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DB32Technicalspecificationformoleculartypingoftoxin-producingfusariumspeciesinwheat江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I1小麥產(chǎn)毒鐮刀菌種群分子分型技術(shù)規(guī)范本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小麥產(chǎn)毒鐮刀菌種群以及產(chǎn)毒素化學(xué)型區(qū)分中鐮刀菌DNA的提取、PCR擴(kuò)增、電泳本標(biāo)準(zhǔn)適用于產(chǎn)毒鐮刀菌種群及產(chǎn)毒化學(xué)類型的定性PGB4789.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物檢驗霉菌Tris-HCl（pH8.0），121℃高壓滅菌20min，儲存于2℃~8℃。4.5RNA酶溶液（5μg/μ）；4.10區(qū)分禾谷鐮刀菌和亞洲鐮刀菌引物Fg16R:5′-GGTAGGTATCCGACATGGCA預(yù)期亞洲鐮刀菌擴(kuò)增片段大小為497bp；預(yù)期禾谷鐮刀菌2Tri11-CON:5′-GACTGCTCATGGAGACTri11-3ADON:5′-TCCTCATGCTCGGTGGACTCTri11-15ADON:5′-TGGTCCAGTTGTCCGTATri11-NIV:5′-GTAGGTTCCATTGCTT4.15TaqDNA聚合酶、PCR擴(kuò)4.1650×TAE緩沖液：稱取484gT從培養(yǎng)平皿上刮取菌絲0.2g~0.5g于1.5）；36.3.1區(qū)分禾谷鐮刀菌和亞洲水—1×2.5μL1.5μL2.0μL0.75μL0.75μL0.025U/μL—2.0μL25.0μLLadder作參照，9v/cm恒壓電泳，電泳40min~60min，電泳結(jié)束后，置于凝膠成像儀上或紫外透射儀4水—1×2.5μL1.5μL2.0μL0.75μL0.75μL0.75μL0.75μL0.025U/μL 2.0μL25.0μL“—”表示體積不確定，如果PCR緩沖液中含有氯化鎂，則不加氯化鎂溶液，根據(jù)TaLadder作參照，9v/cm恒壓電泳，電泳40min~60min，電泳結(jié)束后，置于凝膠成像儀上

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