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文檔簡介
實驗二細菌形態(tài)和結構觀察(Ⅰ)(細菌的簡單染色和革蘭氏染色)一、實驗目的1、觀察細菌菌落征。2、掌握細菌簡單染色、革蘭氏染色技術。3、在油鏡下觀察細菌個體形態(tài)。二、實驗原理1、細菌菌落特征2、細菌基本形態(tài)3、細菌革蘭氏染色機理共有特征:濕潤,較光滑,較透明,較粘稠,易挑取,質地均勻,顏色多樣,菌落正反面及邊緣與中央顏色一致。特有特征:有鞭毛:菌落大而平坦,邊緣多缺刻、不規(guī)則有糖被:菌落大,透明,呈蛋清狀有芽孢:菌落外觀粗糙,“干燥”,不透明且表面多褶基本形態(tài):球狀,桿狀,螺旋狀。其它形態(tài):
星形,方形,帶柄狀,畸形,衰退形G+:細胞壁厚,內肽聚糖含量高,且交聯(lián)度大,網孔小,不含脂類。G-
:細胞壁薄,內肽聚糖含量低,交聯(lián)度小,網孔大,脂類含量高。革蘭氏染色過程:初染→媒染→脫色→復染。三、實驗材料1、菌種:大腸桿菌(Escherichiacoli)、枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、金黃色葡萄球菌(S.aureus)(培養(yǎng)18~24h的菌落平板各一個)。2、染液(1)簡單染色:呂氏美藍染液或齊氏石炭酸復紅染液。(2)革蘭氏染液:草酸銨結晶紫染液、革蘭氏碘液、95%乙醇、番紅染液。3、其他物品:普通光學顯微鏡、載玻片、接種環(huán)、鑷子、酒精燈、無菌水、吸水紙、香柏油、香柏油、二甲苯、擦鏡紙。細菌革蘭氏染色過程涂片→干燥→固定→初染(草酸銨結晶紫染色1min)→水洗→媒染(碘液沖洗后覆蓋1min)→水洗→脫色(95%乙醇脫色至流下乙醇無色為止)→立即用水沖洗→復染(番紅染色2~3min)→水洗→干燥→鏡檢染色結果金黃色葡萄球菌革蘭氏染色結果染色結果大腸桿菌革蘭氏染色結果染色結果金黃色葡萄球菌和大腸桿菌混合菌樣的革蘭氏染色結果染色結果枯草芽孢桿菌革蘭氏染色結果實驗要求每個同學必須做枯草芽孢桿菌簡單染色涂片。每組同學必須做金黃色葡萄球菌或大腸桿菌革蘭氏染色涂片。每組同學必須做枯草芽孢桿菌革蘭氏染色涂片。五、實驗報告1、記錄三種菌的革蘭氏染色結果,繪出菌體細胞形態(tài)。2、要得到正確的革
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