(高清版)DB32∕T 1736-2011 水生動(dòng)物車輪蟲(chóng)病診斷方法

備案號(hào)：江DB32DiagnosemethodonAquaticanimaldiseaseofTrichodinaspp.江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB32/T1736--2011車輪蟲(chóng)病診斷是水生動(dòng)物生物學(xué)診斷的重要部分，目前還沒(méi)有該寄生蟲(chóng)病的診斷方法，特制定本地方標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)按GB/T1.1–2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)規(guī)則》編制。本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省海洋與漁業(yè)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：江蘇省水生動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：陳輝、黃春貴、鄒勇、段翠蘭、王習(xí)達(dá)、郭闖、方蘋(píng)、陳靜、劉訓(xùn)猛、郭立1DB32/T1736-2011水生動(dòng)物車輪蟲(chóng)病診斷方法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水生動(dòng)物車輪蟲(chóng)病診斷方法的儀器、程序和操作步驟。本標(biāo)準(zhǔn)適用于水生動(dòng)物車輪蟲(chóng)病的診斷。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T18088—2000出入境動(dòng)物檢疫采樣3儀器3.1顯微鏡。3.2解剖鏡。3.3解剖盤(pán)。3.4彎頭鑷子。3.5載玻片。3.6蓋玻片。4診斷程序車輪蟲(chóng)病診斷程序見(jiàn)圖1。車輪蟲(chóng)隸屬于原生動(dòng)物門、緣毛亞綱、緣毛目、壺形科、車輪蟲(chóng)屬。車輪蟲(chóng)側(cè)面觀如氈帽狀，反面觀為圓碟形，運(yùn)動(dòng)時(shí)如車輪轉(zhuǎn)動(dòng)樣。隆起的一面為前面或稱口面，相對(duì)而凹入的一面為反口面?？诿嫔嫌邢蜃蠡蚍磿r(shí)針發(fā)方向螺旋狀環(huán)繞的口溝，其末端通向胞口?？跍蟽蓚?cè)各著生一列纖毛，形成口帶，直達(dá)前庭腔。反口面的中間為齒環(huán)和輻線環(huán)。在輻線環(huán)上方有一馬蹄形的大核，一個(gè)長(zhǎng)形的小核和一個(gè)伸縮泡，其中部向體內(nèi)凹入，形成附著盤(pán)，用于吸附在宿主身上。車輪蟲(chóng)用附著盤(pán)附著在魚(yú)體的鰓絲或皮膚上，并來(lái)回滑動(dòng)。游泳時(shí)一般用反口面向前像車輪一樣轉(zhuǎn)動(dòng)，所以稱為車輪蟲(chóng)。生殖用縱二分裂法和接合生殖。常見(jiàn)能致病的車輪蟲(chóng)有10多種，寄生于各種淡水魚(yú)、海水魚(yú)的體表、鰓等處，主要危害魚(yú)苗、魚(yú)種，嚴(yán)重時(shí)可引起大批死亡。大量寄生時(shí)，由于蟲(chóng)體的刺激，引起組織發(fā)炎，分泌大量粘液，在體部、鰓上形成一層粘液層，蟲(chóng)體密集處，如鰭、頭部、體表出現(xiàn)一層白翳。病魚(yú)消瘦、發(fā)黑、游動(dòng)緩慢，呼吸困難，以致死亡。2DB32/T1736-2011表觀病魚(yú)↓ 解剖 鰓皮膚膀胱、輸尿管等制片確診為非車輪蟲(chóng)↓確診為非車輪蟲(chóng)鏡檢10×10確診為車輪蟲(chóng)優(yōu)勢(shì)種優(yōu)勢(shì)種非優(yōu)勢(shì)種圖1車輪蟲(chóng)診斷程序5操作步驟5.1樣品的收集和處理3DB32/T1736-2011 對(duì)有癥狀的水生動(dòng)物，挑選3-5尾，至少不低于2尾的瀕—2000的規(guī)定，隨機(jī)取一定數(shù)量的個(gè)體。對(duì)樣品先進(jìn)行目檢，確定病變部位，然后取鰓、皮膚、前鼻孔內(nèi)側(cè)、膀胱、輸尿管等病變組織或粘液制片。5.2制片用剪刀或解剖刀、鑷子取病癥的部位，同一部位分別制成兩個(gè)玻片，標(biāo)上組織名稱。5.3確診優(yōu)勢(shì)種將制好的玻片分別于顯微鏡低倍鏡（10×10）下觀察，見(jiàn)構(gòu)成齒環(huán)的齒體具發(fā)達(dá)的空錐形錐部以及向外的齒鉤，則確定為車輪蟲(chóng)（具體見(jiàn)圖2）。只要有一片中有單種寄生蟲(chóng)出現(xiàn)80％以上，可定為寄生蟲(chóng)優(yōu)勢(shì)種。5.4確診車輪蟲(chóng)病在低倍鏡的視野下，車輪蟲(chóng)