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文檔簡(jiǎn)介
《臨床相關(guān)技術(shù)操作規(guī)范?病理學(xué)分冊(cè)》
第1章總則
一、為提高病理學(xué)診斷質(zhì)量,促進(jìn)臨床工作,依據(jù)《中華人民
共和國(guó)執(zhí)業(yè)醫(yī)師法》精神,結(jié)合醫(yī)院病理科工作的特點(diǎn),制定本規(guī)
范。
二、醫(yī)院病理科和承擔(dān)醫(yī)院病理科任務(wù)的醫(yī)學(xué)院校病理教研室
的主要臨床任務(wù)是通過(guò)活體組織病理學(xué)檢查(簡(jiǎn)稱活檢)、細(xì)胞病
理學(xué)檢查(簡(jiǎn)稱細(xì)胞學(xué)檢查)和尸體剖檢(簡(jiǎn)稱尸檢)等作出疾病
的病理學(xué)診斷(或稱病理診斷)。具有一定規(guī)模的病理科,應(yīng)積極
開(kāi)展教學(xué)、培訓(xùn)病理醫(yī)師和科學(xué)研究等項(xiàng)工作。
三、病理學(xué)診斷是病理醫(yī)師應(yīng)用病理學(xué)知識(shí)、有關(guān)相關(guān)技術(shù)和
個(gè)人專業(yè)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),對(duì)送檢的患者標(biāo)本(或稱檢材,包括活體組織、
細(xì)胞和尸體等)進(jìn)行病理學(xué)檢查,結(jié)合有關(guān)臨床資料,通過(guò)分析、
綜合后,作出的關(guān)于該標(biāo)本病理變化性質(zhì)的判斷和具體疾病的診斷。
病理學(xué)診斷為臨床醫(yī)師確定疾病診斷、制定治療解決方案、評(píng)估疾
病預(yù)后和總結(jié)診治疾病經(jīng)驗(yàn)等提供重要的、有時(shí)是決定性的依據(jù),
并在疾病預(yù)防,特別是傳染病預(yù)防中發(fā)揮重要作用。
四、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)(或稱病理診斷報(bào)告)是關(guān)于疾病診斷
的重要醫(yī)學(xué)文書(shū)。當(dāng)涉及醫(yī)、患間醫(yī)療爭(zhēng)議時(shí),相關(guān)的病理學(xué)診斷
報(bào)告書(shū)具有法律意義。病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)應(yīng)由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊(cè)
主治醫(yī)師以上(含主治醫(yī)師)的病理醫(yī)師簽發(fā)。各醫(yī)院可酌情準(zhǔn)予
條件適宜的高年資病理科住院醫(yī)師試行簽署病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。低
年資病理科住院醫(yī)師、病理科進(jìn)修醫(yī)師和非病理學(xué)專業(yè)的醫(yī)師不得
簽署病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。
五、病理學(xué)檢查是臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師為確立疾病診斷而進(jìn)行
的合作行為,是有關(guān)臨床科室與病理科之間特殊形式的會(huì)診。臨床
醫(yī)師和病理醫(yī)師雙方皆應(yīng)認(rèn)真履行各自的義務(wù)和承擔(dān)相應(yīng)的責(zé)任。
六、病理學(xué)檢查申請(qǐng)單是臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師發(fā)出的會(huì)診邀請(qǐng)
單。病理學(xué)檢查申請(qǐng)單的作用是:臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師傳遞關(guān)于患
者的主要臨床信息(包括癥狀、體征、各種輔助檢查結(jié)果和手術(shù)所
見(jiàn)等)、診斷意向和就具體病例對(duì)病理學(xué)檢查提出的某些特殊要求,
為進(jìn)行病理學(xué)檢查和病理學(xué)診斷提供重要的參考資料或依據(jù)。病理
學(xué)檢查申請(qǐng)單是疾病診治過(guò)程中的有效醫(yī)學(xué)文書(shū),各項(xiàng)信息必須真
實(shí),應(yīng)由主管患者的臨床醫(yī)師親自(或指導(dǎo)有關(guān)醫(yī)師)逐項(xiàng)認(rèn)真填
寫(xiě)并簽名。
七、臨床醫(yī)師應(yīng)保證送檢標(biāo)本與相應(yīng)的病理學(xué)檢查申請(qǐng)單合適
的內(nèi)容的真實(shí)性和一致性,所送檢材應(yīng)具有病變代表性和可檢查性,
并應(yīng)是標(biāo)本的全部。
八、患者或患者的授權(quán)人應(yīng)向醫(yī)師提供有關(guān)患者的真實(shí)信息(包
括姓名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信息)。病
理醫(yī)師應(yīng)尊重和保護(hù)患者的隱私?;颊呋蚧颊叩氖跈?quán)人應(yīng)保證其自
送檢材的真實(shí)性、完整性和可檢查性。
九、病理科應(yīng)努力為臨床、為患者提供優(yōu)質(zhì)服務(wù),遵照本規(guī)范
的要求加強(qiáng)科室建設(shè),制訂完善的科室管理制度,并實(shí)施有效的質(zhì)
量監(jiān)控。
十、病理科工作人員應(yīng)恪盡職守,做好本職工作。病理醫(yī)師應(yīng)
及時(shí)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢查和發(fā)出病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū),認(rèn)真對(duì)待臨床醫(yī)師
就病理學(xué)診斷提出的咨詢,必要時(shí)應(yīng)復(fù)查有關(guān)的標(biāo)本和切片,并予
以答復(fù)。病理科相關(guān)技術(shù)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)范的相關(guān)技術(shù)操作規(guī)
程,提供合格的病理學(xué)常規(guī)染色片、特殊染色片和可靠的其他相關(guān)
檢測(cè)結(jié)果,并確保經(jīng)過(guò)相關(guān)技術(shù)流程處理的檢材真實(shí)無(wú)誤。
第2章病理學(xué)檢查常規(guī)
第一節(jié)普通活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)
一、申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收
(一)病理科應(yīng)有專人驗(yàn)收普通活體組織病理學(xué)檢查(常規(guī)活
檢)申請(qǐng)單和送檢的標(biāo)本。
(二)病理科驗(yàn)收人員必須:
1、同時(shí)接受同一患者的申請(qǐng)單和標(biāo)本。
2、認(rèn)真核對(duì)每例申請(qǐng)單與送檢標(biāo)本及其標(biāo)志(聯(lián)號(hào)條或其他寫(xiě)
明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標(biāo)記)是否一致;對(duì)于送檢
的微小標(biāo)本,必須認(rèn)真核對(duì)送檢容器內(nèi)或?yàn)V紙上是否確有組織及其
數(shù)量。發(fā)現(xiàn)疑問(wèn)時(shí),應(yīng)立即向送檢方提出并在申請(qǐng)單上注明情況。
3、認(rèn)真檢查標(biāo)本的標(biāo)志是否牢附于放置標(biāo)本的容器上。
4、認(rèn)真查閱申請(qǐng)單的各本次項(xiàng)目是否填寫(xiě)清楚,包括:①患者
基本情況[姓名、性別、年齡,送檢單位(醫(yī)院、科室)、床位、
門診號(hào)/住院號(hào)、送檢日期、取材部位、標(biāo)本數(shù)量等],②患者臨床
情況[病史(癥狀和體征)、化驗(yàn)/影象學(xué)檢查結(jié)果、手術(shù)(包括內(nèi)
鏡檢查)所見(jiàn)、既往病理學(xué)檢查情況(包括原病理號(hào)和診斷)和臨
床診斷等]。
5、在申請(qǐng)單上詳細(xì)記錄患者或患方有關(guān)人員的明確地址、郵編
及電話號(hào)碼,以便必要時(shí)進(jìn)行聯(lián)絡(luò),并有助于隨訪患者。
(三)驗(yàn)收標(biāo)本人員不得對(duì)申請(qǐng)單中由臨床醫(yī)師填寫(xiě)的各項(xiàng)合適
的內(nèi)容進(jìn)行改動(dòng)。
(四)下列情況的申請(qǐng)單和標(biāo)本不予接收:
1、申請(qǐng)單與相關(guān)標(biāo)本未同時(shí)送達(dá)病理科;
2、申請(qǐng)單中填寫(xiě)的合適的內(nèi)容與送檢標(biāo)本不符合;
3、標(biāo)本上無(wú)有關(guān)患者姓名、科室等標(biāo)志;
4、申請(qǐng)單內(nèi)填寫(xiě)的字跡潦草不清;
5、申請(qǐng)單中漏填重要本次項(xiàng)目;
6、標(biāo)本嚴(yán)重自溶、腐敗、干涸等;
7、標(biāo)本過(guò)小,不能或難以制做切片;
8、其他可能影響病理檢查可行性和診斷準(zhǔn)確性的情況。
病理科不能接收的申請(qǐng)單和標(biāo)本一律當(dāng)即退回,不予存放。
(五)臨床醫(yī)師采取的標(biāo)本應(yīng)盡快置放于盛有固定液(4%中性甲醛,
即10%中性福爾馬林)的容器內(nèi),固定液至少為標(biāo)本體積的5倍。
對(duì)于需作特殊本次項(xiàng)目檢查(如微生物、電鏡、免疫組織化學(xué)、分
子生物學(xué)等)的標(biāo)本,應(yīng)按相關(guān)的相關(guān)技術(shù)要求進(jìn)行固定或預(yù)處理。
(六)病理醫(yī)師只對(duì)病理科實(shí)際驗(yàn)收標(biāo)本的病理診斷負(fù)責(zé)。
(七)病理科應(yīng)建立與送檢方交接申請(qǐng)單和標(biāo)本的手續(xù)制度。具
體交接方式方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。
二、申請(qǐng)單和標(biāo)本的編號(hào)、登記
(一)病理科驗(yàn)收人員應(yīng)在已驗(yàn)收的申請(qǐng)單上注明驗(yàn)收日期并及
時(shí)、準(zhǔn)確編號(hào)(病理號(hào)),并逐項(xiàng)錄入活檢標(biāo)本登記簿或計(jì)算機(jī)內(nèi)。
嚴(yán)防病理號(hào)的錯(cuò)編、錯(cuò)登。
(二)標(biāo)本的病理號(hào)可按年編序,或連續(xù)性(不分年度)編序。
(三)同一病例同一次的申請(qǐng)單、活檢標(biāo)本登記簿(包括計(jì)算機(jī)錄
入)、放置標(biāo)本的容器、組織的石蠟包埋塊(簡(jiǎn)稱蠟塊)及其切片
等的病理號(hào)必須完全一致。
(四)病理科應(yīng)建立驗(yàn)收人員與組織取材人員之間申請(qǐng)單和標(biāo)本
的交接制度。具體交接方式方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。
(五)在病理科內(nèi)移送標(biāo)本時(shí),必須確保安全,嚴(yán)防放置標(biāo)本的容
器傾覆、破損和標(biāo)本的散亂、缺失等。
三、標(biāo)本的預(yù)處理
標(biāo)本驗(yàn)收人員對(duì)已驗(yàn)收的標(biāo)本酌情更換適宜的容器,補(bǔ)充足量
的固定液;對(duì)于體積大的標(biāo)本,值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要
病灶定位的情況下,及時(shí)、規(guī)范地予以剖開(kāi),以便充分固定。
四、標(biāo)本的巨檢、組織學(xué)取材和記錄
對(duì)于核驗(yàn)無(wú)誤的標(biāo)本,應(yīng)按照下列程序進(jìn)行操作:①肉眼檢查標(biāo)本
(巨檢);②切取組織塊(簡(jiǎn)稱取材);③將巨檢和取材情況記錄
于活檢記錄單上(活檢記錄單印于活檢申請(qǐng)單的背面)。巨檢和取
材的相關(guān)技術(shù)操作
參見(jiàn)第3章第四節(jié)。
巨檢和取材時(shí)的注意事項(xiàng):
(一)巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進(jìn)行,應(yīng)配備人員負(fù)責(zé)記錄。
(二)巨檢和取材過(guò)程中,應(yīng)嚴(yán)防污染工作人員和周圍環(huán)境。
(三)標(biāo)本一般應(yīng)經(jīng)適當(dāng)固定后再行取材。已知具有傳染性(例如
結(jié)核病、病毒性肝炎等)的標(biāo)本,應(yīng)在不污染環(huán)境和/或不擴(kuò)散傳
染的原則下,經(jīng)必要的初步巨檢或切開(kāi)后,立即置于盛有足量固定
液的專用容器內(nèi),充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。
(四)病理醫(yī)師在對(duì)每例標(biāo)本進(jìn)行巨檢和取材前,應(yīng)與記錄人員認(rèn)
真核對(duì)該例標(biāo)本及其標(biāo)志與申請(qǐng)單的相關(guān)合適的內(nèi)容是否一致。若
對(duì)申請(qǐng)單填寫(xiě)的合適的內(nèi)容或/和標(biāo)本有疑問(wèn)(例如患者姓名有誤,
標(biāo)本合適的內(nèi)容、數(shù)量、病變特征與申請(qǐng)單填寫(xiě)的情況不符等),
應(yīng)暫行擱置,盡快與送檢方聯(lián)系,查明原因,確保無(wú)誤后,再行巨
檢和取材。必要時(shí),可邀請(qǐng)有關(guān)臨床醫(yī)師共同檢查標(biāo)本和取材。對(duì)
于有疑問(wèn)的標(biāo)本,在消除疑問(wèn)前不得進(jìn)行巨檢和取材,應(yīng)將有關(guān)標(biāo)
本連同其申請(qǐng)單一并暫時(shí)妥存。
(五)病理醫(yī)師進(jìn)行巨檢和取材時(shí),記錄人員應(yīng)根據(jù)病理申請(qǐng)單合
適的內(nèi)容,向巨檢醫(yī)師報(bào)告患者的基本臨床情況、手術(shù)所見(jiàn)、標(biāo)本
情況(采取部位、數(shù)量等)和送檢醫(yī)師的特殊要求等,并如實(shí)、清
楚地將病理醫(yī)師的口頭描述記錄于活檢記錄單上。必要時(shí),應(yīng)在活
檢記錄單上(或另附紙)繪簡(jiǎn)圖顯示巨檢所見(jiàn)和標(biāo)示取材部位。取
材者應(yīng)核對(duì)記錄合適的內(nèi)容。
(六)具有醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)價(jià)值的標(biāo)本可攝影存檔,并酌情妥為保存。
(七)病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材
結(jié)束后,應(yīng)由專人立即對(duì)錄音合適的內(nèi)容進(jìn)行文字整理,記錄于活
檢記錄單上(手錄或用計(jì)算機(jī)錄入、打?。?。有關(guān)的錄音資料應(yīng)保
存至病理診斷報(bào)告書(shū)發(fā)出后兩周。
(八)細(xì)小標(biāo)本取材時(shí),可用伊紅點(diǎn)染并用軟薄紙妥善包裹。
(九)每例標(biāo)本取材前、后,應(yīng)用流水徹底清洗取材臺(tái)面和所有相
關(guān)器物,嚴(yán)防檢材被無(wú)關(guān)組織或其他異物污染,嚴(yán)防細(xì)小檢材被流
水沖失。
(十)巨檢和取材必須按照本規(guī)范的要求進(jìn)行操作(參見(jiàn)第3章第
四節(jié))。對(duì)于由不同部位或不同病變區(qū)域切取的組織塊,應(yīng)在其病
理號(hào)之后再加編次級(jí)號(hào)(例如:一1,-2,-3,....;A,,B,C,...
等)。
(十一)巨檢/取材者和記錄人員應(yīng)相互配合、核查,確保所取組
織塊及其編號(hào)標(biāo)簽準(zhǔn)確地置于用于脫水的容器(脫水盒等)內(nèi)。
(十二)標(biāo)本巨檢和取材后剩余的組織/器官應(yīng)置入適當(dāng)容器內(nèi),
添加適量4%中性甲醛并附有相關(guān)病理號(hào)和患者姓名等標(biāo)志,然后按
取材日期有序地妥為保存。取材剩余的標(biāo)本一般保存至病理診斷報(bào)
告書(shū)發(fā)出后兩周。
(十三)病理醫(yī)師在每批標(biāo)本巨檢和取材后,應(yīng)與記錄人員共同核
對(duì)取材合適的內(nèi)容,并在活檢記錄單/取材工作單上簽名和簽署日
期。
(十四)取材后剩余的病理標(biāo)本屬于污染源,應(yīng)遵照有關(guān)規(guī)定處理。
(十五)巨檢/取材醫(yī)師或記錄人員與制片的相關(guān)技術(shù)人員認(rèn)真
辦理交接手續(xù)。具體交接方式方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。
五、組織切片制備的基本要求
(一)組織制片過(guò)程中,應(yīng)確保切片號(hào)與蠟塊號(hào)一致。
(二)制片工作一般應(yīng)在取材后2個(gè)工作日內(nèi)完成(不含需要脫鈣、
脫脂等特殊處理的標(biāo)本)。
(三)制片完成后,相關(guān)技術(shù)人員應(yīng)檢查制片質(zhì)量,并加貼標(biāo)有本
病理科病理號(hào)的標(biāo)簽。常規(guī)石蠟-HE染色片的優(yōu)良率應(yīng)三95%,優(yōu)
秀率不?35%。不合格切片應(yīng)立即重做。切片質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)第
3章第一節(jié)的附表。
(四)制片過(guò)程發(fā)生意外情況時(shí),有關(guān)相關(guān)技術(shù)人員和相關(guān)技術(shù)室
負(fù)責(zé)人應(yīng)及時(shí)向科主任報(bào)告,并積極設(shè)法予以補(bǔ)救。
(五)制片完成后,相關(guān)技術(shù)人員應(yīng)將所制切片與其相應(yīng)的活檢記
錄單/取材工作單等進(jìn)行認(rèn)真核對(duì),確認(rèn)無(wú)誤后,將切片連同相關(guān)
的活檢申請(qǐng)單/活檢記錄單/取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師。
雙方經(jīng)核對(duì)無(wú)誤后,辦理移交簽字手續(xù)。具體交接方式方法由各醫(yī)
院病理科自行制訂。
(六)常規(guī)活檢組織切片制備相關(guān)技術(shù)的基本要求參見(jiàn)第3章第
一節(jié)。
六、組織切片的光學(xué)顯微鏡檢查和病理診斷
(一)病理醫(yī)師進(jìn)行病理診斷時(shí):
1、應(yīng)認(rèn)真閱讀申請(qǐng)單提供的各項(xiàng)資料,必要時(shí)(尤其是疑難病
例),應(yīng)向有關(guān)臨床醫(yī)師了解更多的臨床信息。
2、應(yīng)認(rèn)真閱讀活檢記錄單中關(guān)于標(biāo)本巨檢的描述;負(fù)責(zé)復(fù)檢的
病理醫(yī)師必要時(shí)親自觀察標(biāo)本,補(bǔ)充或訂正病變描述,指導(dǎo)或親自
補(bǔ)取組織塊。
3、應(yīng)了解患者既往病理學(xué)檢查情況(包括切片的病理診斷和有
關(guān)文字記錄):①由本病理科既往受理者,必須及時(shí)調(diào)閱相關(guān)切片
等病理學(xué)檢查資料;②非本病理科既往受理者,應(yīng)積極協(xié)助患者從
有關(guān)病理科商借相關(guān)切片等病理學(xué)檢查資料參閱。
4、應(yīng)在活檢記錄單上簽署"醫(yī)囑”,告知相關(guān)技術(shù)人員進(jìn)行必
要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關(guān)相關(guān)技術(shù)檢測(cè)。
5、應(yīng)全面、細(xì)致地閱片,注意各種有意義的病變。
(二)進(jìn)行初檢的病理醫(yī)師,應(yīng)提出初診意見(jiàn),送交主檢病理醫(yī)師
復(fù)查。
(三)主檢病理醫(yī)師對(duì)難以明確診斷的病例,可以:
1、提請(qǐng)科內(nèi)上級(jí)醫(yī)師會(huì)診或進(jìn)行科內(nèi)讀片討論(會(huì)診);
2、與有關(guān)臨床醫(yī)師進(jìn)行臨床一病理會(huì)診;
3、必要時(shí)約見(jiàn)患者(尤其門診患者)或患者親屬(或其他患方
相關(guān)人員),了解病情,說(shuō)明病理診斷的疑難情況和延期簽發(fā)病理
學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的原因等;
4、于簽發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)前進(jìn)行科外病理會(huì)診("診斷報(bào)告
前病理會(huì)診”),應(yīng)將各方面會(huì)診意見(jiàn)的原件(或復(fù)印件)作為檔案
資料貼附于有關(guān)患者的活檢記錄單中備查;
5、必要時(shí),建議臨床醫(yī)師重復(fù)活檢,或密切隨查。
(四)主檢病理醫(yī)師根據(jù)常規(guī)切片的鏡下觀察,結(jié)合標(biāo)本巨檢、相
關(guān)相關(guān)技術(shù)檢查結(jié)果、有關(guān)臨床資料和參考病理會(huì)診意見(jiàn)等,作出
病理診斷或提出病理診斷意見(jiàn)(意向),清楚地書(shū)寫(xiě)于活檢記錄單
的有關(guān)欄目中、并親筆簽名。各方會(huì)診意見(jiàn)不一、難以明確診斷時(shí),
主檢醫(yī)師可參考會(huì)診意見(jiàn)酌情診斷,或在病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中將各
方會(huì)診意見(jiàn)列出,供臨床醫(yī)師參考。
(五)對(duì)打印的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū),主檢病理醫(yī)師應(yīng)與活檢記錄單
上的病理診斷文字進(jìn)行核對(duì),并親筆簽名。[參見(jiàn)本節(jié)下文:"八、
常規(guī)活檢病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)及其簽發(fā)”]
七、相關(guān)診斷相關(guān)技術(shù)的選用
病理醫(yī)師可借助于組織化學(xué)染色(包括特殊染色)、免疫組織
化學(xué)染色、電子顯微鏡相關(guān)技術(shù)、分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)、流式細(xì)胞
相關(guān)技術(shù)等相關(guān)診斷相關(guān)技術(shù)檢查提供的佐證,對(duì)某些病例(尤其
是疑難病例)進(jìn)行病理診斷。(參見(jiàn)第4章)
八、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)及其簽發(fā)
(一)病理診斷表述的基本類型
I類:檢材部位/疾病名稱/病變性質(zhì)明確和基本明確的病理
診斷。
II類:不能完全肯定疾病名稱/病變性質(zhì),或是對(duì)于擬診的疾病
名稱/病變性質(zhì)有所保留的病理診斷意向,可在擬診疾病/病變名
稱之前冠以諸如病變可"符合為”、"考慮為”、"傾向?yàn)椤薄?提
示為”、"可能為”、"疑為”、"不能排除(除外)”之類的詞
語(yǔ)。
In類:檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾病(即不能
做出I類或II類病理診斷),只能進(jìn)行病變的形態(tài)描述。
IV類:送檢標(biāo)本因過(guò)于細(xì)小、破碎、固定不當(dāng)、自溶、嚴(yán)重受
擠壓(變形)、被燒灼、干涸等,無(wú)法做出病理診斷。
(二)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的基本合適的內(nèi)容
1、患者的基本情況,包括病理號(hào),姓名,性別,年齡,送檢醫(yī)
院/科室(住院/門診),住院號(hào)/門診號(hào),送檢/收驗(yàn)日期等。
2、巨檢病變和鏡下病變要點(diǎn)描述(一般性病變和細(xì)小標(biāo)本可酌
情簡(jiǎn)述或省略)。
3、與病理診斷相關(guān)相關(guān)技術(shù)的檢查結(jié)果。
4、病理診斷的表述(參見(jiàn)上文"病理診斷表述的基本類型”)。
5、對(duì)于疑難病例或作出II、III類病理診斷的病例,可酌情就病
理診斷及其相關(guān)相關(guān)問(wèn)題附加:①建議(例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、
再做活檢、科外病理學(xué)會(huì)診、密切隨診/隨訪等);②注釋/討論。
6、經(jīng)過(guò)本病理科或/和科外病理會(huì)診的病例,可將各方病理
會(huì)診意見(jiàn)列于該例患者的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中。
(三)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的書(shū)寫(xiě)要求
1、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的文字表述力求嚴(yán)謹(jǐn)、恰當(dāng)、精練、條
理和層次清楚。
2、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)應(yīng)為一式二份,一份交予送檢方,另一份
隨同患者的病理學(xué)檢查申請(qǐng)單/病理學(xué)檢查記錄單一并存檔。主檢
病理醫(yī)師必須在每一份病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)上簽名,不能以個(gè)人印章
代替簽名,不能由他人代為簽名;主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨
認(rèn)。
3、手書(shū)的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)必須二聯(lián)復(fù)寫(xiě),必須文字規(guī)范、字
跡清楚,不得潦草、涂改。
4、手書(shū)和計(jì)算機(jī)打印的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中的關(guān)鍵性文字,例
如"癌"、"瘤”、"陽(yáng)性”、"陰性"和數(shù)字等,要認(rèn)真核對(duì),
不得有誤。
5、計(jì)算機(jī)打印的圖文病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)提供的病變圖象要準(zhǔn)確,
具有典型(代表)性,放大倍數(shù)適當(dāng)。
6、患者的基本情況本次項(xiàng)目必須嚴(yán)格按照送檢臨床醫(yī)師填寫(xiě)的
文字抄寫(xiě)或用計(jì)算機(jī)輸錄于病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中,并認(rèn)真核查無(wú)誤,
簽發(fā)報(bào)告書(shū)的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動(dòng)。
7、病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū),不得向臨床醫(yī)
師和患方人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。
(四)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)送
1、病理科自接受送檢標(biāo)本至簽發(fā)該例病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的時(shí)間,
一般情況下為5個(gè)工作日以內(nèi);
2、由于某些原因(包括深切片、補(bǔ)取材制片、特殊染色、免
疫組織化學(xué)染色、脫鈣、疑難病例會(huì)診或傳染性標(biāo)本延長(zhǎng)固定時(shí)間
等)延遲取材、制片,或是進(jìn)行其他相關(guān)相關(guān)技術(shù)檢測(cè),不能如期
簽發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)時(shí),應(yīng)以口頭或書(shū)面告知有關(guān)臨床醫(yī)師或患
方,說(shuō)明遲發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的原因。
3、病理科應(yīng)有專人發(fā)送病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。住院患者的病理學(xué)
診斷報(bào)告書(shū)應(yīng)發(fā)送至有關(guān)臨床科室。病理科所在醫(yī)院門診患者和外
院患者病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)送方式方法,由各醫(yī)院病理科自行制
訂。
4、病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的經(jīng)收人員(包括患方人員)必須履行簽
收手續(xù)。
5、病理科已發(fā)出的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)被遺失時(shí),一般不予補(bǔ)發(fā);
必要時(shí),經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補(bǔ)發(fā)。
九、資料管理
普通活體組織病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理,有關(guān)規(guī)定參
見(jiàn)本章第五節(jié)。
十、會(huì)診
病理學(xué)會(huì)診是普通活體組織病理學(xué)診斷過(guò)程的重要環(huán)節(jié),有關(guān)
規(guī)定參見(jiàn)本章第六節(jié)。
第二節(jié)手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)
一、概述
(一)手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查(快速活檢)是臨床醫(yī)師
在實(shí)施手術(shù)過(guò)程中,就與手術(shù)解決方案有關(guān)的疾病診斷相關(guān)問(wèn)題請(qǐng)
求病理醫(yī)師快速進(jìn)行的急會(huì)診,尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的
密切合作。
(二)快速活檢要求病理醫(yī)師在很短時(shí)間內(nèi),根據(jù)對(duì)切除標(biāo)本的巨
檢和組織塊快速冷凍切片(或快速石蠟切片)的觀察,向手術(shù)醫(yī)師
提供的參考性病理診斷意見(jiàn)。與常規(guī)石蠟切片的病理診斷相比,快
速活檢會(huì)診具有更多的局限性和誤診的可能性。有的病例難以快速
診斷,需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確診斷。因此,應(yīng)向臨床醫(yī)
師說(shuō)明快速活檢的:①局限性、②適用范圍、③慎用范圍和④不宜
應(yīng)用范圍。
(三)有關(guān)臨床醫(yī)師應(yīng)于手術(shù)前向患者和/或患者授權(quán)人說(shuō)明快
速活檢的意義和局限性等,取得患者和/或患方的知情和理解?;?/p>
者和/或患者授權(quán)人應(yīng)在由醫(yī)院制定的《手術(shù)中快速活檢患方知情
同意書(shū)》簽署意見(jiàn)和簽名。
(四)主持手術(shù)的臨床醫(yī)師應(yīng)在手術(shù)前一天向病理科遞交快速活
檢申請(qǐng)單,填寫(xiě)患者的病史,重要的影象學(xué)、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果和提
請(qǐng)病理醫(yī)師特別關(guān)注的相關(guān)問(wèn)題等。盡可能不在手術(shù)進(jìn)行過(guò)程中臨
時(shí)申請(qǐng)快速活檢。
(五)手術(shù)中快速活檢應(yīng)由經(jīng)過(guò)該項(xiàng)工作訓(xùn)練的主治醫(yī)師以上的
病理醫(yī)師主持。尚不具備相應(yīng)條件的病理科不應(yīng)勉強(qiáng)開(kāi)展手術(shù)中快
速活檢。
(六)負(fù)責(zé)快速活檢的主檢病理醫(yī)師應(yīng)了解患者的①臨床情況,②
手術(shù)所見(jiàn),③既往有關(guān)的病理學(xué)檢查情況。
二、適用范圍
(一)需要確定病變性質(zhì)(如腫瘤或非腫瘤/良性腫瘤或惡性腫
瘤等),以決定手術(shù)解決方案的標(biāo)本。
(二)了解惡性腫瘤的擴(kuò)散情況,包括腫瘤是否浸潤(rùn)相鄰組織、
有無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。
(三)確定腫瘤部位的手術(shù)切緣有無(wú)腫瘤組織殘留。
(四)確認(rèn)切除的組織,例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組
織等。
三、慎用范圍涉及截肢和其他會(huì)嚴(yán)重致殘的根治性手術(shù)切除的
標(biāo)本。需要此類手術(shù)治療的患者,其病變性質(zhì)宜于手術(shù)前通過(guò)常規(guī)
活檢確定。
四、不宜應(yīng)用范圍
(一)疑為惡性淋巴瘤。
(二)過(guò)小的標(biāo)本(檢材長(zhǎng)徑WO.2cm者)。
(三)術(shù)前易于進(jìn)行常規(guī)活檢者。
(四)脂肪組織、骨組織和鈣化組織。
(五)需要依據(jù)核分裂象計(jì)數(shù)判斷良、惡性的軟組織腫瘤。
(六)主要根據(jù)腫瘤生物學(xué)行為特征而不能依據(jù)組織形態(tài)判斷良、
惡性的腫瘤。
(七)已知具有傳染性的標(biāo)本(例如結(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋
病等)。
五、申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號(hào)和登記
手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號(hào)和
登記參照本章第一節(jié)中"一”至"三”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定。
六、標(biāo)本的巨檢、取材和記錄
(一)病理科驗(yàn)收快速活檢申請(qǐng)單和標(biāo)本后,應(yīng)參照本章第一節(jié)
中"四"項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定,立即進(jìn)行標(biāo)本的巨檢、取材和記錄。
(二)主持快速活檢的病理醫(yī)師應(yīng)親自參與標(biāo)本的巨檢和取材
(或指導(dǎo)取材)。
(三)通常選取具有代表性的病變組織1?2塊,需要時(shí),增加取
材塊數(shù)。
七、組織切片的制備
(一)冷凍切片
1、完成冷凍HE染色切片制備的時(shí)間通常應(yīng)為20?25分鐘。
2、恒冷箱切片機(jī)制片:至少應(yīng)于切片前1小時(shí)開(kāi)機(jī)預(yù)冷,冷室
溫度一般為T5?-2CTC。常規(guī)開(kāi)展冷凍切片快速病理學(xué)診斷的病理
科,恒冷箱切片機(jī)宜處于24小時(shí)恒溫待機(jī)狀態(tài)。
3、其他方式方法的冷凍切片制備參見(jiàn)第3章第一節(jié)。
(二)快速石蠟切片
1、完成快速石蠟一HE染色切片的時(shí)間通常為30分鐘。
2、快速石蠟切片的制備方式方法參見(jiàn)第3章第一節(jié)。
(三)制備好的冷凍/快速石蠟-HE染色切片,加貼標(biāo)有本病理科
病理號(hào)的標(biāo)簽后,立即交由主檢病理醫(yī)師進(jìn)行診斷。
八、手術(shù)中快速活檢會(huì)診意見(jiàn)及其簽發(fā)
(一)有條件時(shí)病理科宜由兩位病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病
理診斷意見(jiàn)。對(duì)于病變疑難、手術(shù)切除范圍廣泛和會(huì)嚴(yán)重致殘的手
術(shù)中快速活檢,應(yīng)由兩位高級(jí)稱職的病理醫(yī)師共同簽署會(huì)診意見(jiàn)。
主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。
(二)快速活檢診斷意見(jiàn)一般在收到送檢標(biāo)本后40分鐘內(nèi)發(fā)出;
同一時(shí)間段內(nèi)相繼收到的多例患者標(biāo)本或是同一例患者的多次標(biāo)本,
其發(fā)出報(bào)告的時(shí)間依次類推。對(duì)于疑難病變,可酌情延時(shí)報(bào)告。
(三)對(duì)于難以即時(shí)快速診斷的病變(例如病變不典型、交界性
腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等),主檢病理醫(yī)師應(yīng)向手術(shù)
醫(yī)師說(shuō)明情況,恰如其分地簽發(fā)病理診斷意見(jiàn)或告知需要等待常規(guī)
石蠟切片進(jìn)一步明確病理診斷。
(四)主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見(jiàn),宜以文字形
式報(bào)告(具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定)??焖倩顧z病理診斷意
見(jiàn)報(bào)告書(shū)發(fā)出前應(yīng)認(rèn)真核對(duì)無(wú)誤。
九、冷凍切片后剩余組織的處理
(一)冷凍切片后剩余的冷凍組織(簡(jiǎn)稱"凍對(duì)")和冷凍切片
取材后剩余、未曾冷凍的組織(簡(jiǎn)稱"凍?!保?,均應(yīng)保存,用以
制備常規(guī)石蠟切片,以便與冷凍切片進(jìn)行對(duì)照觀察。
(二)"凍對(duì)”/"凍?!苯M織的蠟塊和切片需與同一病例手
術(shù)后送檢的切除標(biāo)本編為同一病理號(hào),并作出綜合性診斷。
(三)當(dāng)冷凍切片病理診斷意見(jiàn)與其"凍對(duì)”組織的常規(guī)石蠟TE
片的病理診斷不一致時(shí),該例的病理診斷一般應(yīng)以石蠟-HE片診斷
為準(zhǔn)。
十、資料管理
手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理,有關(guān)
規(guī)定參見(jiàn)本章第五節(jié)。
第三節(jié)細(xì)胞病理學(xué)檢查常規(guī)
一、申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號(hào)和登記
(一)病理科應(yīng)參照本章第一節(jié)(常規(guī)活體組織病理學(xué)檢查常規(guī))
中"一”和"二”項(xiàng)的規(guī)定,進(jìn)行細(xì)胞病理學(xué)檢查(細(xì)胞學(xué)檢查)申
請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號(hào)和登記。
(二)用于細(xì)胞學(xué)檢查的標(biāo)本必須新鮮,取材后應(yīng)盡快送至病
理科(或細(xì)胞病理學(xué)室,下同);病理科核驗(yàn)檢材無(wú)誤后,應(yīng)盡快進(jìn)行
涂片和染色。
(三)病理科驗(yàn)收標(biāo)本人員不得對(duì)申請(qǐng)單中由臨床醫(yī)師填寫(xiě)的各
項(xiàng)合適的內(nèi)容進(jìn)行改動(dòng)。
二、細(xì)胞涂片、組織印片和壓片的基本要求
(一)細(xì)胞涂片、組織印片和壓片(參見(jiàn)第3章第二節(jié))。
(二)腫物細(xì)針穿刺物涂片
1、應(yīng)由掌握細(xì)針穿刺相關(guān)技術(shù)的注冊(cè)醫(yī)師或注冊(cè)助理醫(yī)師,按
照細(xì)針穿刺相關(guān)技術(shù)操作常規(guī),親自對(duì)確有適應(yīng)癥且無(wú)禁忌癥的患
者采取穿刺物。
2、適應(yīng)癥:通常為:
(1)淺表腫物:乳腺、甲狀腺、涎腺、淋巴結(jié)、前列腺、皮下軟
組織和骨等。
(2)胸腔腫物:肺、胸膜和縱隔等。
(3)腹腔腫物:肝、胰、腎、腎上腺、腹腔內(nèi)、腹膜后和盆腔內(nèi)
等。
(4)顱內(nèi)腫物。
3、禁忌癥:患者有難以控制的咳嗽、肺動(dòng)脈高壓癥、進(jìn)行性肺
氣腫、出血性體質(zhì)及"暈針史”等。
(三)對(duì)于核驗(yàn)無(wú)誤的送檢標(biāo)本,應(yīng)立即依序進(jìn)行:①涂片、印
片或壓片,②固定和③染色。
三、細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)及其簽發(fā)
(一)細(xì)胞病理學(xué)診斷可為臨床醫(yī)師診斷疾病(尤其是腫瘤)提
供重要參考依據(jù)。
(二)細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)必須由具有主檢資格的注冊(cè)病理醫(yī)
師簽署后發(fā)出。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。
(三)細(xì)胞病理學(xué)診斷表述的基本類型
1、直接表述性診斷:適用于穿刺標(biāo)本的細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告。
根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察的實(shí)際情況,對(duì)于某種疾病/病變做出肯定性(I
類)、不同程度意向性(II類)細(xì)胞學(xué)診斷,或是提供形態(tài)描述性
(Ill類)細(xì)胞學(xué)診斷,或是告知無(wú)法做出(IV類)細(xì)胞學(xué)診斷。[參
考本章第一節(jié)的八(一)項(xiàng):"病理學(xué)診斷表述的基本類型”]
2、間接分級(jí)性診斷:用于查找惡性腫瘤細(xì)胞的診斷。
I級(jí):未見(jiàn)惡性細(xì)胞
II級(jí):查見(jiàn)核異質(zhì)細(xì)胞
Ila:輕度核異質(zhì)細(xì)胞
lib:重度核異質(zhì)細(xì)胞
In級(jí):查見(jiàn)可疑惡性細(xì)胞
IV級(jí):查見(jiàn)高度可疑惡性細(xì)胞
V級(jí):查見(jiàn)惡性細(xì)胞
(四)細(xì)胞病理學(xué)診斷的局限性(假陰性或假陽(yáng)性診斷)
1、假陰性:是指在惡性腫瘤患者的有關(guān)標(biāo)本中未能查見(jiàn)惡性細(xì)
胞。假陰性率一般為10%左右。因此,細(xì)胞病理學(xué)檢查的陰性結(jié)果
并不能否定臨床醫(yī)師的惡性腫瘤診斷。
2、假陽(yáng)性:是指在非惡性腫瘤患者的有關(guān)標(biāo)本中查見(jiàn)了“惡性
細(xì)胞"。假陽(yáng)性率通常W1%。因此,細(xì)胞病理學(xué)診斷應(yīng)密切結(jié)合患
者的臨床資料,對(duì)于臨床上未考慮為惡性腫瘤患者的陽(yáng)性細(xì)胞學(xué)診
斷應(yīng)持慎重態(tài)度。
(五)細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的基本合適的內(nèi)容
1、患者的基本情況本次項(xiàng)目,包括病理號(hào)、姓名、性別、年齡、
送檢醫(yī)院/科室(住院/門診)、住院號(hào)/門診號(hào)、送檢/收驗(yàn)日
期等。
2、細(xì)胞病理學(xué)診斷的表述(參見(jiàn)上項(xiàng)''細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告表
述的基本類型”)。
3、必要時(shí)或條件允許時(shí),可酌情就細(xì)胞病理學(xué)診斷及其相關(guān)相
關(guān)問(wèn)題附加:①某些建議(例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、病
理科外病理學(xué)會(huì)診、密切隨查/隨訪等);②注釋/討論。
4、經(jīng)過(guò)本病理科或/和科外病理會(huì)診的病例,可將各方的細(xì)
胞病理學(xué)診斷意見(jiàn)附于該例的細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中。
(六)細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的書(shū)寫(xiě)要求
1、參照本章第一節(jié)(“常規(guī)活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)”)中“八
(二)"項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定。
2、計(jì)算機(jī)圖文打印的細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)提供的細(xì)胞學(xué)圖象
應(yīng)具有典型(代表)性,放大倍數(shù)適當(dāng)。
(七)細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)送
1、病理科自接受送檢標(biāo)本至簽發(fā)細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的時(shí)間,
一般情況下為1?2個(gè)工作日。
2、因某些原因(包括特殊染色、免疫組化染色、疑難會(huì)診等)
不能如期簽發(fā)細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)時(shí),應(yīng)以口頭或書(shū)面告知有關(guān)
臨床醫(yī)師或患方,說(shuō)明遲發(fā)報(bào)告書(shū)的原因。
3、病理科應(yīng)有專人發(fā)送細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。住院患者的細(xì)
胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)應(yīng)發(fā)送至有關(guān)臨床科室;本院門診患者和外院
患者的細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)送方式方法由各醫(yī)院病理科自行
制定。
4、細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的經(jīng)收人員(包括患方人員)必須履
行病理科規(guī)定的簽收手續(xù)。
5、已由病理科發(fā)出的細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)被遺失時(shí),一般不
予補(bǔ)發(fā);必要時(shí),經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補(bǔ)發(fā)。
四、資料管理
細(xì)胞病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理,有關(guān)規(guī)定參見(jiàn)本章第
四節(jié)。
第四節(jié)病理學(xué)檢查資料的管理
一、概述
(一)常規(guī)活檢、手術(shù)中快速活檢、細(xì)胞病理學(xué)檢查和尸檢等的文字
資料(含電子信息資料)、非文字資料(組織的石蠟包埋塊、切片
等)以及其他相關(guān)資料均為有價(jià)值的醫(yī)學(xué)資料,皆由受理病理學(xué)檢
查的病理科按照本規(guī)范規(guī)定的期限妥為保存。病理科必須設(shè)立病理
檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度(包括病理檢查資料的歸
檔、借用和歸還手續(xù)等),并有專人管理。應(yīng)積極實(shí)行病理學(xué)檢查
資料的計(jì)算機(jī)管理。
(二)各種病理學(xué)檢查的文字資料應(yīng)裝訂成冊(cè)保存。
(三)據(jù)以做出常規(guī)活檢、快速活檢、尸檢病理學(xué)診斷的原始組
織學(xué)切片和查見(jiàn)腫瘤細(xì)胞或可疑腫瘤細(xì)胞的玻片必須妥善保存。未
查見(jiàn)惡性腫瘤細(xì)胞的玻片,于診斷報(bào)告書(shū)發(fā)出后保存2周。
二、患者查詢病理學(xué)檢查資料的期限
(一)門診患者為送檢后15年。
(二)住院患者為送檢后30年。
三、活檢、尸檢大體標(biāo)本的保存期限
(一)活檢:自簽發(fā)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)之日起保存2?4周,具
體保存期限由各醫(yī)院自行規(guī)定。
四、病理學(xué)檢查資料的借用
(一)醫(yī)院必須制訂關(guān)于借用病理學(xué)檢查資料的辦法并嚴(yán)格實(shí)
施。
(二)關(guān)于患方借用病理組織學(xué)切片,應(yīng)注意:
1、患方人員申請(qǐng)借用有關(guān)患者的活檢切片、尸檢切片時(shí),應(yīng)按
照醫(yī)院制定的有關(guān)規(guī)定辦理手續(xù)。
2、申請(qǐng)借用切片的患方人員必須:①出示本人身份證等有效證
件并保留其復(fù)印件;②填寫(xiě)借片申請(qǐng)單并簽名;③支付規(guī)定的借片
押金(待歸還切片時(shí)退還)。
3、病理科據(jù)以作出診斷的原始切片一般不外借,通常借出(或
售出)相關(guān)病例的復(fù)制切片。復(fù)制切片借出(或售出)前,應(yīng)確認(rèn)
該切片的病變與原切片相同或基本相同。
4、患方借出的切片應(yīng)妥善保存,必須在規(guī)定的期限內(nèi)歸還?;?/p>
方借出的切片若有破損、丟失等,應(yīng)按規(guī)定支付賠償金,并承擔(dān)相
應(yīng)責(zé)任。
5、病理科因故不能向患方出借或出售有關(guān)切片時(shí),由雙方協(xié)商
解決病理學(xué)會(huì)診相關(guān)問(wèn)題。病理科可酌情允許患方邀請(qǐng)外院的病理
醫(yī)師前來(lái)病理科閱片;有條件的單位可酌情進(jìn)行遠(yuǎn)程病理會(huì)診。
(三)關(guān)于患方借用細(xì)胞病理學(xué)玻片
1、一個(gè)病例的同一次檢查有多張查見(jiàn)惡性腫瘤細(xì)胞的"陽(yáng)性片”
或"可疑陽(yáng)性片"時(shí),可允許患方借用其中的一張。借用手續(xù)參見(jiàn)
上項(xiàng)(二)。
2、一個(gè)病例僅有一張為查見(jiàn)惡性腫瘤細(xì)胞的"陽(yáng)性片”或"可
疑陽(yáng)性片”時(shí),該陽(yáng)性片或可疑陽(yáng)性片原則上不予外借。其會(huì)診相
關(guān)問(wèn)題由雙方協(xié)商解決。病理科可酌情允許患方邀請(qǐng)外院的病理醫(yī)
師前來(lái)病理科閱片。
(四)關(guān)于借用檢材組織的石蠟包埋塊
1、活檢和尸檢檢材組織的石蠟包埋塊(簡(jiǎn)稱蠟塊)是無(wú)法復(fù)制
的病理學(xué)檢查資料,屬于診斷病理學(xué)的重要基礎(chǔ)檔案,原則上不外
借。必要時(shí),可由病理科向患方提供未經(jīng)染色的切片(通稱白片)。
2、患方外借病理切片會(huì)診時(shí),受理會(huì)診的病理科若確實(shí)需要有
關(guān)病例病理檢材的蠟塊,可由有關(guān)病理科雙方協(xié)商解決。
第五節(jié)病理學(xué)會(huì)診
一、具有一定規(guī)模的病理科應(yīng)定期舉行科內(nèi)病理會(huì)診或讀片討
論會(huì)。
二、積極推動(dòng)建立地域性病理會(huì)診中心。
三、加強(qiáng)臨床一病理會(huì)診。
四、應(yīng)由具有高級(jí)職稱的病理醫(yī)師接受病理科內(nèi)、外的病理
學(xué)會(huì)診。
五、接受外院的病理會(huì)診時(shí),由會(huì)診的病理醫(yī)師簽發(fā)《病理學(xué)
會(huì)診咨詢意見(jiàn)書(shū)》,并在該《意見(jiàn)書(shū)》上寫(xiě)明:"病理醫(yī)師個(gè)人會(huì)
診咨詢意見(jiàn),僅供原病理診斷的病理醫(yī)師參考”。由作出原病理診
斷的病理醫(yī)師自行決定是否采納病理會(huì)診咨詢意見(jiàn)和采納的程度。
做出原診斷的病理科應(yīng)將《病理會(huì)診咨詢意見(jiàn)書(shū)》的原件或其復(fù)印
件貼附于有關(guān)患者的病理檢查記錄單上,一并歸檔。
六、加做相關(guān)相關(guān)技術(shù)檢測(cè)方能作出診斷的會(huì)診病例,會(huì)診醫(yī)
師應(yīng)在《意見(jiàn)書(shū)》中予以說(shuō)明,并向患方進(jìn)行適當(dāng)解釋。
七、對(duì)病理診斷時(shí)間較為長(zhǎng)久病例的會(huì)診,應(yīng)考慮到做出原診
斷時(shí)期的診斷病理學(xué)理論、相關(guān)技術(shù)水平、相應(yīng)病變/疾病的定性
診斷標(biāo)準(zhǔn)和原診斷病理科當(dāng)時(shí)的客觀條件。
八、有條件的病理科可開(kāi)展遠(yuǎn)程病理會(huì)診。
第六節(jié)病理科的基本設(shè)施
一、病理科基本設(shè)施的指導(dǎo)原則
(一)保證病理科完成基本工作任務(wù)。
(二)保護(hù)病理工作人員免受污染。
(三)保護(hù)環(huán)境免受污染。
二、病理科的基本工作空間
(一)病理科的常規(guī)工作需要在下列的各自獨(dú)立的房間內(nèi)進(jìn)行:
1、收發(fā)室(檢材的接收、登記,病理診斷報(bào)告書(shū)的發(fā)放,病理
資料查詢等)
2、巨檢和取材室(檢材的肉眼檢查和切取組織塊,貯存取材后的剩
余檢材)
3、常規(guī)切片前的預(yù)處理室(組織塊的脫水、透明和浸蠟)
4、制片室(石蠟切片/冷凍切片/細(xì)胞學(xué)涂片的制做和染色)
5、病理組織學(xué)診斷室
6、細(xì)胞病理學(xué)診斷(酌情附設(shè)組織穿刺室)
7、病理會(huì)診室
8、病理檔案資料室
9、大體標(biāo)本制作室和陳列室
10、儲(chǔ)藏室
(二)病理標(biāo)本巨檢和取材室
1、便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修
2、室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備
3、室內(nèi)高效通風(fēng)設(shè)施
4、封閉式高效能通風(fēng)柜廚(用于巨檢和取材,應(yīng)便于清洗、消
毒,并安裝足夠照明和紫外線消毒設(shè)備)
5、合于個(gè)人和環(huán)境防污染要求的上、下水相關(guān)系統(tǒng)(包括獨(dú)立
的污水排泄相關(guān)系統(tǒng)和污水處理池)
6、流水沖洗裝置
7、冷水和熱水供給相關(guān)系統(tǒng)
8、標(biāo)本儲(chǔ)存柜(安裝排風(fēng)設(shè)備)
9、隔離服裝(消毒后使用)
10、其他相關(guān)設(shè)備。
(三)常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)/快速制片室
1、排放有毒物質(zhì)的室內(nèi)高效通風(fēng)設(shè)施(用于組織塊和石蠟切片
的人工脫水流程)
2、符合個(gè)人和環(huán)境防污染要求的上、下水相關(guān)系統(tǒng)(包括獨(dú)立
的污水排泄相關(guān)系統(tǒng)和污水處理池)
3、室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備
4、封閉式高效能通風(fēng)柜廚(用于人工脫水流程)
5、實(shí)驗(yàn)臺(tái)
6、脫水設(shè)備:①人工脫水器具或/和②半自動(dòng)或全封閉自動(dòng)脫
水機(jī)
7、組織塊石蠟包埋機(jī)
8、石蠟切片機(jī)
*9.恒溫冷凍切片機(jī)
*10.石蠟快速切片機(jī)[*9和10:兩項(xiàng)皆配備或配備一項(xiàng)]
#11.一次性切片刀及其配套部件
#12.切片刀和磨刀機(jī)[#11和12:兩項(xiàng)皆配備或配備一項(xiàng)]
13、冰箱
14、恒溫箱
15、烤箱
16、有關(guān)試劑和試劑柜
17、天平
18、染色用器具
19、普通光學(xué)顯微鏡(用于染色質(zhì)量控制)
20、其他相關(guān)設(shè)備
(四)特殊染色和免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)室
1、用于染色的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施和染色的常規(guī)設(shè)備[參見(jiàn)上文:
(三)常規(guī)切片的預(yù)處理室和制片室]
2、微波爐或其他抗原修復(fù)設(shè)備
3、有關(guān)試劑和試劑柜
4、其他相關(guān)設(shè)備
(五)病理組織學(xué)診斷室和病理會(huì)診室
1、雙筒顯微鏡(每名病理醫(yī)師配備一臺(tái))
*2、雙頭和/或多頭顯微鏡(用于共覽會(huì)診和培訓(xùn)示教)
*3、計(jì)算機(jī)和打印機(jī)(酌情連接局域網(wǎng),用于病理學(xué)檢查資料
的儲(chǔ)存和調(diào)閱)
*4.顯微攝影設(shè)備,計(jì)算機(jī)圖像分析、電子圖像存儲(chǔ)和放映設(shè)
備[*2?4:具有一定規(guī)模的病理科配置]
5、其他相關(guān)設(shè)備
(六)病理檔案資料室
1、用于儲(chǔ)存切片、蠟塊和文字資料的柜具
2、計(jì)算機(jī)和打印機(jī)(酌情連接局域網(wǎng),用于病理學(xué)檢查資料的
儲(chǔ)存和調(diào)閱)
3、其他相關(guān)設(shè)備
(七)必要的專業(yè)參考書(shū)和基本的專業(yè)期刊(具有一定規(guī)模的病
理科應(yīng)設(shè)立圖書(shū)資料室)
(八)病理大體標(biāo)本制作室和陳列室
1、制作病理大體標(biāo)本的工具
2、其他相關(guān)設(shè)備
(九)辦公室:必要的辦公設(shè)備
(十)儲(chǔ)藏室:必要設(shè)施
(十一)淋浴室:必備設(shè)施
四、細(xì)胞病理學(xué)檢查工作的基本設(shè)施
(一)腫物穿刺取材室:
1、便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修
2、室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備
3、用于實(shí)施穿刺術(shù)的檢查床、椅
4、穿刺用器械和器械柜
5、穿刺用、急救用藥物和藥品柜
6、其他相關(guān)設(shè)備
(二)細(xì)胞學(xué)涂片制片室:
1、用于染色的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施和常規(guī)設(shè)備[參見(jiàn)本節(jié)的三(三)
項(xiàng):"常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)/快速制片室”])
2、可調(diào)速離心機(jī)
3、自動(dòng)細(xì)胞病理學(xué)檢查相關(guān)系統(tǒng)(具有一定規(guī)模的病理科,酌
情)
4、其他相關(guān)設(shè)備
(三)細(xì)胞病理學(xué)診斷室:參見(jiàn)本節(jié)的三(五)項(xiàng)(病理組織學(xué)診
斷室和病理會(huì)診室)。
第三章病理學(xué)基本相關(guān)技術(shù)規(guī)范
第一節(jié)病理組織學(xué)診斷檢材的制備相關(guān)技術(shù)
一、組織的固定
㈠凡需要進(jìn)行病理組織學(xué)檢查的標(biāo)本(器官或組織),于離體
(活體或尸體)后,應(yīng)盡快置放(浸泡)于裝有足夠量固定液的容
器中固定。固定液量應(yīng)為被固定標(biāo)本體積的5~10倍。置放標(biāo)本的容
器大小視標(biāo)本和固定液的體積而定,應(yīng)適當(dāng)大一些。臨床科室切取
的標(biāo)本置放于容器中固定后,應(yīng)盡快送交病理科繼續(xù)固定。未能及
時(shí)、充分固定的干涸或腐敗標(biāo)本不能再進(jìn)行固定和用于制做切片。
㈡常規(guī)固定液為4%中性甲醛(10%中性福爾馬林),應(yīng)預(yù)先多
量配制貯存,以備隨時(shí)使用。小標(biāo)本的固定時(shí)間為4——6小時(shí),大
標(biāo)本為18——24小時(shí)或更久。
㈢根據(jù)病理學(xué)特殊檢查(特殊染色和組織化學(xué)染色、免疫組織
化學(xué)染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等)的需要,應(yīng)選用
其他適宜的固定液進(jìn)行固定[參見(jiàn)后述的"(七)固定液的常用種類和
制備”]。
㈣器官、組織固定的基本方式方法
[另參見(jiàn)本章第四節(jié)(病理標(biāo)本的肉眼檢查和組織學(xué)切片取材相關(guān)
技術(shù))]
1、食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官:依規(guī)范方式方法剪
開(kāi)后,按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上(重點(diǎn)暴露黏膜面或內(nèi)表面的
病變處),并用大頭針將標(biāo)本邊緣處固定于紙板上,然后放入4%中
性甲醛中固定(黏膜面或內(nèi)表面朝向容器的液面,并覆蓋薄層脫脂
棉)。
2、肝、脾:由器官背面,沿其長(zhǎng)軸每間隔l?5~2.0cm縱向平行
剖開(kāi),切成數(shù)片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容
器中,容器底面襯以脫脂棉。應(yīng)避免標(biāo)本彎曲和相互間的疊壓。
3、肺葉:放入固定液中的肺葉漂浮于液面,需在肺表面覆蓋薄
層脫脂棉。必要時(shí)從支氣管注入適量4%中性甲醛。
4、腎:沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面(深達(dá)于腎盞),
再行固定。
5、淋巴結(jié):先用4%中性甲醛固定1小時(shí)后,再沿其長(zhǎng)軸切成
數(shù)片(厚2——3mm),繼續(xù)固定。
6、骨組織:先鋸成小片(若是長(zhǎng)骨應(yīng)作橫向鋸片),在4%中
性甲醛中固定24小時(shí)后,再進(jìn)行脫鈣。
7、微小組織或液體沉淀物:先用拭紙或?yàn)V紙妥為包裹(需用大
頭針扎牢),然后放入專用小盒內(nèi)進(jìn)行中性4%甲醛固定,以防檢材
遺失。
8、凡進(jìn)入固定程序的標(biāo)本必須連帶其正確無(wú)誤的病理檢驗(yàn)號(hào)
(病理號(hào))。
㈤多數(shù)固定液對(duì)人體有害,需要防護(hù),必須在封閉的通風(fēng)條件
下進(jìn)行操作。
⑨組織塊的切取和固定:①由較大標(biāo)本切取用于制作切片的組
織塊(取材)時(shí),應(yīng)與標(biāo)本的斷面平行,組織塊厚度一般為0?3cm(不
應(yīng)?0.5Cn1),面積一般在1——1.5X1——1.5以內(nèi)。②切取組織塊
的形狀,在充分包括肉眼病變的前提下盡量規(guī)則些(例如方形、矩
形、三角形等);由一個(gè)標(biāo)本切取的多塊組織的形狀有所不同,便
于蠟塊與其相應(yīng)切片的核對(duì)。③固定組織塊的固定液量,一般應(yīng)為
組織塊總體積的5~10倍以上。④室內(nèi)常溫(25。C左右)下的固定時(shí)
間為3~24小時(shí);低溫(4。C)下的固定時(shí)間應(yīng)延長(zhǎng)。⑤固定組織塊
的容器要大一些。⑥組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動(dòng)固定液
以利于固定液的滲入。
(七)常用固定液
1、4%中性甲醛(10%中性福爾馬林)固定液
甲醛(40%)100ml
無(wú)水磷酸氫二鈉6.5g
磷酸二氫鈉4.Og
蒸偏水900ml
2、乙醇一甲醛(酒精一福爾馬林,AF)固定液
甲醛(40%)IOOml
95%乙醇900ml
[說(shuō)明]一般組織塊經(jīng)乙醇一甲醛固定1?2小時(shí)后,即可移入95%
乙醇內(nèi)脫水。
3、Carnoy固定液
無(wú)水乙醇60ml
氯仿30ml
冰醋酸IOml
[說(shuō)明]組織化學(xué)染色的常用固定液,組織經(jīng)CarnOy液固定1?2
小時(shí)后,即可移入無(wú)水乙醇中脫水。
4、Zenker固定液
升汞5.Og
重格酸鉀2.5g
硫酸鈉LOg
蒸偏水(加至)IoOmI
[說(shuō)明]配制本液時(shí),先將升汞溶于蒸僧水中、加溫至40?50。C溶
解后,再加入重輅酸鉀,最后加入硫酸鈉,貯存待用。使用前加入
5ml冰醋酸,混合。組織塊需固定12~24小時(shí)。切片染色前,需進(jìn)
行脫汞沉淀處理。
5、Bouin固定液
飽和苦味酸水溶液(約L22%)75ml
甲醛(40%)25ml
冰醋酸5ml
[說(shuō)明]本液臨用時(shí)配制。組織塊置于BOUin液固定12?24小時(shí)即
可(小塊組織只需固定數(shù)小時(shí))。經(jīng)BoUin液固定的組織被苦味酸
染成黃色,可用水洗滌12小時(shí)后進(jìn)入乙醇脫水(兼脫色)。不必將
組織中的黃色除凈(殘存于組織中的苦味酸無(wú)礙染色)
6、過(guò)碘酸一賴氨酸一多聚甲醛固定液(PLP)
A液:賴氨酸1.827g
蒸偏水50ml
0.lmol∕L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)50ml
B液:8%多聚甲醛水溶液IOOml
[說(shuō)明]本液臨用時(shí)配制:取A液3份、B液1份,混合后,加入
過(guò)碘酸鈉,使液體終濃度為2%。組織塊在4。C下固定36~54小時(shí)。
本液對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和抗原性保存較好。
7、B5(醋酸鈉一升汞一甲醛)固定液
無(wú)水醋酸鈉1.25g
升汞6.Og
蒸館水90ml
[說(shuō)明]將以上物質(zhì)混合、溶解,使用前加入甲醛Ion11。本液多用
于固定淋巴組織。染色前應(yīng)進(jìn)行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為B4
固定液(蒸偏水為100ml)o
8、丙酮固定液
冷丙酮(4℃)固定液用于酶組織化學(xué)染色。細(xì)胞標(biāo)本的免疫組化染
色也常用冷丙酮固定10分鐘。
二、常規(guī)石蠟包埋組織切片(常規(guī)切片)的制備
㈠組織塊依序進(jìn)行:①水洗,②脫水,③透明,④浸蠟,⑤包
埋和⑥切片。
㈡組織切片制備及其HE染色過(guò)程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、
石蠟等為易燃、有毒物,必須專人管理,2m以內(nèi)不得有明火,局部
環(huán)境應(yīng)有良好的通風(fēng)和消防設(shè)施。
㈢常規(guī)切片的手工操作(步驟次序和各步驟的持續(xù)時(shí)間)
1、水洗:用流水沖洗已經(jīng)固定的組織塊30min。
2、脫水(常溫下)
(1)乙醇一甲醛(AF)液固定60~120min
(2)80%乙醇60~120min
(3)95%乙醇I60~120min
(4)95%乙醇H60~120min
(5)無(wú)水乙醇I60~120min
(6)無(wú)水乙醇II60~120min
(7)無(wú)水乙醇III60min
[注意事項(xiàng)]①未經(jīng)充分固定的組織不得進(jìn)入脫水程序。②用于脫
水的試劑容積應(yīng)為組織塊總體積的5?10倍以上。③自低濃度乙醇
向高濃度乙醇逐級(jí)移進(jìn)脫水。④脫水試劑應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換(500ml
乙醇可用于500個(gè)組織塊脫水;加入硫酸銅的無(wú)水乙醇變藍(lán)時(shí),提
示需要更換)。⑤較大組織塊的脫水時(shí)間長(zhǎng)于較小者,應(yīng)將兩者分
開(kāi)進(jìn)行脫水。⑥組織置于無(wú)水乙醇內(nèi)的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(以免硬化)。
⑦丙酮脫水性能強(qiáng),會(huì)使組織塊過(guò)縮、硬脆,不宜用以替代無(wú)水乙
醇。
3、透明
(1)二甲苯I20min
(2)二甲苯
II20min
(3)二甲苯
III20min
[注意事項(xiàng)]①二甲苯的容積應(yīng)為組織塊總體積的5?IO倍以上。
②組織塊在二甲苯中透明的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(以防組織硬、脆),并
依不同種類組織及其大小而異;組織呈現(xiàn)棕黃或暗紅色透明即可。
③二甲苯應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換。④組織經(jīng)二甲苯適度處理后不顯透明
時(shí),常提示該組織的固定或脫水不充分,應(yīng)查找原因并妥善處理。
4、浸蠟
(1)石蠟I(45-50oC)60min
(2)石蠟∏(56-58oC)60min
(3)石蠟III(56-58oC)60min
[注意事項(xiàng)]①熔化石蠟必須有專人負(fù)責(zé),必須在熔蠟箱內(nèi)或水浴
中(70。C)進(jìn)行,不得用明火加溫。②熔蠟的容積應(yīng)為組織塊總體
積的5?10倍以上。③組織塊經(jīng)二甲苯適度透明后方可轉(zhuǎn)入浸蠟過(guò)
程,應(yīng)盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。④浸
蠟時(shí)間適宜,過(guò)短時(shí)浸蠟不充分(組織過(guò)軟),過(guò)長(zhǎng)時(shí)組織硬脆。
⑤熔蠟應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換。
5、包埋
(1)先將熔化的石蠟傾入包埋模具中,再用加熱的彎曲鈍頭諼
子輕輕夾取已經(jīng)過(guò)浸蠟的組織塊,使組織塊的最大面或被特別指定
處的組織面向下埋入熔蠟中;應(yīng)將組織塊平正地置放于包埋模具底
面的中央處;包埋于同一蠟塊內(nèi)的多塊細(xì)小組織應(yīng)彼此靠近并位于
同一平面上;腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋(立埋)。
(2)將與組織塊相關(guān)的病理號(hào)小條置入包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。
(3)待包埋模具內(nèi)的熔蠟表面凝固后,即將模具移入冷水中加
速凝固。
(4)從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊(簡(jiǎn)稱蠟快),用刀片
去除組織塊周圍的過(guò)多石蠟(組織塊周圍保留l~2mm石蠟為宜)。
將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長(zhǎng)方形。
(5)將病理號(hào)小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)(編號(hào)應(yīng)清晰可見(jiàn))。
(6)把修整好的蠟塊烙貼在支持器上,以備切片。
(7)使用包埋機(jī)的方式方法按有關(guān)廠商的說(shuō)明書(shū)操作。
(8)注意事項(xiàng)
①應(yīng)將組織塊嚴(yán)格分件包埋。包埋時(shí)一定要首先認(rèn)真核對(duì)組
織塊的病理號(hào)(包括亞號(hào))、塊數(shù)和取材醫(yī)師對(duì)包埋面的要求,準(zhǔn)
確地包入相應(yīng)的病理號(hào)小條。發(fā)生包埋差錯(cuò)時(shí),必須立即與取材醫(yī)
師和病理科當(dāng)班負(fù)責(zé)人取得聯(lián)系,及時(shí)處置。
②必須嚴(yán)防各種異物污染,勿將無(wú)關(guān)組織(包括縫線、紙屑或
其他異物(尤其是硬質(zhì)異物)埋入蠟塊內(nèi)。
③包埋過(guò)程要操作迅速,以免組織塊尚未埋妥前熔蠟?zāi)獭?/p>
④包埋用的熔蠟應(yīng)純凈,熔點(diǎn)適宜。浸蠟I用軟蠟(熔點(diǎn)為
45?5(TC),浸蠟II、III和包埋用蠟均用硬蠟(熔點(diǎn)為56?58T)。
⑤包埋用熔蠟使用前應(yīng)將先靜置沉淀、過(guò)濾。
⑥熔蠟時(shí)不得使用明火,以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應(yīng)?65。α
包埋用的諼子不可加溫過(guò)高,以免燙傷組織。
6、切片
(1)切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時(shí),必須
精心磨備(在低倍顯微鏡下確認(rèn)刀刃無(wú)缺口);使用一次性切片刀
片時(shí),應(yīng)及時(shí)更新。
(2)載玻片必須潔凈、光亮。
(3)將切片刀或刀片安裝在持刀座上(以15。為宜)。
(4)將蠟塊固定于持支持器上,并調(diào)整蠟塊和刀刃至適當(dāng)位置
(刀刃與蠟塊表面呈5。夾角)。
(5)細(xì)心移動(dòng)刀座或蠟塊支持器,使蠟塊與刀刃接觸,旋緊刀
座和蠟塊支持器。
(6)修塊(粗切):用右手勻速旋轉(zhuǎn)切片機(jī)輪,修切蠟塊表面
至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15?20
μmo[注意:對(duì)于醫(yī)囑再次深切片(特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意
義病變而進(jìn)行的深切片),應(yīng)盡量少修塊,以盡量好地獲得有關(guān)病
變的連續(xù)性。]
(7)調(diào)節(jié)切片厚度調(diào)節(jié)器(一般為4-6um),進(jìn)行切片,切
出的蠟片應(yīng)連續(xù)成帶,完整無(wú)缺,厚度適宜(3?5urn)、均勻,無(wú)
刀痕、顫痕、皺折、開(kāi)裂、缺損、松解等。
(8)以專用小諼子輕輕夾取完整、無(wú)刀痕、厚薄均勻的蠟片,
放入伸展器的溫水中(45。C左右),使切片全面展開(kāi)。[注意:必
須水溫適宜、潔凈(尤其是水面);每切完一個(gè)蠟塊后,必須認(rèn)真
清理水面,不得遺留其它病例的組織碎片,以免污染。]
(9)將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經(jīng)3-氨丙基一三乙氧基硅
^(3-aminopropyltriethoxysilane,APES)處理過(guò)的載玻片上(HE
染色時(shí)酌情使用,可省略,必要時(shí))。蠟片應(yīng)置放在載玻片右(或
左)2/3處的中央,留出載玻片左(或右)1/3的位置用于貼附標(biāo)簽。
蠟片與載玻片之間無(wú)氣泡。
(Io)必須立即在置放了蠟片的載玻片一端(待貼標(biāo)簽的一端),
用優(yōu)質(zhì)記號(hào)筆或刻號(hào)筆準(zhǔn)確、清楚標(biāo)記其相應(yīng)的病理號(hào)(包括亞號(hào))。
[注意:必須確保載玻片上的病理號(hào)與相關(guān)組織石蠟包埋塊的病理
號(hào)完全一致,不得錯(cuò)寫(xiě)或漏寫(xiě)病理號(hào)。]
(H)將置放了蠟片的載玻片呈45。C角斜置片刻;待載玻片上
的水分流下后,將其置于烤箱中烘烤(60?62T,30-60min),然
后即可進(jìn)行染色。
(12)注意事項(xiàng)
①組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質(zhì)量直接影響切片制備。
切片過(guò)程中遇到的困難首先應(yīng)注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原
因。
②切片機(jī)的質(zhì)量是制備優(yōu)質(zhì)切片的重要前提。要使用質(zhì)量好的
切片機(jī),規(guī)范地切片,精心維護(hù)切片機(jī)。
③經(jīng)由內(nèi)窺鏡、穿刺等獲取的細(xì)小組織,應(yīng)間斷性連續(xù)切片多
面(一般至少制備6張蠟片,必要時(shí)制備更多張)。需作特殊染色、
免疫組化染色等的病例,可預(yù)制蠟片備用。
④切片人員應(yīng)細(xì)心操作,防范被切片刀具割傷。
㈣常規(guī)切片的自動(dòng)組織處理機(jī)操作(步驟次序和各步驟的持續(xù)
時(shí)間,總計(jì)需要14小時(shí))
1、乙醇一甲醛(AF)固定液2×60min
2、95%乙醇I2×60min
3、95%乙醇H2×60min
4、無(wú)水乙醇I60min
5、無(wú)水乙醇n60min
6、二甲苯I30min
7、二甲苯II30min
8、石蠟I30min
9、石蠟II60min
10、石蠟III90min
11、包埋
(1)手工常規(guī)包埋:參見(jiàn)上述的"㈠手工操作”項(xiàng)。
(2)用組織包埋機(jī)時(shí),按有關(guān)廠商說(shuō)明書(shū)的規(guī)定操作。
13、切片:參見(jiàn)上述的"㈠手工操作”項(xiàng)。
14、注意事項(xiàng)
(1)必須按有關(guān)說(shuō)明書(shū)的規(guī)定,使用和維護(hù)自動(dòng)組織處理機(jī)、
包埋機(jī)、磨刀機(jī)、封蓋玻片機(jī)等儀器等。
(2)要嚴(yán)防因停電、機(jī)械故障等造成的組織塊損壞。一旦發(fā)生
此類事故,必須及時(shí)向科主任報(bào)告,盡快采取應(yīng)急措施妥善處置。
(3)使用自動(dòng)組織處理機(jī)時(shí):①合理設(shè)定的運(yùn)行時(shí)間(充分利
用夜間)。②固定、脫水的環(huán)境溫度不得>3(TC。③乙醇、二甲苯和
熔蠟的容積,要大于組織塊總體積的5?10倍以上,并應(yīng)經(jīng)常過(guò)濾,
保持清潔;應(yīng)經(jīng)常檢查試劑的濃度,及時(shí)更新。④對(duì)于多量組織塊,
可按其大小分批進(jìn)行處理;小塊組織可適當(dāng)縮短處理時(shí)間。
三、快速石蠟包埋組織切片的制備
㈠煮沸固定切片法
1、固定:切取大小適宜(厚度?2mm)的組織塊,盡快置入裝有
5-8ml10%中性4%甲醛的試管中煮沸Imin,然后已入冷水中。
2、脫水
(1)將已經(jīng)煮沸固定的組織塊取出,用刀片將其厚度修切至
<1.5mm,隨即置入盛有5-8ml丙酮的試管中,煮沸2min,然后將
丙酮傾棄。
(2)再向該試管中重新加入5-8ml丙酮并煮沸2min。如此重
復(fù)3-4次。
3、浸蠟:將已經(jīng)丙酮脫水的組織塊由試管中取出,用吸水紙去
除其表面液體,隨即置入75?8(TC熔化的石蠟中,待組織塊下沉、
不再出現(xiàn)氣泡時(shí)(約需30s),即可包埋。
4、包埋、切片和染色。
(1)用熱候子將預(yù)制的蠟塊表面熔化,埋入已經(jīng)浸蠟的組織塊。
(2)待埋入組織塊的蠟塊表面凝固后,即用載玻片輕壓蠟塊表
面片刻,使蠟塊表面平整。
(3)將蠟塊置入冰水中,使其變硬。
(4)迅速切片,裱片后用吸水紙去除載玻片上的水分。
(5)將載玻片用火焰烘干(勿距火焰太近)。
(6)迅速進(jìn)行HE染色。
5、注意事項(xiàng)
(1)為了盡量縮短制片時(shí)間,必須預(yù)先作好有關(guān)準(zhǔn)備工作,備
齊取材用具、試管、固定液、丙酮、酒精燈、火柴(或其他引火器)、
包埋用蠟塊、載玻片和染色試劑等,放在固定部位待用。
(2)全部制片過(guò)程一般在20~25min內(nèi)完成。
(3)制片后剩余組織塊應(yīng)作常規(guī)石蠟包埋切片染色,進(jìn)一步診
斷。
(4)含脂肪較多的組織,須經(jīng)多次丙酮處理。
(5)用于組織固定、脫水、透明的試劑和浸蠟用的石蠟應(yīng)及時(shí)
過(guò)濾、更換。
(6)丙酮、乙醇、二甲苯等為易燃物,進(jìn)行上述各項(xiàng)流程時(shí),
2m距離內(nèi)不得存在明火。加溫脫水和浸蠟過(guò)程必須應(yīng)用隔水溫箱,
不得使用干烤箱操作。
㈡超聲波快速處理儀石蠟切片法(參照有關(guān)廠商的說(shuō)明書(shū)操作)。
四、冷凍組織切片的制備
㈠應(yīng)用恒冷箱切片機(jī)制備切片:是目前最適用方式方法。恒冷
箱切片機(jī)種類較多,應(yīng)嚴(yán)格按有關(guān)廠商的說(shuō)明書(shū)操作。用于切片的
標(biāo)本必須未曾固定。
㈡應(yīng)用開(kāi)放式冷凍切片機(jī)制備切片
1、二氧化碳制冷切片
(1)將組織塊放在冷凍臺(tái)上,滴加OCT或羥甲基纖維素液于
組織塊周圍(將組織塊包埋),使固定在切片機(jī)上的切片刀接近組
織塊表面。
(2)間斷開(kāi)放液態(tài)二氧化碳桶的開(kāi)關(guān),噴凍組織塊和切片刀,
使組織塊凍結(jié)和切片刀制冷。
(3)迅速移動(dòng)切片刀進(jìn)行切片:先將組織塊修平,然后調(diào)節(jié)厚
度至8T2Pm處進(jìn)行切片。
(4)用毛筆將切片展開(kāi),貼附于載玻片上,稍干后,置于冷凍
切片固定液中固定Imin,隨即進(jìn)行HE染色。也可用毛筆將切片托
入水中,再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進(jìn)行染色。
(5)組織塊也可先在4%中性甲醛中煮沸固定Imir1,水洗后再
行冷凍切片。
㈢注意事項(xiàng)
1、制作冷凍切片所需的試劑和設(shè)備等應(yīng)處于隨時(shí)可供使用狀態(tài)。
2、切取的組織塊大小適宜(厚度<2mm),并盡快置于冷凍組織
切片機(jī)上制備切片。
3、調(diào)節(jié)冷凍程度,試
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