藥物對離體豚鼠回腸收縮的作用

關(guān)于藥物對離體豚鼠回腸收縮的作用目的學(xué)習(xí)離體小腸平滑肌的制備和灌流。觀察小腸平滑肌的自律性收縮，理解其原理。觀察藥物acetylcholine(Ach、乙酰膽堿），histamine(His、組胺），BaCl2分別對離體豚鼠回腸平滑肌的作用，并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、撲爾敏）為工具藥，初步分析以上藥物的作用原理。第2頁,共17頁，星期六，2024年，5月原理（1）胃腸平滑肌收縮的自動節(jié)律性（慢波理論：Cajal細(xì)胞的生電性鈉泵活動的結(jié)果）。第3頁,共17頁，星期六，2024年，5月原理（2）乙酰膽堿：M膽堿能受體激動藥。Ach與M受體結(jié)合，使平滑肌Ca2+通道開放，Ca2+內(nèi)流↑，肌漿[Ca2+]↑，平滑肌收縮幅度增高。阿托品：M膽堿能受體阻斷藥。阿托品與平滑肌細(xì)胞膜M受體結(jié)合，阻斷乙酰膽堿與M受體結(jié)合，阻斷乙酰膽堿與M受體的激動作用。第4頁,共17頁，星期六，2024年，5月原理（2）組胺：激動平滑肌細(xì)胞膜H1受體，通過激活G蛋白-磷脂酶C系統(tǒng)，使細(xì)胞內(nèi)Ca2+增高，導(dǎo)致平滑肌收縮。撲爾敏：H1受體阻斷藥。撲爾敏與平滑肌細(xì)胞膜H1受體結(jié)合，阻斷組胺與H1受體結(jié)合，從而阻斷組胺對H1受體的激動作用。第5頁,共17頁，星期六，2024年，5月原理（3）氯化鋇：肌肉興奮劑。Ba2+經(jīng)鈣通道進(jìn)入胞漿，使肌漿[Ba2+]↑，平滑肌收縮幅度增高，但泵出障礙；另一方面BaCl2能興奮膽堿能受體，使平滑肌收縮幅度增高。第6頁,共17頁，星期六，2024年，5月材料

豚鼠1只：WT為300g左右麥?zhǔn)显〔?，生物信號采集系統(tǒng)，張力換能器。臺氏液，10-2g/L乙酰膽堿、1g/L硫酸阿托品、10-2g/L組胺，10-3g/L撲爾敏、10g/LBaCl2

溶液。第7頁,共17頁，星期六，2024年，5月方法1.實(shí)驗(yàn)裝置準(zhǔn)備：打開恒溫水浴37℃---加臺氏液于麥?zhǔn)显〔壑?--95%O2+5%CO2持續(xù)通氣（氣泡一個個逸出為宜）。2.標(biāo)本準(zhǔn)備：擊昏豚鼠---開腹---減取回腸---沖洗內(nèi)腔---截取腸段---

腸段兩端對角穿線---

固定于麥?zhǔn)显〔酆蛽Q能器上。3.實(shí)驗(yàn)記錄：打開配置（藥物對離體豚鼠回腸的作用）---零點(diǎn)設(shè)置---調(diào)節(jié)換能器張力2g---穩(wěn)定10-30分鐘（基線和收縮幅度穩(wěn)定）第8頁,共17頁，星期六，2024年，5月找到盲腸，在離回盲部1cm處剪斷，取出回腸約10cm左右一段，置于盛有冰冷臺氏液的培養(yǎng)皿中，沖洗干凈，將回腸剪成1-1.5cm的幾小段。標(biāo)本準(zhǔn)備（1）第9頁,共17頁，星期六，2024年，5月標(biāo)本準(zhǔn)備（2）取一段腸管置于盛有臺氏液的培養(yǎng)皿中，在其兩端對角處分別用縫針穿線，并打結(jié)。一端系于浴槽固定鉤上，另一端系在張力換能器的懸臂梁上。換能器腸管第10頁,共17頁，星期六，2024年，5月觀察項(xiàng)目記錄腸段基礎(chǔ)張力，收縮張力，收縮頻率。加入10-2g/LAch0.2ml，觀察并記錄曲線，作用明顯時換液。重復(fù)以上Ach劑量，待收縮到最高點(diǎn)時加入1g/L阿托品

0.2ml，觀察曲線，此時不換液，待曲線基本穩(wěn)定后，再加入相同量的Ach，觀察并記錄收縮曲線，換液。加入10-2g/L組胺

0.3ml，作用明顯時迅速換液。預(yù)先加入10-2g/L撲爾敏0.2ml，5min后（不換液）加入同量組胺，觀察并記錄收縮曲線，換液。加入10g/LBaCl2

溶液1ml，當(dāng)作用達(dá)到最高點(diǎn)，加入1g/L阿托品

0.2ml，觀察并記錄收縮曲線。第11頁,共17頁，星期六，2024年，5月實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ach

換液Ach

阿

Ach

換液His

換液撲

HisBacl2

阿

(每次換液后穩(wěn)定15min)穩(wěn)定20min第12頁,共17頁，星期六，2024年，5月注意事項(xiàng)注意保持腸管通暢，勿使其封閉。不要把藥物直接滴加到回腸上。每次加的臺氏液量保持相等。加的臺氏液量必須預(yù)先加熱到37℃。藥物作用明顯后，盡早沖洗。每次換液后穩(wěn)定10－20min。第13頁,共17頁，星期六，2024年，5月實(shí)驗(yàn)結(jié)果（1）曲線描記：標(biāo)上加藥時間點(diǎn)，藥物名，洗脫時間點(diǎn)。對曲線進(jìn)行測量：基礎(chǔ)張力，收縮張力。填入表格。第14頁,共17頁，星期六，2024年，5月實(shí)驗(yàn)結(jié)果（2）表3.藥物對離體豚鼠回腸平滑肌張力的影響組別標(biāo)本數(shù)基礎(chǔ)張力（g）收縮幅度（g）

乙酰膽堿阿托品+乙酰膽堿組胺撲爾敏+組胺BaCl2BaCl2+阿托品 第15頁,共17頁，星期六，2024年，5月實(shí)驗(yàn)報(bào)告針對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，進(jìn)行結(jié)果描述總結(jié)Ach、阿托品、His、撲爾敏、BaCl2分別對離體豚鼠回腸有什么作用。2.討論和結(jié)論分析Ach、阿托品、His、撲爾敏、BaCl2對離體豚鼠回腸平滑肌的作用機(jī)理。