DB41T 2067-2020 奶牛場(chǎng)布魯氏菌病凈化技術(shù)規(guī)范

41I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件起草單位：新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、孫照霞、王超、胡元春、郝曉鵬、姜金慶、劉長(zhǎng)忠、常衛(wèi)波、趙智燦1奶牛場(chǎng)布魯氏菌病凈化技術(shù)規(guī)范本文件適用于獨(dú)立封閉飼養(yǎng)規(guī)模100頭以上奶牛場(chǎng)布魯氏菌GB/T18646—2018動(dòng)物布魯氏菌病診斷對(duì)奶牛場(chǎng)采取一系列防控措施，用血清學(xué)檢測(cè)血清均為陰性，奶牛場(chǎng)連續(xù)2年無(wú)個(gè)體發(fā)病和無(wú)感染4.1.1流行特點(diǎn)病多。在母畜中，第一次妊娠母畜發(fā)病較多。消化道、呼吸道、生殖道是主要的感染途徑，也可通過(guò)損傷的皮膚4.1.2臨床癥狀潛伏期一般為14d～180d。最顯著癥狀是懷孕母畜發(fā)生流產(chǎn)，流產(chǎn)后可能發(fā)生胎衣滯留和子宮內(nèi)24.1.3剖檢病變4.2.1血清學(xué)診斷）（4.2.1.5間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（iELISA按GB/T18646—2018規(guī)定）4.2.1.6競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（cELISA按GB/T18646—2018規(guī)定）4.2.2病原學(xué)診斷警示——以下病原學(xué)操作包括但不僅限于涂片染色鏡檢、分離培養(yǎng)、聚合酶鏈中涉及細(xì)菌活菌操作等，均應(yīng)在BSL-3級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室4.2.2.1涂片染色鏡檢按《布魯氏菌病防治技術(shù)規(guī)范淋巴結(jié)、胎兒胃內(nèi)容物等組織，按GB/T18646—201面、肝湯瓊脂斜面、3%甘油0.5%葡萄糖肝湯瓊脂斜面等培養(yǎng)基培養(yǎng)；若為陳舊病料或污染病料，可用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)。組織樣品、陰道沖洗液、精液、關(guān)節(jié)液、胃內(nèi)容物、乳樣按GB/T18646—2018第4章13節(jié)布魯氏菌Bruce-Ladder檢測(cè)方法操作，熒光定量PCR可按商品化試劑盒操作。4.3結(jié)果判定b)免疫場(chǎng)奶牛最后一次布病疫苗免疫后間隔二年后，按照4.3.3進(jìn)35.1凈化要求5.2技術(shù)路線(xiàn)為陽(yáng)性者進(jìn)行撲殺，同時(shí)加強(qiáng)消毒和提高綜合飼養(yǎng)管理水平等措施，提高布病凈化工5.3凈化過(guò)程進(jìn)行第一次普檢，100～120日齡時(shí)，進(jìn)行第二次普檢。對(duì)檢出陽(yáng)性牛隔離并采用4.2.1.3試管凝集試驗(yàn)(SAT)或4.2.1.6競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（cELISA）進(jìn)行復(fù)核，對(duì)確診陽(yáng)性畜進(jìn)行撲殺；間隔3個(gè)月再次采用4.2.1.1琥紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）或4.2.1.5間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（iELISA）對(duì)污染牛群進(jìn)競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（cELISA）進(jìn)行復(fù)核，對(duì)確診陽(yáng)性牛進(jìn)行撲殺，每年春、秋兩季各進(jìn)行一次普檢，采用4.2.1.1琥紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）或4.2.1.5間接酶聯(lián)免疫5.3.4.4按照《跨省調(diào)運(yùn)乳用種用動(dòng)物產(chǎn)地檢疫規(guī)程》進(jìn)行檢疫，奶牛引入必須來(lái)自于非疫區(qū)，調(diào)入4對(duì)采樣器械進(jìn)行消毒。采樣結(jié)束后，收集采樣物品進(jìn)行消毒處理，并更換衣服清洗消毒。應(yīng)在符合相應(yīng)級(jí)別生物安全實(shí)驗(yàn)室中操作，病原分離培養(yǎng)需在BSL-3級(jí)實(shí)驗(yàn)室操作，未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料和滅活性實(shí)驗(yàn)在BSL-2級(jí)實(shí)驗(yàn)室操作。檢測(cè)人員需佩戴一次性醫(yī)用乳膠手套、口罩、帽子、鞋套和長(zhǎng)袖橡膠手套，備有接羔袋和消毒液，禁止赤手接觸對(duì)運(yùn)輸病畜的車(chē)輛和其它工具選用過(guò)氧乙酸、次氯酸、二氧化氯等消毒劑進(jìn)行噴灑消毒。6.3.1家畜的流產(chǎn)胎兒、胎盤(pán)、胎衣或死胎等，采取深埋或焚燒等方法進(jìn)行無(wú)害化處理；流