DB12T 650-2016 轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分篩查Cry1AbCry1Ac試紙條法

67.050B

20備案號(hào)：

DB12天 津 市 地方 標(biāo) 準(zhǔn)DB12/T

650—2016轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分篩查Cry1Ab/Cry1Ac

試紙條法Screening

plantCry1Ab/Cry1Ac

strip2016-09-27

發(fā)布 2016-11-01

實(shí)施天津市市場(chǎng)和質(zhì)量監(jiān)督管理委員會(huì)發(fā)布DB12/T

650—2016 本標(biāo)準(zhǔn)按照

GB/T

—

給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由天津市農(nóng)村工作委員會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：天津市農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所、天津市東麗區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：蘭青闊、李亮、黃鳳軍、劉雪巖、趙新、宛煜嵩、易萌、陳銳、徐石勇。本標(biāo)準(zhǔn)

2016

年

9

月首次發(fā)布。DB12/T

650—2016

1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分Cry1Ab/Cry1Ac斷。本標(biāo)準(zhǔn)適用于表達(dá)Cry1Ab/Cry1Ac蛋白的轉(zhuǎn)基因大豆MON87701，轉(zhuǎn)基因玉米MON810、Bt11、Bt176，轉(zhuǎn)基因水稻、克螟稻、科豐六號(hào)，轉(zhuǎn)基因棉花、MON15985等主要植物及其初級(jí)加工產(chǎn)品中Cry1Ab/Cry1Ac蛋白的試紙條篩查。2 規(guī)范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T

6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3 原理特異性單克隆抗體1-NC膜檢測(cè)線(xiàn)上特異性單克隆抗體2結(jié)合形成雙抗體夾心復(fù)合物，并顯色。如果樣本中轉(zhuǎn)基因作物含量大于5%，控制線(xiàn)（Control

稱(chēng)C）和檢測(cè)線(xiàn)（Test

，簡(jiǎn)稱(chēng)T）顯色，結(jié)果為陽(yáng)性；反之，控制線(xiàn)（C）顯色，檢測(cè)線(xiàn)（T）不顯色，結(jié)果為陰性。4 儀器設(shè)備及試劑4.1 儀器設(shè)備勻漿器；天平；移液槍?zhuān)徽袷幤?；離心管等。4.2 試劑提取緩沖液；實(shí)驗(yàn)用水為重蒸餾水或符合GB/T

6682規(guī)定的一級(jí)水等。5 方法步驟5.1 樣品的采集和預(yù)處理3

幼嫩組織

，置于2

離心管中。作物籽粒可使用鐵鉗夾碎，取較碎部分置于2

離心管中。5.2 樣品研磨加1

mL純水或提取緩沖液于離心管中，使用一次性研磨杵手工研磨或電鉆研磨，確保上層液體體積應(yīng)至少占總體積三分之一。DB12/T

650—2016對(duì)于混合樣品，應(yīng)稱(chēng)重后使用大容量研磨儀器研磨至100目大小粉末，然后加入水或提取緩沖液。5.3 渦旋震蕩在振蕩器上用力震蕩30

，確保樣品充分混勻。5.4 試紙條檢測(cè)震蕩后，靜置1

待固體物質(zhì)沉淀分層，盡快從包裝中取出試紙條，按照箭頭方向插入離心管，開(kāi)始計(jì)時(shí)。5.5 讀取結(jié)果

底色褪去后，將試紙條水平放置于觀察者正面讀取結(jié)果。5.6 結(jié)果判斷測(cè)試結(jié)果分為陰性、陽(yáng)性和無(wú)效三種。陰性（—）：控制線(xiàn)C

顯色，檢測(cè)線(xiàn)Ｔ不顯色；陽(yáng)性（＋）：控制線(xiàn)C

顯色，檢測(cè)線(xiàn)Ｔ顯色肉眼可見(jiàn)；無(wú)效：C

線(xiàn)未出現(xiàn)，可能操作不當(dāng)或試紙失效。表明