布病的實(shí)驗(yàn)室診斷

布魯氏菌(bùlǔshìjūn)病概況布魯氏菌?。ㄒ韵潞?jiǎn)稱布?。┦且环N全球分布的由布氏菌引起的人獸共患傳染病。布氏菌通過(guò)(tōngguò)皮膚粘膜、消化道、呼吸道等途徑浸潤(rùn)人體而出現(xiàn)發(fā)熱、關(guān)節(jié)痛、乏力、多汗為主的臨床癥狀，可以造成骨關(guān)節(jié)、免疫、消化、循環(huán)、神經(jīng)等多系統(tǒng)損害，其臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變，無(wú)特異性。

共六十四頁(yè)全球(quánqiú)布魯氏菌病疫情2013年上半年世界(shìjiè)羊布魯氏菌病分布圖（引自O(shè)IE）ICDC,ChinaCDC共六十四頁(yè)3共六十四頁(yè)4共六十四頁(yè)5共六十四頁(yè)Amsterdam,TheNetherlandswww.kit.nl世界衛(wèi)生組織建議(jiànyì)的人布魯氏菌病診斷世衛(wèi)組織建議的檢測(cè)包括：虎紅平板試驗(yàn)(RBT)血清(xuèqīng)凝集試驗(yàn)(SAT)Coomb`s試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)ELISA熒光偏振布氏菌培養(yǎng)PCR世衛(wèi)組織未具體確定流程、取舍值和檢測(cè)特征（診斷靈敏性和特異性）沒(méi)有明確的陽(yáng)性和陰性預(yù)測(cè)值（PPV&NPV）結(jié)論取舍值（及靈敏性/特異性）因抗原來(lái)源和流程差異而不同，有待優(yōu)化PPV和NPV取決于疾病的流行程度，有待確立建議開(kāi)展檢測(cè)前，應(yīng)在設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)沫h(huán)境中確定診斷功效（靈敏性、特異性、PPV和NPV等）共六十四頁(yè)WHO人布魯氏菌(bùlǔshìjūn)病的診斷檢測(cè)IgM/IgG側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)(jiǎncè)熒光偏振檢測(cè)虎紅平板試驗(yàn)血清凝集試驗(yàn)2-ME試驗(yàn)IgM/IgGELISA庫(kù)姆斯(IgG)CFT培養(yǎng)

（僅在BSL-3中）PCR簡(jiǎn)易/快捷復(fù)雜/要求高靈敏性+++++++++++++++參考+++++++++++特異性++++++++++++++++++++參考++++++++保健點(diǎn)參比實(shí)驗(yàn)室診斷機(jī)構(gòu)共六十四頁(yè)布魯氏菌(bùlǔshìjūn)病病原學(xué)布魯氏菌為革蘭陰性短小桿菌，0.5-0.7×0.6-1.5nm，初次分離時(shí)多呈球桿狀和卵圓形，故稱“布魯氏菌”。菌體無(wú)鞭毛，不形成芽胞，毒力菌株可有菲薄的莢膜。1985年WHO布魯氏菌病專家季員會(huì)把布氏菌屬分為6個(gè)種19個(gè)生物型。羊種（1～3型）、牛種（1～9型）、豬種（1～5型）及綿羊型副睪種、沙林鼠種、犬種各1個(gè)生物型。中國(guó)已分離到14個(gè)生物型，即羊種（1～3型），牛種（除5型以外的7個(gè)型），豬種（1.3型），綿羊副睪種和犬種各1個(gè)型。臨床上以羊、牛、豬三個(gè)種意義最大，羊種致病力最強(qiáng)。多種生物型的產(chǎn)生(chǎnshēng)可能與病原菌為適應(yīng)不同宿主而發(fā)生遺傳變異有關(guān)。共六十四頁(yè)布氏菌可被堿性(jiǎnxìnɡ)染料著色，如革蘭染色為陰性，姬姆莎染色呈紅色，布氏菌對(duì)染料吸收緩慢布氏菌革蘭染色(rǎnsè)共六十四頁(yè)共六十四頁(yè)布魯氏菌(bùlǔshìjūn)的分離培養(yǎng)1、血培養(yǎng)：1）雙相培養(yǎng)基：血液10mL注入雙相培養(yǎng)基中→37℃溫箱培養(yǎng)→每48小時(shí)觀察→無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)繼續(xù)培養(yǎng)→培養(yǎng)至30日才發(fā)出報(bào)告。2）自動(dòng)化培養(yǎng)：血培養(yǎng)瓶置全自動(dòng)血培養(yǎng)儀中→有菌生長(zhǎng)儀器(yíqì)報(bào)警→做鑒定2、骨髓培養(yǎng)：按臨床骨髓穿刺法抽取骨髓，按照血液培養(yǎng)方法培養(yǎng)。共六十四頁(yè)自動(dòng)(zìdòng)培養(yǎng)儀和培養(yǎng)瓶共六十四頁(yè)疑似布魯氏菌時(shí)：抽取菌液少許，接種到血瓊脂培養(yǎng)基中，進(jìn)行純培養(yǎng)。要求一定(yīdìng)生物安全柜內(nèi)操作！生化反應(yīng)進(jìn)一步鑒定：

自動(dòng)化設(shè)備布魯氏菌(bùlǔshìjūn)培養(yǎng)與鑒定共六十四頁(yè)培養(yǎng)(péiyǎng)特性專性需氧，生長(zhǎng)緩慢生長(zhǎng)溫度20-40℃，最佳生長(zhǎng)溫度35-37℃，pH6.6-7.4，馬耳他布魯氏菌和某些牛種菌需要(xūyào)較嚴(yán)格的5%-10%CO2。布魯菌屬對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高，生長(zhǎng)中需要各種氨基酸、離子、煙酸和生物素，有點(diǎn)菌種需要血清或全血才能生長(zhǎng)共六十四頁(yè)布氏瓊脂(qióngzhī)布魯氏菌菌落血平皿布氏菌菌落(jūnluò)布魯氏菌培養(yǎng)與鑒定共六十四頁(yè)研究(yánjiū)方法VITEK2全自動(dòng)微生物生化(shēnɡhuà)分析儀共六十四頁(yè)布氏菌生化(shēnɡhuà)鑒定共六十四頁(yè)借助VITEK2COMPACT全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)建立了一套布魯氏菌的生化鑒定參考標(biāo)準(zhǔn)分型方法。完善布魯氏菌生化鑒定數(shù)據(jù)庫(kù)。鑒定布魯氏菌速度快，可靠性高，確定布魯氏菌屬的鑒定指標(biāo)為L(zhǎng)-脯氨酸芳胺酶（ProA）、酪氨酸芳胺酶（TyrA）、尿素酶（URE）、氨基(ānjī)乙酸芳胺酶（GlyA）；區(qū)分羊種布氏菌的指標(biāo)為ELLMAN（ELLM）；區(qū)分牛種布氏菌的指標(biāo)為乳酸鹽產(chǎn)堿（1LATK）；區(qū)分豬種布氏菌指標(biāo)為丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳胺酶（APPA）.當(dāng)鑒定為人蒼白桿菌時(shí)，需與布魯氏菌進(jìn)行鑒別。全自動(dòng)微生物生化鑒定(jiàndìng)結(jié)果共六十四頁(yè)

羊種菌為人主要(zhǔyào)致病菌種生物型H2S染料抑菌血清凝集噬菌體裂解硫堇復(fù)紅AMRTbWbBK2羊1-++-+---+2-+++----+3-++++---+病原(bìngyuán)特征共六十四頁(yè)羊1型為主羊3型為主19631969-19712005病原(bìngyuán)特征羊種菌菌型變遷(biànqiān)共六十四頁(yè)凍干機(jī)設(shè)備(shèbèi)共六十四頁(yè)菌種保存(bǎocún)管共六十四頁(yè)BCSP31-PCR引物和擴(kuò)增片段，產(chǎn)物223bpPrimer1：B45’-TGGCTCGGTTGCCAATATCAA-3’Primer2：B55’-CGCGCTTGCCTTTCAGGTCTG-3’檢測(cè)BCSP31基因的PCR方法，可以在屬的水平(shuǐpíng)上檢測(cè)和鑒定布魯氏菌菌株OIE推薦鑒定布魯氏菌種的方法之一

共六十四頁(yè)MDL2000DNALadder

1。B.melitensis2.B.abortus3.B.suis4.B.ovis5.B.neotomae6.B.canis

M123456布魯氏菌(bùlǔshìjūn)屬BCSP31-PCR電泳結(jié)果

-----223bp共六十四頁(yè)AMOS-PCR鑒定(jiàndìng)布氏菌種布魯氏菌DNA多態(tài)性一個(gè)原因就是插入序列分布，IS711就是一段插入序列，在數(shù)量和位置上都很保守，一個(gè)引物錨定在IS711上，其他不同的引物分別選在與插入基因IS711鄰近的單染色體DNA上，代表種的特異性，通過(guò)擴(kuò)增帶的大小來(lái)鑒別種。設(shè)計(jì)5條引物的混合反應(yīng)體系，適用于布魯氏菌種間的鑒定方法(fāngfǎ)，可鑒別布氏菌牛種1，2，4型、羊種布魯氏菌、豬種1型和綿羊附睪種。除了共有的178bp以外牛種布魯氏菌1，2，4型擴(kuò)增條帶為498bp，羊種布魯氏菌擴(kuò)增片段為731bp，豬種1型擴(kuò)增條帶為285bp，綿羊附睪種961bp。共六十四頁(yè)

19株標(biāo)準(zhǔn)(biāozhǔn)菌株AMOS-PCR擴(kuò)增結(jié)果

1000bp

123456789101112131415161718

192021222000bp750bp500bp250bp200bp

1、22.DL2000DNALadder2-4.B.Melitensis1-35-11.B.Abortus1-712.B.Abortus913-17.B.Suis.1-518.B.ovis19.B.neotomae20.B.canis21.陰性(yīnxìng)對(duì)照共六十四頁(yè)750bp500bp250bp

M1234567891011250bp

223bp

布魯氏菌(bùlǔshìjūn)屬種鑒定1-5AMOS擴(kuò)增1、c-2、羊13、牛14、豬15、待檢菌株

6-10BCSP31-PCR：6、羊17、牛1

8、豬1

9、OVIS10、待檢菌株共六十四頁(yè)多重PCR(Bruceladder)EvaluationofaMultiplexPCRAssay(Bruce-ladder)forMolecularTypingofAllBrucellaSpecies,IncludingtheVaccineStrains共六十四頁(yè)B.abortusB.melitensisB.suisB.cains布氏菌

MLVA分型共六十四頁(yè)中國(guó)分離(fēnlí)株的基因型分布省份主ST型菌株數(shù)主ST型菌數(shù)主ST型比例內(nèi)蒙古8722636.1%四川811654.5%新疆811545.5%寧夏810660.0%廣西217228.6%河南87342.9%山東87571.4%遼寧325240.0%青海85480.0%上海85240.0%安徽40.0%甘肅294250.0%廣東84250.0%吉林84375.0%共六十四頁(yè)布魯氏菌(bùlǔshìjūn)血清學(xué)檢測(cè)常用方法有：虎紅平板(píngbǎn)凝集試驗(yàn)試管凝集試驗(yàn)（萊特試驗(yàn)）半胱氨酸試管凝集試驗(yàn)抗人球蛋白試驗(yàn)共六十四頁(yè)Amsterdam,TheNetherlandswww.kit.nl虎紅平板(píngbǎn)試驗(yàn)Rose-BengalPlateAgglutinationTest檢測(cè)特征(tèzhēng)（流行率低）靈敏度92.9（急性病例）特異性94.3%（無(wú)暴露史）

特異性91.7%（重復(fù)暴露）

特異性76.9（既往布病患者）

Ruis-MezaetalClinMicrobiolInfect.2005;11(3):221-5不同來(lái)源（品牌）和批次的抗原質(zhì)量差異很大難以解讀（弱陽(yáng)性）由于暴露和非特異性反應(yīng)，在疾病流行地區(qū)的表現(xiàn)不良需要確定取舍值結(jié)論診斷功效在很大程度上取決于制劑來(lái)源和疾病流行程度，需要確定取舍值共六十四頁(yè)虎紅平板(píngbǎn)凝集試驗(yàn)它是一種半定量的凝集反應(yīng)試驗(yàn)。所用抗原是用虎紅(四氯四碘熒光素)色素(sèsù)染成的一種酸性抗原，具有克服非特異性反應(yīng)，對(duì)檢查小分子抗體IgG較為敏感的特點(diǎn)?；⒓t平板凝集試驗(yàn)(RBPT)方法:在清潔的玻片上加0.03ml的受檢血清，然后再加入上述標(biāo)化抗原懸液0.03ml，使充分混勻，在4分鐘內(nèi)觀察結(jié)果，以出現(xiàn)可見(jiàn)的凝集反應(yīng)為陽(yáng)性。共六十四頁(yè)虎紅玻片凝集(níngjí)試驗(yàn)（RBT）篩查試驗(yàn)(shìyàn):簡(jiǎn)便、實(shí)用、快速、經(jīng)濟(jì)，適用于基層單位檢驗(yàn)

共六十四頁(yè)全血玻片凝集反應(yīng)在一張清潔的破片上加1滴赫德遜氏反應(yīng)抗原，然后在抗原上加1滴受檢血液或關(guān)節(jié)腔內(nèi)積液，可用加樣器吸頭使其混勻，在酒精燈上稍微加熱，促進(jìn)反應(yīng)，在8分鐘內(nèi)觀察結(jié)果，凡在此時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性。也可以(kěyǐ)加入0.08-0.01ml不同的血液量，再加入1滴抗原，粗測(cè)血標(biāo)本效價(jià)。共六十四頁(yè)玻片凝集(níngjí)的評(píng)價(jià)虎紅平板凝集試驗(yàn)和全血玻片凝集試驗(yàn)為初篩、定性凝集試驗(yàn)或半定性凝集試驗(yàn)，優(yōu)點(diǎn)是較試管凝集試驗(yàn)操作更簡(jiǎn)便，檢測(cè)迅速，尤其是虎紅平板凝集試驗(yàn)是在酸化抗原基礎(chǔ)上制備的帶有色素的抗原制劑，經(jīng)大量的研究資料證明，本法與常規(guī)血清學(xué)試驗(yàn)有較高的符合率，是人畜布氏菌防治工作中，廣泛(guǎngfàn)采用的一種篩選試驗(yàn)方法。但此兩種平板試驗(yàn)，尤其是全血玻片凝集試驗(yàn)，可能出現(xiàn)非特異性凝集反應(yīng)，在單以平板凝集反應(yīng)診斷布氏菌病時(shí)，應(yīng)考慮到此點(diǎn)，以免誤診。對(duì)陽(yáng)性和疑似標(biāo)本必須進(jìn)行SAT確證，才能作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果。共六十四頁(yè)RBT注意事項(xiàng)抗原(kàngyuán)質(zhì)量被檢血樣反應(yīng)板結(jié)果觀察和判定記錄報(bào)告診斷價(jià)值與意義與其它實(shí)驗(yàn)的關(guān)系

共六十四頁(yè)試管(shìguǎn)凝集(萊特試驗(yàn))原理在已知的特異性抗原—布氏菌抗原的懸液中加入未知的被檢患者血清，若患者血清中含有(hányǒu)布氏菌抗體，抗原與抗體發(fā)生肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)。共六十四頁(yè)可作為布氏菌病早期診斷(zhěnduàn)方法，病人常于發(fā)燒的第1天起就開(kāi)始出現(xiàn)凝集素，而且出現(xiàn)高滴度凝集素或凝集素滴度不斷上升，不僅有很高的診斷意義，同時(shí)也可作為判定疾病活動(dòng)性指標(biāo)。目前，雖然出現(xiàn)了不少新的診斷布氏菌病的技術(shù)方法，但仍不能取代本試驗(yàn)方法，而這些新方法則是對(duì)本法的補(bǔ)充和完善。共六十四頁(yè)但是，作為單一的診斷方法是不完善的。從國(guó)內(nèi)外的研究資料表明，僅用凝集反應(yīng)對(duì)畜群進(jìn)行多次檢查(jiǎnchá)，仍有許多布氏菌病病畜檢查(jiǎnchá)不出來(lái)；對(duì)部分慢性期布氏菌病患者得不出陽(yáng)性反應(yīng)結(jié)果；還有一些其他疾病患者，在血清學(xué)上與布氏菌病存在交叉凝集反應(yīng)，因而做本試驗(yàn)是難于排除的。因而有必要做多種血清學(xué)實(shí)驗(yàn)檢查(jiǎnchá)，以便綜合性判定，獲得正確結(jié)果。除每份待撿血清需作1個(gè)血清對(duì)照，以排除血清的自然凝集外，每次試驗(yàn)尚需有1個(gè)抗原對(duì)照，以排除所用抗原的自然凝集。共六十四頁(yè)試管凝集(níngjí)(萊特試驗(yàn))0.5ml抗原(kàngyuán)試管凝集反應(yīng)操作示意圖0.2ml血清2.3ml鹽水0.5ml鹽水0.5ml棄去0.50.50.50.50.50.50.5共六十四頁(yè)試管(shìguǎn)凝集(萊特試驗(yàn))結(jié)果判定：效價(jià)以產(chǎn)生50%凝集（++凝集程度(chéngdù)）血清最高稀釋倍數(shù)為受檢血清效價(jià)共六十四頁(yè)試管(shìguǎn)凝集(萊特試驗(yàn))試管凝集試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)(biāozhǔn)比濁管配制共六十四頁(yè)試管(shìguǎn)凝集(萊特試驗(yàn))診斷標(biāo)準(zhǔn)：1、人、牛、馬、鹿等大家畜血清(xuèqīng)為1：100（++）及以上者為陽(yáng)性，1:50（++）為可疑。2、對(duì)可疑反應(yīng)的人或動(dòng)物應(yīng)在10-25天內(nèi)重復(fù)檢查，以便進(jìn)一步確診共六十四頁(yè)方法與臨床：1、該法特異性較好，敏感性較高，適用于檢疫和臨床診斷

2、由于該方法有時(shí)出現(xiàn)(chūxiàn)前帶現(xiàn)象和封閉現(xiàn)象，所以有時(shí)出現(xiàn)(chūxiàn)陰性結(jié)果，必要時(shí)和其他方法聯(lián)合應(yīng)用試管凝集(níngjí)(萊特試驗(yàn))共六十四頁(yè)試管凝集(níngjí)檢測(cè)StandardTubeAgglutinationTest發(fā)病后不同月份的靈敏度(%)0-22-44-6>6SAT(1:100)79.564.476.950.61:501:1001:2001:4001:8001:1600發(fā)現(xiàn)凝集抗體（IgM和IgG)靈敏性隨疾病持續(xù)時(shí)間下降頑固性和布病復(fù)發(fā)患者中表現(xiàn)不佳在本地流行地區(qū)/暴露個(gè)體中的特異性較低流行地區(qū)的建議取舍值為1：200，提高(tígāo)特異性導(dǎo)致的低靈敏度難以讀取和標(biāo)準(zhǔn)化共六十四頁(yè)SAT注意事項(xiàng)抗原稀釋液定量對(duì)照溫度結(jié)果(jiēguǒ)判定記錄報(bào)告單共六十四頁(yè)當(dāng)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)涉及傳染或潛在傳染性生物因子時(shí)，應(yīng)進(jìn)行危害程度評(píng)估。危害程度評(píng)估應(yīng)至少包括下列內(nèi)容：生物因子的種類（已知的、未知的或未知傳染性的生物材料）、來(lái)源、傳染性、致病性、傳播(chuánbō)途徑、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、感染劑量、濃度、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、預(yù)防和治療。危害程度評(píng)估應(yīng)由適當(dāng)?shù)挠薪?jīng)驗(yàn)的專業(yè)人員進(jìn)行。生物安全(ānquán)的評(píng)估共六十四頁(yè)共六十四頁(yè)注：a大量活菌操作：實(shí)驗(yàn)操作涉及“大量”病原菌的制備，或易產(chǎn)生氣溶膠的實(shí)驗(yàn)操作（如病原菌離心、凍干等）。c樣本檢測(cè)：包括樣本的病原菌分離純化、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)、生化鑒定、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、PCR核酸(hésuān)提取、涂片、顯微觀察等初步檢測(cè)活動(dòng)。d非感染性材料的實(shí)驗(yàn)：如不含致病性活菌材料的分子生物學(xué)、免疫學(xué)等實(shí)驗(yàn)。共六十四頁(yè)布魯氏菌感染(gǎnrǎn)途徑感染途徑：吸入、皮膚粘膜污染、攝入等吸入感染：很多操作可產(chǎn)生氣溶膠，如：感染動(dòng)物的皮毛、糞便，燒接種環(huán)、抽真空、離心、攪拌、研磨等，氣溶膠≤5um液滴核會(huì)懸浮于空中皮膚粘膜污染：含病原體的液體(yètǐ)濺在眼睛、口鼻粘膜及其他皮膚感染攝入感染：誤食和不洗手吃食物接種感染：共六十四頁(yè)感染(gǎnrǎn)事件共六十四頁(yè)感染(gǎnrǎn)事件造成此次事故的原因：一是購(gòu)買實(shí)驗(yàn)山羊時(shí)，相關(guān)教師未要求青喜養(yǎng)殖場(chǎng)出具相關(guān)檢疫合格證明；二是實(shí)驗(yàn)前相關(guān)教師未對(duì)實(shí)驗(yàn)山羊進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢疫；三是在指導(dǎo)學(xué)生實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，相關(guān)教師未能嚴(yán)格要求學(xué)生遵守操作規(guī)程(cāozuòguīchéng)、進(jìn)行有效防護(hù)。共六十四頁(yè)存在(cúnzài)的問(wèn)題職責(zé)不履行，不開(kāi)展檢測(cè)培訓(xùn)不到位，未開(kāi)展監(jiān)督與指導(dǎo)操作不規(guī)范，未嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程防護(hù)不落實(shí)，未嚴(yán)格執(zhí)行生物安全規(guī)定

存在潛在感染(gǎnrǎn)的風(fēng)險(xiǎn)?。。」擦捻?yè)

1、布魯氏菌強(qiáng)毒菌株、疫苗菌株、弱毒菌株均可能造成人體感染，感染所需菌量會(huì)有較大差別。2、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)(huódòng)與實(shí)驗(yàn)室級(jí)別要求布病血清學(xué)實(shí)驗(yàn)可以在BSL-1實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行未知標(biāo)本分離菌、少量菌株實(shí)驗(yàn)、弱毒菌株的實(shí)驗(yàn)在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行布氏菌的抗原制備、菌種保存在BSL-3實(shí)驗(yàn)室生物(shēngwù)安全要求共六十四頁(yè)布魯氏菌病血清學(xué)實(shí)驗(yàn)的生物(shēngwù)安全1生物安全規(guī)定BSL-12實(shí)驗(yàn)(shíyàn)的分類滅活與否3使用的標(biāo)本血清全血血漿腦脊液4血清中的布氏菌未分離到其它病原？5血清中的核酸難以測(cè)到

《人間傳染的病原微生物名錄》ICDC,ChinaCDC共六十四頁(yè)布魯氏菌(bùlǔshìjūn)病病原學(xué)實(shí)驗(yàn)生物安全布氏菌在病原微生物的危害等級(jí)劃分；二類屬于高致病性實(shí)驗(yàn)室適用等級(jí)分類：BSL-3其中(qízhōng)弱毒株或疫苗株可在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作小量標(biāo)本，初代分離等在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作ICDC,ChinaCDC共六十四頁(yè)生物(shēngwù)安全設(shè)備生物安全柜吸附墊：在操作臺(tái)上放上貼有吸附材料的塑料薄膜，每日更換，可以(kěyǐ)把操作臺(tái)的污染減少到最低程度。柜內(nèi)實(shí)驗(yàn)器材和材料的取出

：生物安全實(shí)驗(yàn)室的廢棄的污染性材料、使用過(guò)的包裝材料、容器、紙張等廢棄物，都收裝好或者經(jīng)高壓滅菌器滅菌后拿到緩沖區(qū)：實(shí)驗(yàn)中或完畢后，必須從安全柜中取出非滅活的病原體時(shí)，應(yīng)裝好放在消毒液槽中，使容器外側(cè)被消毒后取出，消毒液種類因病原體不同而異。

共六十四頁(yè)生物(shēngwù)安全設(shè)備回收容器

：在安全柜內(nèi)配置回收污染物質(zhì)的容器：配置存放(cúnfàng)污染的玻璃器皿和廢棄物容器。容器中必須配有消毒液，將污染物質(zhì)完全浸沒(méi)。這些回收容器至少每天操作完畢后蓋