TBPMA 20-2024 蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ICS67.050CCSX04BPMA北 京 預(yù) 防 醫(yī) 學(xué) 會(huì) 團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/BPMA20—2024蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法Determinationofchloramphenicolandmetronidazoleresiduesinhoneybyliquidchromatography-tandemmassspectrometrymethod2024-04-23發(fā)布 2024-04-23實(shí)施北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì) 發(fā)布T/BPMA20—2024T/BPMA20—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前 言 II范圍 1規(guī)性用件 1術(shù)和義 1原理 1試和料 1儀設(shè)備 2試的備 2測(cè)步驟 2結(jié)計(jì)算 3法測(cè)靈度確度精度 4附錄 A （料）甲硝、霉及標(biāo)中英通名、學(xué)子和CAS號(hào) 5附錄 B （料）標(biāo)準(zhǔn)液空基加樣品甲唑氯素特征子量譜圖 6前 言本文件按GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的和起草規(guī)則》的起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由北京市通州區(qū)疾病預(yù)防控制中心提出。本文件由北京預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)歸口。T/BPMA20—2024T/BPMA20—2024PAGEPAGE2蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本文件描述了蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定的方法。本文件適用于蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的測(cè)定。（GB/T6682GB/T27404本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理試樣用乙腈提取后經(jīng)C18-氨基復(fù)合固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量。GB/T6682乙腈-水溶液（1：9，V/V）。5mmol/L乙酸銨溶液：準(zhǔn)確稱取0.385g乙酸銨，用水溶解并稀釋至1L。氯霉素、甲硝唑、氯霉素-D5、甲硝唑-D4標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥98%，具體見附錄A。或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。100mg/L的氯霉0℃~56-D5-D4100mg/L的氯霉素-D5的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液和甲硝唑-D4內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。0℃~5℃保存，有效期6個(gè)月。1.00mg/L100mg/L100mg/L0.50mL50mL1.00mg/L0℃~51.00mg/L100mg/L-D5100mg/L唑-D40.50mL50mL1.00mg/L0℃~5℃保3100μg/L1.00mg/L5.00mL50mL容量瓶中，100μg/L100μg/L1.00mg/L5.00mL50mL容量瓶中，100μg/L混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：分別準(zhǔn)確吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液和混合內(nèi)標(biāo)使用液，用乙腈0.20.51.0μg/L2.05.0μg/L10.0、20.0μg/L、50.0μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，混合內(nèi)標(biāo)濃度為2.0μg/L。臨用現(xiàn)配。有機(jī)相微孔濾膜：0.22μm。C18-氨基復(fù)合固相萃取柱，1.75g/12mL，或相當(dāng)者。液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。分析天平：感量0.01mg和0.01g。（C18，100mm，1.7μm）冷凍離心機(jī)：轉(zhuǎn)速10000r/min。按照GB/T27404實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測(cè)附錄E食品樣品的抽取、制備和保存進(jìn)行。提取5001于040L100g（.，加水5102min，3030min，410000r/min離心8min凈化準(zhǔn)確移取5mL上清液直接上樣于C18-氨基復(fù)合小柱，使樣品自然通過，接收全部流出樣液，將樣液在40℃水浴條件下氮?dú)獯抵两?，用乙腈水溶液?.3）定容至1mL，過0.22μm濾膜，上機(jī)測(cè)定。液相色譜-質(zhì)譜參考條件C181001.7μmA=5mmol/LB=1；c)柱溫：40℃；流速：0.3mL/min；5。表1 流動(dòng)梯程序時(shí)間（min)A%B%095.05.00.595.05.03.001004.001005.095.05.0（ESI+）；3kV；5001000L/h；150L/h；700kpa；（MRM）。（ESI-）；2.8kV；5001000L/h；150L/h；700kpa；（MRM）。表2 MRM化合物模式母離子（m/z）子離子（m/z）錐孔電壓（V）碰撞電壓（V）氯霉素ESI-321.0152.0*4020321.0257.04015氯霉素-D5ESI-326.1157.0*4020326.1262.14015甲硝唑ESI+172.1128.1*2020172.182.12015甲硝唑-D4ESI+176.182.12020176.1128.1*2015注：*為定量離子3表3相對(duì)離子豐度（%）≤10＞10～20＞20～50＞50允許相對(duì)偏差（%）±50±30±25±20在液相色譜(（5.12），B。結(jié)果按式（1）計(jì)算：式中：

??=(1)??×??2×1000X ——μg/kg；C ——μg/L；——（10mL），——（5mL），——（1mL），1000——換算系數(shù)；m ——g。靈敏度取樣量按5.00g計(jì)算，方法檢出限為：氯霉素0.10μg/kg，甲硝唑0.10μg/kg。方法定量限為：氯霉素0.30μg/kg，甲硝唑0.30μg/kg。準(zhǔn)確度0.30μg/kg~5.0μg/kg71.0%~119%。精密度本方法批內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤20%，批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤30%。附錄A（資料性）甲硝唑、氯霉素及內(nèi)標(biāo)的中英文通用名稱、化學(xué)分子式和CAS號(hào)甲硝唑、氯霉素及內(nèi)標(biāo)的中英文通用名稱、化學(xué)分子式和CAS號(hào)見表A.1。表A.1甲硝唑、氯霉素及內(nèi)標(biāo)的中英文通用名稱、化學(xué)分子式和CAS號(hào)中文通用名稱英文通用名稱化學(xué)分子式CAS號(hào)甲硝唑MetronidazoleC6H9N3O3443-48-1甲硝唑-D4Metronidazole--D4（ethyleneD4）C6H5D4N3O31261392-47-5氯霉素ChloramphenicolC11H12Cl2N2O556-75-7氯霉素-D5Chloramphenicol-D5（RingD4，BenzylD）C11D5H7Cl2N2O5202480-68-0附錄B（資料性）標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白基質(zhì)加標(biāo)樣品中甲硝唑和氯霉素的特征離子質(zhì)量色譜圖A.1A