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DB22DB22/T2911—2018貝類(lèi)中副溶血性弧菌檢測(cè)微滴數(shù)字PCR法DeterminationofVibrioParahemolyticusinshellfish-dropletdigitalPCRmethod吉林省市場(chǎng)監(jiān)督管理廳發(fā)布I1警示——使用本標(biāo)準(zhǔn)的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本標(biāo)準(zhǔn)并未指出所有可能的安全問(wèn)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了貝類(lèi)中副溶血性弧菌檢測(cè)微滴數(shù)字PCR法的試劑和材料、儀器和設(shè)備、樣品、試驗(yàn)步GB4789.1-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品衛(wèi)生GB4789.7-2013食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)WS/T230-2002臨床診斷中聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技微滴式數(shù)字PCR平臺(tái)通過(guò)產(chǎn)生微小油包水體系實(shí)現(xiàn)反應(yīng)體系的分割，根據(jù)副溶血性弧菌的旋轉(zhuǎn)酶4.1裂解液,成分包括：2%CTAB(cetyltrithylammoniumbromideEDTA(ethylenediaminetet24.9副溶血性弧菌旋轉(zhuǎn)酶（gyrase）基因4.10上游引物：5’-CGGTAGTAAACCCACTGTCAG-3’下游引物：5’-GTTTCAGGCTCACCATGACG-3’探針：5’-（FAM）-ATCCATCGTGGCGGTCATATCCAC-（TAMRA）-3’7.2.2按照GB/T19495.3的規(guī)定進(jìn)行CTAB提取按照GB/T19495.3的規(guī)定，用核酸蛋白分析儀或紫外分光光度計(jì)（5.4）260nm和280nm的測(cè)定311152/s12℃保存反應(yīng)產(chǎn)物。體系完成后，進(jìn)行數(shù)字PCR
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