DB3704T 0032-2023 肉雞禽腺病毒病防治技術(shù)規(guī)范　

ICS65.020.30CCSB41DB3704IDB3704/T0032—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由棗莊市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出、歸口并組織實(shí)施。本文件起草單位：滕州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、棗莊市臺(tái)兒莊區(qū)畜牧水產(chǎn)服務(wù)中心、棗莊市畜牧漁業(yè)事業(yè)發(fā)展中心、棗莊市市中區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、滕州市春雨農(nóng)牧有限公司、滕州市慧潤農(nóng)牧發(fā)展有限公司、滕州合易食品有限公司、棗莊雙源養(yǎng)殖有限公司、棗莊科技職業(yè)學(xué)院。本文件主要起草人：朱維、岳慶磊、劉兵、宋秀梅、陳萍、王卉、馬珍馳、李繼慶、王會(huì)、李明貴、李玉征、李建俠、徐宜剛、魏永昌、孔令華、楊艦、葛斌、孫卓敬。DB3704/T0032—2023腺病毒是家禽和野禽中常見的傳染性病原體，也是哺乳動(dòng)物和魚類的傳染性病原體，它最早發(fā)現(xiàn)于1953年，因此類病毒傾向于感染上皮細(xì)胞而被命名為腺病毒。該病毒共分為哺乳動(dòng)物腺病毒屬、禽腺病毒屬、腺胸腺病毒屬、唾液腺病毒屬四個(gè)屬，禽腺病毒是禽腺病毒屬的成員，可引起許多對(duì)家禽生產(chǎn)產(chǎn)生重要影響的疾病。根據(jù)禽腺病毒的群特異性抗原可分成3個(gè)群，其中Ⅰ群禽腺病毒包括大部分從雞、火雞、鵝等禽類分離到的腺病毒，具有共同的群特異性抗原。Ⅱ群包括火雞出血性腸炎病毒、大理石脾病毒和雞脾腫大病毒，這些病毒具有可與Ⅰ群相區(qū)別的群特異性抗原，能夠引起禽類明顯的疾病。Ⅲ群是與產(chǎn)蛋下降綜合征有關(guān)的病毒及來自鴨的相關(guān)病毒，具有與Ⅰ群部分相同的共同抗原。依據(jù)限制性內(nèi)切酶片段圖譜和核酸序列等分子生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，目前Ⅰ群已鑒定了5個(gè)禽腺病毒種，其名稱用字母A-E表示，其中從雞群中分離的Ⅰ群禽腺病毒共12個(gè)血清型。當(dāng)雞的健康受到損害時(shí)，腺病毒可作為條件性致病原而快速感染致病。例如禽腺病毒血清4型引起心包積液綜合征，血清1型特別偏好在肝細(xì)胞上生長，且在特定的情況下，能導(dǎo)致嚴(yán)重的肝損傷，即包涵體肝炎。1DB3704/T0032—2023肉雞禽腺病毒病防治技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了肉雞禽腺病毒病的術(shù)語和定義、診斷、預(yù)防和控制。本文件適用于動(dòng)物疫控機(jī)構(gòu)、肉雞養(yǎng)殖場、種雞場、孵化場、動(dòng)物診療等單位及從業(yè)人員對(duì)肉雞禽腺病毒病的診斷和防治。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB18596畜禽養(yǎng)殖業(yè)污染物排放標(biāo)準(zhǔn)GB/T36195畜禽糞便無害化處理技術(shù)規(guī)范NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范NY/T1566標(biāo)準(zhǔn)化肉雞養(yǎng)殖場建設(shè)規(guī)范NY/T1948獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全要求通則NY/T3075畜禽養(yǎng)殖場消毒技術(shù)NY/T4027I群禽腺病毒檢測方法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。肉雞禽腺病毒病broilerfowladenovirusofdisease由腺病毒科禽腺病毒屬病毒引起的肉雞包涵體肝炎、心包積液綜合征、肌胃糜爛及呼吸道病變的一類病毒性疾病。4診斷根據(jù)本病流行病學(xué)特點(diǎn)、臨床癥狀、病理變化可做出初步診斷；確診需進(jìn)行血清學(xué)檢測、PCR檢測和病毒分離鑒定等實(shí)驗(yàn)室檢測。4.1流行病學(xué)該病無明顯季節(jié)性特征，各年齡段肉雞均易感，發(fā)病的嚴(yán)重性與感染病毒毒株毒力、劑量及肉雞日齡有關(guān)；該病與禽白血病、傳染性法氏囊病、禽傳染性支氣管炎等病混感時(shí)，病情加重；本病以垂直傳播為主，也可通過水平傳播，水平傳播又以機(jī)械傳播為主要方式，雞糞為最主要的傳染源；該病自然感染的潛伏期較短，一般為24h～48h。4.2臨床癥狀4.2.1包涵體肝炎2DB3704/T0032—2023病雞精神萎靡、呈蹲伏勢，羽毛蓬亂，冠處蒼白，一般3天后突然出現(xiàn)死亡，死亡率可達(dá)10%4.2.2心包積液綜合征病雞群在4周～5周齡時(shí)出現(xiàn)5天～9天的死亡高峰，死亡率可達(dá)20%～80%。4.2.3肌胃糜爛幼齡雞有死亡，其它日齡僅出現(xiàn)食欲不振，采食量下降癥狀。4.2.4呼吸道癥狀口腔有粘性分泌物流出，呼吸加快，個(gè)別出現(xiàn)呼吸困難等呼吸道癥狀。4.3病理變化4.3.1剖檢變化4.3.1.1包涵體肝炎肝臟呈淺白色、質(zhì)地發(fā)脆易碎、邊角鈍圓腫大、局部有壞死灶。4.3.1.2心包積液綜合征心包內(nèi)淡黃色清亮積液，肺水腫，肝腫大變性，腎臟腫大。4.3.1.3肌胃糜爛肌胃擴(kuò)張，有明顯的出血、糜爛點(diǎn)；胰腺、膽囊和膽管偶見腫大和出血點(diǎn)。4.3.1.4呼吸道病變氣管內(nèi)有大量粘性分泌物，咽喉部出血，肺臟充血。4.3.2組織學(xué)病理變化4.3.2.1包涵體肝炎肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)包涵體，有嗜酸性，也有嗜堿性的，呈圓形或者不規(guī)則形狀。4.3.2.2心包積液綜合征心肌纖維腫脹，出血、漿液滲出；肝細(xì)胞腫脹，出現(xiàn)水泡變性和包涵體；肺臟、腎臟出現(xiàn)水腫，間質(zhì)增寬。4.3.2.3肌胃糜爛腺上皮細(xì)胞出現(xiàn)核內(nèi)包涵體，有巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤；胰臟腺泡細(xì)胞也見包涵體。4.3.2.4呼吸道病變纖毛消失，部分上皮細(xì)胞壞死，多個(gè)器官組織中有單核細(xì)胞浸潤。4.4實(shí)驗(yàn)室檢測按照NY/T541進(jìn)行樣品采集、保存與運(yùn)輸，檢測過程按NY/T1948中的生物安全要求操作。4.4.1檢測參考文件按NY/T4027的規(guī)定執(zhí)行。4.4.2血清抗體檢測采集新鮮血液，待凝固出血清后取上清液，采用ELISA方法進(jìn)行檢測。4.4.3熒光定量PCR檢測3DB3704/T0032—2023采集咽喉、泄殖腔拭子，肝臟等組織進(jìn)行熒光定量PCR檢測。4.4.4病原分離鑒定將肝組織充分研磨，制成懸液，取上清，接種至雞肝癌細(xì)胞（LMH細(xì)胞）或雞胚肝細(xì)胞（CEL細(xì)胞觀察是否出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)，如出現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)變圓、皺縮、脫落等典型病變，則初步判定病毒分離成功。將細(xì)胞培養(yǎng)物反復(fù)凍融，離心取上清，采用4.4.3熒光定量PCR方法作進(jìn)一步鑒定。4.5結(jié)果判定4.5.1臨床疑似符合4.1、4.2和4.3.1的，臨床診斷為疑似肉雞禽腺病毒病。4.5.2確診符合4.5.1和4.3.2，則免疫雞群采用4.4.3方法，未免疫雞群采用4.4.2、4.4.3或4.4.4中的任意一種方法進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果為陽性的，即判斷為肉雞腺病毒病確診；反之檢測結(jié)果陰性，則肉雞群未患禽腺病毒病。5.1雛雞管理5.1.1控制雛雞或種蛋來源雛雞或種蛋應(yīng)從有《種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營許可證》的種雞場購進(jìn)，且雞群無禽腺病毒感染。5.1.2雛雞運(yùn)輸管理雛雞出殼后應(yīng)在24h內(nèi)運(yùn)至養(yǎng)殖場，運(yùn)輸車廂內(nèi)要保持空氣流通，溫度控制在23℃~28℃。5.2消毒進(jìn)雞前、出雞后、帶雞、用具和場區(qū)等所有消毒活動(dòng)，均嚴(yán)格按照NY/T3075執(zhí)行，特別是出現(xiàn)患病、死亡肉雞后，疑似污染的場所、用具要加強(qiáng)消毒。使用消毒劑時(shí)，應(yīng)選擇該病毒敏感的消毒劑，采取針對(duì)性消毒措施，保證消毒效果。5.2.1空舍消毒在無肉雞且密閉環(huán)境消毒時(shí)，選擇福爾馬林配合高錳酸鉀進(jìn)行熏蒸消毒24h以上，溫度控制在26℃以上、相對(duì)濕度75%以上，消毒效果最佳。5.2.2用具消毒5.2.2.1浸泡消毒對(duì)用具優(yōu)先采用1:1000的甲醛浸泡30min消毒，用清水沖洗晾干后使用。5.2.2.2噴灑消毒對(duì)路面、墻壁、設(shè)備和工具進(jìn)行噴霧消毒，霧滴直徑大小控制在200μm以上。5.2.2.3其它消毒其它不適宜浸泡、噴灑的物品和用具，采用火焰或陽光照射等方式消毒。5.2.3帶雞消毒采取氣霧消毒的方法，最佳溫度為18℃~22℃,相對(duì)濕度為70%～80%，最佳霧滴直徑為50μm～100μm，選擇如0.1%苯扎溴銨、0.3%過氧乙酸等對(duì)雞無刺激或刺激性比較小的消毒劑；眼觀雞背羽毛微濕即可，消毒液用量為15mL/m3～30mL/m3。5.2.4飲水消毒4DB3704/T0032—2023在水中添加適量的消毒劑供雞飲用，要注意消毒藥品交替使用，接種疫苗前后3天禁用；高錳酸鉀現(xiàn)用現(xiàn)配，不可久置；嚴(yán)格按照規(guī)范劑量配制，避免導(dǎo)致雞中毒；每次消毒，消毒藥不能混合使用，三種消毒藥交替使用，每周消毒2次～3次。5.2.4.1漂白粉在1000kg水中添加漂白粉6g～10g，攪勻靜置30min后飲用。5.2.4.2高錳酸鉀按0.01％比例配制高錳酸鉀溶液，隨配隨飲。5.2.4.3過氧乙酸在1kg水中加入20％過氧乙酸1mL，靜置30min后飲用。5.3飼養(yǎng)管理5.3.1養(yǎng)殖場的建設(shè)養(yǎng)殖場選址、布局、建設(shè)、防疫設(shè)施及環(huán)境保護(hù)等方面要符合NY/T1566要求，養(yǎng)殖場需取得動(dòng)物防疫條件合格證。5.3.2人員、物品的要求和管理所有人員均應(yīng)有與所在崗位相匹配的專業(yè)技術(shù)水平和能力；養(yǎng)殖參與人員實(shí)行封閉式管理，嚴(yán)禁人員串崗，嚴(yán)格執(zhí)行入場、出場消毒管理制度。不同養(yǎng)殖舍間的物品不能混用，按照5.2的要求消毒。5.3.3飲水飲水要符合GB5749要求，3天～4天對(duì)管線用臭氧消毒一次。5.3.4飼料飼喂全價(jià)飼料，采用紫外線對(duì)飼料消毒，避免飼料污染，尤其是避免被糞便污染。5.3.5全進(jìn)全出實(shí)施全進(jìn)全出，對(duì)免疫、飼喂、消毒等環(huán)節(jié)進(jìn)行統(tǒng)一管理。5.3.6環(huán)境衛(wèi)生做好生產(chǎn)區(qū)環(huán)境衛(wèi)生清理，空舍清除垃圾后，用水、高壓水槍清洗雞舍內(nèi)的設(shè)備、墻壁、天花板和地板上附著的污垢后再進(jìn)行消毒。對(duì)進(jìn)場物品（含人員隨身物品）采用化學(xué)熏蒸、紫外線或臭氧等方式徹底消毒。進(jìn)入生活區(qū)人員需沐浴、消毒，更換場區(qū)內(nèi)提供的工作服、靴子方能進(jìn)場。進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)人員需在生活區(qū)隔離60h以上，所攜帶物品衣物熏蒸4h以上，方能進(jìn)入。5.3.7清理糞便每天3次～4次清糞，及時(shí)用水清洗刮糞板，并用1:100的甲醛溶液對(duì)刮糞板噴霧消毒。5.3.8驅(qū)蟲和免疫按照本場的程序做好驅(qū)蟲、免疫工作，并跟蹤開展免疫效果評(píng)價(jià)和及時(shí)補(bǔ)免。5.4無害化處理5.4.1病死雞按照農(nóng)業(yè)部農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2017〕25號(hào)文件要求處理。5.4.2糞便5DB3704/T0032—2023按照5.3.7及時(shí)清理糞便，按照GB/T36195要求對(duì)畜禽糞便進(jìn)行無害化處理。5.4.3污水所排污水均集中到污水池，并投入消毒劑（藥）殺滅水中病原體，經(jīng)沉淀和生物處理達(dá)到GB18596要求后，再向外排放，另污水池設(shè)1.5mm防滲層。6控制6.1種雞、商品肉雞、孵化場的管理每月按照置信水平95%、實(shí)驗(yàn)敏感性100%、預(yù)期流行率1%的標(biāo)準(zhǔn)采樣，開展禽腺病毒熒光PCR檢測；同時(shí)做好其它疫病免疫，特別是控制好免疫抑制性傳染病。6.1.2商品肉雞做好消毒，及時(shí)清理糞便，每日觀察雞群，及時(shí)挑出病雞并隔離，對(duì)病死雞無害化處理。6.1.3孵化場做好每批孵化前的衛(wèi)生清理和消毒，孵化中及時(shí)挑出死胚，并做好無害化處理。6.2疫病監(jiān)測對(duì)主要禽病（禽流感、新城疫、雞白痢、禽傳染性支氣管炎、禽傳染性喉氣管炎、傳染性法氏囊等）常年堅(jiān)持監(jiān)測；每天注意觀察雞群狀況，并詳細(xì)記錄，發(fā)現(xiàn)可疑狀況及時(shí)上報(bào)、處理。6.3針對(duì)性科學(xué)免疫選擇優(yōu)質(zhì)腺病毒疫苗，在1日齡或7日齡免疫1次；種雞群要兼顧種代和子代的抗體水平，分別在1周齡、5周齡、17周齡進(jìn)行1次免疫。6.4治療措施發(fā)病時(shí)使用禽腺病毒抗體進(jìn)行治療，同時(shí)配合添加優(yōu)質(zhì)維生素、葡萄糖等多糖類；根據(jù)雞群情況，適當(dāng)投喂抗細(xì)菌感染和抗病毒藥物，但需符合停藥期、休藥期規(guī)定。7數(shù)據(jù)記錄7.1記錄內(nèi)容養(yǎng)殖場（小區(qū)）應(yīng)當(dāng)建立養(yǎng)殖檔案，載明以下內(nèi)容：畜禽的品種、數(shù)量、來源和進(jìn)出場日期；飼料、飼料添加劑、獸藥等投入品的來源、名稱、使用對(duì)象、時(shí)間和用量；檢疫、免疫、消毒、發(fā)病、死亡和無害化處理情況。7.2保存時(shí)間相關(guān)記錄保存2年以上。6DB3704/T0032—2023[1]《病死及病害動(dòng)物無害化處理技術(shù)規(guī)范》（農(nóng)業(yè)部農(nóng)醫(yī)