DB51T 2253-2022 五小葉槭育苗技術規(guī)程

DB51I 7 9 9 9 本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定1五小葉槭育苗技術規(guī)程本文件規(guī)定了五小葉槭（Acerpentaphyllum）的組織培養(yǎng)育苗技術、播種育苗技術及技術歸檔等要本文件適用于五小葉槭在四川省內的組織培養(yǎng)育苗和播種育GB/T8321.10農藥合理LY/T2289林木種苗生產經(jīng)養(yǎng)基上，給予適宜的條件進行培養(yǎng)，誘導產生愈傷組織4組織培養(yǎng)育苗組培環(huán)境控制4.1.1準備室消毒滅菌24.1.3接種室滅菌接種前30min，開啟房間紫外燈15min。4.1.4超凈工作臺使用前先開啟操作臺內紫外燈15min，然后關紫外燈打開通風櫥通風154.1.5培養(yǎng)室滅菌4.1.6接種器具滅菌15min～20min。滅菌完成后迅速轉移至潔凈恒溫烘箱烘干備用，烘箱溫度通常設置成40℃~50℃。剪刀、鑷子等使用前需用酒精燈灼燒或接種工具滅菌4.1.7培養(yǎng)基滅菌4.1.8菌瓶處理培養(yǎng)基配制與保存4.2.1培養(yǎng)基選擇4.2.2母液配制與保存水質要求大量元素配制母液濃度3大量元素母液各組分濃度是培養(yǎng)基中相應大量元素組分濃度的40倍，微量元素母液是培養(yǎng)基中相中相應鐵鹽組分濃度的200倍，植物生長調節(jié)劑用1mol/LNaOH助溶后配成0.2mg/mL的母液。母液保存糖和瓊脂稱取母液量取與定容mL，NAA0.25mL，量筒量取去離子水958.5mL。溶解滅菌保存度應≤20℃,培養(yǎng)基應在30d內用完。無菌外植體制備4.3.1母樹選擇4.3.2外植體選擇4.3.3外植體采集4采集時間續(xù)天晴3d以上的上午。枝條要求外植體處理、保存、運輸若無需運輸，采集的半木質化枝條剪去所有葉片、木質化枝條保留枝條上端1/3處以上的葉片，直溫箱中運回組培室。保溫箱中應有防撞氣泡墊包裹的冰袋。外植體從采集到接種應在48h內完成。4.3.4外植體表面消毒預處理枝條置于自來水下沖洗5min后，用1‰洗潔洗干凈，再用無菌水沖洗3遍，無菌濾紙吸干表面水分，至于超凈工作臺表面消毒璃瓶中消毒10min，期間每隔2min稍用力搖晃玻璃瓶。無菌初代培養(yǎng)NAA。接種后，材料宜暗培養(yǎng)15d后，再光照培養(yǎng)增殖培養(yǎng)4.4.1增殖培養(yǎng)基DKW+30g/L蔗糖+7g/L卡拉膠+0.25mg/L6-BA+0.05mg/LNAA。4.4.2繼代接種段或叢芽，穩(wěn)定后可根據(jù)大小每瓶接種6～4.4.3培養(yǎng)條件4.4.4繼代培養(yǎng)代數(shù)從取外植體時開始計代，繼代培養(yǎng)超過50代，或培養(yǎng)時5DB51/T2253—4.6.1時間64.8.1基質配比按體積比泥炭土（10mm～30mm珍珠巖（4.8.2容器盛裝4.8.3育苗場地選擇與消毒4.8.4基質消毒與清洗1‰KMnO4溶液淋透基質，蓋上干凈薄膜保濕24在使用前的4d～5d對基質進行消毒，使用前3d對基質進行清洗，避免基質濕度過大。4.8.5移栽時節(jié)4.8.6移栽4.8.7穴盤苗管理初期管理苗床上方約2m處左右搭建遮陽網(wǎng)。前7d，拱棚內光照從2500lux逐漸增強到拱棚兩側敞小口→敞大口→全部揭開薄膜，使其適應自然環(huán)境的溫濕度；逐步增強光照至15000lux~4.8.8更換容器7基質配比基質段制作場地選擇消毒與清洗移栽大苗管理換杯完1h內澆定根水。前5d宜遮陽。4.8.9水肥管理苗木出圃4.9.1袋苗煉苗4.9.2起苗時節(jié)苗圃地的選擇8整地要求做到深耕細整、清除草根石礫等雜物。春季翻耕深度應在30cm以上，秋(冬)季和翌年翻耕土壤時加入優(yōu)質腐熟的有機肥(廄肥、堆肥或餅肥)150g/m2~300g/m2和速效復合肥30g/m2~45g/m2,翻挖使土肥均勻混合，在改善圃地土壤結構的同時，保證苗木初期營養(yǎng)需要。選用多菌靈粉劑、菌蟲絕粉劑1%溶液等農藥的一種或兩種混合使用對土壤進行消毒。5.2.4作床作高床育苗。苗床寬1.2m,床高30cm~40cm,苗床間預留寬30cm的作業(yè)道，長度隨地形而定。5.3播種曬，待翅果大部分開裂時，揀出枯枝、果翅碎片等雜質得到凈種，陰干后用布袋盛裝，放置于4℃冰箱春季播種前15d,用2%多菌靈溶液消毒，用40℃溫水浸種8h后沙藏堆放催芽，溫度保持在15℃~20℃,催芽期間，經(jīng)常翻看觀察種子變化，當種子裂口率達到20%以上即可進行播種。播種量6.0g/m2~7.5g/m2。采用撒播方式播種。播后用過2mm~3mm土覆蓋1cm~3cm,厚度以不見翅果為宜，搭塑料拱棚及75%遮蔭網(wǎng)保濕。9播種后10d～15d種子開始發(fā)芽出土，出苗持苗以60株～80株/㎡為宜。當苗高10根水，移栽在陰天進行。間出的苗也可進行容器苗移栽，移栽方法同.6施肥苗木出圃起苗要保持根系完整，少傷側根、須根，不傷苗干育苗中應建立技術檔案。苗木出圃時，應分級捆扎，并附上標簽。苗木生產檔案和標簽分別執(zhí)行五小葉槭組織培養(yǎng)初代培養(yǎng)基配方和生根培養(yǎng)基配NH4NO3MgSO42OMnSO42O2OCuSO42ONa2MoO42OCoCl2VB6VB3VB1258Na2-EDTANAA