免疫檢查點抑制劑和PD-L1抗體檢測試劑相關(guān)情況概述

免疫檢查點抑制劑和PD-L1抗體檢測試劑相關(guān)情況概述（原創(chuàng)2020-03-26CMDE中國器審）

近年來，腫瘤免疫治療迅速發(fā)展，以抗PD-1抗體和抗PD-L1抗體為代表的免疫檢查點抑制劑成為臨床研究的熱點。2018年，兩個免疫檢查點抑制劑納武利尤單抗（nivolumab）和帕博利珠單抗（pembrolizumab）相繼在我國獲準(zhǔn)上市。2019年，與免疫檢查點抑制劑配套使用的一個PD-L1抗體檢測試劑也獲得批準(zhǔn)。本文簡要介紹二者的情況，為PD-L1抗體檢測試劑的科學(xué)審評提供參考。

一、免疫檢查點抑制劑的作用機制

T細(xì)胞的完全活化依靠“雙信號”系統(tǒng)調(diào)控：第一信號來自T細(xì)胞表面的TCR（T細(xì)胞受體）與抗原呈遞細(xì)胞（APC）表面的主要組織相容性復(fù)合體（MHC）的特異性結(jié)合，即T細(xì)胞對抗原識別；第二信號來自協(xié)同刺激因子，包括兩種：一種為激活性協(xié)同刺激因子，另一種為抑制性協(xié)同刺激因子，后者的存在價值是為了防止T細(xì)胞過度刺激進而傷及其他正常組織。

而“聰明”的腫瘤細(xì)胞為了逃脫免疫攻擊，在受到腫瘤微環(huán)境相應(yīng)因子的刺激后，可在其細(xì)胞表面迅速上調(diào)表達抑制性協(xié)同刺激因子，以便抑制T細(xì)胞的免疫應(yīng)答。PD-L1蛋白即是腫瘤細(xì)胞表達的抑制性協(xié)同刺激因子，其可通過與T細(xì)胞表面表達的PD-1蛋白相互作用，向T細(xì)胞傳遞抑制性信號，阻斷T細(xì)胞的免疫應(yīng)答。

免疫檢查點抑制劑（抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體）通過阻斷T細(xì)胞表面PD-1與腫瘤細(xì)胞表面PD-L1的結(jié)合，解除腫瘤細(xì)胞對T細(xì)胞的抑制，重建T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷功能。

二、PD-1和PD-L1的表達情況

PD-1是一種跨膜蛋白，在T細(xì)胞未活化時幾乎不表達，在T細(xì)胞活化后才會表達。除了在活化的T細(xì)胞上表達之外，PD-1還在活化的B細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、單核細(xì)胞以及部分腫瘤細(xì)胞表達。PD-L1也是一種跨膜蛋白，誘導(dǎo)表達于T細(xì)胞、樹突細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等，在干擾素和其他炎癥因子刺激的腫瘤組織中會迅速上調(diào)表達。

三、已批準(zhǔn)的免疫檢查點抑制劑（抗PD-1抗體和抗PD-L1抗體）

目前，F(xiàn)DA已批準(zhǔn)了多種抗PD-1抗體和抗PD-L1抗體藥物，如：派姆單抗（pembrolizumab）、阿特珠單抗（atezolizumab）、durvalumab和avelumab單抗等，具體情況見表1。

表1FDA已上市的免疫檢查點相關(guān)抗體藥物四、FDA已批準(zhǔn)的PD-L1抗體檢測試劑

（一）基本情況

目前，F(xiàn)DA批準(zhǔn)的與免疫檢查點抑制劑（抗PD-1抗體或抗PD-L1抗體）配套使用的試劑均為PD-L1抗體檢測試劑，共有4種，分別來自安捷倫和羅氏2家公司。4種抗體檢測試劑均采用免疫組化方法，檢測靶標(biāo)均為PD-L1蛋白，檢測樣本類型均為腫瘤組織的FFPE樣本，用于PD-L1識別的單克隆抗體克隆號分別為：28-8，22C3，SP142和SP263。但每種檢測試劑用到的抗體不同，導(dǎo)致不同檢測試劑對同一癌種PD-L1陰陽性閾值的設(shè)定不同，同一檢測試劑對不同癌種PD-L1陰陽性閾值的設(shè)定也不同。有關(guān)4種檢測試劑的具體情況見表2。

表2.4種PD-L1抗體檢測試劑相關(guān)情況（二）4種PD-L1抗體檢測試劑的閾值設(shè)定與預(yù)期用途

1.PD-L1IHC28-8pharmDx

采用兔單抗28-8及EnVisionFLEX可視系統(tǒng)，檢測非小細(xì)胞肺癌、頭頸鱗狀細(xì)胞癌、尿道上皮癌和黑色素瘤患者腫瘤組織FFPE中PD-L1蛋白。以細(xì)胞膜著色的腫瘤細(xì)胞占所有腫瘤細(xì)胞的百分率設(shè)定閾值，大于等于1%定義為PD-L1表達陽性。PD-L1表達與小細(xì)胞肺癌和頭頸鱗狀細(xì)胞癌患者服用nivolumab后生存期延長有關(guān)，PD-L1表達與尿道上皮癌患者服用nivolumab后應(yīng)答率增加有關(guān)，PD-L1表達與黑色素瘤患者服用nivolumab后的無進展生存期延長有關(guān)，該試劑不用于nivolumab用藥人群的判定，非伴隨診斷試劑。

2.PD-L1IHC22C3pharmDx

采用小鼠單抗22C3和EnVisionFLEX可視系統(tǒng)，檢測非小細(xì)胞肺癌、胃或胃食管交界處腺癌、食管鱗狀細(xì)胞癌、宮頸癌、尿路上皮癌和頭頸鱗狀細(xì)胞癌患者腫瘤組織FFPE中PD-L1蛋白。不同的癌種有不同的閾值設(shè)定方式，有的癌種以細(xì)胞膜著色的腫瘤細(xì)胞占可見腫瘤細(xì)胞的百分率設(shè)定閾值，大于等于1%定義為PD-L1表達陽性；有的癌種以著色的腫瘤細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞占可見腫瘤細(xì)胞的百分率設(shè)定閾值，大于等于1%或10%定義為PD-L1表達陽性。PD-L1抗體檢測試劑用于輔助鑒別可使用pembrolizumab治療的非小細(xì)胞肺癌、胃或胃食管交界處腺癌、食管鱗狀細(xì)胞癌、宮頸癌、尿路上皮癌和頭頸鱗狀細(xì)胞癌患者，為伴隨診斷試劑。

3.VENTANAPD-L1（SP142）

采用兔單抗SP142和OptiViewDABIHC檢測試劑盒，檢測尿路上皮癌和三陰性乳腺癌患者腫瘤組織FFPE中的PD-L1蛋白。有兩種不同的閾值設(shè)定方式，一種以細(xì)胞膜著色的腫瘤細(xì)胞占可見腫瘤細(xì)胞的百分率設(shè)定閾值，一種以著色的腫瘤浸潤免疫細(xì)胞占可見腫瘤細(xì)胞的百分率設(shè)定閾值，不同癌種具有不同的閾值。PD-L1抗體檢測試劑用于輔助鑒別可使用Tecentriq治療的尿路上皮癌和三陰性乳腺癌患者，為伴隨診斷試劑。

4.VENTANAPD-L1（SP263）

采用兔單抗SP263，檢測尿路上皮癌患者腫瘤組織FFPE中的PD-L1蛋白，有兩種不同的閾值設(shè)定方式，一種以細(xì)胞膜著色的腫瘤浸潤免疫細(xì)胞占可見腫瘤細(xì)胞的百分率設(shè)定閾值，一種以著色的腫瘤細(xì)胞占可見腫瘤細(xì)胞的百分率設(shè)定閾值。PD-L1表達與尿道上皮癌患者服用durvalumab后應(yīng)答率增加有關(guān)，非伴隨診斷試劑。

五、中國已批準(zhǔn)的免疫檢查點抑制劑和PD-L1抗體檢測試劑

2018年，pembrolizumab和nivolumab免疫檢查點抑制劑在中國獲準(zhǔn)上市。2019年，安捷倫的PD-L1IHC22C3pharmDx抗體檢測試劑在中國獲準(zhǔn)上市，該試劑檢測非小細(xì)胞肺癌患者FFPE中的PD-L1蛋白，用于輔助鑒別可使用pembrolizumab治療的非小細(xì)胞肺癌患者，為伴隨診斷試劑。

六、PD-L1抗體檢測試劑注冊申報相關(guān)問題探討

（一）臨床定位

美國FDA已批準(zhǔn)4個PD-L1抗體檢測試劑，其預(yù)期用途可分為兩大類：第一類是作為伴隨診斷試劑，輔助鑒別可使用相關(guān)免疫檢查點抑制劑治療的癌癥患者；第二類是作為補充診斷試劑，預(yù)測腫瘤患者對相關(guān)免疫檢查點抑制劑藥物應(yīng)答的有效性。該類試劑在我國的臨床定位，應(yīng)結(jié)合我國目前的臨床實際需求以及申報產(chǎn)品提供的相關(guān)證據(jù)予以確定。

（二）臨床評價情況

該類試劑的臨床評價一般包括：（1）申報試劑與相關(guān)免疫檢查點抑制劑聯(lián)合進行的藥物臨床試驗；（2）申報試劑的臨床檢測性能，如：不同臨床試驗機構(gòu)、不同資質(zhì)病理醫(yī)生對不同特征臨床樣本的閱片重復(fù)性等。

（三）境外臨床數(shù)據(jù)

根據(jù)接受境外臨床試驗數(shù)據(jù)指導(dǎo)原則的相關(guān)要求，是否接受境外臨床試驗數(shù)據(jù)，需從以下三方面加以考慮：一是法規(guī)差異；二是臨床實踐差異；三是人種差異。PD-L1抗體檢測試劑，應(yīng)包括中國人群的數(shù)據(jù)，原因有兩個：一是免疫組化進行結(jié)果判讀時，受主觀影響較大，且判讀時存在細(xì)胞染色等干擾因素，這就導(dǎo)致免疫組化方法在國內(nèi)外臨床實踐中存在差異；二是抗體試劑的有效性與所伴隨的免疫檢查點抑制劑的療效息息相關(guān)。境內(nèi)外人群PD-L1蛋白的表達量是否具有一致性，現(xiàn)有文獻尚未達成一致。另外，免疫治療的療效除與PD-L1蛋白的豐度有關(guān)，還受腫瘤微環(huán)境的影響，比如腫瘤突變水平、腫瘤抗原豐度以及其他協(xié)同刺激因子的影響等。境內(nèi)外人群的腫瘤微環(huán)境是否存在差異，現(xiàn)有文獻也尚未達成一致。

（四）審評機構(gòu)間的溝通

鑒于PD-L1抗體檢測試劑臨床有效性的判定，與其伴隨的免疫檢查點抑制劑的療效有關(guān)。而伴隨藥物是否具有療效，需要由藥物審評員進行判斷。這就需要藥審和器審之間進行有效溝通，爭取藥物和試劑同步審評，同步上市。

（五）產(chǎn)品說明書的規(guī)范

鑒于PD-L1檢測試劑與其伴隨藥物相互依存，互相匹配。因此，建議在試劑的產(chǎn)品說明書中明確其所伴隨的藥物，包括藥物廠家、藥物通用名稱和商品名稱等。

七、總結(jié)

作為臨床急需的藥物與檢測試劑，免疫檢查點抑制劑和PD-L1抗體檢測試劑目前屬于新興的申報熱點。如何進行科學(xué)審評，為臨床提供安全有效的產(chǎn)品，需要我們深入了解二者相互作用的機制，研究并借鑒境外產(chǎn)品的審評經(jīng)驗，促進不同審評機構(gòu)之間的溝通交流。

參考文獻：

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