生物學案：第一章第一節(jié)微生物的分離和培養(yǎng)第一課時

學必求其心得，業(yè)必貴于專精學必求其心得，業(yè)必貴于專精學必求其心得，業(yè)必貴于專精第一課時微生物培養(yǎng)基的配制學習目標重點難點1。能記住培養(yǎng)基的概念。2．能說出培養(yǎng)基的種類、劃分原則以及應用。3．能說出滅菌和消毒的區(qū)別和聯(lián)系以及實驗室常用的方法。4．能記住細菌培養(yǎng)基的制備流程以及出現(xiàn)的問題。重點:1．能說出培養(yǎng)基的種類以及應用。2．能夠分析出消毒和滅菌的區(qū)別和聯(lián)系，并且掌握高壓蒸汽滅菌法的操作流程和注意事項。3．能解決細菌培養(yǎng)基的配制流程中出現(xiàn)的問題。難點：能解決培養(yǎng)基制備過程中的滅菌和消毒的基本方法和流程。一、培養(yǎng)基為人工培養(yǎng)微生物而制備的,提供適合微生物______、______或積累________的營養(yǎng)基質。二、培養(yǎng)基的分類1．根據(jù)化學成分的不同可分為:（1）天然培養(yǎng)基：采用__________或__________以及它們的________或粗消化物配制而成的培養(yǎng)基。(2)合成培養(yǎng)基:由________的分析純等高純度______與________配制而成的培養(yǎng)基。（3）半合成培養(yǎng)基：采用部分________和部分________配制而成的培養(yǎng)基。2．根據(jù)培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)可分為:______培養(yǎng)基、________培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。配制半固體、固體培養(yǎng)基需要在培養(yǎng)基中加入常用的凝固劑______.在培養(yǎng)基中它的質量分數(shù)常為________________。3．根據(jù)培養(yǎng)基的功能可分為:（1)加富培養(yǎng)基：指在培養(yǎng)基成分中的營養(yǎng)物質僅適合于______或______微生物,而對其他微生物不合適的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。（2）選擇培養(yǎng)基：指在配制培養(yǎng)基時______某種化學物質或______某些營養(yǎng)物質以______不需要的微生物生長，而______所需微生物的生長。（3）______培養(yǎng)基：是用于區(qū)別______________的培養(yǎng)基.預習交流1．培養(yǎng)細菌常用的培養(yǎng)基是哪種培養(yǎng)基？這種培養(yǎng)基的優(yōu)缺點各是什么？2．合成培養(yǎng)基的優(yōu)缺點各是什么？3．培養(yǎng)真菌常用的培養(yǎng)基是什么？4．大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌在伊紅—美藍培養(yǎng)基上生成的菌落各自有什么特點？三、培養(yǎng)基配制運用的滅菌和消毒技術1．滅菌：指采用強烈的______________使物體內外__________永遠喪失其____________的措施.（1)實驗室最常用的滅菌方法是______滅菌。（2）高壓蒸汽滅菌是在密閉的________________中進行的，要求溫度應該達到________（氣壓為______),時間維持__________。裝鍋是指將待滅菌物品放在____________中（不要____________），蓋好鍋蓋，按______方法旋緊四周固定螺栓，打開________。出鍋是指當壓力表中指針降至“0"點，稍停并待溫度繼續(xù)降至______以下后，打開________，旋開________，開蓋，取出滅菌物品。2．消毒:用較溫和的______或______方法殺死__________微生物（包括病原微生物和有害微生物的________），實際上是______滅菌。3．微生物學操作中常用的滅菌和消毒方法還有__________、______滅菌和消毒、________滅菌和消毒等。預習交流1．高溫滅菌的原理是什么？2．舉例說明干熱滅菌適用的物品.四、細菌培養(yǎng)基的配制步驟1．配制________；2.調節(jié)______;3。______；4。______；5．______；6.________。答案：一、生長繁殖代謝產(chǎn)物二、1.（1）動植物組織微生物細胞提取物（2）準確稱量化學試劑蒸餾水（3）天然物質化學試劑2．液體半固體瓊脂1.5％~2。0%3．（1)一種一類（2)加入除去抑制促進（3）鑒別不同微生物種類預習交流:1．提示：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基.優(yōu)點：取材便利、營養(yǎng)豐富、配制簡便；缺點：營養(yǎng)成分難以控制、實驗結果的重復性差.2．提示：優(yōu)點：化學成分及含量明確、實驗的可重復性好；缺點：配制繁瑣、成本較高。3．提示:馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。4．提示：大腸桿菌在伊紅—美藍培養(yǎng)基上生成的菌落特點為菌落小、有綠色金屬光澤；產(chǎn)氣腸桿菌在伊紅—美藍培養(yǎng)基上生成的菌落特點為菌落大、濕潤、呈灰棕色。三、1.物理或化學方法所有微生物生長繁殖能力（1）高溫(2）高壓蒸汽滅菌器（鍋)121℃100kPa15～30min滅菌桶裝得過滿對稱排氣閥100℃排氣閥固定螺栓2．物理化學絕大多數(shù)營養(yǎng)細胞部分3．過濾除菌射線化學藥物預習交流:1．提示：高溫的致死作用,主要是使微生物的蛋白質和核酸等重要生物大分子物質發(fā)生不可逆轉的變性.2．提示：干熱滅菌適用于耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬等.四、1.培養(yǎng)液2．pH3．分裝4．包扎5．滅菌6．擱置斜面在預習中還有哪些問題需要你在聽課時加以關注?請在下列表格中做個備忘吧！我的學困點我的學疑點一、培養(yǎng)基1．培養(yǎng)基的種類（填寫下列表格內容)（1）根據(jù)外觀的物理狀態(tài)不同劃分培養(yǎng)基種類特點用途液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑,如______觀察微生物的運動、分類鑒定固體培養(yǎng)基微生物分類與鑒定、活菌計數(shù)、菌種保藏(2）按照化學成分劃分種類化學成分是否明確用途天然培養(yǎng)基____主要用于工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基____主要用于微生物的分類、鑒定（3)按照用途劃分種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學物質或除去某些營養(yǎng)物質依據(jù)某些微生物對某些物質的抗性而設計______________________________加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學物質____________________________________________________________________鑒別不同種類的微生物伊紅—美藍培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌2。微生物所需的有機營養(yǎng)物質及其功能（填寫表格內容)碳源氮源生長因子概念凡能為微生物提供所需碳元素的物質凡能為微生物提供所需氮元素的物質微生物生長不可缺少的微量有機物來源無機碳源：CO2、______等；有機碳源:糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等無機氮源：____、氨、銨鹽、硝酸鹽等;有機氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等酵母膏、蛋白胨、動植物組織提取液最常用來源________________________________________________作用主要用于構成微生物的細胞物質和一些代謝產(chǎn)物；異養(yǎng)微生物的主要能源物質主要用于合成____________________________________________________（2011·山東泰安高二檢測）下表是關于幾種微生物能利用的碳源物質和氮源物質的描述，描述錯誤的微生物有幾種?（）硝化細菌圓褐固氮菌甲烷氧化菌乳酸菌碳源物質CO2CO2葡萄糖葡萄糖氮源物質NH3N2尿素N2A。1種B．2種C．3種D．4種各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有碳源、氮源、生長因子、水和無機鹽.(1）碳源:給微生物生長提供碳元素的物質。有機碳源既可給微生物提供碳元素，也可給微生物提供能源，多用于培養(yǎng)異養(yǎng)型微生物.培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物可加入無機碳源。(2）氮源：給微生物生長提供氮元素的物質.有機氮源既可給微生物提供氮元素,也可給微生物提供能源，多用于培養(yǎng)異養(yǎng)型微生物。培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物可加入無機氮源。(3)生長因子：微生物生長不可缺少的微量有機物.（4）無機鹽：給微生物提供大量元素或微量元素。二、滅菌與消毒1．滅菌和消毒的比較（填寫表格內容）條件結果常用的方法消毒較________________方法殺死物體上絕大多數(shù)微生物（不包括芽孢和孢子）煮沸消毒法（如100℃，5～6min可殺死微生物營養(yǎng)細胞和一部分芽孢)、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法等滅菌________物理或化學方法殺死物體內外所有微生物,包括芽孢和孢子________、______滅菌等2.請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌.如果需要，請選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿。（2）玻璃、試管、燒瓶和吸管。（3)實驗操作者的雙手。3．三種滅菌方法的比較（填寫表格內容）滅菌方法適用材料或用具滅菌條件滅菌時間灼燒滅菌________________________酒精燈火焰的充分燃燒層直到燒紅干熱滅菌耐高溫且保持干燥的物品，如玻璃器皿（__________)和金屬用具等干熱滅菌箱內，溫度為____________1～2h高壓蒸汽滅菌________高壓蒸汽鍋內，100kPa，121℃__________培養(yǎng)基配制需要運用滅菌和消毒技術，但兩者消滅的微生物種類和數(shù)量是不同的。下列哪一項能正確表示滅菌和消毒之間的關系?（）（1）滅菌所依據(jù)的原理基本都是利用高溫處理使菌體內的蛋白質和核酸發(fā)生不可逆轉的變性,從而達到殺菌的效果。（2)消毒時一般不能殺死微生物的芽孢的原因是：芽孢是有些細菌在一定條件下，細胞質高度濃縮脫水所形成的一種抗逆性很強的球形或橢圓形的休眠體。其主要的特點是抗性強，對高溫、紫外線、干燥、電離輻射和很多有毒的化學物質都有很強的抗性。（3）芽孢和孢子的區(qū)別①芽孢：某些細菌在其生長發(fā)育后期,可在細胞內形成一個圓形或橢圓形的抗逆性休眠體,稱為芽孢。每個細胞僅形成一個芽孢，故它無繁殖功能。芽孢有極強的抗熱、抗輻射、抗化學藥物和抗靜水壓等能力.芽孢的休眠能力十分驚人,可保持幾年到幾十年的生活力。②孢子:孢子是生物所產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的細胞.一般是單細胞，個體微小。由于它的性狀不同，發(fā)生過程和結構的差異而有各種名稱。生物通過無性生殖產(chǎn)生的孢子叫無性孢子，如分生孢子、孢囊孢子、游動孢子等;通過有性生殖產(chǎn)生的孢子叫有性孢子，如接合孢子、子囊孢子等；直接由營養(yǎng)細胞通過細胞壁加厚和積貯養(yǎng)料而能抵抗不良環(huán)境條件的孢子叫厚垣孢子、休眠孢子等。三、細菌培養(yǎng)基的配制1．簡述配制細菌培養(yǎng)基的基本流程.2．如何判斷培養(yǎng)基的制作是否合格？3．培養(yǎng)基配制過程中如何調節(jié)pH？下列有關細菌培養(yǎng)基配制過程的說法，正確的是(）。A．應將培養(yǎng)基的pH調至6。0～6.2B．分裝時，培養(yǎng)基高度約為試管高度的1/3C．擱置斜面長度不超過試管總長的1/2D．分裝完成后可直接擱置斜面培養(yǎng)基配制的原則（1）目的要明確，要根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的種類、培養(yǎng)的目的選擇原料。(2）營養(yǎng)要協(xié)調,配制培養(yǎng)基時必須要注意各種營養(yǎng)物質的濃度和比例，否則會產(chǎn)生不良后果。（3)pH要適宜，這是因為各種微生物適宜生長的pH范圍不同。答案：活動與探究一:1．（1)瓊脂（2）否是(3)從眾多微生物中分離所需的微生物依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學藥品反應產(chǎn)生明顯的特征而設計2．NaHCO3N2糖類，尤其是葡萄糖銨鹽、硝酸鹽維生素、氨基酸、堿基蛋白質、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物酶和核酸的組成成分遷移與應用：C解析:硝化細菌為化能自養(yǎng)型,以CO2為碳源，以NH3為氮源。圓褐固氮菌為異養(yǎng)固氮菌,碳源為含碳有機物,氮源為分子態(tài)氮。甲烷氧化菌對碳源要求嚴格，只能是甲烷或甲醇.乳酸菌不能固氮，其氮源不可能是N2.活動與探究二：1．溫和的物理或化學強烈的干熱滅菌濕熱2．提示：（1）(2）需要滅菌;（3）需要消毒。3．接種環(huán)、接種針或其他金屬工具吸管、培養(yǎng)皿160～170℃培養(yǎng)基15～30min遷移與應用：B解析:準確理解消毒、滅菌兩個概念的內涵與外延?；顒优c探究三：1．提示：配制培養(yǎng)液→調節(jié)pH→分裝→包扎→滅菌→擱置斜面。2．提示：如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2天后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的。3．提示：先用玻璃棒蘸取培養(yǎng)基測試其pH，再根據(jù)實際情況用質量分數(shù)為3％的HCl或NaOH溶液將其pH調至7。0～7。2。遷移與應用：C解析：應將培養(yǎng)基的pH調至7。0～7。2；分裝時，培養(yǎng)基高度約為試管高度的1/5；分裝完成后應該包扎、滅菌然后擱置斜面.1．不同的微生物對營養(yǎng)物質的需求各不相同。下列有關一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)型微生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是（）。A．氮源物質為該微生物提供必要的氮素B．碳源物質也是該微生物的能源物質C．無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質D．水是該微生物的營養(yǎng)要素之一2．下列關于滅菌和消毒的理解，不正確的是（）。A．滅菌是指殺滅物體內外所有的微生物的細胞、芽孢和孢子B．消毒和滅菌實質上是相同的C．接種環(huán)用灼燒滅菌D．常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等3．下列關于配制培養(yǎng)基的敘述,正確的是（）。A．制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂B．加入鏈霉素可得到放線菌C．培養(yǎng)自生固氮菌時不需要氮源D．發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基4．酵母菌培養(yǎng)液常含有一定濃度的葡萄糖，但當葡萄糖濃度過高時，反而抑制微生物的生長,原因是（）。A．碳源供應太充足B．葡萄糖不是酵母菌的原料C．改變了酵母菌培養(yǎng)液的pHD．細胞會失水過多5．某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗.實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計數(shù)。請回答與此實驗相關的問題。（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了________和________.除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是________和________.（2)對培養(yǎng)基進行滅菌，應該采用的方法是______________________________________。（3)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度,可以用于篩選耐________細菌,這種培養(yǎng)基被稱為______________.答案