《園藝產品貯藏與保鮮》課件-1.2.2園藝產品可溶性糖含量的測定

園藝產品可溶性糖含量的測定CONTENTS目錄實驗目的1實訓原理2實驗材料、儀器、藥品3實驗步驟4實驗目的PART01實驗目的學習蒽酮比色法測定可溶性糖的原理和方法。了解不同植物組織可溶性糖含量的高低。實訓原理PART02實訓原理指樣品中的還原單糖及在本法測定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。可溶性總糖靈敏、快速、簡便。蒽酮比色法糖類在較高溫度下被硫酸作用脫水生成糠醛或糖醛衍生物后與蒽酮（C14H10O）縮合成藍綠色化合物。藍綠色化合物溶液在可見光620nm處有最大吸收峰，含糖量在150μg/ml以內，其顏色深淺與糖量成正比。蒽酮不僅能與單糖也能與雙糖、糊精、淀粉等直接作用，樣品不必經過水解。原理實訓所需儀器、試劑PART03實訓所需儀器、試劑1材料蘋果，蔬菜菜葉2儀器分光光度計、天平、恒溫水浴鍋、研缽、移液器、三角燒瓶、燒杯、容量瓶（100ml、500ml、1000ml）、試管等3藥品無水葡萄糖、濃硫酸、蒽酮、草酸鈉、飽和醋酸鉛、石英砂4200ug/ml標準葡萄糖母液100mg/500ml5蒽酮試劑1g蒽酮/1000ml稀硫酸（760ml濃硫酸→1000ml）實驗步驟PART04實驗步驟1、制作標準曲線（1）取6支干燥試管，將標準溶液稀釋成一系列不同濃度的溶液。實驗步驟1、制作標準曲線（2）依次加入1ml溶液及5ml蒽酮試劑，震蕩混勻（酸入水，沿器壁，慢攪拌）。（3）沸水浴10min，冷卻。（4）620nm下比色測定溶液吸光值。（5）繪制標準曲線

以溶液濃度C為橫坐標，以吸光值A為縱坐標。實驗步驟2、測定樣品可溶性糖含量（1）稱取5g新鮮樣品，研磨（加少許石英砂）至勻漿，將漿液倒入燒杯，70℃熱水洗滌研缽，洗滌液并入燒杯。（破碎細胞）（2）加蒸餾水30~40ml。（溶解細胞內物質）（3）水浴加熱燒杯，70~80℃保持30min后冷卻。（使溶解更充分）（4）一滴一滴加入飽和醋酸鉛（除蛋白），直至不形成白色沉淀。（5）將溶液和殘渣洗入100ml容量瓶，定容，震蕩混勻。實驗步驟2、測定樣品可溶性糖含量（6）過濾到三角燒瓶（0.2-0.4g草酸鈉粉末），再過濾（去除醋酸鉛對吸光值的影響）（7）取1ml稀釋過的糖提取液（葉片樣品稀釋20倍，蘋果樣品稀釋60倍）（稀釋至150μg/ml范圍內）（8）加入5ml蒽酮試劑，混勻后沸水浴10min（顯色反應）（9）冷卻后620nm下比色（在標準曲線上得結果）實驗步驟2、測定樣品可溶性糖含量（10）計算可溶性糖含量（g/100g鮮重）=C：提取液含糖量（μg/ml）V：含Wg樣品的溶液總體積（ml）（定容至100ml×稀釋倍數(shù)）W：植物

組織鮮重(g)106：g/μg作業(yè)樣品名稱