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PAGE17-第4講細(xì)胞工程課標(biāo)要求核心素養(yǎng)1.闡明植物組織培育是在肯定條件下,將離體植物器官、組織和細(xì)胞在相宜的培育條件下誘導(dǎo)形成愈傷組織,并重新分化,最終形成完整植株的過程2.概述植物體細(xì)胞雜交是將不同植物體細(xì)胞在肯定條件下融合成雜合細(xì)胞,繼而培育成新植物體的技術(shù)3.舉例說明植物細(xì)胞工程利用快速繁殖、脫毒、次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)、育種方式有效提高了生產(chǎn)效率4.闡明動(dòng)物細(xì)胞培育是從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織,分散成單個(gè)細(xì)胞后,在相宜的培育條件下讓細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的過程。動(dòng)物細(xì)胞培育是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)5.闡明動(dòng)物細(xì)胞核移植一般是將體細(xì)胞核移入一個(gè)去核的卵母細(xì)胞中,并使重組細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的過程6.闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指通過物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段,使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程7.概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)1.細(xì)胞全能性的物質(zhì)基礎(chǔ),生物生長(zhǎng)的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)等(生命觀念)2.植物細(xì)胞工程的基本操作流程及單克隆抗體的制備過程示意圖等(科學(xué)思維)3.植物細(xì)胞工程的應(yīng)用等(科學(xué)探究)考點(diǎn)一植物細(xì)胞工程技術(shù)及其應(yīng)用1.細(xì)胞工程的概念2.細(xì)胞的全能性(1)含義:具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。(2)物質(zhì)基礎(chǔ):細(xì)胞內(nèi)含有本物種全部的遺傳信息。(3)植物細(xì)胞全能性表達(dá)的條件:具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu),處于離體狀態(tài),供應(yīng)肯定的養(yǎng)分、激素和其他相宜的外界條件。3.植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)(1)植物組織培育技術(shù)①理論基礎(chǔ):植物細(xì)胞具有全能性。②基本過程eq\x(外植體)eq\o(→,\s\up8(脫分化))eq\x(愈傷組織)eq\o(→,\s\up8(再分化))eq\x(胚狀體或叢芽)eq\o(→,\s\up8(發(fā)育))eq\x(植株)③培育條件a.無菌:培育基滅菌、培育材料和培育器械消毒。b.固體培育基:大多由無機(jī)養(yǎng)分成分、有機(jī)養(yǎng)分成分、激素、瓊脂四部分組成。c.光照:脫分化階段不須要光照。d.激素調(diào)控:培育基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例調(diào)控組織培育進(jìn)程。(2)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)①概念:將不同種的植物體細(xì)胞,在肯定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。②原理:體細(xì)胞雜交利用了細(xì)胞膜的流淌性,雜種細(xì)胞培育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。③過程④意義:克服不同種生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、獲得雜種植株。4.植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑①微型繁殖:用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培育技術(shù)。②作物脫毒:選取作物莖尖、根尖等無毒組織進(jìn)行組織培育,獲得脫毒苗的技術(shù)。③人工種子:以植物組織培育得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料,經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子,可以解決某些植物牢固率低、繁殖困難的問題。(2)作物新品種的培育:?jiǎn)伪扼w育種和突變體的利用。(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):即利用植物組織培育技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料和生物堿等。1.激素比例與細(xì)胞分裂分化的關(guān)系(1)適當(dāng)提高生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例簡(jiǎn)單生根。(2)適當(dāng)提高細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比例簡(jiǎn)單生芽。(3)比例適中誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織。如圖所示:2.植物體細(xì)胞雜交后的遺傳物質(zhì)分析(1)遺傳特性:雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì),故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。(2)染色體組數(shù)①染色體組數(shù)=兩種植物體細(xì)胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。②植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株,有幾個(gè)染色體組就稱為幾倍體。③若一植物細(xì)胞含有2x條染色體,2個(gè)染色體組,基因型為Aabb,另一植物細(xì)胞含有2y條染色體,2個(gè)染色體組,基因型為ccDd,則新植株應(yīng)為異源四倍體,其體細(xì)胞中染色體數(shù)為(2x+2y)條,4個(gè)染色體組,基因型為AabbccDd。3.對(duì)不同物種植物體細(xì)胞雜交和有性雜交的比較(1)結(jié)果不同①體細(xì)胞雜交:不管染色體數(shù)、基因組還是染色體組都采納干脆相加。②植物有性雜交:先減半再相加。(2)適用的定律不同①有性生殖過程中符合孟德爾遺傳定律。②植物體細(xì)胞雜交:屬于無性生殖,不符合孟德爾遺傳定律。1.探討人員選取番茄葉片進(jìn)行植物組織培育,制備人工種子,嘗試?yán)眉^及簡(jiǎn)潔的文字寫出其制備流程圖。提示:番茄葉片→葉組織塊eq\o(→,\s\up8(脫分化))愈傷組織eq\o(→,\s\up8(再分化))有生根發(fā)芽實(shí)力的胚狀體結(jié)構(gòu)eq\o(→,\s\up8(細(xì)胞的分裂與分化))人工種子。2.結(jié)合誘變育種從細(xì)胞工程的角度動(dòng)身,簡(jiǎn)述一種培育抗寒香蕉品種的方法及步驟。提示:體細(xì)胞誘變育種。利用誘變劑等方法使香蕉離體培育細(xì)胞發(fā)生基因突變,再利用植物組織培育技術(shù)發(fā)育成完整植株,然后篩選培育出抗寒品種。3.某探討小組不慎做出圖中A、B、C所示的不同的培育結(jié)果,試分析該不同結(jié)果出現(xiàn)的主要緣由。ABC提示:不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素的濃度比例不同。當(dāng)培育基中加入的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素濃度比值等于1時(shí),誘導(dǎo)形成愈傷組織,如A瓶;當(dāng)培育基中加入的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素濃度比值大于1時(shí),誘導(dǎo)愈傷組織形成芽,如B瓶;當(dāng)培育基中加入的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素濃度比值小于1時(shí),誘導(dǎo)愈傷組織形成根,如C瓶??疾橹参锝M織培育過程分析1.(多選)(2024·威海市高三一模)草莓是一種養(yǎng)分價(jià)值較高的水果,深受人們寵愛,但由于草莓是無性繁殖,感染的病毒很簡(jiǎn)單傳給后代,導(dǎo)致產(chǎn)量降低,品質(zhì)變差??蒲腥藛T通過熱處理結(jié)合莖尖培育法,取得了較好的脫毒效果,試驗(yàn)結(jié)果如下表所示(S代表成活率,D代表脫毒率)。下列敘述錯(cuò)誤的是()莖尖長(zhǎng)度(mm)38℃熱處理時(shí)間(d)102030400.3~0.5S:36.7%;D:81.8%S:40.0%;D:83.3%S:30.0%;D:100%S:16.7%;D:100%0.5~0.8S:60.0%;D:66.7%S:60.0%;D:72.2%S:50.0%;D:93.3%S:40.0%;D:100%0.8~1.0S:93.3%;D:57.1%S:85.7%;D:69.2%S:60.0%;D:94.4%S:46.7%;D:92.8%A.莖尖培育法運(yùn)用了植物組織培育技術(shù)B.一般來說,莖尖越小,脫毒率越高C.熱處理時(shí)間越長(zhǎng),成活率越高D.適當(dāng)提高熱處理溫度,脫毒效果會(huì)更好CD[莖尖培育法運(yùn)用了植物組織培育技術(shù),原理是植物細(xì)胞的全能性,A正確;依據(jù)表格中的D值可知,一般來說,莖尖越小,脫毒率越高,B正確;由表格數(shù)據(jù)可知,熱處理時(shí)間越長(zhǎng),成活率越低,C錯(cuò)誤;依據(jù)表格信息,無法確定提高熱處理溫度之后的脫毒效果,D錯(cuò)誤。]2.紫杉醇是從紅豆杉樹皮中提取的高效抗癌物質(zhì),細(xì)胞培育生產(chǎn)紫杉醇是擴(kuò)大紫杉醇來源的重要途徑。如圖為三種紅豆杉細(xì)胞培育過程中細(xì)胞數(shù)量與紫杉醇產(chǎn)量的數(shù)據(jù)圖。(1)以南方紅豆杉葉為原料獲得生產(chǎn)紫杉醇的愈傷組織須要通過細(xì)胞的________,愈傷組織細(xì)胞具有較強(qiáng)的________實(shí)力。這一技術(shù)的勝利實(shí)現(xiàn)了組織培育技術(shù)在一個(gè)重要領(lǐng)域的應(yīng)用,即_____。(2)對(duì)比分析兩個(gè)曲線圖可知:培育后期紫杉醇產(chǎn)量出現(xiàn)下降的緣由可能是_________________;在培育過程中,要不斷通入無菌空氣并進(jìn)行攪拌,其目的是_________________(答出三點(diǎn)即可);與傳統(tǒng)方法獲得紫杉醇相比,利用植物組織培育技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇,具有___________________等優(yōu)點(diǎn)(答出兩點(diǎn)即可)。(3)植物生長(zhǎng)調(diào)整劑在組織培育中具有極其重要的作用,其中赤霉素類植物生長(zhǎng)調(diào)整劑的主要作用是________________________。[解析](1)以南方紅豆杉葉為原料獲得生產(chǎn)紫杉醇的愈傷組織須要通過細(xì)胞的脫分化產(chǎn)生,愈傷組織細(xì)胞具有較強(qiáng)的分裂分化實(shí)力。這一技術(shù)的勝利實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(2)對(duì)比分析兩個(gè)曲線圖可知:培育后期,培育的細(xì)胞數(shù)量最少,同時(shí)隨著培育時(shí)間的延長(zhǎng),某些代謝產(chǎn)物積累等導(dǎo)致紫杉醇產(chǎn)量下降。植物細(xì)胞培育過程須要足夠的氧氣,因此,在培育過程中,要不斷通入無菌空氣并進(jìn)行攪拌,其目的是防止微生物污染,保證O2供應(yīng)足夠,使細(xì)胞與培育液充分接觸。與傳統(tǒng)方法獲得紫杉醇相比,利用植物組織培育技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇,具有產(chǎn)量高、節(jié)約資源、愛護(hù)環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)。(3)赤霉素類植物生長(zhǎng)調(diào)整劑的主要作用是促進(jìn)培育細(xì)胞的伸長(zhǎng)。[答案](1)脫分化分裂分化細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)(2)培育的細(xì)胞數(shù)量最少、某些代謝產(chǎn)物積累等防止微生物污染,保證氧氣供應(yīng)足夠,使細(xì)胞與培育液充分接觸產(chǎn)量高、節(jié)約資源、愛護(hù)環(huán)境(3)促進(jìn)培育細(xì)胞的伸長(zhǎng)考查植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用3.(2024·重慶選擇性考試適應(yīng)性測(cè)試)某探討人員設(shè)計(jì)了下列技術(shù)路途,以期獲得甘藍(lán)和蘿卜體細(xì)胞雜交植株。請(qǐng)回答下列問題:(1)制備原生質(zhì)體時(shí),常用兩種酶處理,分別是________。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是________。原生質(zhì)體融合勝利的標(biāo)記是________。圖中X是________,除了被干脆誘導(dǎo)出芽生根外,還可以通過形成________獲得再生植株。(2)為誘導(dǎo)融合體產(chǎn)生不定芽,通常應(yīng)在培育基中加入兩類植物激素,其中起主要作用的是__________________________________。(3)若想獲得抗鹽植株,可選用融合原生質(zhì)體作為人工誘變的材料,緣由是_________________________________________________________________________________________________________________________________,且需在含較高濃度的NaCl培育基中篩選。[解析](1)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,所以制備原生質(zhì)體,須要用纖維素酶和果膠酶將細(xì)胞壁分解,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是PEG(聚乙二醇)。原生質(zhì)體融合勝利的標(biāo)記是雜種細(xì)胞再次生成細(xì)胞壁;圖中X經(jīng)過離體培育,可以形成試管苗,所以X是愈傷組織,除了被干脆誘導(dǎo)出芽生根外,還可以通過形成胚狀體制成人工種子獲得再生植株。(2)植物組織培育中常加入細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素,當(dāng)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值低時(shí),有利于芽的形成,所以其主要作用的是細(xì)胞分裂素。(3)由于融合原生質(zhì)體包含了兩個(gè)物種的全部遺傳信息,且具有全能性,所以可選用融合原生質(zhì)體作為人工誘變的材料。[答案](1)纖維素酶和果膠酶PEG(聚乙二醇)雜種細(xì)胞再次生成細(xì)胞壁愈傷組織人工種子(2)細(xì)胞分裂素(3)具有分裂、分化實(shí)力,突變頻率高,融合原生質(zhì)體包含了兩個(gè)物種的全部遺傳信息,且具有全能性4.如圖為科研人員用兩種方法繁殖苗木的示意圖,據(jù)圖回答下列問題:(1)③④過程中常用到的激素有________________________。③④⑤中不須要進(jìn)行光照的是過程________________。(2)通過甲、乙兩種途徑獲得的B、C植株的遺傳性狀與A相同,緣由是______________________________________________。(3)某同學(xué)認(rèn)為甲途徑中的①過程包含了乙途徑中的③④過程,你認(rèn)為此說法________(填“正確”或“不正確”),緣由是_____。(4)人工種子中的a、b、c分別相當(dāng)于自然種子中的______。(5)若對(duì)優(yōu)質(zhì)葡萄進(jìn)行擴(kuò)大種植,宜采納的繁殖方式是____(填“甲”或“乙”)途徑;若對(duì)稀有的寶貴花卉進(jìn)行擴(kuò)大種植,宜采納的繁殖方式是________(填“甲”或“乙”)途徑。[解析]甲途徑為枝條的扦插繁殖,在插條的下端生出不定根,枝條上的側(cè)芽發(fā)育為主枝,即可得到完整植株。由于整段枝條沒有脫分化轉(zhuǎn)變?yōu)橛鷤M織,因此途徑甲不包括③過程。利用扦插的方法繁殖后代簡(jiǎn)便易行,并且扦插的葡萄枝條很簡(jiǎn)單成活;稀有的寶貴花卉不適用扦插方法,因?yàn)槟塬@得的枝條很少,因此可取很小一部分組織進(jìn)行組織培育,以獲得大量后代。[答案](1)生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素③(2)都是A經(jīng)過無性生殖得到的(3)不正確③④分別為脫分化、再分化過程,而①過程中的扦插枝條并沒有脫分化變成愈傷組織(4)種皮、胚、胚乳(5)甲乙考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞工程1.動(dòng)物細(xì)胞培育——?jiǎng)游锛?xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)(1)原理:細(xì)胞增殖。(2)過程(3)培育條件①無菌、無毒環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(培育液和培育用具進(jìn)行無菌處理,培育過程加抗生素,定期更換培育液,清除代謝產(chǎn)物))②養(yǎng)分:除糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素之外通常還需加入血清、血漿等一些自然成分。③相宜的溫度:36.5°C±0.5℃,相宜的pH:7.2~7.4。④氣體環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(95%的空氣:其中O2為細(xì)胞代謝必需,5%的CO2:維持培育液的pH))(4)應(yīng)用①生產(chǎn)生物制品;②用于基因工程;③用于檢測(cè)有毒物質(zhì);④用于生理、病理、藥理等方面的探討。2.動(dòng)物細(xì)胞核移植(1)理論基礎(chǔ):動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。(2)分類:胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。(3)基本過程(4)應(yīng)用①加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。②愛護(hù)瀕危物種。③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。④作為異種移植的供體。3.動(dòng)物細(xì)胞融合(1)原理:細(xì)胞膜的流淌性。(2)融合方法:聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電刺激等。(3)意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,也為制造單克隆抗體開拓了新途徑。4.單克隆抗體制備(1)單克隆抗體制備過程(2)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。(3)單克隆抗體的應(yīng)用:作為診斷試劑;制成“生物導(dǎo)彈”;用于治療疾病和運(yùn)載藥物。1.動(dòng)物細(xì)胞培育和核移植時(shí)留意的五個(gè)問題(1)在分散細(xì)胞時(shí),需用胰蛋白酶分散細(xì)胞,不能用胃蛋白酶,因?yàn)槲傅鞍酌缸饔玫南嘁藀H約為1.8,胰蛋白酶作用的相宜pH為7.2~7.8,而多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培育的相宜pH為7.2~7.4。(2)取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培育,一般選用10代以內(nèi)的細(xì)胞,因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型,保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。(3)克隆動(dòng)物是由重組的細(xì)胞經(jīng)培育而來的,該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞,細(xì)胞核基因來源于供應(yīng)細(xì)胞核的親本,其遺傳物質(zhì)來自兩個(gè)親本。(4)克隆動(dòng)物絕大部分性狀與供體動(dòng)物相同,少數(shù)性狀與供應(yīng)去核卵母細(xì)胞的動(dòng)物相同,與代孕動(dòng)物的性狀無遺傳關(guān)系。(5)從生殖方式的角度看,動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)屬于無性生殖,重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵,須要?jiǎng)游锛?xì)胞培育和胚胎工程技術(shù)的支持。2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞膜的流淌性、細(xì)胞增殖細(xì)胞膜的流淌性、細(xì)胞的全能性方法步驟分散成單個(gè)細(xì)胞后誘導(dǎo)融合篩選培育酶解法去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,再生細(xì)胞壁后形成雜種細(xì)胞,經(jīng)植物組織培育成雜種植株誘導(dǎo)方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法物理方法、化學(xué)方法結(jié)果形成雜交細(xì)胞形成雜種植株用途或意義突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。制備單克隆抗體克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。培育植物新品種3.單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析(1)對(duì)動(dòng)物免疫的緣由:B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程,即接觸抗原,增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞,才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,所以與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞事實(shí)上是漿細(xì)胞。(2)雜交瘤細(xì)胞具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅具有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的實(shí)力,還具有骨髓瘤細(xì)胞在體外培育條件下大量增殖的實(shí)力,可以克服單純B淋巴細(xì)胞不能無限增殖的缺點(diǎn),而大量生產(chǎn)單克隆抗體。1.多發(fā)性硬化癥是一種由纖維蛋白滲入大腦引發(fā)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病。科研人員將纖維蛋白作為抗原注射到小鼠體內(nèi),并利用該小鼠制備了抗纖維蛋白的單克隆抗體(5B8),請(qǐng)寫出制備的基本技術(shù)流程。提示:注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲得的B細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞;用特定的選擇培育基進(jìn)行篩選;對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆和抗體檢測(cè);在體外環(huán)境或小鼠腹腔內(nèi),培育篩選后獲得的雜交瘤細(xì)胞;從細(xì)胞培育液或小鼠腹水中提取單克隆抗體5B8。2.動(dòng)物細(xì)胞體外培育時(shí),通常要在培育基中補(bǔ)充肯定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培育影響的試驗(yàn)結(jié)果。血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培育的影響寫出從該圖供應(yīng)的信息可以獲得的正確結(jié)論。(寫出三點(diǎn))提示:(1)有無血清對(duì)正常細(xì)胞培育的影響不同。(2)培育基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培育。(3)培育基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培育影響不大。考查動(dòng)物細(xì)胞培育過程及所需條件1.2019年11月18日上午,中國誕生了第一塊“人造肉”,即“細(xì)胞培育肉”。如圖是“細(xì)胞培育肉”生物制造流程圖,請(qǐng)結(jié)合所學(xué)學(xué)問回答下列問題:(1)生物制造“細(xì)胞培育肉”的第一步,就是要獲得肌肉干細(xì)胞,所謂的“干細(xì)胞”,是指動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留著少數(shù)具有________實(shí)力的細(xì)胞。(2)“細(xì)胞培育肉”生物制造的關(guān)鍵技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)。①進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí),須要用________酶將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞。在相宜環(huán)境中培育,細(xì)胞懸液中的細(xì)胞很快貼附在瓶壁上,稱為________。②在相宜條件下,培育瓶中的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,數(shù)量不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的________。(3)一般的動(dòng)物細(xì)胞培育須要向培育基中添加肯定量的血清,以保證________;還須要添加肯定量的抗生素,以防__________。但從食品平安的角度考慮,在生物制造“細(xì)胞培育肉”時(shí),這兩種成分均不能添加。(4)“細(xì)胞培育肉”生物制造過程中,肌肉細(xì)胞培育須要利用合適的支架體系,請(qǐng)推想其緣由:_________________________________________________________________________________________________________________。[解析](1)動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留著少數(shù)具有分裂和分化實(shí)力的細(xì)胞,這些細(xì)胞叫做干細(xì)胞。(2)①胰蛋白酶或膠原蛋白酶可以將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí),可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞。在相宜環(huán)境中培育,細(xì)胞懸液中的細(xì)胞很快貼附在瓶壁上,稱為貼壁生長(zhǎng)。②當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(3)一般的動(dòng)物細(xì)胞培育須要向培育基中添加肯定量的血清,以保證細(xì)胞順當(dāng)?shù)厣L(zhǎng)增殖;還須要添加肯定量的抗生素,以防培育過程中被污染。(4)“細(xì)胞培育肉”最終目標(biāo)是要得到類似于從動(dòng)物組織中取得的“肌肉”,這就要求細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境也跟體內(nèi)肌肉生長(zhǎng)環(huán)境類似。所以采納支架體系主要就是模擬體內(nèi)肌肉生長(zhǎng)環(huán)境,協(xié)助形成細(xì)胞組織的三維結(jié)構(gòu)。[答案](1)分裂和分化(2)①胰蛋白酶或膠原蛋白貼壁生長(zhǎng)②接觸抑制(3)細(xì)胞順當(dāng)?shù)厣L(zhǎng)增殖培育過程中被污染(4)模擬體內(nèi)肌肉生長(zhǎng)環(huán)境,協(xié)助形成細(xì)胞組織的三維結(jié)構(gòu)考查細(xì)胞核移植技術(shù)及應(yīng)用2.2018年1月25日,中科院神經(jīng)科學(xué)探討所探討團(tuán)隊(duì)利用類似克隆羊“多莉”的體細(xì)胞克隆技術(shù)克隆的獼猴“中中”和“華華”,登上了全球頂尖學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》的封面,該成果標(biāo)記著中國領(lǐng)先開啟了以體細(xì)胞克隆猴作為試驗(yàn)動(dòng)物模型的新時(shí)代。如圖是體細(xì)胞克隆猴的技術(shù)流程圖,請(qǐng)據(jù)圖回答問題。(1)圖中選擇獼猴胚胎期而非成年期的成纖維細(xì)胞進(jìn)行培育,其緣由是___________________________。剛放入培育瓶中的細(xì)胞沉降到瓶底部后首先會(huì)出現(xiàn)________現(xiàn)象。每一次傳代培育時(shí),常利用________酶消化處理,制成細(xì)胞懸液后轉(zhuǎn)入到新的培育瓶中。(2)圖示過程涉及的主要技術(shù)有_________________(答出三點(diǎn)即可)。以體細(xì)胞克隆猴作為試驗(yàn)動(dòng)物模型的顯著優(yōu)勢(shì)之一是同一批克隆猴群的遺傳背景相同,圖中克隆猴的遺傳物質(zhì)主要來自____________。(3)圖中步驟①是克隆猴的技術(shù)難點(diǎn)之一,須要將卵母細(xì)胞培育到________后進(jìn)行去核操作,而后用________方法激活受體細(xì)胞,使其完成分裂和發(fā)育。(4)體細(xì)胞克隆猴的另外一個(gè)技術(shù)難點(diǎn)是猴的體細(xì)胞克隆胚胎發(fā)育差。科學(xué)家發(fā)覺,胚胎發(fā)育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化親密相關(guān)。由此推想,圖中Kdm4dmRNA翻譯產(chǎn)生的酶的作用是______________________。[解析](1)由于胚胎成纖維細(xì)胞增殖實(shí)力更強(qiáng),更易于培育,因此在進(jìn)行核移植時(shí),通常選擇胚胎期的成纖維細(xì)胞進(jìn)行培育。動(dòng)物細(xì)胞培育過程中常出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的特點(diǎn),因此剛放入培育瓶中的細(xì)胞沉降到瓶底部后首先會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象。進(jìn)行傳代培育時(shí),常利用胰蛋白酶消化處理,制成細(xì)胞懸液后轉(zhuǎn)入到新的培育瓶中。(2)圖示過程涉及的主要技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)、早期胚胎培育技術(shù)(或動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù))、胚胎移植技術(shù)。圖中克隆猴是成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核移入卵母細(xì)胞,獲得重組細(xì)胞,經(jīng)過細(xì)胞培育獲得早期胚胎,然后經(jīng)過胚胎移植獲得的,因此其遺傳物質(zhì)主要來自成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核。(3)圖中步驟①體細(xì)胞核移植是克隆猴的技術(shù)難點(diǎn)之一,其詳細(xì)操作為,首先須要將卵母細(xì)胞培育到減數(shù)其次次分裂中期(MⅡ中期)后進(jìn)行去核操作,而后用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞,使其完成分裂和發(fā)育。(4)由于胚胎發(fā)育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化親密相關(guān),為了使胚胎順當(dāng)發(fā)育,須要對(duì)組蛋白進(jìn)行去甲基化操作,因此可推知圖中Kdm4dmRNA翻譯產(chǎn)生的酶的作用是催化組蛋白的去甲基化。[答案](1)胚胎成纖維細(xì)胞增殖實(shí)力更強(qiáng),更易于培育細(xì)胞貼壁胰蛋白(2)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)(或體細(xì)胞核移植技術(shù))、早期胚胎培育技術(shù)(或動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù))、胚胎移植技術(shù)成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核(3)減數(shù)其次次分裂中期(MⅡ中期)物理或化學(xué)(4)催化組蛋白的去甲基化考查動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)及單克隆抗體的制備3.抗PD-L1單克隆抗體能與癌細(xì)胞膜表面的PD-L1特異性結(jié)合,因而具有治療某些癌癥的作用。如圖是制備抗PD-L1單克隆抗體的示意圖,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.在分別B淋巴細(xì)胞前,須要對(duì)小鼠注射PD-L1進(jìn)行免疫B.多孔玻璃板中的細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞和鼠瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞C.圖中細(xì)胞集落a~d既能大量繁殖,又能產(chǎn)生抗體D.圖中細(xì)胞集落a可用于擴(kuò)大化培育生產(chǎn)抗PD-L1單克隆抗體B[本試驗(yàn)的目的是獲得抗PD-L1單克隆抗體,所以在分別B淋巴細(xì)胞前,須要對(duì)小鼠注射PD-L1進(jìn)行免疫,A正確;多孔玻璃板中的細(xì)胞有三種融合細(xì)胞,即B淋巴細(xì)胞和鼠瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞,鼠瘤細(xì)胞和鼠瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞,B錯(cuò)誤;圖中a~d是經(jīng)過篩選的雜交瘤細(xì)胞,所以既能大量繁殖,又能產(chǎn)生抗體,C正確;圖中細(xì)胞集落a與PD-L1抗原反應(yīng)呈陽性,說明能夠產(chǎn)生抗體,可以用于擴(kuò)大化培育生產(chǎn)抗PD-L1單克隆抗體,D正確。]4.(2024·福建省龍巖市高三質(zhì)檢)新型冠狀病毒和SARS病毒都會(huì)造成肺炎。如圖是SARS-CoVS蛋白特異性單克隆抗體的制備過程?;卮鹣铝袉栴}:(1)若只考慮細(xì)胞兩兩融合,圖中甲理論上有________種。(2)已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。鼠的淋巴細(xì)胞有上述兩種途徑,但一般不分裂增殖;鼠的骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑,但能不斷分裂增殖。依據(jù)該原理,在含甲的混合培育液中添加氨基嘌呤________(填“能”或“不能”)篩選出A,緣由是___________________________________________________________________________________。(3)在SARS-CoVS蛋白特異性單克隆抗體的制備過程中,須要用到動(dòng)物細(xì)胞培育和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。一般來說,動(dòng)物細(xì)胞培育須要的條件有_____________(至少答出兩點(diǎn));誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有_______________(至少答出兩種)。(4)SARS-CoVS蛋白單克隆抗體_______(填“能”或“不能”)對(duì)新型冠狀病毒發(fā)揮作用,理由是_______________________________________________________________________________________________________________。[解析](1)只考慮細(xì)胞兩兩融合,甲理論上有3種融合細(xì)胞,包括兩個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合的類型,兩個(gè)已免疫的B細(xì)胞融合的類型,一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞與一個(gè)已免疫B細(xì)胞融合的類型。(2)在含甲的混合培育液中添加氨基嘌呤后,已免疫的B細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞能利用S途徑進(jìn)行DNA合成,但是無法進(jìn)行分裂增殖,骨髓瘤細(xì)胞的D合成途徑被阻斷,所以骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖,只有骨髓瘤細(xì)胞與已免疫的B細(xì)胞融合形成雜種細(xì)胞能利用S途徑合成DNA并進(jìn)行分裂增殖從而存活下來,所以在含甲的混合培育液中添加氨基嘌呤能篩選出雜交瘤細(xì)胞A。(3)動(dòng)物細(xì)胞培育的條件包括以下幾點(diǎn):①無毒、無菌的環(huán)境;②養(yǎng)分物質(zhì):無機(jī)物(無機(jī)鹽、微量元素等),有機(jī)物(糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子等);③血清和血漿(供應(yīng)細(xì)胞生長(zhǎng)必需的養(yǎng)分成分);④相宜的溫度和pH等;誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有物理誘導(dǎo)法、化學(xué)試劑誘導(dǎo)法和生物誘導(dǎo)法。(4)抗體具有特異性,針對(duì)特定的病毒人體會(huì)產(chǎn)生相對(duì)應(yīng)的抗體,故相應(yīng)的SARS-CoVS蛋白單克隆抗體只會(huì)對(duì)SARS這種病毒起作用,不能對(duì)新型冠狀病毒發(fā)揮作用。[答案](1)3(2)能雜交瘤細(xì)胞D途徑被氨基嘌呤阻斷后不能合成DNA,但可通過S途徑合成DNA,不斷分裂增殖(3)無菌、無毒環(huán)境,養(yǎng)分,溫度、pH,氣體環(huán)境PEG、滅活的病毒、電激(4)不能新型冠狀病毒與SARS病毒的抗原不同,SARS-CoVS蛋白單克隆抗體只能與SARS-CoVS蛋白發(fā)生特異性結(jié)合真題體驗(yàn)|感悟高考淬煉考能[新高考·選擇性考試示范]1.(2024·遼寧適應(yīng)性測(cè)試)某課外活動(dòng)小組獲得了一株性狀優(yōu)良的結(jié)球生菜,并利用植物組織培育技術(shù)對(duì)其進(jìn)行快速繁殖。下列有關(guān)敘述正確的是()A.運(yùn)用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒B.為保持結(jié)球生菜的優(yōu)良遺傳性狀,應(yīng)選用花粉進(jìn)行培育C.在誘導(dǎo)生根時(shí),培育基中應(yīng)提高細(xì)胞分裂素的比例和用量D.經(jīng)再分化產(chǎn)生的不定芽可經(jīng)人工薄膜包裝制成人工種子D[運(yùn)用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒,A錯(cuò)誤;由于產(chǎn)生花粉過程中發(fā)生基因分別,故為保持結(jié)球生菜的優(yōu)良遺傳性狀,應(yīng)選用體細(xì)胞進(jìn)行培育,B錯(cuò)誤;在誘導(dǎo)生根時(shí),培育基中應(yīng)提高生長(zhǎng)素的比例和用量,C錯(cuò)誤;用人工薄膜將胚狀體、不定芽等分別包裝可制成人工種子,故經(jīng)再分化產(chǎn)生的不定芽可經(jīng)人工薄膜包裝制成人工種子,D正確。]2.(2024·遼寧適應(yīng)性測(cè)試)為了初步檢測(cè)藥物X和Y的抗癌活性,在細(xì)胞培育板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞,使其貼壁生長(zhǎng),試驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物X或Y,培育過程及結(jié)果如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.細(xì)胞培育液中通常須要加入血清B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)C.比照組中應(yīng)加入等體積的無菌蒸餾水D.依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,可以初步推斷藥物X的抗癌效果較好C[培育動(dòng)物細(xì)胞時(shí),細(xì)胞培育液中通常須要加入血清,A正確;對(duì)于已經(jīng)貼壁生長(zhǎng)的動(dòng)物細(xì)胞,可用胰蛋白酶處理,使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù),B正確;試驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物X或Y,故比照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞砜(溶劑),C錯(cuò)誤;分析試驗(yàn)結(jié)果可知,添加藥物X的那組肝癌細(xì)胞數(shù)目最少,可以初步推斷藥物X的抗癌效果較好,D正確。]3.(2024·山東等級(jí)考)兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種緣由斷裂,形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出,未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理,將一般小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種,過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是()A.過程①需運(yùn)用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞B.過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C.過程③中常用滅活的病
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