DB32T 4029-2021 胰腺生物樣本采集、處理和保藏技術(shù)規(guī)范

DB32Thetechnicalspecificationforcollection,processingandpreservationofpancreasbiospecimens江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I 1 1 1 2 3 4 48穿刺獲取胰腺組織樣本采集、處理和保 6 7 7 8 9 本文件主要起草單位：江蘇省人民醫(yī)院、江蘇省科技資源統(tǒng)籌服務(wù)中心、南京醫(yī)科利于實(shí)現(xiàn)生物樣本資源共享以及聯(lián)合研究，為開展重大疾病的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究奠定堅(jiān)實(shí)的生物樣本庫的主要功能在于存儲臨床正常和病理組織、血液、DNA等樣本及其相關(guān)臨床資料，向全國科技發(fā)展的重點(diǎn)基礎(chǔ)工作之一。其中生物樣本庫聯(lián)盟和臨床數(shù)據(jù)庫聯(lián)盟是促進(jìn)臨床科研和轉(zhuǎn)化醫(yī)1本文件適用于開展胰腺相關(guān)生物樣本采集、處理、保藏和運(yùn)輸?shù)纳鶺S/T225臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理負(fù)責(zé)識別胰腺生物樣本庫收集對象、獲取捐贈者知情同意、臨床-實(shí)驗(yàn)室溝通的工作人員，應(yīng)由相2程單的工作人員，可專職雇用，也可由經(jīng)培訓(xùn)合格的醫(yī)生或護(hù)士擔(dān)任。以下簡稱技術(shù)員。4樣本采集和保藏條件準(zhǔn)備根據(jù)《中華人民共和國人類遺傳資源管理?xiàng)l例》的要求，樣本庫對于采集和/或保藏的樣本在獲得34.3.1樣本庫工作人員主要包括管理人員、臨床研究骨干、臨床研究助理、生物樣4.3.2樣本庫工作人員應(yīng)具有臨床醫(yī)學(xué)、臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)、護(hù)理學(xué)、生物學(xué)、病理學(xué)或管理4.3.3樣本庫工作人員應(yīng)接受生物樣本庫的4.4.3液氮罐：便攜式液氮罐用于樣本采集過程中的臨時(shí)保藏和運(yùn)輸，大型液氮罐用于樣本4.5.1臨床研究骨干負(fù)責(zé)確定適合進(jìn)行生物樣本采集和保藏的病例，并通知4.5.2臨床研究骨干負(fù)責(zé)與樣本捐贈者溝通，并獲得捐贈者的書5樣本采集技術(shù)準(zhǔn)備胰腺生物樣本采集、處理和保藏應(yīng)符合GB/T378645.3.1.1為方便管理及辨識內(nèi)容物，宜使用同一類型但不同顏色標(biāo)識的照不同的生物樣本采集或處理的標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)流程，將各耗5.3.1.3將粘性標(biāo)簽粘貼于所對應(yīng)各物品的合適位置，不5.3.1.4將經(jīng)標(biāo)記的物品分別放入對應(yīng)的套裝袋5.3.1.5未使用但已貼標(biāo)簽的耗材可重復(fù)利用，使用前應(yīng)確認(rèn)物品完好胰腺實(shí)性/囊性腫瘤收集套裝、胰腺實(shí)性/囊性腫瘤穿刺樣本收集套裝、胰液樣本6.1.1采集前應(yīng)由臨床研究助理確認(rèn)知情同意書填寫無誤，并核對捐贈者身份信名等）與所使用血樣本采集套裝及物品編號匹配，然后應(yīng)由臨床護(hù)士負(fù)6.1.2采血管選擇應(yīng)滿足后期科研用途，包括但不限于采用血清分離6.1.3抽血完成后，臨床研究助理應(yīng)盡快將知情同意書連同所采集血液樣本一起處理室交給技術(shù)員，宜保證血樣本自采集至送達(dá)樣本庫的時(shí)間少于6.1.4技術(shù)員初步確認(rèn)樣本質(zhì)量完好（如：采血管無破損、采血量足夠、樣本無），本處理，分離獲得血清/血漿/血細(xì)胞（血樣本處理方法也可參照附錄C）。6.2.3技術(shù)員將樣本基本信息、儲存位置和標(biāo)準(zhǔn)分析前代碼登記于各類手術(shù)開始前，由技術(shù)員確認(rèn)需要采集胰腺組織的病例，準(zhǔn)備胰腺實(shí)性/囊性腫瘤收集套裝，確認(rèn)便57.2.1技術(shù)員攜帶便攜式液氮罐和套裝前往手術(shù)室，等待手術(shù)標(biāo)本離體，并流程單上記錄主要血管離斷時(shí)間和標(biāo)本離體時(shí)間（7.2.2主要動脈血供離斷時(shí)間和標(biāo)本離體時(shí)間應(yīng)由參與手a)全胰切除術(shù)以胰十二指腸下后動脈、胃十二指腸動脈和脾動脈后離斷b)胰十二指腸切除術(shù)以胰十二指腸下后動脈和胃十二指腸動脈后離斷者離斷時(shí)間計(jì)；7.3.2技術(shù)員使用胰腺實(shí)性腫瘤收集套裝，按照順序取瘤旁組織和腫瘤組織7.3.3液氮保存瘤旁和腫瘤組織置入凍存管，確保旋緊密封蓋后置入便攜式7.3.5技術(shù)員在手術(shù)切除胰腺組織樣本流程單上記錄參與手術(shù)的臨床研究骨7.3.8技術(shù)員將樣本基本信息、儲存位置和標(biāo)準(zhǔn)分析前代碼登記于7.4.2技術(shù)員使用胰腺囊性腫瘤收集套裝7.4.4液氮保存瘤旁和腫瘤組織置入凍存管，確保旋緊密封蓋后置入便攜式67.4.6臨床研究骨干在手術(shù)切除胰腺組織樣本流程單上記錄參與手術(shù)的臨床7.4.9技術(shù)員將樣本基本信息、儲存位置和標(biāo)準(zhǔn)分析前代碼登記于7.5.2將上清液轉(zhuǎn)移至對應(yīng)的凍存管中，將囊液上清和囊液細(xì)胞7.5.3技術(shù)員將樣本基本信息、儲存位置和標(biāo)準(zhǔn)分析前代碼登記于7.6.1.3組織保護(hù)液保藏法：組織分裝至預(yù)先盛有組織保其他處理細(xì)節(jié)按不同保護(hù)液各異，具體參照保護(hù)死組織、纖維化、炎細(xì)胞浸潤和正常胰腺組完成上述保藏程序后，技術(shù)員將樣本基本信息、儲存位置和標(biāo)準(zhǔn)分析前代碼登記于各類文件和/或78.2.1由參與內(nèi)鏡操作的臨床研究骨干進(jìn)行穿刺組織大體病理檢視，確認(rèn)穿刺物主要8.2.2臨床研究骨干使用胰腺實(shí)性腫瘤穿刺套裝，按照順序分別將瘤旁組織和腫瘤組8.2.4臨床研究骨干在穿刺獲得胰腺組織樣本流程單上記錄穿刺者和樣8.2.6所有胰腺組織樣本宜留有匹配的H8.2.7穿刺完成后，臨床研究骨干負(fù)責(zé)將液氮罐、所收集樣本和流程單一起送至生物給技術(shù)員，技術(shù)員初步確認(rèn)樣本收集和流程單填寫符合8.3.1當(dāng)確認(rèn)穿刺進(jìn)入囊腔后，由參與內(nèi)鏡操作8.3.2臨床研究骨干在在穿刺獲得胰腺組織樣本流程單上記錄穿刺者和樣本離8.3.4技術(shù)員將樣本基本信息、儲存位置和標(biāo)準(zhǔn)分析前代碼登記于各類文9胰液樣本采集、處理和保藏8胰液樣本收集可通過術(shù)中胰管穿刺抽吸（切斷胰管前穿刺）、內(nèi)鏡穿刺/引流、外傷病人外引流等9.2.1技術(shù)員應(yīng)確認(rèn)采集的胰液是新鮮獲得，并準(zhǔn)備胰液樣9.2.3技術(shù)員在胰液樣本流程單上記錄采集者和樣本離體時(shí)間9.2.5技術(shù)員將樣本基本信息、儲存位置和標(biāo)準(zhǔn)分析前代碼登記于各類文件和/或mg/L有效氯消毒液拖地、紫外燈照射等方式進(jìn)行處理。10.1.7儲存環(huán)境包含但不僅限于溫度范圍時(shí)能夠及時(shí)發(fā)出警報(bào)，按照既定程序，通知工作人員采取合理的處理測量液氮的液面高度，或在液氮罐的不同高度放置探測器來測量液氮9），核通過、樣本庫主任簽字批準(zhǔn)同意方可進(jìn)行樣本程中樣本周圍環(huán)境溫度，過程中盡量縮短操作時(shí)間并減少樣本反復(fù)證運(yùn)輸過程中的溫度控制符合要求（具體參見主要包括手術(shù)或穿刺獲得的胰腺組織樣本（具體運(yùn)輸流程參見庫類型簡寫年份年內(nèi)編號樣本類型分裝號胰腺生物樣本庫套裝分類范例胰腺生物樣本庫套裝分類及明細(xì)內(nèi)容建議見表B.1/C.1.1若樣本收集目的無需單獨(dú)分離外周血白細(xì)胞和/或血小板，技術(shù)員可將抗凝血按照1ml/管分裝），獲得白膜層成分可繼續(xù)用于外周血單個(gè)核細(xì)胞等細(xì)胞成C.1.3各類血樣本宜儲存于超低溫冰箱，應(yīng)保證血樣本自C.1.4由技術(shù)員完成樣本基本信息、儲存位置和分析前變量在各類文件和/或樣本庫管理系統(tǒng)信息登），C.2.3各類血樣本宜儲存于超低溫冰箱，應(yīng)保證血樣本自括：樣本預(yù)處理方式、離心血樣本處理?xiàng)l件（包括：樣入庫具體位置（包括：冰箱號、架子號、層號、盒子號、位置號））；d)冷凍樣本(≤-150℃)：應(yīng)使用干燥液氮罐運(yùn)輸。將樣本置液氮被認(rèn)為是一種危險(xiǎn)系數(shù)較低的物品，也無需受制于國際航運(yùn)協(xié)會危險(xiǎn)物品的a)新鮮血樣本：常溫運(yùn)輸，保證運(yùn)輸過程平穩(wěn)，切勿劇烈震蕩，常溫運(yùn)輸，保證采血到運(yùn)送至生b)新鮮囊液、胰液樣本：應(yīng)準(zhǔn)備盛滿碎冰的保溫轉(zhuǎn)運(yùn)盒，將裝有樣本的容器置于冰上運(yùn)送至樣本c)凍存血、囊液、胰液樣本：應(yīng)準(zhǔn)備裝滿干冰的泡沫箱，凍存管包埋入干冰中，宜用膠帶封好泡沫箱，盡快運(yùn)送至目的地（干冰應(yīng)當(dāng)準(zhǔn)備充分，確保運(yùn)輸全程的溫a)新鮮組織：應(yīng)準(zhǔn)備盛滿碎冰的保溫轉(zhuǎn)運(yùn)盒、裝有生理鹽水的密封容器，獲得組織樣本后，將其放入裝有預(yù)冷生理鹽水的密封容器中，并置于保溫轉(zhuǎn)運(yùn)盒中，運(yùn)輸至回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行后續(xù)操b)低溫凍存組織：應(yīng)準(zhǔn)備裝滿干冰的泡沫箱或是盛有足夠液氮的隔熱容器，凍存管包埋入干冰或浸于液氮中，泡沫箱或隔熱容器不應(yīng)完全密封，盡快運(yùn)送至目的地（干冰準(zhǔn)備應(yīng)當(dāng)充分，確保）；c)石蠟包埋組織和切片：石蠟包塊和石蠟切片可放在隔熱裝置中常溫運(yùn)輸，同時(shí)防止其處于超過27℃的環(huán)境。[1]CampbellLD,AstrinJJ,DeSouzaY,Giri,J,PatelAA,Rawley-PayneM,RushAandSieffimplementationoftheSampleCollegeofAmericanPathologist[9]RudloffU,Bhanot