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茶多酚的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)所需儀器,器皿,試劑:可見(jiàn)分光光度計(jì)可調(diào)移液槍移液槍頭25ml容量瓶(2個(gè))
100ml燒杯(3個(gè))250ml燒杯(3個(gè))
廢液缸
膠頭滴管酒石酸亞鐵緩沖溶液蒸餾水第一步:打開(kāi)儀器預(yù)熱20min;并旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)選擇旋鈕,將波長(zhǎng)調(diào)整為540nm。第二步:做空白試驗(yàn)A1:5ml蒸餾水+5ml酒石酸亞鐵+磷酸緩沖溶液定容至25ml.A2:5ml蒸餾水+磷酸緩沖溶液定容至25ml.注意:所需容量瓶用緩沖溶液潤(rùn)洗,樣液用移液槍定量準(zhǔn)確吸取,定量時(shí)用膠頭滴管標(biāo)至刻度線,定量后搖勻待用。吸取并定容(1)吸取5ml蒸餾水(2)吸取5ml酒石酸亞鐵(3)磷酸緩沖溶液定容(4)定容至25刻度線第三步:吸光值的檢測(cè)1.用A2樣液潤(rùn)洗10mm比色皿2-3次。2.樣液傾倒至2/3處,用柔軟不掉屑的紙巾或?qū)S貌潦貌疾羶舯壬蟊砻鏆埩粢后w。
注意:手拿磨砂面并按同一方向輕輕擦拭。3.打開(kāi)分光光度計(jì)將比色皿放置第一個(gè)格子內(nèi),蓋好蓋子,注意磨砂面向外。4.歸零。5.重復(fù)上述1-4步驟檢測(cè)A1樣液讀取的數(shù)據(jù)為空白差X(記錄)注意:此項(xiàng)空白試驗(yàn)在連續(xù)生產(chǎn)時(shí)每天做一次,在不生產(chǎn)時(shí)每次試驗(yàn)前都要做。6.容量瓶剩余樣品倒掉,用緩沖液清洗備用。第四步:樣品檢測(cè)B1:1ml樣品+4ml蒸餾水+5ml酒石酸亞鐵+磷酸緩沖溶液定容至25ml.B2:1ml樣品+4ml蒸餾水+磷酸緩沖溶液定容至25ml.吸取并定容(1)吸取1ml待測(cè)樣品(2)吸取4ml蒸餾水(3)5ml酒石酸亞鐵(4)磷酸緩沖溶液定容定容注意:所需容量瓶用緩沖溶液潤(rùn)洗,樣液用移液槍定量準(zhǔn)確吸取,定量時(shí)用膠頭滴管標(biāo)至刻度線,定量后搖勻待用。第五步:吸光值的檢測(cè)1.用B2樣液潤(rùn)洗10mm比色皿2-3次。2.樣液傾倒至2/3處,用柔軟不掉屑的紙巾或?qū)S貌潦貌疾羶舯壬蟊砻鏆埩粢后w。
注意:手拿磨砂面并按同一方向輕輕擦拭。3.打開(kāi)分光光度計(jì)將比色皿放置第一個(gè)格子內(nèi),蓋好蓋子,注意磨砂面向外。4.歸零。5.重復(fù)上述1-4步驟檢測(cè)B1樣液讀取的數(shù)據(jù)為樣品差Y(記錄)第六步:計(jì)算計(jì)算公式:
Z(mg/l)=(Y-X)*1.957*2000上式:Z-所測(cè)樣品中茶多酚含量。
Y-樣品差(試液顯色后的吸光度)。
X-空白差(試液底色的吸光度)。1.957-系數(shù)(用10mm比色皿,當(dāng)吸光度等于0.50時(shí),每毫升茶湯中含茶多酚相當(dāng)于1.957mg)。2000-系數(shù)。
第七步:器皿清洗,儀器歸
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