DB45T 1760-2018 草菇菌種保藏技術(shù)規(guī)范

DB45草菇菌種保藏技術(shù)規(guī)范TechnicalspecificationforpreservingVolvariellavolvaceaculture廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1草菇菌種保藏技術(shù)規(guī)范本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了草菇（Volvariellavolvacea）菌種保藏的術(shù)語和定義、原則、要求和保藏方法。3.1菌種culture3.2母種stockculture3.3菌種保藏culturepreservation3.44.1應(yīng)根據(jù)菌種的使用頻率選擇適宜方法進(jìn)行保藏。25.1菌種保藏所使用的器皿應(yīng)清潔、透明、無破損、無裂痕。5.2接種時(shí)應(yīng)對菌株編號(hào)及培養(yǎng)基分別進(jìn)行核對，采用適宜的培養(yǎng)基和無菌操作。5.3菌種培養(yǎng)至有厚垣孢子產(chǎn)生后進(jìn)行保藏。5.4菌種移植培養(yǎng)后，應(yīng)與原保藏菌株的培養(yǎng)特性及其登記卡（包含菌株名稱、編號(hào)、所用培養(yǎng)基、5.5保藏期間應(yīng)定期檢查菌種存放設(shè)施的溫度、濕度，菌株有無污染、棉塞有無霉變、培養(yǎng)基是否干5.6傳代過程中，將保藏菌種在營養(yǎng)貧乏和豐富的新鮮培養(yǎng)基中作交替培養(yǎng)。6.1定期移植保藏法6.2液體石蠟保藏法6.3液氮超低溫保藏法3A.2.1宜在接種培養(yǎng)后用硅膠塞封存。A.2.2使用前檢查確認(rèn)菌株是否變異，移植傳代次數(shù)不宜超過4次。A.3.1培養(yǎng)基制備A.3.1.1配方A.3.1.2配制A.3.1.3分裝A.3.1.4滅菌4A.3.1.5滅菌效果檢查A.3.2接種A.3.3培養(yǎng)A.3.4性狀指標(biāo)A.3.5保藏A.3.6定期移植5B.2.1應(yīng)選用化學(xué)純液體石蠟。B.2.2操作時(shí)應(yīng)防止液體石蠟燃燒。B.2.3應(yīng)使用電子式火焰滅菌器對移種過培養(yǎng)物的接種鏟滅菌。B.2.4保藏場所應(yīng)保持干燥，防止膠塞污染。B.2.5保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無菌液體石蠟。B.3.1液體石蠟準(zhǔn)備B.3.2培養(yǎng)物制備符合附錄A.3.1的規(guī)定。B.3.3石蠟灌注B.3.4保藏情況，液體石蠟減少，露出培養(yǎng)基斜面時(shí)應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充經(jīng)B.3.5恢復(fù)培養(yǎng)6C.2.1操作時(shí)應(yīng)戴上面具和皮手套，凍存管應(yīng)擰緊螺帽。C.2.2運(yùn)送液氮應(yīng)使用專用特制液氮罐，存放液氮罐的房間應(yīng)保持良好通風(fēng)。C.2.3應(yīng)防止安瓿管爆裂。C.2.4注意液氮罐中液氮的殘存量，定期填充液氮。C.3.1準(zhǔn)備C.3.1.1安瓿管或凍存管C.3.1.2標(biāo)簽C.3.1.3保護(hù)劑C.3.1.4培養(yǎng)物C.3.2分裝7C.3.3預(yù)凍預(yù)凍時(shí)，溫度宜控制在