臨床基因擴增檢驗技術(shù)

—PAGE25——PAGE36—XX省臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核申請書申報日期：XX省衛(wèi)生廳印制年月日XX省臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核申報材料目錄1.醫(yī)療機構(gòu)設(shè)置臨床基因擴增檢驗實驗室正式申請；2.《醫(yī)療機構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證》(副本)復印件；3.擬設(shè)基因擴增檢驗實驗室的設(shè)置平面圖；4.擬設(shè)置基因擴增檢驗實驗室醫(yī)院的醫(yī)療衛(wèi)生資源狀況、對臨床基因擴增檢驗實驗室的需求情況以及實驗室運行的預測分析；5.檢驗報告樣單（2份）；6.實驗室技術(shù)審核相關(guān)表格；7.實驗室相關(guān)程序文件和標準操作程序（SOP）；8.其它有關(guān)質(zhì)量文件名稱或證明材料。

實驗室技術(shù)審核相關(guān)表格一、醫(yī)院基本情況醫(yī)院名稱醫(yī)院類別醫(yī)院等次地址郵政編碼聯(lián)系電話傳真電話醫(yī)院實際開放床位數(shù)醫(yī)院業(yè)務(wù)用房建筑面積m2醫(yī)院在編人數(shù)人，其中衛(wèi)生技術(shù)人員數(shù)人，管理人員數(shù)人；法定代表人聯(lián)系電話（辦）：（手機）：二、實驗室情況實驗室負責人電子郵箱聯(lián)系電話辦：手機：傳真實驗室總?cè)藬?shù)人高級職稱人數(shù)人，占%副高級職稱人，占%中級職稱人，占%初級職稱人，占%（一）技術(shù)隊伍情況1．實驗室主要負責人姓名性別出生年月年齡學歷學位職務(wù)職稱所學專業(yè)畢業(yè)院校畢業(yè)年月工作簡歷：主要著作及成果：2．實驗室工作人員一覽表序號姓名性別年齡學歷(學位)職務(wù)職稱所學專業(yè)畢業(yè)時間從事本專業(yè)時間培訓合格證書號備注（二）主要儀器設(shè)備序號儀器設(shè)備名稱及編號型號規(guī)格數(shù)量生產(chǎn)廠家購買日期備注（三）擬開展的臨床基因診斷項目項目方法備注（四）實驗室相關(guān)程序文件和標準操作程序（sop）1.儀器設(shè)備的維護保養(yǎng)程序有□無□2.儀器設(shè)備的校準程序有□無□3.儀器設(shè)備的操作程序有□無□4.臨床標本的收集程序有□無□5.臨床標本的處理（核酸純化）程序有□無□6.臨床標本的保存程序有□無□7.核酸擴增及產(chǎn)物分析檢測的操作程序有□無□8.試劑的質(zhì)檢操作程序有□無□9.實驗室消耗品購買、審核和貯存程序有□無□10.實驗室廢棄物的處理程序有□無□11.實驗室廢棄物的處理程序有□無□12.實驗室的清潔程序有□無□13.室內(nèi)質(zhì)量控制程序有□無□14.抱怨處理程序有□無□注：請將實驗室相關(guān)程序文件和標準操作程序（sop）附后。三、聲明本實驗室自愿申請衛(wèi)生廳委托省臨床檢驗中心組織的技術(shù)審核，承諾所提供的資料真實、有效，愿意承擔全部法律責任，并承擔以下義務(wù)：1.遵守《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》和《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因診斷實驗室工作導則》及有關(guān)規(guī)定；2.不論能否獲準審核，預付審核階段所需的全部費用。實驗室負責人（簽字）：醫(yī)療機構(gòu)法定代表人（簽字）：醫(yī)療機構(gòu)意見：負責人：（公章）年月日上級主管部門意見：負責人：（公章）年月日省級臨床檢驗專家組意見：負責人：（公章）年月日省級衛(wèi)生行政部門審批意見：負責人：（公章）年月日附件2：XX省臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核辦法為規(guī)范臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核，進一步加強對全省醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室的準入管理，根據(jù)衛(wèi)生部《臨床實驗室管理辦法》和《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》等有關(guān)文件，制定本審核辦法。一、審核前準備工作擬申請開展臨床基因擴增檢驗的醫(yī)療機構(gòu)，按照《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》和《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則》有關(guān)標準及要求，積極開展自查，加強整改。二、提交申請資料擬申請開展臨床基因擴增檢驗的醫(yī)療機構(gòu)，自查結(jié)果符合臨床基因擴增檢驗開展條件的，向省衛(wèi)生廳提出臨床基因擴增檢驗實驗室設(shè)置申請（醫(yī)院正式文件），填寫《XX省臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核申請書》，連同該實驗室標準化操作程序文件一并報省衛(wèi)生廳醫(yī)政與醫(yī)療服務(wù)監(jiān)管處。三、技術(shù)審核委托省衛(wèi)生廳在收到申請起10個工作日內(nèi)，對醫(yī)療機構(gòu)提交申請資料的完整性、實驗室設(shè)置需求等進行初審，初審結(jié)果符合要求的，委托XX省臨床檢驗中心進行技術(shù)審核；初審結(jié)果不符合要求的，正式函復申請機構(gòu)。四、初步技術(shù)審核XX省臨床檢驗中心接到省衛(wèi)生廳委托后5個工作日內(nèi)，對照《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》和《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則》等有關(guān)標準及要求，對申請開展臨床基因擴增檢驗的醫(yī)療機構(gòu)實驗室進行初步技術(shù)審核，提出整改建議。實驗室進行整改后，試運行三個月。五、正式技術(shù)審核XX省臨床檢驗中心從臨床基因擴增實驗室技術(shù)審核專家組中六、技術(shù)審核結(jié)果的使用（一）專家組根據(jù)技術(shù)審核情況簽發(fā)《XX省臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核報告》；（二）XX省臨床檢驗中心在技術(shù)審核結(jié)束后15個工作日內(nèi)，向申請機構(gòu)反饋技術(shù)審核結(jié)果，并報省衛(wèi)生廳備案。1、對技術(shù)審核合格的醫(yī)療機構(gòu)，核發(fā)《臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核合格證》；2、對技術(shù)審核基本合格的醫(yī)療機構(gòu)，應提出整改意見，1個月后根據(jù)真該情況再次組織技術(shù)審核，審核合格的，核發(fā)《臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核合格證》；審核不合格的，書面告知申請機構(gòu)；3、對技術(shù)審核不合格的醫(yī)療機構(gòu)，書面告知申請機構(gòu)。（三）技術(shù)審核合格的醫(yī)療機構(gòu)，憑《臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核合格證》到省衛(wèi)生廳進行相應診療科目項下的檢驗項目登記備案。七、醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室的復核（一）省衛(wèi)生廳對通過技術(shù)審核臨床基因擴增實驗室每5年復核一次。醫(yī)療機構(gòu)在技術(shù)審核5年期滿前的3個月內(nèi)，向省衛(wèi)生廳提出復核申請。（二）《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》下發(fā)前已通過衛(wèi)生部或XX省臨床檢驗中心驗收，并取得《臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核合格證》的實驗室（合格有效期為5年），在有效期內(nèi)單位可憑《臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核合格證》原件及復印件到登記注冊的衛(wèi)生行政部門辦理檢驗項目登記備案。醫(yī)療機構(gòu)在驗收合格5年期滿前的3個月內(nèi)，向省衛(wèi)生廳提出復核申請。（三）復核程序參照技術(shù)審核程序執(zhí)行。

衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于印發(fā)《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增管理辦法》的通知衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號各省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生廳局，新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團衛(wèi)生局：為進一步規(guī)范臨床基因擴增檢驗實驗室管理，保證臨床診斷科學、合理，保障患者合法權(quán)益，根據(jù)《醫(yī)療機構(gòu)管理條例》、《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》，我部對《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》（衛(wèi)醫(yī)發(fā)〔2002〕10號）進行了修訂，制定了《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》?，F(xiàn)印發(fā)給你們，請遵照執(zhí)行。醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法第一章總則第一條為規(guī)范醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理，保障臨床基因擴增檢驗質(zhì)量和實驗室生物安全，保證臨床診斷和治療科學性、合理性，根據(jù)《醫(yī)療機構(gòu)管理條例》、《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》和《醫(yī)療技術(shù)臨床應用管理辦法》，制定本辦法。第二條臨床基因擴增檢驗實驗室是指通過擴增檢測特定的DNA或RNA，進行疾病診斷、治療監(jiān)測和預后判定等的實驗室，醫(yī)療機構(gòu)應當集中設(shè)置，統(tǒng)一管理。第三條本辦法適用于開展臨床基因擴增檢驗技術(shù)的醫(yī)療機構(gòu)。第四條衛(wèi)生部負責全國醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室的監(jiān)督管理工作。各省級衛(wèi)生行政部門負責所轄行政區(qū)域內(nèi)醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室的監(jiān)督管理工作。第五條以科研為目的的基因擴增檢驗項目不得向臨床出具檢驗報告，不得向患者收取任何費用。第二章實驗室審核和設(shè)置第六條醫(yī)療機構(gòu)向省級衛(wèi)生行政部門提出臨床基因擴增檢驗實驗室設(shè)置申請，并提交以下材料：責驗收行政部門執(zhí)業(yè)許可證》（一）《醫(yī)療機構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證》復印件；（二）醫(yī)療機構(gòu)基本情況，擬設(shè)置的臨床基因擴增檢驗實驗室平面圖以及擬開展的檢驗項目、實驗設(shè)備、設(shè)施條件和有關(guān)技術(shù)人員資料；（三）對臨床基因擴增檢驗的需求以及臨床基因擴增檢驗實驗室運行的預測分析。第七條省級臨床檢驗中心或省級衛(wèi)生行政部門指定的其他機構(gòu)（以下簡稱省級衛(wèi)生行政部門指定機構(gòu)）負責組織醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室的技術(shù)審核工作。第八條省級臨床檢驗中心或省級衛(wèi)生行政部門指定機構(gòu)應當制訂醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室技術(shù)審核辦法，組建各相關(guān)專業(yè)專家?guī)?，按照《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗工作導則》對醫(yī)療機構(gòu)進行技術(shù)審核。技術(shù)審核辦法報請省級衛(wèi)生行政部門同意后實施。第九條醫(yī)療機構(gòu)通過省級臨床檢驗中心或省級衛(wèi)生行政部門指定機構(gòu)組織的技術(shù)審核的，憑技術(shù)審核報告至省級衛(wèi)生行政部門進行相應診療科目項下的檢驗項目登記備案。第十條省級衛(wèi)生行政部門應當按照《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》和《醫(yī)療機構(gòu)臨床檢驗項目目錄》開展醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗項目登記工作。第十一條基因擴增檢驗實驗室設(shè)置應符合國家實驗室生物安全有關(guān)規(guī)定。第三章實驗室質(zhì)量管理第十二條醫(yī)療機構(gòu)經(jīng)省級衛(wèi)生行政部門臨床基因擴增檢驗項目登記后，方可開展臨床基因擴增檢驗工作。第十三條醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室應當按照《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗工作導則》，開展臨床基因擴增檢驗工作。第十四條醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室人員應當經(jīng)省級以上衛(wèi)生行政部門指定機構(gòu)技術(shù)培訓合格后，方可從事臨床基因擴增檢驗工作。第十五條醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室應當按照《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗工作導則》開展實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制，參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心或指定機構(gòu)組織的實驗室室間質(zhì)量評價。衛(wèi)生部臨床檢驗中心或指定機構(gòu)應當將室間質(zhì)量評價結(jié)果及時通報醫(yī)療機構(gòu)和相應省級衛(wèi)生行政部門。第四章實驗室監(jiān)督管理第十六條省級臨床檢驗中心或省級衛(wèi)生行政部門指定機構(gòu)按照《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗工作導則》對醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室的檢驗質(zhì)量進行監(jiān)測，并將監(jiān)測結(jié)果報省級衛(wèi)生行政部門。第十七條省級以上衛(wèi)生行政部門可以委托臨床檢驗中心或者其他指定機構(gòu)對醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室進行現(xiàn)場檢查?，F(xiàn)場檢查工作人員在履行職責時應當出示證明文件。在進行現(xiàn)場檢查時，檢查人員有權(quán)調(diào)閱有關(guān)資料，被檢查醫(yī)療機構(gòu)不得拒絕或隱瞞。第十八條省級以上衛(wèi)生行政部門指定機構(gòu)對室間質(zhì)量評價不合格的醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室提出警告。對于連續(xù)2次或者3次中有2次發(fā)現(xiàn)臨床基因擴增檢驗結(jié)果不合格的醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室，省級衛(wèi)生行政部門應當責令其暫停有關(guān)臨床基因擴增檢驗項目，限期整改。整改結(jié)束后，經(jīng)指定機構(gòu)組織的再次技術(shù)審核合格后，方可重新開展臨床基因擴增檢驗項目。第十九條對于擅自開展臨床基因檢驗項目的醫(yī)療機構(gòu)，由省級衛(wèi)生行政部門依據(jù)《醫(yī)療機構(gòu)管理條例》第四十七條和《醫(yī)療機構(gòu)管理條例實施細則》第八十條處罰，并予以公告。公告所需費用由被公告醫(yī)療機構(gòu)支付。第二十條醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室出現(xiàn)以下情形之一的，由省級衛(wèi)生行政部門責令其停止開展臨床基因擴增檢驗項目，并予以公告，公告所需費用由被公告醫(yī)療機構(gòu)支付：（一）開展的臨床基因擴增檢驗項目超出省級衛(wèi)生行政部門核定范圍的；（二）使用未經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局批準的臨床檢驗試劑開展臨床基因擴增檢驗的；（三）在臨床基因擴增檢驗中未開展實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制的；（四）在臨床基因擴增檢驗中未參加實驗室室間質(zhì)量評價的；（五）在臨床基因擴增檢驗中弄虛作假的；（六）以科研為目的的基因擴增檢驗項目向患者收取費用的；（七）使用未經(jīng)培訓合格的專業(yè)技術(shù)人員從事臨床基因擴增檢驗工作的。（八）嚴重違反國家實驗室生物安全有關(guān)規(guī)定或不具備實驗室生物安全保障條件的。第五章附則第二十一條本辦法自發(fā)布之日起施行。《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》（衛(wèi)醫(yī)發(fā)〔2002〕10號）同時廢止。

附件：醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則

附件醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則一、臨床基因擴增檢驗實驗室的設(shè)計（一）臨床基因擴增檢驗實驗室區(qū)域設(shè)計原則。原則上臨床基因擴增檢驗實驗室應當設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。這4個區(qū)域在物理空間上必須是完全相互獨立的，各區(qū)域無論是在空間上還是在使用中，應當始終處于完全的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當合并。例如使用實時熒光PCR儀，擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并；采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。各區(qū)的功能是：1.試劑儲存和準備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。2.標本制備區(qū)：核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于涉及臨床樣本的操作，應符合生物安全二級實驗室防護設(shè)備、個人防護和操作規(guī)范的要求。3.擴增區(qū)：cDNA合成、DNA擴增及檢測。4.擴增產(chǎn)物分析區(qū)：擴增片段的進一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。（二）臨床基因擴增檢驗實驗室的空氣流向。臨床基因擴增檢驗實驗室的空氣流向可按照試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)進行，防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前的區(qū)域?？砂凑諒脑噭﹥Υ婧蜏蕚鋮^(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進行。可通過安裝排風扇、負壓排風裝置或其他可行的方式實現(xiàn)。（三）工作區(qū)域儀器設(shè)備配置標準。1.試劑儲存和準備區(qū)。（1）2～8℃和-20℃以下冰箱。（2）混勻器。（3）微量加樣器（覆蓋0.2-1000μl）。（4）可移動紫外燈（近工作臺面）。（5）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭。（6）專用工作服和工作鞋(套)。（7）專用辦公用品。2.標本制備區(qū)。（1）2-8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱。（2）高速離心機。（3）混勻器。（4）水浴箱或加熱模塊。（5）微量加樣器（覆蓋0.2-1000μl）。（6）可移動紫外燈（近工作臺面）。（7）生物安全柜。（8）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾芯）。（9）專用工作服和工作鞋(套)。（10）專用辦公用品。（11）如需處理大分子DNA，應當具有超聲波水浴儀。3.擴增區(qū)。（1）核酸擴增儀。（2）微量加樣器（覆蓋0.2-1000μl），（視情況定）。（3）可移動紫外燈（近工作臺面）。（4）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾芯）。（5）專用工作服和工作鞋。（6）專用辦公用品。4.擴增產(chǎn)物分析區(qū)。視檢驗方法不同而定，基本配置如下：（1）微量加樣器（覆蓋0.2-1000μl）。（2）可移動紫外燈（近工作臺面）。（3）消耗品：一次性手套、加樣器吸頭（帶濾芯）。（4）專用工作服和工作鞋。（5）專用辦公用品。上述各區(qū)域儀器設(shè)備配備為基本配備，實驗室應當根據(jù)自己使用的擴增檢測技術(shù)或試劑的特點，對儀器設(shè)備進行必要的增減。二、臨床基因擴增檢驗實驗室工作基本原則(一)進入各工作區(qū)域應當嚴格按照單一方向進行，即試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。(二)各工作區(qū)域必須有明確的標記，不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品不得混用。(三)不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出。(四)實驗室的清潔應當按試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進行。不同的實驗區(qū)域應當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。(五)工作結(jié)束后，必須立即對工作區(qū)進行清潔。工作區(qū)的實驗臺表面應當可耐受諸如次氯酸鈉的化學物質(zhì)的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應當方便有效。由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關(guān)鍵，因此可使用可移動紫外燈（254nm波長），在工作完成后調(diào)至實驗臺上60～90cm內(nèi)照射。由于擴增產(chǎn)物僅幾百或幾十堿基對（bp），對紫外線損傷不敏感，因此紫外照射擴增片段必須延長照射時間，最好是照射過夜。(六)實驗室的安全工作制度或安全標準操作程序，所有操作符合《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2008）。三、臨床基因擴增檢驗實驗室各區(qū)域工作注意事項(一)試劑儲存和準備區(qū)。貯存試劑和用于標本制備的消耗品等材料應當直接運送至試劑貯存和準備區(qū)，不能經(jīng)過擴增檢測區(qū)，試劑盒中的陽性對照品及質(zhì)控品不應當保存在該區(qū)，應當保存在標本處理區(qū)。(二)標本制備區(qū)。由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，可通過在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件，避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染，加入待測核酸后，必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在傳染危險性的材料，必須在生物安全柜內(nèi)開蓋，并有明確的樣本處理和滅活程序。(三)擴增區(qū)。為避免氣溶膠所致的污染，應