HIV抗體檢測上崗培訓(xùn)教學(xué)課件

HIV抗體檢測依據(jù)全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范

NationalGuidelineforDetectionofHIV/AIDS（2015年修訂版）全國艾滋病檢測工作管理1990.全國HIV檢測管理規(guī)范（試行）1997.9.全國艾滋病檢測工作規(guī)范2003.5.全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范（試行）

------“規(guī)范”

------“辦法”？2004.8全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2006.6全國艾滋病檢測工作管理辦法

------“辦法”2009.9全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范（修訂版）2015.12全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范（2015年修訂版）

HIV-1新發(fā)感染檢測一章；

4代試劑（抗原抗體聯(lián)合檢測試劑）的檢測流程；

核酸檢測流程；HIV-1核酸檢測報(bào)告和嬰兒艾滋病感染早期診斷檢測報(bào)告

兩章內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)室生物安全

艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理。流行病檢測HIV抗體檢測報(bào)告單、艾滋病病毒抗體檢測數(shù)和陽性人數(shù)統(tǒng)計(jì)報(bào)表、艾滋病職業(yè)暴露個(gè)案登記表和艾滋病防治工作人員職業(yè)暴露事故匯總表；完善了不同的檢測策略獨(dú)立的一章增加了新增補(bǔ)充試驗(yàn)概念取消了主要內(nèi)容2009年版第一章樣品的采集和處理第二章HIV抗體檢測第三章HIV-1抗原檢測

第四章HIV核酸檢測第五章HIV-1耐藥檢測第六章CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞檢測

第七章HIV-1的分離培養(yǎng)

第八章實(shí)驗(yàn)室生物安全第九章艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理2015年版第一章樣品的采集和處理第二章HIV抗體檢測第三章HIV-1新發(fā)感染檢測第四章HIV-1抗原檢測第五章HIV核酸檢測第六章艾滋病病毒感染實(shí)驗(yàn)室檢測策略第七章HIV-1基因型耐藥檢測第八章CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞檢測第九章HIV-1的分離培養(yǎng)

全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范（2015年修訂版）勘誤表1.第4頁，4.3.5中，“時(shí)間不超過24小時(shí)”改為“時(shí)間不超過48小時(shí)”。2.第16頁，5.4.1.1中，第二行“下表”改為“試劑盒規(guī)定的”。3.第29頁，5.2.4.2中，第二行“報(bào)告檢測值，”改為“報(bào)告檢測值；”。4.第30頁，5.3.1.6中，第二行“RNA1033CPs/ml”改為“RNA103CPs/ml”。5.第31頁，6.3中，第五行“150003CPs/ml”改為“15000CPs/ml”。6.第36頁，圖4中，倒數(shù)第二個(gè)框的“無反應(yīng)”下缺少連接報(bào)告HIV抗體陰性P24抗原陰性的箭頭，改為下圖，圖4。7.第37頁，4.2.2中第4行“結(jié)果有反應(yīng)做抗體確證試驗(yàn)”改為“結(jié)果有反應(yīng)做補(bǔ)充試驗(yàn)”；“結(jié)果無反應(yīng)判為抗體陰性”改為“結(jié)果無反應(yīng)判為HIV抗體陰性”。4.3.1.1中，第二行報(bào)告“HIV抗體陰性”改為報(bào)告“HIV-1抗體陰性”。8.第38頁，文字倒數(shù)第一行圖6后添加“此流程也可用于發(fā)光試劑試驗(yàn)”。9.第42頁，6.1中，第二行取消“或EDTA抗凝全血”。10.第42頁，圖10中，倒數(shù)第二個(gè)框內(nèi)刪除“無反應(yīng)”。11.第45頁，圖12中，第三個(gè)框下右邊“無反應(yīng)”改為“有反應(yīng)”。

區(qū)分抗原抗體檢測試劑抗體有反應(yīng)抗原有反應(yīng)抗體有反應(yīng)抗原無反應(yīng)抗體無反應(yīng)抗原無反應(yīng)

抗體無反應(yīng)抗原有反應(yīng)

抗體檢測*

無反應(yīng)

均有反應(yīng)一有反應(yīng)一無反應(yīng)

補(bǔ)充試驗(yàn)HIV-1核酸試驗(yàn)或2~4周后隨訪圖4區(qū)分抗原抗體檢測試劑篩查檢測流程

報(bào)告HIV抗體陰性，HIVP24抗原陰性抗體檢測*均有反應(yīng)一有反應(yīng)一無反應(yīng)

無反應(yīng)第二章HIV抗體檢測范圍本章規(guī)定了HIV抗體的檢測方法、結(jié)果報(bào)告、質(zhì)量控制。適用于各級各類醫(yī)療、疾病預(yù)防控制、檢驗(yàn)檢疫、采供血及衛(wèi)生保健機(jī)構(gòu)?？勺鳛閷IV感染者診斷和監(jiān)測的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

HIV抗體檢測實(shí)驗(yàn)室要求應(yīng)符合《全國艾滋病檢測工作管理辦法（2006年版）》中對檢測實(shí)驗(yàn)室人員、建筑設(shè)施和設(shè)備等條件的要求。應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2008）對II級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）的各項(xiàng)要求。實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制按本規(guī)范相關(guān)章節(jié)規(guī)定執(zhí)行。HIV抗體檢測的目的HIV抗體檢測可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測等。以診斷為目的的檢測是為了確定個(gè)體HIV感染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的體檢等。以血液篩查為目的的檢測是為了防止輸血傳播HIV，包括獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。以監(jiān)測為目的的檢測是為了解不同人群HIV感染率及其變化趨勢，包括各類高危人群、重點(diǎn)人群和一般人群。研究HIV抗體檢測的要點(diǎn)根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略。嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室SOP。結(jié)果判定以試劑盒說明書為標(biāo)準(zhǔn)。篩查試驗(yàn)有反應(yīng)，須做補(bǔ)充試驗(yàn)。篩查試驗(yàn)無反應(yīng)，不應(yīng)做補(bǔ)充試驗(yàn)。篩查及補(bǔ)充試驗(yàn)對象均應(yīng)做好咨詢工作。

補(bǔ)充試驗(yàn)是通過檢測樣本中是否存在艾滋病病毒抗體、抗原或者核酸而確定艾滋病病毒感染的檢測方法?？贵w確證試驗(yàn)（免疫印跡試驗(yàn)，條帶/線性免疫試驗(yàn)））核酸試驗(yàn)（核酸定性和核酸定量試驗(yàn)）。特定條件*下的替代檢測，包括三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、三種快速試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)，免疫層析或免疫滲濾試驗(yàn)。*特定條件：高流行地區(qū)（流行率大于5%）、高危人群（如男男同性戀，吸毒人群）、三種試劑均經(jīng)過使用地區(qū)中心實(shí)驗(yàn)室評價(jià)。我們省暫時(shí)不用此策略

達(dá)到保證措施的必要條件貫徹有關(guān)HIV檢測的法規(guī)有效的檢測方法和檢測試劑常規(guī)質(zhì)量控制和質(zhì)量保證艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室檢測信息上報(bào)于每月5號前上報(bào)上一個(gè)月實(shí)驗(yàn)室檢測數(shù)據(jù)至艾滋病綜合信息管理系統(tǒng)和艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)。<<艾滋病綜合防治數(shù)據(jù)信息管理手冊>>（2011年版）附件17未開展網(wǎng)絡(luò)直報(bào)的單位，由縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)收集信息后統(tǒng)一上報(bào)。HIV感染的實(shí)驗(yàn)診斷檢測方法HIV抗體檢測，HIV-1抗原檢測，HIV核酸檢測，HIV-1分離培養(yǎng)。HIV抗體檢測檢測時(shí)間：窗口期兩個(gè)階段（篩查和確證）三個(gè)程序（篩查－復(fù)檢－確證）六種標(biāo)本（全血、血清，血漿，口腔黏膜滲出液，尿液，濾紙干血斑。）人類免疫缺陷病毒未經(jīng)抗病毒治療的病人HIV感染到死亡的自然史HIV感染后的血清學(xué)動(dòng)態(tài)HIV抗原人IgG感染人IgM天周月年HIVRNAP24Ag常規(guī)HIV抗體檢測的方法一、篩查方法1.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA/EIA）2.化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)3.快速檢測（RT）及其它檢測試驗(yàn)

明膠顆粒凝集試驗(yàn)（PA）免疫滲濾試驗(yàn)免疫層析試驗(yàn)檢測抗體聯(lián)合檢測抗原抗體

酶標(biāo)免疫技術(shù)(EIA)

人員培訓(xùn)

◎ELISA原理；

◎臨床意義；

◎熟悉檢測技巧，

◎熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；

◎熟悉檢測儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識。

◎二、抗體確證試驗(yàn)免疫印跡試驗(yàn)（WesternBlot)條帶/線性免疫試驗(yàn)（RIPA/ lia）其他方法可用于確證的特定條件下的三種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗(yàn)或酶聯(lián)加快速試驗(yàn)，免疫層析和免疫滲濾試驗(yàn)。每一代HIV試劑實(shí)驗(yàn)原理

固相載體血清樣本YY第一代,第二代結(jié)合物微孔板HIV抗原抗-人IgG酶抗體每一代HIV試劑實(shí)驗(yàn)原理

固相載體血清抗體YYY第一代,第二代第三代結(jié)合物微孔板HIV抗原抗-人IgG酶抗體每一代HIV試劑實(shí)驗(yàn)原理

固相載體血清抗體YYYYYY第一代第二代第三代第四代結(jié)合物微孔板HIV抗原抗-人IgG酶抗體抗-p24單抗HIV“窗口期”第一代HIVAb:6-8星期HIV“窗口期”第一代HIVAb:6-8星期

第二代HIVAb:4-5星期HIV“窗口期”第一代HIVAb:6-8星期

第二代HIVAb:4-5星期第三代HIVAb:±3星期第四代HIVAb/Ag:±2星期HIV“窗口期”第一代HIVAb:6-8星期

第二代HIVAb:4-5星期第三代HIVAb:±3星期

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)——加底物顯色，用酶標(biāo)儀測定結(jié)果?；瘜W(xué)發(fā)光——加發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測定結(jié)果。有效試驗(yàn)的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規(guī)定

明膠顆粒凝集試驗(yàn)（PA）：是HIV抗體檢測的一種簡便方法。將HIV抗原致敏的明膠顆粒，與待檢樣品作用。當(dāng)待檢樣品含有HIV抗體時(shí)，明膠顆粒與抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，根據(jù)凝集情況判讀結(jié)果。PA試劑有兩種:同時(shí)檢測HIV-1和HIV-2抗體以及分別檢測HIV-1和HIV-2抗體。有效試驗(yàn)的陰性和陽性對照質(zhì)控，需符合試劑盒的規(guī)定。凝集試驗(yàn)與ELISA的原理比較ELISAColor凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)與ELISA操作步驟的比較ELISA凝集試驗(yàn)加入樣品和稀釋液第一步反應(yīng)洗滌洗滌第二步：酶反應(yīng)顯色第三步：加入底物結(jié)果判讀孵育凝集圖像

免疫滲濾試驗(yàn)：斑點(diǎn)ELISA和斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn)：均以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原點(diǎn)狀或線狀固定在膜上，加待檢樣品，利用微孔濾膜的可濾過性，使抗原抗體反應(yīng)。陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)或條帶。有效試驗(yàn)的質(zhì)控點(diǎn)必須顯色。免疫層析試驗(yàn)：以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原線狀固定在膜上，待檢樣品沿著固相載體遷移，陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶。有效試驗(yàn)的質(zhì)控帶必須顯色。反應(yīng)時(shí)間嚴(yán)格按試劑盒說明書要求執(zhí)行。

結(jié)果報(bào)告篩查報(bào)告：使用附表1（HIV抗體篩查檢測報(bào)告）篩查試驗(yàn)無反應(yīng)報(bào)告為“HIV抗體陰性”；有反應(yīng)必須進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢兩次檢測均無反應(yīng)報(bào)告為“HIV抗體陰性”，復(fù)檢檢測均有反應(yīng)或一個(gè)有反應(yīng)一個(gè)無反應(yīng)需進(jìn)行“補(bǔ)充試驗(yàn)”；報(bào)告為“HIV感染待確定”，不能出具陽性報(bào)告。HIV抗體篩查報(bào)告需由一名檢驗(yàn)人員和一名審核者簽字

確證報(bào)告：使用附表2（HIV抗體確證檢測報(bào)告）。符合HIV-1抗體陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV-1抗體陽性”；符合HIV-2抗體陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV-2抗體陽性”；并按規(guī)定做好檢測后咨詢和疫情報(bào)告。符合HIV抗體陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV抗體陰性”。如疑似“窗口期”感染，建議進(jìn)一步做HIV核酸檢測或2-4周后隨訪，盡早明確診斷。符合HIV抗體不確定判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV抗體不確定”，在備注中應(yīng)注明“2-4周后復(fù)檢”或盡快做核酸檢測。

HIV抗體確證檢測報(bào)告應(yīng)在收到樣品后的7個(gè)工作日內(nèi)發(fā)出。

特定條件的用于確證的三種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗(yàn)或酶聯(lián)加快速試驗(yàn)報(bào)告。見附表4。我們省暫時(shí)不用此策略質(zhì)量控制：李向忠老師

范圍：本章規(guī)定了艾滋病實(shí)驗(yàn)室的檢測策略及結(jié)果報(bào)告。疫情監(jiān)測相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告；臨床診斷相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告；血液篩查相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告。

第六章艾滋病病毒感染實(shí)驗(yàn)室檢測策略

疫情監(jiān)測相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告試劑-1有反應(yīng)無反應(yīng)試劑-2有反應(yīng)無反應(yīng)報(bào)告HIV抗體陽性報(bào)告HIV抗體陰性

圖1

HIV匿名無關(guān)聯(lián)檢測流程情況一：HIV匿名無關(guān)聯(lián)檢測圖1情況二：實(shí)名關(guān)聯(lián)檢測，需采取臨床診斷相關(guān)檢測策略及結(jié)果報(bào)告。

情況一：使用抗體檢測試劑的檢測流程圖2臨床診斷相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告試劑-1有反應(yīng)無反應(yīng)試劑1雙份或雙孔檢測或兩種試劑*均有反應(yīng)一有反應(yīng),一無反應(yīng)均無反應(yīng)

補(bǔ)充試驗(yàn)報(bào)告HIV抗體陰性

圖2使用抗體檢測試劑的檢測流程

*兩種試劑可以是原有試劑加另一種試劑，也可以是兩種不同試劑。情況二：使用抗原抗體檢測試劑的檢測流程又分兩種情形

用不能區(qū)分抗原抗體的試劑進(jìn)行初篩見圖3。結(jié)果無反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性、HIV-1p24抗原陰性”；結(jié)果有反應(yīng)，不能出具陽性報(bào)告，必須進(jìn)入復(fù)檢試驗(yàn)。對初篩有反應(yīng)的樣品，用抗體檢測試劑進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)，結(jié)果有反應(yīng)，進(jìn)行抗體補(bǔ)充試驗(yàn)；結(jié)果無反應(yīng)，2-4周后隨訪或進(jìn)行HIV-1核酸試驗(yàn)、HIV-1P24抗原試驗(yàn)，（HIV-1核酸檢測見本章4.3.2，HIV-1P24抗原試驗(yàn)見第四章）。

臨床診斷相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告不區(qū)分抗原抗體的檢測試劑有反應(yīng)無反應(yīng)抗體檢測*有反應(yīng)無反應(yīng)補(bǔ)充試驗(yàn)HIV-1核酸試驗(yàn)或P24抗原試驗(yàn)或2-4周后隨訪報(bào)告HIV抗體陰性P24抗原陰性圖3使用不區(qū)分抗原抗體聯(lián)合檢測試劑的檢測流程用可區(qū)分抗原抗體的試劑進(jìn)行初篩見圖4。抗原抗體結(jié)果均無反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性、HIVp24抗原陰性”；抗原抗體結(jié)果均有反應(yīng)，進(jìn)行抗體復(fù)檢檢測，結(jié)果有反應(yīng)，做補(bǔ)充試驗(yàn)，結(jié)果無反應(yīng)，進(jìn)行HIV核酸試驗(yàn)或2-4周后隨訪；抗體有反應(yīng)抗原無反應(yīng)，進(jìn)行抗體復(fù)檢檢測，結(jié)果有反應(yīng)做抗體確證試驗(yàn)，結(jié)果無反應(yīng)判為抗體陰性、P24抗原陰性；抗體無反應(yīng)抗原有反應(yīng)，2-4周后隨訪或進(jìn)行HIV核酸或抗原試驗(yàn)。

臨床診斷相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告區(qū)分抗原抗體檢測試劑抗體有反應(yīng)抗原有反應(yīng)抗體有反應(yīng)抗原無反應(yīng)抗體無反應(yīng)抗原無反應(yīng)

抗體無反應(yīng)抗原有反應(yīng)

抗體檢測*

無反應(yīng)

均有反應(yīng)一有反應(yīng)一無反應(yīng)

補(bǔ)充試驗(yàn)HIV-1核酸試驗(yàn)或2~4周后隨訪圖4區(qū)分抗原抗體檢測試劑篩查檢測流程

報(bào)告HIV抗體陰性，HIVP24抗原陰性抗體檢測*均有反應(yīng)一有反應(yīng)一無反應(yīng)

無反應(yīng)

*抗體檢測：試劑1雙份或雙孔檢測或原有試劑加另一種試劑

補(bǔ)充試驗(yàn)檢測策略補(bǔ)充試驗(yàn)分為抗體確證試驗(yàn)和HIV-1核酸試驗(yàn)?？贵w確證試驗(yàn)免疫印跡試劑（WB）條帶/線性免疫試驗(yàn)（RIBA/LIA），

特定條件下的替代檢測（三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、三種快速試驗(yàn)或者酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)），免疫層析或免疫滲濾試驗(yàn)。HIV-1核酸試驗(yàn)定性試驗(yàn)定量試驗(yàn)

抗體確證試驗(yàn)檢測流程免疫印跡試驗(yàn)(WB/RIBA)不確定陰性陽性出現(xiàn)HIV-2指示帶圖5免疫印跡試驗(yàn)流程核酸試驗(yàn)或2-4周后隨訪報(bào)告HIV-1抗體陰性報(bào)告HIV-1抗體陽性根據(jù)情況進(jìn)一步檢測HIV-2

如果使用以檢測HIV-1抗體為主并含HIV-2指示帶的抗體確證試劑，當(dāng)出現(xiàn)HIV-2指示帶，根據(jù)情況進(jìn)一步檢測HIV-2。HIV-2檢測有兩種方法，使用能夠區(qū)分HIV-1和HIV-2的抗體確證試劑，根據(jù)試劑盒說明書直接判定結(jié)果。使用以檢測HIV-1抗體為主的抗體確證試劑，只有1條HIV-2指示帶，當(dāng)檢測結(jié)果出現(xiàn)HIV-2指示帶時(shí)，根據(jù)具體情況決定是否進(jìn)一步檢測HIV-2：（1）HIV-1抗體陽性，報(bào)告HIV-1抗體陽性，不推薦再檢測HIV-2；（2）HIV-1抗體不確定或陰性，需再用單純的HIV-2抗體確證試劑或能區(qū)分HIV-1與HIV-2感染的確證試劑檢測。

HIV-1核酸試驗(yàn)對HIV抗體復(fù)檢試驗(yàn)有反應(yīng)樣品（見圖2），進(jìn)行HIV-1核酸試驗(yàn)，核酸檢測結(jié)果無反應(yīng)的樣品，建議做抗體確證試驗(yàn)?？贵w確證試驗(yàn)不確定或抗體陰性疑似急性期感染的樣品，可進(jìn)行兩次HIV-1核酸試驗(yàn)。

核酸檢測結(jié)果報(bào)告定性檢測結(jié)果有反應(yīng)，報(bào)告“HIV-1核酸陽性”；無反應(yīng)，報(bào)告“HIV核酸陰性”。定量檢測結(jié)果低于檢測限，報(bào)告低于檢測限；檢測結(jié)果>5000CPs/ml，報(bào)告檢測值；檢測結(jié)果≤5000CPs/ml，建議重新采樣檢測，檢測結(jié)果報(bào)告檢測值。臨床醫(yī)生可結(jié)合臨床及流行病史、CD4+T淋巴細(xì)胞檢測值或HIV-1抗體隨訪檢測結(jié)果等進(jìn)行診斷或排除診斷。檢測流程見圖8。

HIV-1核酸檢測HIV-1核酸定量檢測有反應(yīng)報(bào)告HIV-1核酸陽性無反應(yīng)報(bào)告HIV-1核酸陰性低于檢測限高于檢測限圖8HIV-1核酸試驗(yàn)流程HIV-1核酸定性檢測報(bào)告低于檢測下線>5000CPs/ml報(bào)告檢測值≤5000CPs/ml，重新采樣檢測

血液篩查相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告血站針對獻(xiàn)血者及其捐獻(xiàn)的血液進(jìn)行HIV篩查的程序，依據(jù)GB18469－2012《全血及成分血質(zhì)量要求》、《血站技術(shù)操作規(guī)程（2012版）》的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。單采血漿站針對供血漿者和血漿產(chǎn)品的HIV篩查程序依據(jù)《單采血漿站技術(shù)操作規(guī)程（2011版）》的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。所有不合格樣本的進(jìn)一步檢測參照臨床診斷檢測策略。

嬰兒HIV-1感染早期診斷相關(guān)的檢測策略及結(jié)果報(bào)告核酸檢測策略（RNA/DNA）及結(jié)果報(bào)告見圖11。抗體檢測策略及結(jié)果報(bào)告見圖12。有反應(yīng)有反應(yīng)無反應(yīng)無反應(yīng)有反應(yīng)有反應(yīng)無反應(yīng)艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童出生后6周采集第一份血樣本制備成濾紙片干血斑(DBS)進(jìn)行嬰兒艾滋病感染早期診斷盡快采集第二份血樣本，送檢嬰兒滿3個(gè)月再次采集血樣本，送檢盡快再次采集血樣本，送檢報(bào)告“嬰兒HIV感染早期診斷結(jié)果陰性”按照未感染兒童處理，繼續(xù)提供兒童保健及隨訪服務(wù)；滿12月齡開始進(jìn)行抗體檢測報(bào)告“嬰兒HIV感染早期診斷檢測結(jié)果陽性”診斷兒童HIV感染，進(jìn)行傳染病信息報(bào)告提供轉(zhuǎn)介服務(wù)圖11艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童HIV感染早期診斷試驗(yàn)流程無反應(yīng)不確定有反應(yīng)無反應(yīng)有反應(yīng)有反應(yīng)無反應(yīng)有反應(yīng)有反應(yīng)無反應(yīng)無反應(yīng)艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童12個(gè)月進(jìn)行HIV抗體篩查試驗(yàn)用另一種篩查試劑再次檢測18個(gè)月時(shí)再進(jìn)行HIV抗體篩查試驗(yàn)試劑1雙份或雙孔檢測，或原有試劑加另一種試劑抗體補(bǔ)充試驗(yàn)提供咨詢，繼續(xù)隨訪，進(jìn)行核酸檢測等補(bǔ)充試驗(yàn)圖12艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體檢測流程報(bào)告HIV抗體陽性報(bào)告HIV抗體陰性性強(qiáng)調(diào)---嚴(yán)格按照說明書操作---嚴(yán)格防止交叉污染---嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程---嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室安全制度EIA結(jié)果判斷OD值各孔OD值是通過某一波長的一束光自上而下照射，并檢測被液體吸收的光的量。Cut-off值（臨界值）是將檢測的陽性和（或）陰性對照的OD值代入廠商提供的計(jì)算公式計(jì)算出來的判斷陽性和陰性結(jié)果的界值。不同廠商、不同方法的試劑臨界值計(jì)算公式不同。EIA結(jié)果判斷有反應(yīng)：樣本的OD值＞CUTOFF值無反應(yīng)：樣本的OD值＜CUTOFF值不確定（灰色區(qū)）：CUTOFF值上下10%EIA影響因素反應(yīng)時(shí)間溫度酶結(jié)合物的穩(wěn)定性EIA試驗(yàn)的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)

操作可以標(biāo)準(zhǔn)化

結(jié)果判定客觀

重復(fù)性好，便于質(zhì)量控制

一次檢測樣本多，節(jié)約時(shí)間

方便普查缺點(diǎn)

反應(yīng)時(shí)間長，操作復(fù)雜

大包裝，浪費(fèi)大

設(shè)備PA的優(yōu)缺點(diǎn)操作簡便，不需任何輔助設(shè)備可以單人份操作SFDHIV1/2PA可同時(shí)檢測HIV-1型（包括O群）和HIV-2型抗體。由于使用了重組抗原及明膠顆粒凝集技術(shù)，試劑的敏感性和特異性均較高。對HIV血清轉(zhuǎn)化盤的研究顯示：敏感性與酶免法相當(dāng)特異性高于99.8%此法操作簡便，不需特殊儀器出結(jié)果快特別適合在未產(chǎn)前檢查的分娩孕婦、高危行為的求診者、輸血前的急診者、邊遠(yuǎn)地區(qū)供血者、VCT、急診室、解剖室、殯儀館以及意外暴露時(shí)追蹤傳染源等情況下使用。對于實(shí)驗(yàn)條件差，技術(shù)人員水平較低的發(fā)展中國家也較適用。但其敏感性、特異性均較ELISA法低，且檢測結(jié)果結(jié)果用肉眼判讀，易受主觀因素的影響，不同的檢驗(yàn)人員觀察同一個(gè)結(jié)果可能會(huì)得出不同的結(jié)論，弱陽性結(jié)果常常較難判別。免疫滲濾、免疫層析的優(yōu)缺點(diǎn)對篩查結(jié)果的解釋篩查檢測的目的是檢出所有的陽性者，因此對篩查試劑的質(zhì)量要求是敏感性必須好，在注重強(qiáng)調(diào)敏感性的情況下，特異性不可避免地受到影響。出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果，同時(shí)還有可能出現(xiàn)的技術(shù)誤差等等。因此分析篩查結(jié)果時(shí)，必須全面考慮。篩查實(shí)驗(yàn)的陽性結(jié)果不能最終確定為HIV抗體陽性，必須做補(bǔ)充試驗(yàn)才能下結(jié)論。假陽性結(jié)果一些含有針對HLA抗原的抗體患自身免疫性疾?。ㄈ缦到y(tǒng)性紅斑狼、風(fēng)濕病等寄生蟲（如瘧疾等）其他病毒（如病毒性肝炎等）近期疫苗接種（如流感疫苗接種等）高丙種球蛋白癥假陰性結(jié)果“窗口期”感染者嚴(yán)重的HIV相關(guān)免疫紊亂者血清轉(zhuǎn)換期：一些病人在病程的晚期發(fā)生血清學(xué)轉(zhuǎn)換，可能由于免疫系統(tǒng)的崩潰所致；也可能于HAART治療導(dǎo)致免疫重建的病人IgG抗體缺乏者抗原量過量技術(shù)誤差

實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)技術(shù)誤差是難免的，特別是在一次做大批量檢測時(shí)。血清標(biāo)本或試劑稀釋或配備不正確加樣器污染或不正確加錯(cuò)標(biāo)本臨近孔交叉污染洗滌程序錯(cuò)誤吸光檢測不正確對確證結(jié)果的解釋W(xué)B的檢測結(jié)果是在轉(zhuǎn)印條膜特異性HIV抗原的位置上出現(xiàn)深淺不同的條帶，按照不同的的帶型，最終結(jié)果可以判斷為HIV抗體陽性、HIV抗體陰性、HIV抗體不確定。HIV抗體陽性：說明是真正感染了HIV，為HIV感染者或AIDS。HIV抗體陰性：①未感染HIV②“窗口期”感染者HIV抗體不確定：不僅篩查陽性的標(biāo)本可以出現(xiàn)不確定的結(jié)果，篩查陰性的標(biāo)本做WB檢測時(shí)也有大約15%出現(xiàn)不確定結(jié)果，可能為下列幾種情況。

早期感染：有過HIV感染危險(xiǎn)行為的個(gè)體。處在血清轉(zhuǎn)換的過程，出現(xiàn)