化學(xué)品 亞慢性吸入毒性試驗(yàn)方法 編制說明

1《化學(xué)品亞慢性吸入毒性試驗(yàn)方法》編制說明（征求意見稿）(2)2024年1月至5月，初步確立標(biāo)準(zhǔn)的框架、(4)根據(jù)起草工作進(jìn)度安排，按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法相2最終修訂的標(biāo)準(zhǔn)草案形成送審稿，并按程序和起草規(guī)則》和GB/T20000.2-2014《標(biāo)準(zhǔn)化工作指南第2部分:采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的（2）原則上等同采用經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OrganizationforEconomic技術(shù)內(nèi)容與上述方法一致，并按照GB/T1.1-2009《標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)等同采用經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OrganizationforEconomicCooperationandDevelopment,OECD）TG413（2018《亞慢性吸入毒性試驗(yàn)方法》90-DAY3準(zhǔn)GB/T21765-2008《化學(xué)物亞慢性吸入毒性試驗(yàn)方法》相比，該標(biāo)準(zhǔn)修增添了較多內(nèi)容，主要包括本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)OECD文件對(duì)GB/T21765-2008進(jìn)行編輯性修改主要技術(shù)內(nèi)容4.1.10如果是混合物，提供配方的差異不得超過同性別平均體重的20%。每只動(dòng)物都要做好標(biāo)記，以光照時(shí)，應(yīng)12h明，12h暗。飼以實(shí)驗(yàn)室的常4應(yīng)，3）動(dòng)物福利因素。如果沒有數(shù)據(jù)可參考，可使用聯(lián)合國(guó)全球化學(xué)品統(tǒng)一分類和標(biāo)簽制度的急性限值（即氣溶膠的最大濃度為5mg/L，蒸汽為20mg必要超過這些限制，應(yīng)提供理由。對(duì)于顆粒物，只有在能夠保持/達(dá)到可吸入顆的最低濃度(LOAEC)、最大耐受濃度(MTC)和/或基準(zhǔn)劑量（BMC）的估計(jì)。研究人員可利用濃度范圍研究來確定在不對(duì)動(dòng)物造成過度應(yīng)激狀況下可以容忍的最高濃度，以及最能體現(xiàn)試驗(yàn)化學(xué)品毒性的參數(shù)。BAL可以在濃度范圍研究終學(xué)品的溶解度和暴露后的肺部負(fù)擔(dān)進(jìn)行評(píng)估，以期為吸入研究的持續(xù)時(shí)間和暴5少持續(xù)5天，一般不超過28天。如果還包括停止暴量應(yīng)作相應(yīng)調(diào)整。當(dāng)測(cè)試溶解性差的顆粒狀化學(xué)品時(shí)，染毒時(shí)間可超過28天，根據(jù)試驗(yàn)化學(xué)品的性質(zhì)可選擇方案A或者方案B，具體見附件。方案A主要用于氣體、蒸汽、液體氣溶膠和可溶性氣體氣溶膠的化合物；方案B用于測(cè)試溶解性差的固體氣溶膠，這些化學(xué)品有可能停留在肺部。雖然附件中方案A和B對(duì)組別設(shè)計(jì)、測(cè)試的物質(zhì)進(jìn)行詳細(xì)說明，但研究的實(shí)際設(shè)計(jì)方案由研究負(fù)察染毒結(jié)束后的毒性效應(yīng)的轉(zhuǎn)歸而設(shè)設(shè)立附加實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物在染毒90d后，不再6進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)動(dòng)物呼吸帶的溫度維持在22℃±3℃。相對(duì)濕度，除了水性氣溶以便評(píng)估全身毒性在死亡或安樂死的時(shí)候也應(yīng)該稱重。如果在前4周內(nèi)沒有氣管肺泡灌洗液（BALF）及檢測(cè)；增加了肺臟負(fù)荷檢測(cè)。并對(duì)病理檢查進(jìn)行7表1.標(biāo)準(zhǔn)臨床病理參數(shù)血液學(xué)紅血球計(jì)數(shù)白血球總計(jì)數(shù)血細(xì)胞比容差異白細(xì)胞計(jì)數(shù)血紅蛋白濃度血小板計(jì)數(shù)平均冠狀血紅蛋白凝血功能（選擇一項(xiàng)血紅蛋白凝血酶原時(shí)間平均血紅蛋白濃度凝血時(shí)間網(wǎng)狀細(xì)胞部分凝血活酶時(shí)間臨床化學(xué)葡萄糖*丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶總膽固醇天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶甘油三酯堿性磷酸酶血尿素氮血清白蛋白總膽紅素鈉肌酐鈣總蛋白磷球蛋白氯化物尿液分析（可選）外觀（顏色和濁度）總蛋白體積葡萄糖比重或滲透壓pH值血液/血細(xì)胞支氣管肺泡灌洗應(yīng)在暴露后觀察期（postexposureo8間和PEO的時(shí)間由研究人員根據(jù)劑量范圍研究的結(jié)果和其他可用的相關(guān)信息決3）肺泡巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒在測(cè)試溶解性差的固體氣溶膠時(shí)，對(duì)肺負(fù)荷的測(cè)量可以提供受試物殘留狀所示，每個(gè)濃度組中要增加5個(gè)雄性動(dòng)物。PEO-1計(jì)劃在染毒終止后約24小時(shí)可選擇在PEO-2和PEO-3組中測(cè)量肺負(fù)荷。為了獲得關(guān)于肺部清除動(dòng)力學(xué)的信后的持續(xù)時(shí)間和PEO的間隔由研究人員根據(jù)范圍研究的結(jié)果和其他相關(guān)信息來表2.尸檢時(shí)保存的器官和組織卵巢主動(dòng)脈胰腺骨髓（和/或新鮮抽吸物）大腦（包括大腦、小腦和延髓/腦勺的部分）周邊神經(jīng)（坐骨神經(jīng)或脛骨神經(jīng)，最好靠近9盲腸凝固性腺體結(jié)腸十二指腸附睪*[眼睛（視網(wǎng)膜、視神經(jīng)）和眼瞼］股骨和跗骨關(guān)節(jié)膽囊（如果存在）[Harderian腺體]心臟腸道淚腺（眶外）喉部（3層，包括會(huì)厭的底部）肝臟來自肺部肝區(qū)的淋巴結(jié)，特別是對(duì)于溶解性差的顆粒狀測(cè)試化學(xué)品。對(duì)于更深入的檢查和/或以免疫學(xué)為重點(diǎn)的研究，可以考慮額外的引流淋巴結(jié)，例如來自后縱隔、內(nèi)頸、副頸、后頸、耳廓和/或頸/下頜骨區(qū)域的淋巴結(jié)。淋巴結(jié)（從入口處的遠(yuǎn)端）乳腺(雄性和雌性)肌肉（大腿）鼻咽組織（至少4級(jí)；1級(jí)要包括鼻咽管和鼻腔相關(guān)淋巴組織（NALT食道肌肉）垂體前列腺直腸唾液腺精囊皮膚脊髓（頸椎、中胸和腰)脾臟胸骨胃牙齒胸腺舌頭氣管（至少2個(gè)層次，包括1個(gè)通過頸部的縱切面和1個(gè)橫切面）輸尿管尿道膀胱子宮所有大的病變和腫塊注意：[括號(hào)內(nèi)]器官和組織以及任何其他器官和組織的保存由研究人員決定。黑體字的臟器應(yīng)在解剖后盡快修剪并濕潤(rùn)稱重，以避免干燥。組織和器官應(yīng)在尸檢后立即用10%緩沖福爾馬林或其他合適的固定---在5試驗(yàn)數(shù)據(jù)和報(bào)告部分進(jìn)行了更加詳細(xì)的要求（見200組的動(dòng)物數(shù)、出現(xiàn)損害的動(dòng)物數(shù)、損害類型及每種類型的動(dòng)物百分?jǐn)?shù)。所有觀體重變化、對(duì)死亡率的影響以及任何其他特異合格的亞慢性吸入90d毒性試驗(yàn)，可提供未觀察到有害作用的劑量水平a)吸入染毒裝置的描述，包括設(shè)計(jì)、類型、容積、空氣來源、微粒和氣溶b)描述測(cè)量溫度、濕度、微粒／氣溶膠及其粒度的設(shè)j)所有病理組織觀察結(jié)果詳細(xì)描述；c)將染毒的氣體濃度進(jìn)行標(biāo)化；在整體試驗(yàn)評(píng)價(jià)中包括染毒濃度與標(biāo)準(zhǔn)化d)應(yīng)該說明可能的死因和主要的作用e)如果試驗(yàn)過程中，出現(xiàn)動(dòng)物疼痛或者持久痛苦跡象的動(dòng)物需要處死的情g)應(yīng)確定BMC或NOAEC和LOAEC；h)描述在主要研究中發(fā)生的可能影響研究結(jié)果的任何i)如果進(jìn)行肺部負(fù)荷檢測(cè)，詳細(xì)說明肺部負(fù)荷測(cè)定的吸入毒性試驗(yàn)，并依據(jù)新的標(biāo)準(zhǔn)與2008年的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了對(duì)比。新方法的主要優(yōu)的OECD化學(xué)品測(cè)試指南，并結(jié)合我國(guó)化學(xué)品管理的實(shí)際需求，對(duì)測(cè)