蛋白質(zhì)溶解度

關(guān)于蛋白質(zhì)溶解度在一定的氫氧化鉀溶液中溶解的蛋白質(zhì)質(zhì)量占試樣中總蛋白質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)。通常采用氮溶解指數(shù)（NSI）和蛋白質(zhì)分散指數(shù)（(PDI)來表示。

第2頁,共12頁，星期六，2024年，5月

原理用一定濃度的氫氧化鉀溶液提取試樣中的可溶性蛋白質(zhì)，在催化劑作用下用濃硫酸將提取液中可溶性蛋白質(zhì)的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用鹽酸滴定測(cè)出試樣中可溶性蛋白質(zhì)含量；同時(shí)，測(cè)定原始試樣中粗蛋白質(zhì)含量，計(jì)算出試樣的蛋白溶解度。第3頁,共12頁，星期六，2024年，5月試劑a)

氫氧化鉀（分析純），無水硫酸鉀、五水硫酸銅、氫氧化鈉、硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、硫酸銨；

b)

濃硫酸、鹽酸（分析純）、95%乙醇、蒸餾水。

第4頁,共12頁，星期六，2024年，5月

儀器和設(shè)備

a)

感量為0.0001g分析天平；

b)

磁力攪拌器；

c)

離心機(jī)；

d)

樣品粉碎機(jī)；

e)

60目分析篩；

f)

電爐；

g)

100mL或250mL凱氏燒瓶；

h)

凱氏蒸餾裝置；

i)

250mL錐形瓶；

j)

1000mL容量瓶；

k)

微量滴定管。第5頁,共12頁，星期六，2024年，5月分析步驟1

0.042M氫氧化鉀溶液

稱取2.360g氫氧化鉀，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

2

混合催化劑

稱取6g硫酸鉀和0.4g硫酸銅，磨碎混勻。

3

氫氧化鈉溶液

稱取400g氫氧化鈉，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

4

硼酸溶液

稱取20g硼酸，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

5

0.1M鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液

量取8.3mL濃鹽酸，注入1000mL水中混勻，按GB601-88要求進(jìn)行標(biāo)定即可。

6

混合指示劑

稱取1g甲基紅和5g溴甲酚綠，加入乙醇溶解后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度。

第6頁,共12頁，星期六，2024年，5月

試樣處理稱取試樣1.5g（準(zhǔn)確至0.0002g）置于250mL燒杯中，準(zhǔn)確移入0.042M氫氧化鉀溶液75mL，磁力攪拌20min，然后將試樣轉(zhuǎn)移至離心管中，以2700r/min的速度離心10min。第7頁,共12頁，星期六，2024年，5月

測(cè)定吸取上清液15mL,放入消化管中,按照GB/T6432-1994凱氏定氮法測(cè)定試樣中可溶性蛋白質(zhì)的含量。同時(shí)，按照GB/T6432-1994凱氏定氮法測(cè)定試樣中粗蛋白質(zhì)的含量。第8頁,共12頁，星期六，2024年，5月分析結(jié)果計(jì)算15/75=x/1.5g=0.3gx

ps%=0.3g原樣中粗蛋白含量/原樣中粗蛋白含量×100%

第9頁,共12頁，星期六，2024年，5月注意事項(xiàng)

不同樣品的粒度應(yīng)相同。

不同樣品在氫氧化鉀溶液中的攪拌時(shí)間應(yīng)一致。第10頁,共12頁，星期六，2024年，5月Over