2024屆高考 一輪復(fù)習(xí) 人教版 細(xì)胞工程 學(xué)案

第33講細(xì)胞工程

［課標(biāo)要求］

1.植物的組織培養(yǎng)（H）2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克?。↖I）3.細(xì)胞融合與

單克隆抗體（II）

考點(diǎn)一植物的組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交

知1識(shí)自主梳理A

1.細(xì)胞工程的概念

原理和方法

細(xì)細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)

胞

操作水平

工細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平

程

目的

改變細(xì)胞的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品

2.細(xì)胞的全能性

或具守某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞，

細(xì)都具TT發(fā)育成完整生物體的潛能

胞

的矍備細(xì)胞內(nèi)含有本物種全部的遭佳值星

全

能「具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)

性薪-處于片體狀態(tài)

L提供一定的營(yíng)養(yǎng)、激素和其他適宜的外界條件

［提醒］細(xì)胞具有全能性w細(xì)胞體現(xiàn)全能性。

3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)

盛曳植物細(xì)胞的全能性

植

物過程離體的植物器脫分化愈傷再分化胚狀體植物

處官、組織、細(xì)胞*組織"或叢芽一體

級(jí)

培產(chǎn)-培養(yǎng)基滅虐、培養(yǎng)材料和培養(yǎng)器械消毒

養(yǎng)

技固體大多由無機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、

術(shù)珞養(yǎng)培養(yǎng)基激素、瓊脂四部分組成

〕

條件?■幽堆階段不需要光照

激去培養(yǎng)網(wǎng)中生長(zhǎng)索和細(xì)胞分裂索的比例調(diào)

調(diào)控控組織培養(yǎng)的進(jìn)程

［提醒］脫分化階段不需要給予光照，再分化階段需要給予光照，以利于葉

綠素的形成。

4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

⑴概念：將丕回獨(dú)的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜

種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。

（2）操作流程

保我細(xì)胞A、B)

纖韁素醒和果膠篇處理去棹細(xì)胞曳

(原生質(zhì)體A、B〕

誘導(dǎo)融合一Q物理法:內(nèi)心、振動(dòng)、電激等

化學(xué)法：聚乙二靜(PEG)作為掂導(dǎo)劑

(融合的原生質(zhì)體)

再生出細(xì)胞嗯(觸合完成的標(biāo)忐)

脫分化畫T］再分化/胚狀體］發(fā)優(yōu)保補(bǔ)

密種細(xì)胞廠r組織或叢芽尸〔植株

1提醒］雜種植株的變異類型不屬于基囚重組。屬于染色體變異，其染色體

數(shù)通常是兩親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和，雜種植株屬于異源多倍體。

5.植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用

(1)植物繁殖的新途徑

微型保持優(yōu)良品種的遺傳特性,高效

植物快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖

殖

繁

作物利用分生區(qū)附近(如莖尖)進(jìn)行組

新

的

樂織培養(yǎng)獲得脫毒苗

徑

途

人工胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等

不于包上人工種皮制成

［提醒I①微型繁殖是無性繁殖，進(jìn)行有絲分裂，其遺傳物質(zhì)不變。

②人工種子是無性繁殖，而自然種子是有性繁殖。

(2)作物新品種的培育：?jiǎn)伪扼w育種、突變體的利用。

(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：培養(yǎng)到愈傷組織階段。

［提醒］采用液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)到愈傷組織階段，得到的是愈傷組織細(xì)胞的

代謝產(chǎn)物。

.，目困囹固——

(1)棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。(J)

(2)植物的每個(gè)細(xì)胞都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性。(X)

(3)在愈傷組織形成幼苗的再分化過程中，不會(huì)發(fā)生細(xì)胞的增殖。(X)

(4)愈傷組織的形成需要光照。(X)

(5)植物細(xì)胞的原生質(zhì)體指的是完整的植物細(xì)胞。(X)

(6)用鹽酸水解法可去掉細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體。(X)

(7)微型繁殖一定能保持親本的優(yōu)良性狀。(X)

1.(選修3P36小知識(shí))(1)固體培養(yǎng)基中的無機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分包括

,有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分包括

_________________________等物質(zhì)0

（2）培養(yǎng)基中的蔗糖只是提供碳源嗎？還起什么作用？

提示：（1）水、無機(jī)鹽小分子糖類、氨基酸（2）蔗糖不僅提供碳源，還可

以維持細(xì)胞滲透壓

2.（選修3P40小知識(shí)）胚狀體是由_______再分化后形成的，有

的結(jié)構(gòu)，相當(dāng)于正常發(fā)育形成的胚，與其有類似的

提示：愈傷組織根和芽受精卵結(jié)構(gòu)和發(fā)育過程

3.（選修3P40討論）針對(duì)植物種類和土壤等條件，在人工種子的包裹劑中可

以加入適量的養(yǎng)分、、有機(jī)碳源以及農(nóng)藥、、有益菌等。為了

促進(jìn)胚狀體的生長(zhǎng)發(fā)育，還可以向人工種皮中加入一些

提示：無機(jī)鹽抗生素植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑

陶國(guó)考向突破

r

1.（2023?寧夏六盤山模擬）在草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒

傳播給后代，導(dǎo)致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼

苗。草莓微型繁殖的基本過程如下圖，請(qǐng)回答下列問題：

外植體―.愈傷組織一處胚狀體或叢芽一植株

（1）微型繁殖培育無病毒草莓苗時(shí)，一般選取作為外植體，其依

據(jù)是

⑵與常規(guī)的種子繁殖方法相比，植物微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有

一（答出2點(diǎn)即可）。

（3）過程①配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加,以利于外植體啟動(dòng)

細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后2?5d,若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部有污染，原因可

能是O

（4）過程②要進(jìn)行照光培養(yǎng)，其作用是

（5）離體的葉肉細(xì)胞在適宜的條件下培養(yǎng)，最終能夠形成完整的植株，說明

該葉肉細(xì)胞具有該植物全部的o

（6）通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細(xì)胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過

包裝得到人工種子，這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長(zhǎng)成幼

苗。

解析：（1）由于莖尖（或根尖）病毒極少，甚至無病毒，因此通常選擇莖尖或根

尖作為外植體，通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育獲得脫毒苗。（2）與常規(guī)的種子繁殖

方法相比，植物微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有繁殖速度快，保持優(yōu)良品種的優(yōu)良特性等。

（3）過程①為脫分化過程，配制好的培養(yǎng)基中需要加入植物激素；在植物組織培

養(yǎng)時(shí)，若外植體消毒不徹底，將會(huì)在接種后的2?5d發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部有污

染。（4）過程②為再分化過程，再分化過程中芽會(huì)發(fā)育成葉，葉肉細(xì)胞中的葉綠

素的合成需要光照，故該過程需要進(jìn)行照光培養(yǎng)。（5）離體的葉肉細(xì)胞在適宜的

條件下培養(yǎng)，最終能夠形成完整的植株，證明葉肉細(xì)胞具有全能性，即該葉肉細(xì)

胞具有該植物全部的遺傳信息。（6）通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細(xì)胞培養(yǎng)

成胚狀體，再通過人工種皮（人工薄膜）包裝得到人工種子，這種人工種子在適宜

條件下可萌發(fā)生長(zhǎng)成幼苗。

答案：（1）莖尖（或根尖）莖尖（或根尖）病毒少，甚至無病毒（2）繁殖速度快;

保持優(yōu)良品種的遺傳特性

（3）植物激素外植體消毒不徹底（4）促進(jìn)葉肉細(xì)胞中葉綠素的合成（5）遺

傳信息（6）人工種皮（人工薄膜）

2.花椰菜易受黑腐病病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥對(duì)黑腐病等多種常

見病害具有抗性。我國(guó)科學(xué)家將紫外線（UV）照射處理的黑芥葉肉原生質(zhì)體和花

椰菜根原生質(zhì)體融合，獲得了抗黑腐病的雜合新植株。對(duì)雙親和部分雜合新植株

的染色體計(jì)數(shù)，結(jié)果加下表所示。請(qǐng)回答下列問題：

雜合雜合雜合

花椰

植株黑芥新植新植新植

菜

株A株B株C

染色

體數(shù)/1816343058

條

⑴原生質(zhì)體融合的理論依據(jù)是

誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)物質(zhì)是0

(2)將花椰菜和黑芥體細(xì)胞在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，繼而培養(yǎng)成新植

物體的技術(shù)稱為,

該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于.

(3)已知用一定劑量的UV處理黑芥原生質(zhì)體可破壞其染色體。根據(jù)表中數(shù)

據(jù)，嘗試推測(cè)已獲得的花椰菜黑芥雜合新植株B染色體數(shù)目小于34(雙親染色體

數(shù)之和)、雜合新植株C染色體數(shù)目大于34,可能的原因是

___________________________________o若要分析雜合新植株的染色體變異類

型，應(yīng)剪取雜合新植株與植株的根尖，制成裝片，在顯微鏡下觀察

比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。

(4)簡(jiǎn)要寫出從雜合新植株中篩選出具有高抗性的雜合新植株的思路：

解析：(1)根據(jù)細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性的特點(diǎn)，經(jīng)過一定的處理，可實(shí)現(xiàn)

原生質(zhì)體的融合。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法和化學(xué)法，常用的化學(xué)物質(zhì)

是聚乙二醇(PEG)。(2)用于融合的兩個(gè)細(xì)胞，一個(gè)是黑芥葉肉細(xì)胞，一個(gè)是花椰

菜的根部細(xì)胞，利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可將花椰菜和黑芥體細(xì)胞在一定條件下

融合成雜種細(xì)胞，繼而利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將朵種細(xì)胞培養(yǎng)成新植物體，該技

術(shù)可克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。（3）由于用一定劑量的UV處理黑芥

原生質(zhì)體可破壞其染色體，同時(shí)在融合過程中染色體可能會(huì)丟失，同時(shí)融合是隨

機(jī)的，可能存在多個(gè)細(xì)胞融合的情況，因此會(huì)出現(xiàn)雜合新植株B染色體數(shù)目小

于34和雜合新植株C染色體數(shù)目大于34的情況。若要分析雜合新植株的染色

體變異類型，應(yīng)剪取雜合新植株與雙親（花椰菜和黑芥）植株的根尖，制成裝片，

在顯微鏡下觀察并比較染色體的形態(tài)和數(shù)目，從而進(jìn)行合理的分析。（4）根據(jù)題

表中數(shù)據(jù)可知，雜合植株可能會(huì)有多種類型，為了從雜合新植株中篩選出具有高

抗性的雜合新植株，需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)鑒定，即將不同的雜合新植株分別進(jìn)行

黑腐病病菌接種實(shí)臉，觀察比較它們的生長(zhǎng)情況，生長(zhǎng)最好的即為高抗性雜合新

植株。

答案：（1）細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性聚乙二醇（或PEG）（2）植物體細(xì)抱雜

交克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙（3）融合過程中染色體可能會(huì)丟失；

融合是隨機(jī)的，可能存在多個(gè)細(xì)胞的融合雙親（花椰菜和黑芥）（4）將不同的雜

合新植株分別進(jìn)行黑腐病病菌接種實(shí)驗(yàn)，觀察比較它們的生長(zhǎng)情況，生長(zhǎng)最好的

即為高抗性的雜合新植株

考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)

!------4紹明自主梳理A

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——?jiǎng)游锛?xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)

⑴原理：細(xì)胞增殖。

（2）過程

［提醒］①選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，因?yàn)槠浞只潭鹊?、?/p>

殖能力強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。

②癌細(xì)胞不具有接觸抑制現(xiàn)象，能無限增殖。

(3)培養(yǎng)條件

「對(duì)堆養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理

晨2一添加一定-的抗生素

-定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物

培

養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)除正常的有機(jī)和無機(jī)營(yíng)養(yǎng)外，還需加入血

條一清、血漿等一些天然成分

件

洱度,「適宜溫度為36.5±0.5t(哺乳動(dòng)物)

~LpH為7.2~7.4

鏢-95%空氣加5%C()2(維持培養(yǎng)液的pH)

撲”------

I提醒I培養(yǎng)時(shí)的氣體環(huán)境不是氧氣而是95%空氣+5%CO2。

(4)應(yīng)用：生物制品的生產(chǎn)、檢測(cè)有毒物質(zhì)、醫(yī)學(xué)研究。

2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

⑴原理：動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。

(2)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程

/溫一迪螂一供體細(xì)胞

注卜)翳重組細(xì)胞一

卵母MH叫去核一去核卵/

細(xì)胞母細(xì)胞

胚胎竺電移植.代孕母體一生出與典遺傳物質(zhì)基本

相同的個(gè)體

［提醒I卵母細(xì)胞MII期細(xì)胞質(zhì)中，含有能夠激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物

質(zhì)。

(3)應(yīng)用

①加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。

②保護(hù)瀕危物種。

③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。

④轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官用于異種移植。

⑤用于組織器官的移植。

(4)存在的問題：成功率低、克隆動(dòng)物存在健康問題、克隆動(dòng)物食品的安全

性問題等。

.，回硼囹固............ma

(1)制備肝細(xì)胞懸液時(shí)先用剪刀剪碎肝組織，再用胃蛋白酶處理。(X)

(2)肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸。(X)

（3）在25C的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)。（X）

（4）培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞。（義）

⑸二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的。（義）

（6）動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞必須是卵細(xì)胞。（X）

挖材

1.（選修3P44尋根問底）胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，對(duì)細(xì)胞的消化有兩種情況:

（1）短時(shí)間內(nèi)（填

“會(huì)”或“不會(huì)”）被消化，原因是

⑵長(zhǎng)時(shí)間后細(xì)胞（填"會(huì)”或“不會(huì)”）被消化，原因是

提示：（1）不會(huì)細(xì)胞膜上具有糖蛋白，對(duì)細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用（2）會(huì)

細(xì)胞膜上糖蛋白的保護(hù)作用是有限的；細(xì)胞膜的主要成分包括磷脂和蛋白質(zhì)，蛋

白質(zhì)可被胰蛋白酶水解

2.（選修3P49討論）⑴核移植技術(shù)中，在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母

細(xì)胞之前，必須先去掉受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的原因是

⑵用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是

（3）通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，不是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了

100%的復(fù)制，原因是

此外，動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系。

提示：(1)保證核移植動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)全部來自供體細(xì)胞(2)1()代以內(nèi)的

細(xì)胞一般保持正常的二倍體核型，未發(fā)生基因突變(3)克隆動(dòng)物絕大部分DNA

來自供體細(xì)胞的細(xì)胞核，其核外還有少量的DNA,即線粒體中的DNA來自受體

卵母細(xì)胞

陶題考向突破

1.(2()23?江西九江模擬)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)：隨著腫瘤增長(zhǎng)超過了其血管供應(yīng)，內(nèi)

部缺氧能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生一種特異性的轉(zhuǎn)錄因子(即能激活特定基因表達(dá)的

蛋白質(zhì)——HIF-1),進(jìn)而促進(jìn)血管生成。為探究HIF-1的作用，相關(guān)實(shí)驗(yàn)如下表

所示。

腫瘤質(zhì)量

組別注射物培養(yǎng)第9培養(yǎng)第21

天天

HIF-\基因缺陷型胚胎

實(shí)驗(yàn)鼠0.70.8

干細(xì)胞

對(duì)照鼠野生型胚胎干細(xì)胞1.75.2

請(qǐng)回答下列問題:

(1)體外培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時(shí)，通常在培養(yǎng)液中添加一定量的，以防

培養(yǎng)過程中的污染。當(dāng)貼壁的胚胎干細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)

停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為。

(2)題表實(shí)驗(yàn)過程中，已檢測(cè)實(shí)驗(yàn)鼠注入的胚胎干細(xì)胞HlF-\基因被成功敲

除，表明HIF-1可以。

(3)由于腫瘤細(xì)胞具有的特點(diǎn)，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的需求

量較大。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，缺氧條件下，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的HIF-1可明顯促進(jìn)血管

內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的合成，增加對(duì)腫瘤細(xì)胞的快速供氧。請(qǐng)推測(cè)VEGF的生

理作用是

（4）科學(xué)家還從原發(fā)性腫瘤中分離出了血管生成抑制素和內(nèi)皮抑制素，通過

實(shí)驗(yàn)證明這兩種激素都可以抑制血管生成。在腫瘤治療過程中，當(dāng)切除原發(fā)性腫

瘤后往往會(huì)導(dǎo)致繼發(fā)性腫瘤的迅速生長(zhǎng)，根據(jù)上述研究，并結(jié)合VEGF的生理

作用，請(qǐng)分析“繼發(fā)性腫瘤的迅速生長(zhǎng)”的原因可能是

解析：（1）為防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染，體外培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時(shí)，通常在

培養(yǎng)液中添力口一定量的抗生素。當(dāng)貼壁的胚胎干細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸

時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。（2）題表實(shí)臉結(jié)果

表明，注入H/F-1基因缺陷型胚胎干細(xì)胞的實(shí)臉鼠腫瘤質(zhì)量變化不大，而對(duì)照鼠

腫瘤質(zhì)量增加較快，表明HIF-1可以促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。（3）由于腫瘤細(xì)胞具有無限

增殖的特點(diǎn)，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的需求量較大。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的生

理作用是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞周圍血管的生成。（4）在腫瘤治療過程中，當(dāng)切除原發(fā)性

腫瘤后，機(jī)體內(nèi)血管生成抑制素和內(nèi)皮抑制素含量減少，從而使VEGF含量增

多，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞周圍血管生成，從而導(dǎo)致繼發(fā)性腫瘤的迅速生長(zhǎng)。

答案：（1）抗生素細(xì)胞的接觸抑制（2）促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)（3）無限增殖促進(jìn)

腫瘤細(xì)胞周圍血管的生成（或促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖）（4）機(jī)體內(nèi)血管生成抑

制素和內(nèi)皮抑制素含量減少，從而使VEGF含量增多，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞周圍血

管生成

2.（2021?湖南選擇等）M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表

達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、

胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A,流程如圖所

示?；卮鹣铝袉栴}：

成纖維細(xì)胞

I胚胎培養(yǎng)

早期胚胎

I胚胎移植

代孕母親

克隆動(dòng)物A

⑴在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是

這類酶能將特定部位的兩個(gè)核甘酸之間的

______斷開。

(2)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí),

需要定期更換培養(yǎng)液，目的是

⑶與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是

從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為

(答出兩點(diǎn)即可)，功能上具有

(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：以免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融

合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫出利用此抗體確定

克隆動(dòng)物A中M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路：

解析：（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，切割質(zhì)粒DNA要用到限制酶，限制酶能夠

識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核普酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)

核昔酸之間的磷酸二酯鍵斷開。（2）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，要定期更換

培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。（3）

體細(xì)胞核移植技術(shù)由于動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，故與胚

胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低。胚胎干細(xì)胞具有胚胎

細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)

育的全能性，即可以分化成為動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。（4）在進(jìn)行單克鱉抗

體制備時(shí)，首先要誘導(dǎo)相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。在應(yīng)用單克隆抗

體進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，主要原理是抗原一抗體特異性結(jié)合，所以實(shí)驗(yàn)思路是取該轉(zhuǎn)基因

動(dòng)物的肝組織細(xì)胞，提取其蛋白質(zhì)，加入適量的M蛋白的單克隆抗體，觀察有

無凝集現(xiàn)象（或有無抗原一抗體特異性結(jié)合的現(xiàn)象），若有則說明M基因不失活，

若無則說明M基因失活。

答案：（1）限制酶（或限制性核酸內(nèi)切酶）磷酸二酯鍵

（2）清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害

（3）動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難體積小、細(xì)胞核大、

核仁明顯（答出兩點(diǎn)即可）發(fā)育的全能性

（4）B取該轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的肝組織細(xì)胞，提取其蛋白質(zhì)，加入適量的M蛋白

的單克隆抗體，觀察有無凝集現(xiàn)象（或有無抗原一抗體特異性結(jié)合的現(xiàn)象），若有

則說明“基因不失活，若無則說明M基因失活

考點(diǎn)三動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備

.____4紹E2自主梳理A____

i.動(dòng)物細(xì)胞融合

胞的過

二合細(xì)

合形成

細(xì)胞結(jié)

個(gè)動(dòng)物

個(gè)或多

邀金兩

交

胞雜

稱細(xì)

程，也

等

電激

毒或

的病

、碰

EG)

二醉(P

要聚乙

條件需

因素

動(dòng)誘導(dǎo)

有

融合特

物細(xì)胞

是動(dòng)

病毒

活的

］滅

物|提醒

細(xì)

。

胞的方法

動(dòng)性

膜的流

細(xì)胞

融里里

合

一

息的單

遺傳信

個(gè)細(xì)胞

個(gè)或多

原來兩

成具有

型整形

細(xì)胞

為雜交

胞，稱

核細(xì)

雜交

遠(yuǎn)緣

限，使

法的局

雜交方

了有性