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DB34DB34/T3660—2020檢測方法DuplexRT-PCRassayfordetectionofduckhepatitisvirustype1andtype32020-08-03發(fā)布2020-09-03實施安徽省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I1RT-PCR：反轉錄聚合酶鏈式反應（reversetranscription-podNTP：脫氧核糖核苷三磷酸（deoxy-M-MLV：莫洛尼氏鼠白血病病毒（moloneymurinPBS：磷酸緩沖液（phosphatebuffeTAE：Tris-乙酸電泳緩沖液（tris3.5冰箱（-20℃;-80℃)。2），5’-TTCAATTTCCAGATTGAGTTCAAA-3’；DHV-3引物，5’-ACGAACCAGCCATTGACG-3’，引物濃度均6.1.412000g4℃離心153——5×RTBuffer4μL,RNaseInhibitor(40U/μL)0.5μL,M-MLV反轉錄酶(6.2.4PCR儀中，42℃作用60min,再70℃作用15min,-20℃保存?zhèn)溆谩?5A.10.01mol/LpH7.2磷酸鹽緩沖液（PBS）的A.1.10.2mol/L磷酸氫二鈉溶液：稱取磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H2O）71.6g，先加適量滅菌去離子A.1.20.2mol/L磷酸二氫鈉溶液：稱取磷酸二氫鈉（NaH2PO4·H2O）27.6g，先加適量滅菌去離子水A.1.3量取0.2moL/L磷酸氫二鈉溶液36mL，0A.2.10.5mol/L乙二銨四乙酸二鈉（EDTA二水乙二銨四乙酸二鈉（分析純）
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