單獨或同LSV復(fù)合感染所致。在自然界中可通過桃蚜和百合西圓蚜進行非持久性傳播,也可通過機械傳播或葉片嫁接傳播。目前,LSV病毒在汁液中的穩(wěn)定性尚未見到相關(guān)報道,其在大田內(nèi)通過機械傳播的能力也有待于進一步確定。病毒主要在6、7月份進行傳播,5月份較低,到8、9月份傳播最慢(AsjesCJ,2000)。由于LSV的傳播非常迅速,因此,LSV廣泛存在于商品種球中。通過減少病毒傳播介體,可以有效地防治其蔓延。百合病毒為馬鈴薯X病毒屬(pote父℃irus)成員,單獨侵染百合無病,與其他病毒復(fù)合侵染時可造成黃條紋、葉畸形、矮化,有的早熟而死。LVX目前在國內(nèi)百合上還沒有發(fā)生的報道。此病毒是彎曲的細絲狀,長640nm,直徑為18nm,只侵染百合科植物??赡芡ㄟ^桃蚜以持久方式傳播。也可以通過花葉的相互接觸和汁液接種傳播,廣泛分布在商業(yè)交易的百合幼苗中。在某些環(huán)境條件下在百合中引起卷曲斑紋(和基部斑紋)。當(dāng)和黃瓜花葉病毒一起復(fù)合侵染時在百合中引起壞死斑點。當(dāng)和郁金香碎色病毒復(fù)合侵染時,在鱗莖狀百合屬植物中引起棕色環(huán)斑,在藥百合植物葉片中引起碎斑。李屬壞死環(huán)斑病毒PNRSV是一種寄主范圍廣、侵染能力強的病毒。據(jù)報道,該病可侵染47屬189種植物,主要包括歐洲大櫻桃酸櫻桃桃蘋果杏洋李A(yù).2線蟲類菊花滑刃線蟲菊花滑刃線蟲(Aphelenchoidesritzemabosi)通常又稱為菊花葉枯線蟲或腋芽滑刃線蟲。寄主范5GB/T38362—2019圍非常廣,寄生觀賞植物、蔬菜、小果類植物和雜草等200多種植物,菊花(是其模式寄主,其他重要的寄主有大麗花、福祿考、金絲桃、繡線菊、秋海棠、大巖桐、薄包花、秋海棠、黑樹營、草毒、煙草、西瓜、萵苣、番茄、芹菜等。該線蟲是菊花的重要病害,病害發(fā)生導(dǎo)致經(jīng)濟價值降低,嚴(yán)重的導(dǎo)致死亡;為害草莓造成減產(chǎn),嚴(yán)重時損失可達65%,在法國曾嚴(yán)重為害煙草,造成煙葉產(chǎn)量及品質(zhì)嚴(yán)重下降。此病害在美國、日本是菊花的災(zāi)難性病害。菊花葉枯線蟲主要為害植物地上部的花、葉、芽。線蟲在葉片脈間取食,致使葉片在脈間形成黃褐色角斑或扇形斑,病斑最后變?yōu)樯詈稚⒖菟?,病葉自下而上枯死,枯死葉片下垂不脫落?;ê脱渴芎t畸形、變小或不開花、枯死,表面有褐色傷痕。若幼苗末梢生長點被害,則植株生長發(fā)育受阻,嚴(yán)重的很快死亡。腐爛莖線蟲腐爛莖線蟲屬墊刃目(Tylenchida),粒線蟲科(Anguinidae),莖線蟲屬(寄主作物種類多,除危害甘薯和馬鈴薯外,還危害洋蔥、大蒜、胡蘿卜、歐芹、芹菜、番茄和黃瓜等蔬菜以及甜菜和花生等經(jīng)濟作物。在我國目前主要危害甘薯。腐爛莖線蟲是遷移植物內(nèi)寄生線蟲,嚴(yán)重危害寄主植物地下部分組織或器官如塊莖、球莖、匍匐莖、根狀莖和根等,以各種蟲態(tài)在植物病組織內(nèi)越冬,或以成蟲和卵在土壤內(nèi)越冬。在田間缺少栽培作物寄主時,該線蟲可以在田間的雜草和土壤中的真菌寄主上存活。形態(tài)特征:雌、雄蟲呈線形(或蠕蟲形熱殺死后蟲體略向腹面彎,側(cè)線6條;頭部低平、略縊縮;背食道腺開口位于口針基部球后附近;中食道球紡錘形、有瓣,后食道腺短覆蓋腸的背面;尾圓錐形,通常腹彎端圓雌蟲體長體長與體寬的比值約為口針長單卵巢、前伸,陰門位于體后部,后陰子宮囊長度是肛門距陰門長度的40%~98%;尾長是肛門處體寬的倍雄蟲體長體長與體寬的比值約為口針長交合刺長24μm~27μm,交合傘向尾部伸展長度是尾長的50%~90%。鱗球莖莖線蟲鱗球莖莖線蟲屬于線蟲門(墊刃目(粒線蟲科(莖線蟲屬鱗球莖莖線蟲在全世界廣泛分布。近年來,我國多次在船舶、旅客攜帶的植物材料、食品以及進口種球、幼苗中截獲鱗球莖莖線蟲,該線蟲極易隨寄主侵入我國,有極大的危害性,寄主植物有500多種。鱗球莖莖線蟲在高溫殺死后,呈直線型,它的形態(tài)特征為角質(zhì)層有明顯環(huán)紋,在1000倍顯微鏡下觀察,側(cè)部會觀察到4條側(cè)線。該線蟲主要是在莖薄壁細胞內(nèi)取食,對每種寄主的為害特點各不相同,危害癥狀和特點不一。由于寄主的不同,有些寄主被鱗球莖莖線蟲為害后會產(chǎn)生膨大現(xiàn)象,有些形成畸形,有些形成矮化扭曲,有些在受害莖基部引起壞死等。鱗球莖莖線蟲嚴(yán)重危害甜菜,通過進入寄主胚軸進行取食,并在寄主內(nèi)大量繁殖,線蟲和其分泌物會侵蝕植株組織,使植物產(chǎn)生化學(xué)和組織學(xué)上的變化,短時間而高效的繁殖速率使得蟲量迅速增大,繼續(xù)侵染,繼而莖梗和葉柄彎曲,植株葉片腫大,逐漸形成腐爛病,導(dǎo)致貯藏根系腐壞。鱗球莖莖線蟲生物階段有三段,即卵、幼蟲和成蟲,每個生物階段都能侵染植物。鱗球莖莖線蟲的生活史為第19天至第23天,雌蟲可成活45d~73d。鱗球莖莖線蟲的四齡幼蟲經(jīng)完成蛻皮發(fā)育,形成成蟲后,即可在約4d之后進行雌雄蟲之間的交配,產(chǎn)卵期可達25d~30d。鱗球莖莖線蟲的繁殖能力很強,雌蟲每條產(chǎn)卵數(shù)量可達200~500粒,產(chǎn)卵起始溫度為1℃~5℃,最高產(chǎn)卵溫度為36℃,13℃~18℃是最適合鱗球莖莖線蟲繁殖的溫度。短體線蟲屬非中國種)短體科線蟲隸屬于線蟲門(墊刃目墊刃總科(短體線蟲屬具有重要經(jīng)濟性,可對多種作物造成危害,能引起根系表皮破損和內(nèi)部組織的腐爛,且能誘發(fā)真菌或6GB/T38362—2019細菌的二次侵染。據(jù)報道,目前短體線蟲屬中有效種為75種??Х榷腆w線蟲(p.coffeae)、穿刺短體線蟲傷殘短體線蟲玉米短體線蟲艾短體線蟲和山藥短體線蟲(p.dioscoreae)等6個種在我國有較多報道,可作為中國種,除上述6種線蟲種類都被列入檢疫對象。2012—2013年,我國寧波、北京、深圳和浙江口岸曾對進境的樹木、種球、截止及航班旅客攜帶物進行檢疫時,分離到9個短體屬線蟲(pratylenchus)群體,鑒定為8種短體線蟲。其中,寧波口岸截獲的日本短體線蟲(p.japonicus)和傷殘短體線蟲(p.Ψulnus)分離自進境的日本雞爪械樹木根際介質(zhì),盧斯利維亞短體線蟲(p.boliΨianus)分離自新西航班旅客攜帶的帶土植物;深圳口岸從香港航班旅客攜帶芋頭中分離到咖啡短體線蟲(p.coffeae浙江口岸和寧波口岸分別從日本郵寄的雞爪械和進境的以色列孤挺花種球中截獲朱頂紅短休線蟲(p.hippeastri)。其中玻利維亞短體線蟲、朱頂紅短體線蟲、日本短體線蟲和假草地短體線蟲這4個種屬于國內(nèi)口岸首次截獲。短體線蟲屬形態(tài)特征:蟲體粗短,側(cè)區(qū)4條~6條側(cè)線,側(cè)尾腺孔在尾中部;唇區(qū)低,前端平、偶爾圓,與體壁連續(xù)到略縊縮,頭架骨化顯著;口針粗短,基部球發(fā)達,呈圓形,前端平或凹陷;中食道球卵圓形到圓形;食道腺腹面覆蓋腸;陰口位置靠后;雌蟲單生殖管、前伸,有后陰子宮囊;授精囊大到圓;雌蟲尾近圓柱形到圓錐形,通常是肛口處體寬的2倍~3倍,尾末端光滑或有環(huán)紋;雄蟲交合傘延伸至尾末端,引帶簡單,不伸出泄殖腹。A.2.5毛刺線蟲屬(傳毒種類)毛刺線蟲屬(Trichodorusspp.)傳毒種類隸屬于毛刺線蟲科(Trichodoridae)。毛刺線蟲屬至今已發(fā)現(xiàn)有56種,為多年生草本或木本植物的根部遷移性外寄生線蟲,不但直接取食植物根系造成植物根系粗短、腫大、側(cè)根增多,還引起植物營養(yǎng)不良和生長失調(diào)等。更嚴(yán)重的是已知4種毛刺線蟲種類能傳具毒毛刺線蟲圓筒毛刺線蟲和相似毛刺線蟲傳播一種病毒,原始毛刺線蟲(T.primitiΨus)和具毒毛刺線蟲(T.Ψiruliferus)傳播多種病毒。A.3真菌類菌核病菌菌核病由核盤菌屬鏈核盤菌屬絲核屬和小菌核屬等真菌引起的植物病害。發(fā)病部位由菌絲體集結(jié)成結(jié)構(gòu)松緊不一,表面光滑或粗糙,形狀、大小、顏色不同的菌核。由菌絲并雜有寄主組織而形成的稱假菌核。后者因往往還保持植物器官的形狀(如僵果等)而較易診斷。主要為害莖蔓、葉片和果實。莖基部染病,初生水漬狀斑,后擴展成淡褐色,造成莖基軟腐或縱裂,病部表面生出白色棉絮狀菌絲體。葉片染病,葉面上現(xiàn)灰色至灰褐色濕腐狀大斑,病斑邊緣與健部分界不明顯,濕度大時斑面上現(xiàn)絮狀白霉,終致葉片腐爛。果實染病,初現(xiàn)水浸狀斑,擴大后呈濕腐狀,其表現(xiàn)密生白色棉絮狀菌絲體,發(fā)病后期病部表面現(xiàn)數(shù)量不等的黑色鼠糞狀菌核。菌核遺留在土中或混雜在種子中越冬或越夏?;煸诜N子中的菌核,隨播種帶病種子進入田間傳播蔓延,該病屬分生孢子氣傳病害類型,其特點是以氣傳的分生孢子從寄生的花和衰老葉片侵入,以分生孢子和健株接觸進行再侵染。侵入后,長出白色菌絲,開始為害柱頭或幼瓜。在田間帶菌雄花落在健葉或莖上經(jīng)菌絲接觸,易引起發(fā)病,并以這種方式進行重復(fù)侵染,直到條件惡化,又形成菌核落入土中或隨種株混入種子間越冬或越夏。南方2~4月及11~12月適其發(fā)病。本病對水分要求較高;相對濕度高于85%,溫度在15℃~20℃利于菌核萌發(fā)和菌絲生長、侵入及子囊盤產(chǎn)生。因此,低溫、濕度大或多雨的早春或晚秋有利于該病發(fā)生7G
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