檢驗(yàn)科甘油三酯測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-SH-025版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20110701第3頁(yè)共5頁(yè)編寫制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01血清甘油三酯測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗(yàn)申請(qǐng)單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：血清甘油三酯((縮寫TG)測(cè)定；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血脂測(cè)定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2標(biāo)本采集與處理2.1標(biāo)本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2標(biāo)本保存2.2.1接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定1天，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定7天。-20℃可保存數(shù)月；-70℃至少可保存半年；應(yīng)避免標(biāo)本反復(fù)凍溶。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對(duì)保存時(shí)間超過(guò)1天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。抽血前3天內(nèi)避免高脂飲食，24小時(shí)內(nèi)不飲酒。2.3.2不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。EDTANa2(1mg／mL)抗凝。2.1.5抽血前最好停用影響血脂的藥物（如調(diào)脂藥、避孕藥、某些降壓藥、激素等）數(shù)天或數(shù)周，否則應(yīng)記錄用藥情況。2.1.6妊娠后期各項(xiàng)血脂都會(huì)增高，應(yīng)在產(chǎn)后或終止哺乳后3個(gè)月查血才能反映基本血脂水平。3方法原理脂肪酶甘油三酯+H2O甘油+酯肪酸甘油激酶甘油+ATP甘油-3-磷酸+ADP甘油磷酸氧化酶甘油-3-磷酸+O2磷酸二羥丙酮+H2O2過(guò)氧化物酶H2O2+4-氨基安替比林+對(duì)氯苯酚醌染料+H2O醌染料在500nm有最大吸收，顏色的強(qiáng)度與血清中甘油三酯含量成正比。4試劑及其他用品4.1試劑：甘油三酯(GK-GPO-PAP法)試劑盒（貨號(hào)TG6160），由北京利德曼生化股份有限公司出品。4.2試劑盒保存：未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲(chǔ)存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉(cāng)冰箱內(nèi)穩(wěn)定14天。開蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者試劑出現(xiàn)明顯的粉紅色，或空白吸光率>0.1時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無(wú)特殊準(zhǔn)備。4.4試劑盒主要成分：組成濃度緩沖液40mmol/LPH=7.04-氨基安替比林0.25mmol/L酯肪酶>150U/L甘油激酶>0.4U/ml甘油磷酸氧化酶>1.5U/mlATP1mmol/L疊氮鈉0.05%過(guò)氧化物酶>5000U/L對(duì)氯苯酚25mmol/L穩(wěn)定劑5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1校準(zhǔn)品：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校準(zhǔn)液（P/N442600），其甘油三酯濃度值可溯源至美國(guó)疾病預(yù)防與控制中心（CDC）標(biāo)準(zhǔn)參考材料。5.2校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，1個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。5.3校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時(shí)間不限。但在：①更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后，進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.4校準(zhǔn)液重建方法：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校準(zhǔn)液即開即用，無(wú)需特殊準(zhǔn)備。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由Beckman-Coulter公司提供的兩個(gè)不同水平未定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控血清，即開即用，無(wú)需特殊準(zhǔn)備。6.3質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定兩個(gè)水平質(zhì)控血清各一次。6.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。6.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測(cè)。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動(dòng)生化分析儀器。8標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測(cè)定→結(jié)果復(fù)核→報(bào)告。主要分析參數(shù)參見說(shuō)明書。10結(jié)果計(jì)算血清TG濃度（mmol/L）＝×校準(zhǔn)液TG濃度(mmol/L)儀器根據(jù)此公式自動(dòng)給出每個(gè)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果。11檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1結(jié)果的報(bào)告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2報(bào)告范圍：0.0～11.40mmol/L，超過(guò)此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說(shuō)明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測(cè)定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度：批內(nèi)CV<5.0％，總CV<6％；12.2準(zhǔn)確度：以參考方法(VANHANDEL法)定值的血清為校準(zhǔn)品時(shí)，本法測(cè)定結(jié)果與VANHANDEL法基本一致。12.3靈敏度：甘油三酯為2mmol/L時(shí),顯色吸光度A520nm為：0.141-0.186。12.4線性范圍：0.0～11.40mmol/L。12.5方法的有限性及干擾因素12.5.1血清中游離甘油也可參與此測(cè)定反應(yīng)，一般人血清中游離甘油約占甘油三酯的5％，在常規(guī)測(cè)定時(shí)應(yīng)考慮其影響。12.5.2內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸200mg/ml對(duì)測(cè)試結(jié)果無(wú)明顯影響。13參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平13.1參考范圍：成年人血清：0.22-1.80mmol/L。13.2醫(yī)學(xué)決定水平血清TG含量有隨年齡增高的傾向，成年人血清TG合適水平＜1.69mmol/L；邊緣水平1.70mmol/L～2.25mmol/L；甘油三酯高值2.26mmol/L～5.64mmol/L；甘油三酯極高值＞5.64mmol/L14臨床意義14.1原發(fā)性高TG血癥多有遺傳因素，包括家族性高TG血癥與家族性混合型高脂（蛋白）血癥等。繼發(fā)性高TG血癥見于糖尿病、糖原累積病、甲狀腺機(jī)能不足、腎病綜合征、妊娠、口服避孕藥、酗酒等。14.2一般認(rèn)為單獨(dú)高TG不是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，同時(shí)伴以高TC、高LDL-C、低HDL-C等情況時(shí)才有病理意義。目前將血清TG水平作為冠心病的預(yù)防和治療時(shí)的第二目標(biāo)。14.3通常將高脂蛋白血癥分為Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等六型，除Ⅱa型外都有高TG，有的TG可高達(dá)1000mg/dl以上。14.4影響TG水平的因素有：①年齡與性別，TG水平往往隨年齡上升；②長(zhǎng)期高飽合脂肪酸和高熱量飲食；③遺傳因素；④其他，如缺少運(yùn)動(dòng)、腦力勞動(dòng)、精神緊張等可能使TC升高。14.5不應(yīng)憑一次血脂檢測(cè)結(jié)果作出血脂水平異常的診斷，有懷疑時(shí)應(yīng)在兩月內(nèi)進(jìn)行再次或多次測(cè)定，且兩次測(cè)定至少要相隔一周；在判斷是否存在高脂血癥或決定防治措施之前，至少應(yīng)有兩次血脂檢驗(yàn)的記錄。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，審核者對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與血脂其他指標(biāo)和與載脂蛋白等的關(guān)系，TG濃度常與HDL-C呈負(fù)相關(guān)，高甘油三酯的標(biāo)本肉眼可觀察到渾濁或覆蓋奶酪層。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定通常無(wú)威脅生命的‘緊急值’”。17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動(dòng)生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.2生化檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。17.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。17.4標(biāo)本