高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)DB41-T 1926-2019

ICS65.020.01

B05

DB41

河南省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB41/T1926—2019

高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2019-11-21發(fā)布2020-02-21實(shí)施

河南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB41/T1926—2019

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：郝西、臧秀旺、劉娟、張俊、鄭崢、郭秀璞、湯豐收、高偉、徐靜、張忠信、

孫子淇、苗利娟、杜紅、張香萍、王桂芳、崔亞男、張曼。

I

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高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量的術(shù)語(yǔ)和定義、質(zhì)量要求、檢驗(yàn)方法與檢驗(yàn)規(guī)則。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于河南省高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量的評(píng)價(jià)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程扦樣

GB/T3543.3農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程凈度分析

GB/T3543.4農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程發(fā)芽試驗(yàn)

GB/T3543.5農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程真實(shí)性和品種純度鑒定

GB/T3543.6農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程水分測(cè)定

GB5009.168食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪酸的測(cè)定

GB20464農(nóng)作物種子標(biāo)簽通則

NY/T2237植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試指南花生

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

高油酸花生

種子脂肪中油酸含量≥75%的花生。

3.2

種子純度

品種在特征特性方面典型一致的程度，用本品種的種子數(shù)占供檢本作物樣品種子數(shù)的百分率表示。

3.3

種子凈度

在一定量的種子中，正常種子的重量占總重量（包含正常種子之外的雜質(zhì)）的百分比。

3.4

四級(jí)種子

在種子生產(chǎn)中，以育種家種子為種源，運(yùn)用重復(fù)繁殖技術(shù)路線，按世代順序繁殖的育種家種子、原

原種、原種和大田用種的種子。

3.5

育種家種子

育種家育成的最初種子。具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用白色標(biāo)簽作標(biāo)記。

1

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3.6

原原種

由育種家種子直接繁殖的種子。具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用白色標(biāo)簽作標(biāo)記。

3.7

原種

由原原種直接繁殖的種子。具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用紫色標(biāo)簽作標(biāo)記。

3.8

大田用種

由原種繁殖用于大田生產(chǎn)的種子。具有該品種特異性、一致性和遺傳穩(wěn)定性。用藍(lán)色標(biāo)簽作標(biāo)記。

4質(zhì)量要求

高油酸花生種子質(zhì)量指標(biāo)應(yīng)符合表1的要求。

表1高油酸花生種子質(zhì)量指標(biāo)

項(xiàng)目育種家種子原原種原種大田用種

油酸/%≥75.075.075.075.0

純度/%≥10010099.699.4

凈度/%≥99.599.599.599.3

雜質(zhì)/%≤0.50.50.50.7

其他作物種子/%≤0000

雜草種子/（粒/kg）≤0001

有毒(害)雜草種子/（粒/kg）≤0000

發(fā)芽率/%≥80.080.080.080.0

水分/%≤10.010.010.010.0

5檢測(cè)方法

5.1真實(shí)性和品種純度

5.1.1表型鑒定

5.1.1.1田間鑒定

按品種地上部性狀的典型性和莢果性狀的典型性進(jìn)行鑒定。鑒定方法按NY/T2237的規(guī)定執(zhí)行。

5.1.1.2油酸含量測(cè)定

按GB5009.168的規(guī)定執(zhí)行；油酸含量指標(biāo)應(yīng)符合該品種本質(zhì)特征。

5.1.2分子標(biāo)記

采用固定數(shù)目的單核苷酸多態(tài)性（SingleNucleotidePolymorphism，SNP）引物，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)樣

品比較或與SNP指紋數(shù)據(jù)比對(duì)平臺(tái)比對(duì)的方式，對(duì)品種真實(shí)性進(jìn)行驗(yàn)證或身份鑒定。檢測(cè)方法按附錄A

執(zhí)行。

2

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5.2凈度和雜質(zhì)

按GB/T3543.3的規(guī)定執(zhí)行。

5.3發(fā)芽試驗(yàn)

按GB/T3543.4的規(guī)定執(zhí)行。

5.4水分

按GB/T3543.6的規(guī)定執(zhí)行。

5.5其他作物、雜草種子和有毒（害）雜草種子數(shù)目

按GB/T3543.3的規(guī)定執(zhí)行。

6檢驗(yàn)規(guī)則

6.1扦樣

按GB/T3543.2的規(guī)定執(zhí)行。

6.2質(zhì)量判定

按GB20464的規(guī)定執(zhí)行。

3

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AA

附錄A

（規(guī)范性附錄）

花生品種真實(shí)性分子標(biāo)記鑒定方法

A.1引物合成

利用已遴選的14個(gè)核心SNP引物和36個(gè)擴(kuò)展SNP引物作為品種真實(shí)性驗(yàn)證和身份鑒定的檢測(cè)引物，

構(gòu)建已知品種的SNP指紋數(shù)據(jù)比對(duì)平臺(tái)。

根據(jù)真實(shí)性驗(yàn)證或身份鑒定的要求，采用序貫式方法，選定SNP引物。

SNP引物采用ULTRPAGE的方式進(jìn)行純化，將Primer_AlleleFAM（36umol/μL）、Primer_AlleleHEX

（36umol/μL）、Primer_Common（90umol/μL）三種引物溶解后按體積比1:1:1混勻?yàn)镵ASP引物Mix。

A.2脫氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid，DNA）提取

在種子生產(chǎn)基地隨機(jī)取樣，供檢樣品為葉片或種子，采用混合樣品檢測(cè)（至少含有30個(gè)個(gè)體的材

料），先單獨(dú)提取DNA，再取等量DNA混合。

DNA提取方法應(yīng)保證提取的DNA數(shù)量和質(zhì)量符合PCR擴(kuò)增的要求，DNA無(wú)降解，溶液的紫外光吸光

度OD260與OD280的比值宜介于1.8～2.0。

DNA提取可選CTAB法或試劑盒法。

A.3PCR擴(kuò)增

SNP反應(yīng)可以在96等不同規(guī)格孔板進(jìn)行，體系的總體積可相應(yīng)采用10μL或5μL，在板上設(shè)無(wú)

模板對(duì)照。

A.4SNP基因分型

將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用能檢測(cè)熒光信號(hào)的檢測(cè)平臺(tái)（如可以檢測(cè)FAM和HEX波長(zhǎng)熒光的酶標(biāo)儀FLUOstar

Omega及實(shí)時(shí)定量PCR儀）進(jìn)行讀板，并根據(jù)熒光量比值進(jìn)行SNP分型。

A.5結(jié)果計(jì)算與表示

統(tǒng)計(jì)位點(diǎn)差異記錄的結(jié)果，計(jì)算差異位點(diǎn)數(shù)，核實(shí)差異位點(diǎn)的引物編號(hào)。

檢測(cè)結(jié)果用供檢樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品比較的位點(diǎn)差異數(shù)表示，檢測(cè)結(jié)果的容許差距不大于2個(gè)位點(diǎn)。對(duì)

于在容許差距范圍內(nèi)且提出有異議的樣品，可以按照GB/T3543.5的規(guī)定進(jìn)行田間小區(qū)種植鑒定。

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DB41/T1926—2019

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：郝西、臧秀旺、劉娟、張俊、鄭崢、郭秀璞、湯豐收、高偉、徐靜、張忠信、

孫子淇、苗利娟、杜紅、張香萍、王桂芳、崔亞男、張曼。

I

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高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量的術(shù)語(yǔ)和定義、質(zhì)量要求、檢驗(yàn)方法與檢驗(yàn)規(guī)則。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于河南省高油酸花生四級(jí)種子質(zhì)量的評(píng)價(jià)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程扦樣

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