海水 陰離子表面活性劑的測定 流動(dòng)注射-亞甲基藍(lán)分光光度法（征求意見稿）

ICS13.060.99CCSZ1046（本草案完成時(shí)間：）在提交反饋意見時(shí)，請將您知道的相關(guān)專利連同支持性文件一并附上。IDB46/TXXXX—XXXX 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4方法原理 5干擾和消除 26試劑與材料 27儀器和設(shè)備 38樣品采集及保存 39分析步驟 310結(jié)果計(jì)算與表示 411精密度和正確度 412質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 513廢物處理 614注意事項(xiàng) 6DB46/TXXXX—XXXX本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由海南省生態(tài)環(huán)境廳提出并歸口。本文件起草單位：海南省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心本文件主要起草人：熊曾恒、何書海、陸美環(huán)、王晟、周女琬、符嬌瑰、王霞、黃丹。本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本標(biāo)準(zhǔn)于2024年XX月XX日首次發(fā)布，自2024年XX月XX日實(shí)施。1DB46/TXXXX—XXXX海水陰離子表面活性劑的測定流動(dòng)注射-亞甲基藍(lán)分光光度法本文件規(guī)定了測定海水中陰離子表面活性劑的流動(dòng)注射-亞甲基藍(lán)分光光度法。本文件適用于海水中陰離子表面活性劑的測定。對有較深顏色的水樣本法受干擾。當(dāng)檢測光程為10mm時(shí)，本方法的檢出限為0.007mg/L（以十二烷基苯磺酸鈉，LAS計(jì)測定下限為0.028mg/L，測定范圍為0.020mg/L～0.500mg/L（以LAS計(jì)）。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB7494水質(zhì)陰離子表面活性劑的測定亞甲藍(lán)分光光度法GB17378.3海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分樣品采集、貯存與運(yùn)輸GB17378.4海洋監(jiān)測規(guī)范第4部分海水分析HJ442近岸海域環(huán)境監(jiān)測規(guī)范HJ826水質(zhì)陰離子表面活性劑的測定流動(dòng)注射-亞甲基藍(lán)分光光度法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。陰離子表面活性劑anionicsurfactants指普通合成洗滌劑的活性成分，本方法中是指使用最廣泛的直鏈烷基苯磺酸鈉（LAS）。4方法原理4.1流動(dòng)注射分析儀工作原理在封閉的管路中，將一定體積的試樣注入連續(xù)流動(dòng)的載液中，試樣與試劑在化學(xué)反應(yīng)模塊中按特定的順序和比例混合、反應(yīng)，在非完全反應(yīng)的條件下，進(jìn)入流動(dòng)檢測池進(jìn)行光度檢測。4.2化學(xué)反應(yīng)原理樣品中的陰離子表面活性劑與陽離子染料亞甲藍(lán)形成亞甲基藍(lán)活性物質(zhì)（MBAS三氯甲烷萃取，有機(jī)相于650nm波長處測量吸光度。參與工作流程見圖1。2DB46/TXXXX—XXXX1.蠕動(dòng)泵；2.注入閥；3.反應(yīng)環(huán)；4.相分離裝置；5.檢測池10mm，650nm；R1.堿性亞甲基藍(lán)溶液（6.16R2.酸性亞甲基藍(lán)溶液（6.17C.載液（6.15S.試樣；W1.廢液（三氯甲烷相W2.廢液（水相）圖1流動(dòng)注射-亞甲藍(lán)分光光度法測定陰離子洗滌劑的參考工作流程圖5干擾和消除樣品中的硫化物能與亞甲基藍(lán)生成無色的還原物而消耗亞甲基藍(lán)試劑，遇此情況可將試樣調(diào)至堿性，滴加適量的過氧化氫，消除干擾。蛋白質(zhì)和4-氨基類化合物等一些陽離子會(huì)對本方法的測量結(jié)果產(chǎn)生負(fù)干擾，這些陽離子類物質(zhì)在適當(dāng)條件下可釆用陽離子交換樹脂去除。6試劑與材料除非另有說明，分析時(shí)均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純試劑，實(shí)驗(yàn)用水為符合GB/T6682的一級水。6.1硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/mL，優(yōu)級純。6.2鹽酸：ρ（HCl）=1.19g/mL。6.3氫氧化鈉（NaOH）：優(yōu)級純。6.4氯化鈉（NaCl）：分析純。6.5十水四硼酸鈉（Na2B4O7·10H2O）。6.6三氯甲烷（CHCl3以戊烯（amylene）或乙醇（alcohol）穩(wěn)定。注1：三氯甲烷試劑中一般會(huì)有氣泡，在分析過程中容易產(chǎn)生周期性氣泡峰，影響測定6.7無水乙醇（C2H5OH）。6.8模擬海水：ρ（NaCl）=30g/L。將30.0g氯化鈉（6.4）溶解于600ml的水中，溶解后移至1000ml容量瓶中，用水定容至標(biāo)線，混勻。6.9十二烷基苯磺酸鈉（C18H29NaO3S，LAS）。6.10亞甲基藍(lán)（C16H18N3ClS），指示劑級。6.11磷酸二氫鈉（NaH2PO4·2H2O）。6.12異丙醇（C3H8O）：分析純。6.13堿性硼酸鈉儲(chǔ)備液。稱取1.6g十水四硼酸鈉（6.5）和0.34g氫氧化鈉（6.3）溶于適量水中，溶解后移至100ml容量瓶中，3DB46/TXXXX—XXXX加水至標(biāo)線，混勻。6.14亞甲基藍(lán)儲(chǔ)備液。稱取0.2g亞甲基藍(lán)（6.10），溶于50ml無水乙醇（6.7）中，充分溶后用水定容至100mL，超聲振蕩10min確保充分溶解，用0.22μm膜過濾，濾液儲(chǔ)存于棕色玻璃瓶中，有效期3個(gè)月。6.15載液在專用試劑玻璃瓶中加入700ml三氯甲烷（6.6）和200ml水，超聲波儀超聲20min左右，靜置保存于容器中。現(xiàn)用現(xiàn)配。6.16堿性亞甲基藍(lán)溶液。在試劑瓶中加入200ml超純水，加入100ml堿性硼酸鈉儲(chǔ)備液（6.13），然后加入36ml亞甲基藍(lán)儲(chǔ)備液（6.14），混勻后混勻后加入100ml無水乙醇（6.7），并定容至1000ml，棕色瓶儲(chǔ)存1個(gè)月，使用前超聲真空脫氣10分鐘。6.17酸性亞甲基藍(lán)溶液。在試劑瓶中加入400ml超純水，然后加入56g磷酸二氫鈉（6.11），充分溶解后加入50ml無水乙醇（6.7混勻后加入6.8ml濃硫酸（6.1混勻后加入7.6ml亞甲基藍(lán)儲(chǔ)備液（6.14最后定容至1000ml，棕色瓶儲(chǔ)存1個(gè)月，使用前超聲真空脫氣10分鐘。6.18十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ=100.0mg/L（以LAS計(jì)）。使用市售的有證標(biāo)準(zhǔn)溶液或稱取0.100g十二烷基苯磺酸鈉（6.9準(zhǔn)確至0.001g，溶于50ml水中，然后移至100ml容量瓶中，加水至標(biāo)線，緩慢混勻。于5℃下保存，可保存2周。6.19十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ=10.00mg/L（以LAS計(jì)）。量取十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液（6.18）10.00ml至100ml容量瓶中，加水至標(biāo)線，緩慢混勻。當(dāng)天配制。6.20載流槽清洗液：20%異丙醇（6.12）水溶液。7儀器和設(shè)備7.1流動(dòng)注射儀：包括自動(dòng)進(jìn)樣器、化學(xué)反應(yīng)模塊（預(yù)處理通道、注入泵、反應(yīng)通道及流動(dòng)檢測池，光程一般為10mm，通光管道孔徑約1.5mm）蠕動(dòng)泵、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。7.2分析天平：精度為0.1mg。7.3過濾裝置：布氏漏斗、吸濾瓶、安全瓶、抽氣泵7.4超聲波儀：頻率范圍在20～50kHz。7.5一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。8樣品采集及保存按照GB17378.3－2007和HJ442.3的相關(guān)規(guī)定采集樣品。若樣品采集后不加硫酸調(diào)節(jié)pH，則樣品需在24小時(shí)內(nèi)分析。若加硫酸至pH＜2，于4℃條件下避光冷藏，可在48小時(shí)內(nèi)分析。注2：陰離子表面活性劑易吸附在懸浮固體或沉積物上，樣品應(yīng)充分混勻，有明顯顆粒9分析步驟9.1調(diào)試與校準(zhǔn)4DB46/TXXXX—XXXX按照儀器說明書安裝分析系統(tǒng)、調(diào)試儀器及設(shè)定工作參數(shù)。儀器開機(jī)后，進(jìn)行流路系統(tǒng)的預(yù)調(diào)節(jié)，注意避免水相進(jìn)入流通池。待水相、有機(jī)相分離系統(tǒng)預(yù)調(diào)節(jié)后，對流路系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)調(diào)以獲得最佳分析條件。待基線穩(wěn)定后（約5min）后，按9.2~9.4進(jìn)行操作。9.2校準(zhǔn)9.2.1標(biāo)準(zhǔn)系列的制備于一組容量瓶中分別量取適量的十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液（6.18用模擬海水（6.8）稀釋至0.02mg/L、0.05mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L、0.50mg/L。9.2.2校準(zhǔn)曲線的繪制量取約10ml標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（9.2.1）分別置于樣品杯中，從低濃度到高濃度依次取樣分析，得到不同濃度陰離子表面活性劑的信號值（峰面積）。以信號值（峰面積）為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的陰離子表面活性劑質(zhì)量濃度（以LAS計(jì)，mg/L）為橫坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。9.3測定按照與繪制校準(zhǔn)曲線相同測定條件，量取約10ml待測樣品進(jìn)行測定，記錄信號值（峰面積）。如果濃度高于標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)，要對樣品進(jìn)行適當(dāng)稀釋。9.4空白試驗(yàn)用10ml模擬海水（6.8）代替樣品，按照與樣品分析相同步驟進(jìn)行測定，記錄信號值（峰面積）。10結(jié)果計(jì)算與表示10.1結(jié)果計(jì)算樣品中陰離子表面活性劑的濃度（以LAS計(jì)，mg/L）,按照公式（1）進(jìn)行計(jì)算P=×f（1）式中：ρ——樣品中陰離子表面活性劑的質(zhì)量濃度，mg/L；y——測定信號值（峰面積a——校準(zhǔn)曲線方法的截距；b——校準(zhǔn)曲線方法的斜率；f——稀釋倍數(shù)。10.2結(jié)果表示當(dāng)測定結(jié)果小于1mg/L時(shí)，保留小數(shù)點(diǎn)后3位，測定結(jié)果大于等于1mg/L時(shí)，保留3位有效數(shù)字。11精密度和正確度11.1精密度六家實(shí)驗(yàn)室分別對陰離子表面活性劑含量為0.050mg/L、0.100mg/L和0.300mg/L的模擬海水加標(biāo)5DB46/TXXXX—XXXX樣品進(jìn)行6次重復(fù)測定。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍分別為：1.1%~4.3%、1.2%~6.6%和1.3%~3.5%實(shí)驗(yàn)室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：6.8%、2.6%、1.7%，重復(fù)性分別為:0.004、0.01、0.02，再現(xiàn)性分別為：0.010、0.01、0.02。~六家實(shí)驗(yàn)室分別對陰離子表面活性劑含量為0.050mg/L、0.100mg/L和0.300mg/L的的低濃度海水（近岸海域海水）加標(biāo)樣品進(jìn)行6次重復(fù)測定。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍分別為：1.6%~7.0%、1.6% 3.7%和1.0%~3.8%實(shí)驗(yàn)室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：7.8%、3.1%、5.0%，重復(fù)性分別為：0.01、0.01、~0.02，再現(xiàn)性分別為：:0.01、0.01、0.05。六家實(shí)驗(yàn)室分別對陰離子表面活性劑含量為0.050mg/L、0.100mg/L和0.300mg/L的高濃度海水（感潮河段）加標(biāo)樣品進(jìn)行6次重復(fù)測定。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍分別為：0.9%~4.2%、0.8%~3.9%和0.5%~4.1%，實(shí)驗(yàn)室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：5.4%、5.9%、4.9%，重復(fù)性分別為：0.01、0.01、0.02，再現(xiàn)性分別為：0.01、0.02、0.04。11.2正確度六家實(shí)驗(yàn)室分別對加標(biāo)含量為0.050mg/L、0.100mg/L和0.300mg/L的人工海水加標(biāo)樣品進(jìn)行了6次重復(fù)測定。加標(biāo)回收率范圍分別為：90%~108%、96%~103%、98%~103%，加標(biāo)回收率最終值分別為：(95.3±13.6)%、(99.2±5.2)%、(100±3.4)%。六家實(shí)驗(yàn)室分別對加標(biāo)含量為0.050mg/L、0.100mg/L和0.300mg/L的低濃度海水加標(biāo)樣品進(jìn)行了6次重復(fù)測定。加標(biāo)回收率范圍分別為：82%~102%、93%~102%、92%~106%，加標(biāo)回收率最終值分別為：(92.0±15.6)%、(96.3±+6.2)%、(97.9±10.0)%。六家實(shí)驗(yàn)室分別對加標(biāo)含量為0.050mg/L、0.100mg/L和0.300mg/L的高濃度海水加標(biāo)樣品進(jìn)行了6次重復(fù)測定。加標(biāo)回收率范圍分別為：92%~104%、86%~103%、89%~102%，加標(biāo)回收率最終值分別為：(98.3±10.8)%、(97.0±11.8)%、(96.9±9.8)%。12質(zhì)量保證和質(zhì)量控制12.1空白試驗(yàn)每批樣品（不超過20個(gè)樣品）應(yīng)至少分析2個(gè)實(shí)驗(yàn)室空白，測定結(jié)果中目標(biāo)物濃度不應(yīng)超過方法檢12.2校準(zhǔn)曲線每批樣品分析均須繪制校準(zhǔn)曲線，校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)應(yīng)≥0.995。每分析10個(gè)樣品需用一個(gè)校準(zhǔn)曲線的中間濃度校準(zhǔn)溶液進(jìn)行校準(zhǔn)核查，其測定結(jié)果與最近一次校準(zhǔn)曲線該點(diǎn)濃度的相對偏差應(yīng)<±10%，否則應(yīng)重新繪制校準(zhǔn)曲線。12.3精密度控制每批樣品應(yīng)至少測定10%的平行雙樣，樣品數(shù)量少于10個(gè)時(shí)，應(yīng)至少測定一個(gè)平行雙樣。當(dāng)測定結(jié)果大于1mg/L時(shí)，兩次平行測定結(jié)果的相對偏差應(yīng)≤±10%；小于1mg/L時(shí)，兩次平行測定結(jié)果的相對偏差應(yīng)≤±15%；測定結(jié)果小于0.1mg/L時(shí)，兩次平行測定結(jié)果的相對