甜瓜主要病害抗性鑒定與評價技術(shù)規(guī)程 第2部分：甜瓜蔓枯病抗性鑒定與評價技術(shù)規(guī)程-送審討論稿

1霜霉病抗病性鑒定評價的術(shù)語和定義、抗病性鑒定方法NY/T2118蔬菜育苗基質(zhì)24抗病性鑒定方法4.1基本設(shè)備持在20℃~30℃)、塑料盆、鋁鍋、電爐、培養(yǎng)皿、試管、剪刀、鑷子、廣口瓶、酒精燈、濾紙、三4.2接種體分離4.3接種體確定選擇分布較廣、致病力較強的病原菌優(yōu)勢菌株作為人工接種鑒定4.4接種體保存4.4.1短期保存將甜瓜蔓枯病菌接種于PDA斜面養(yǎng)基上，在25℃~28℃培養(yǎng)7d后，置4℃~8℃的冰箱中保存。3將甜瓜蔓枯病菌接種于PDA平板培養(yǎng)基上，并在接種點周圍28℃培養(yǎng)7d后，取出濾紙片，經(jīng)真空干燥后于-20℃~-80℃的低溫冰箱中保存。4.5接種體懸浮液制備將保存的人工接種鑒定使用的甜瓜蔓枯病菌接種體移植于PDA平板培養(yǎng)基上，在25℃~28℃培養(yǎng)7d進行活化。在無菌操作下，甜瓜蔓枯病菌接種體接種于PDA平板培養(yǎng)基上，置于25℃~28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7d～10d，用滅菌蒸餾水洗下分生孢子，并制成接種體懸浮液，供人工接種使用。5.1.1種子質(zhì)量將待鑒定甜瓜的種子經(jīng)5%次氯酸鈉溶液浸種10min，用清水沖洗3次，再用清水浸泡5h后，置于30℃~32℃恒溫箱中保濕催芽。5.1.3播種露白發(fā)芽后播植于溫室，采用營養(yǎng)缽盆栽法進行育苗，基質(zhì)應(yīng)自來水澆透育苗基質(zhì)，隨后將已催芽的待鑒定甜瓜種子播于上述塑料營養(yǎng)缽中，每缽1粒種子，然后用泥炭育苗基質(zhì)覆蓋，以蓋住種子為宜。重復(fù)3次，每重復(fù)30缽，5.1.4對照品種5.1.5接種前管理播種后將塑料缽置于溫室中，進行培育，出苗前，溫室溫度保持在25℃~30℃,保持盆中土壤濕度；甜瓜苗出土后，溫室溫度保持在23℃每年4月～6月和9月～11月為甜瓜對蔓枯病抗性鑒定與抗甜瓜對蔓枯病的抗病性鑒定接種，分別在甜瓜苗三4直向下?lián)p傷根系后，每株用接種液200ml～250ml澆根，用透明薄膜覆蓋的小拱棚保濕24接種后的甜瓜苗，置于溫度為23℃~28℃的溫室中，黑暗保濕（RH85%～100%）24h；以后每天光照12h～14h，溫室溫度保持在23℃~28℃,適時澆水，保持正常栽培管理，不施用殺菌劑。接種后20d～25d時進行調(diào)查。也可根據(jù)感病的對照品種病級擴展到最高病級的5株發(fā)病率以“Ri”計，數(shù)值以“%”表9.1.1鑒定有效性判別當(dāng)感病對照品種達到其相應(yīng)感病程度（DI≥50.0），該批9.1.2抗病性劃分1HR2R345S69.1.3鑒定結(jié)果記錄6編號品種/種質(zhì)名稱來源重復(fù)病情級別病情指數(shù)平均病指抗性評價013579ⅠⅡⅢ……播種日期接種日期接種生育期接種病原物分離編號接種病原物株系類型調(diào)查時間鑒定人（簽字）：校核人（簽字）：鑒定技術(shù)負(fù)責(zé)人（簽字）：鑒定單位蓋章）7200g，切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持30min，用2層紗布趁熱在量杯上過濾，棄濾渣，取濾液補充水分到1000ml；把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂17g，然后至6.8～7.0。將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞或泡沫度的1/5，滅菌后制成斜面；三角瓶的分裝量以不超過其容積的一半為宜，滅菌后倒入滅菌培養(yǎng)皿，制8植株的葉緣處開始侵染，形成v字形黑褐色壞死斑，隨著病情擴展，病斑上著生黑色小點，空氣干燥時初現(xiàn)水漬狀病斑，后中央變?yōu)楹稚菟腊?，呈星狀開裂，內(nèi)部呈木圓柱形，初為單胞，后產(chǎn)生1-2個隔膜