常見病原性球菌的檢驗(yàn)（臨床微生物檢驗(yàn)課件）

葡萄球菌屬

微生物鑒定技術(shù)1掌握葡萄球菌屬生物學(xué)特性熟悉葡萄球菌屬臨床意義23掌握葡萄球菌屬種間鑒定與鑒別試驗(yàn)4掌握葡萄球菌屬微生物學(xué)檢驗(yàn)學(xué)習(xí)目標(biāo)球菌概述

球菌的種類很多，根據(jù)革蘭氏染色性不同分為革蘭陽性和革蘭陰性球菌。

致病性球菌稱病原性球菌主要引起化膿性炎癥又可稱為化膿性球菌。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)葡萄球菌屬

葡萄球菌屬細(xì)菌為一類觸酶陽性的革蘭染色陽性球菌，因常堆聚成葡萄串狀而得名。廣泛分布于自然界并構(gòu)成人體的正常菌群。大多非致病，有少部分引起化膿性感染。主要包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血性葡萄球菌等35個(gè)種，17個(gè)亞種。

一、生物學(xué)特性（一）形態(tài)與結(jié)構(gòu)本屬菌多為球形，直徑0．5-1．5um。葡萄球菌無鞭毛，無芽胞、無莢膜。G+球菌，當(dāng)菌體幼齡、老齡或死亡變?yōu)镚-球菌。1．在液體培養(yǎng)基上呈單個(gè)、成雙或短鏈狀排列。2．在固體培養(yǎng)基上呈葡萄串狀排列。3．膿汁標(biāo)本中呈單個(gè)散在或少數(shù)呈葡萄串狀排列。

葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)表皮葡萄球菌電鏡圖葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)金黃色葡萄球菌革蘭染色（外傷感染）葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)金黃色葡萄球菌純培養(yǎng)革蘭染色鏡下形態(tài)（二）培養(yǎng)特性葡萄球菌為需氧和兼性厭氧菌，對(duì)營養(yǎng)的要求不高，在普通營養(yǎng)瓊脂（普皿）上生長良好。最適pH值為7．4-7．6，最適溫度為35-37℃。在20%CO2中有利于毒素形成。1．在液體培養(yǎng)基：37℃18-24h，呈均勻混濁生長。2．在普皿上：37℃24h，不透明、光滑、圓形、凸起、邊緣整齊、直徑1-5mm，通常是1-2mm，不同菌株可產(chǎn)生不同的脂溶性色素，如：金黃色、白色、檸檬色菌落。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)金黃色葡萄球菌菌落表皮葡萄球菌菌落葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)

（二）培養(yǎng)特性

3．在血皿上：形成較大菌落。金黃色葡萄球菌，產(chǎn)生溶血毒素，在血平板上產(chǎn)生β-溶血。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)

（二）培養(yǎng)特性

4．在高鹽甘露醇平板上：大多數(shù)葡萄球菌耐鹽性強(qiáng)，（大多數(shù)可在高鹽100-150g/LNaCl培養(yǎng)基中生長）。此平板常作為選擇性培養(yǎng)基，菌可分解甘露醇使指示劑呈淡黃色。G-菌在此平板上不生長。

金黃色葡萄球菌在高鹽甘露醇平板上的菌落（二）培養(yǎng)特性

5．卵黃高鹽瓊脂平板：金黃色葡萄球菌卵磷脂酶，在此培養(yǎng)基上，在菌落周圍可形成白色沉淀圈。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)（三）生化反應(yīng)：葡萄球菌的生化活性強(qiáng)，能分解多種糖類，蛋白質(zhì)和氨基酸，觸酶陽性。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)陰性對(duì)照觸酶試驗(yàn)

陽性發(fā)酵葡萄糖（四）細(xì)胞壁抗原1．蛋白抗原：葡萄球菌細(xì)胞壁的一種蛋白成分，稱為葡萄球菌A蛋白（SPA），是具有種、屬特異性而無型特異性的完全抗原。SPA可與人類IgG抗體的Fc段非特異性結(jié)合，而不影響Fab段與特異性抗原結(jié)合的功能。故可用之作為檢測(cè)多種微生物抗原的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)的重要試劑，簡

單、快速的協(xié)同凝集試驗(yàn)。

葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)（四）細(xì)胞壁抗原

2．多糖抗原：為具有型特異性的半抗原。金黃色葡萄球菌-核糖醇磷壁酸，檢測(cè)其刺激機(jī)體所產(chǎn)生的磷壁酸抗體有助于金黃色葡萄球菌感染的診斷和預(yù)后判斷。表皮葡萄球菌等凝固酶陰性葡萄球菌-甘油磷壁酸。

（五）分類葡萄球菌屬可根據(jù)DNA的同源性、色素、生化反應(yīng)及是否產(chǎn)生血漿凝固酶等不同方法進(jìn)行分類。臨床上常見的葡萄球菌主要有金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和溶血性葡萄球菌4種，根據(jù)是產(chǎn)生血漿凝固酶將葡萄球菌分為凝固酶陽性和陰性兩大類。

傳統(tǒng)的分型方法有噬菌體分型法。新穎的分型方法為分子生物學(xué)方法，如質(zhì)粒圖譜分析和細(xì)菌染色體指紋圖譜分析已廣泛用于作為葡萄球菌所致醫(yī)院感染的監(jiān)控手段。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)

（六）抵抗力：葡萄球菌是抵抗力最強(qiáng)的無芽胞細(xì)菌，在已干燥的膿、痰、血中仍可存活數(shù)月。置80℃30min，或50g/L的石炭酸溶液、1g/L的升汞溶液中15min可被殺死。1/20萬的龍膽紫可抑制其生長。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)

二．臨床意義：（一）致病物質(zhì)：1．毒素：

（1）腸毒素：耐熱，100℃30min不被破壞。（2）紅疹毒素：作用血管。（3）表皮剝脫毒素（4）其他毒素：溶血毒素、殺白細(xì)胞素等。2．酶：（1）血漿凝固酶：結(jié)合型血漿凝固酶游離型血漿凝固酶（2）耐熱核酸酶：耐100℃15min。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)（二）所致疾?。?．侵襲性疾?。夯撔愿腥?。

金黃色葡萄球菌常引起癤、癰、外科切口、創(chuàng)傷等局部化膿性感染。播散入血后可引起深部組織的化膿性感染等全身感染。

表皮葡萄球菌已成為醫(yī)院感染的重要病原菌，尤其見于免疫抑制和中性粒細(xì)胞減少患者。

腐生葡萄球菌是導(dǎo)致尿路感染的常見病原菌之一。2．毒素性疾病：食物中毒，皮膚燙傷綜合征，毒性休克

綜合征。溶血葡萄球菌是易引起先天性瓣膜心內(nèi)膜炎。3.假膜性腸炎：長期使用抗生素所致的菌群失調(diào)癥。三．微生物學(xué)檢驗(yàn)：（一）標(biāo)本采集：根據(jù)不同病癥及臨床體征采集不同的標(biāo)本。

化膿性感染病灶采集濃汁、滲出液、穿刺液、咽拭子標(biāo)本；菌血癥、敗血癥采集血液標(biāo)本；腦膜炎采集腦脊液標(biāo)本；食物中毒采集糞便、嘔吐物或剩余的食物標(biāo)本。

葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)（二）直接涂片：形態(tài)與染色。

標(biāo)本或增菌液直接涂片，革蘭染色鏡檢見革蘭陽性呈葡萄串狀排列球菌，即可做出“查見革蘭陽性球菌，葡萄串狀排列，疑為葡萄球菌”的初步報(bào)告。

正常情況下無菌狀態(tài)的體液標(biāo)本如腦脊液，漿膜腔積液

和關(guān)節(jié)腔抽出液等，直接涂片檢查具有重要價(jià)值，其他體

液標(biāo)本伴有炎癥細(xì)胞也有參考價(jià)值。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)

（四）增菌培養(yǎng)：血液標(biāo)本（靜脈血5ml）增菌培養(yǎng)，增菌液（50ml）可用葡萄糖肉湯或Mg2SO4肉湯。24h培養(yǎng)后每日觀察增菌液變化。如無變化，需培養(yǎng)7d，其中盲目傳代2次，如無細(xì)菌培養(yǎng)可報(bào)“血液標(biāo)本經(jīng)7d培養(yǎng)無菌生長”。如發(fā)生混濁、內(nèi)有膠胨樣凝塊等現(xiàn)象可進(jìn)行進(jìn)一步分離培

養(yǎng)和革蘭染色。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)

（三）分離培養(yǎng)1．血平板：35℃18-24h。菌落特征（復(fù)習(xí)）。2．普通平板

3．高鹽甘露醇平板（五）生化反應(yīng)：1．觸酶試驗(yàn)陽性。

試管法、玻片法和平板法。

葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)2．凝固酶試驗(yàn)：玻片法和試管法。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)（五）生化反應(yīng)3．耐熱DNA試驗(yàn)：

表皮葡萄球菌金黃色葡萄球菌（五）生化反應(yīng)

4.乳膠凝集試驗(yàn)：如SlidexStaphPlus可快速鑒定金黃色葡萄球菌。

基本原理是在紙板或玻片上滴加包被有人類纖維蛋白原和抗金黃色葡萄球菌單克隆IgG抗體的藍(lán)色膠乳顆粒，然后用接種環(huán)挑取待鑒定葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物與之混勻，出現(xiàn)肉眼

可見凝集現(xiàn)象為陽性。此試驗(yàn)不僅可檢測(cè)金黃色葡萄球菌

凝固酶，還可檢測(cè)葡萄球菌A蛋白（SPA）。

葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)（五）生化反應(yīng)5.甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：

6．腸毒素試驗(yàn)：

100℃30min處理后喂飼幼貓。

7.API葡萄球菌鑒定試劑盒：

本法為國際上較通用的API微量生化鑒定盒之一，APISTAPH可鑒定26種葡萄球菌，

以及3種微球菌。（五）生化反應(yīng)8.其它非培養(yǎng)鑒定或檢查方法：（1）免疫學(xué)方法：用ELISA或?qū)α髅庖唠娪痉椒z測(cè)金黃色葡萄球菌磷壁酸抗體。（2）分子生物學(xué)方法：用商品化Accu探針對(duì)培

養(yǎng)物進(jìn)行鑒定，用脈沖場(chǎng)凝膠電泳法（PFGE）對(duì)

葡萄球菌的質(zhì)粒和染色體進(jìn)行限制性核酸內(nèi)切酶

圖譜分析等。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)（六）鑒定

按科→屬→種的順序。1．科間鑒別：葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)表1微球菌科、鏈球菌科和奈瑟菌科鑒別要點(diǎn)表10-1葡萄球菌與微球菌鑒別要點(diǎn)2．屬間鑒別：葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)表2葡萄球菌屬與微球菌屬鑒別要點(diǎn)3．種間鑒別：葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)菌名凝固酶耐熱DNA酶脲酶甘露醇氧化新生霉素耐藥多黏菌素B耐藥金黃色葡萄球菌++d+-+表皮葡萄球菌--++-+溶血葡萄球菌------腐生葡萄球菌--+-+-表3引起臨床感染的最常見的4種葡萄球菌鑒別要點(diǎn)

對(duì)甲氧西林等抗葡萄球菌抗生素耐藥的金黃色葡萄球菌(MRSA)和表皮葡萄球菌(MRSE)目前已演變成為葡萄球菌醫(yī)院感染的主要和棘手問題。mecA基因探針和PCR等分子生物學(xué)技術(shù)也已用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)MRSA。臨床目前用于治療MRSA所致感染的主要藥物是萬古霉素和替考拉寧，另外氟喹諾酮類的環(huán)丙沙星等，以及利福平(與其它抗菌

藥物聯(lián)用)和復(fù)方新諾明(TMP—SMZ)等。（六）藥敏試驗(yàn)葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)MRSA葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)（七）結(jié)果評(píng)價(jià)和報(bào)告：金黃色葡萄球菌系毒力很強(qiáng)的致病菌，無論從任何標(biāo)本中分離出均應(yīng)及時(shí)鑒定，進(jìn)行藥敏試驗(yàn)和盡快報(bào)告臨床。從輸液導(dǎo)管、人工植入組織中分離出表皮葡萄球菌和從尿液標(biāo)本中分離出腐生葡萄球菌應(yīng)視為病原菌。葡萄球菌的尿液培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)應(yīng)考慮>103-104為陽性菌尿標(biāo)準(zhǔn)。其它凝固酶陰性葡萄球菌引起感染流行或臨床治療失敗時(shí)應(yīng)考慮將其鑒定到種。當(dāng)MRSA對(duì)頭孢菌素類的體外藥敏試驗(yàn)表現(xiàn)為“敏感”時(shí)，不能將這種假象向臨床報(bào)告，以免造成錯(cuò)誤導(dǎo)向。因?yàn)轶w內(nèi)活性試驗(yàn)已證實(shí)頭孢菌素類對(duì)MRSA無效。葡萄球菌屬微生物鑒定技術(shù)鏈球菌屬細(xì)菌鑒定1掌握鏈球菌屬主要生物學(xué)特性熟悉鏈球菌屬臨床意義23掌握鏈球菌屬種間鑒定與鑒別試驗(yàn)4掌握鏈球菌屬微生物學(xué)檢驗(yàn)學(xué)習(xí)目標(biāo)

鏈球菌屬細(xì)菌為一類觸酶陰性的革蘭染色陽性球菌，廣泛分布于自然界、人及動(dòng)物腸道和健康人鼻咽部。鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

1.形態(tài)與染色G+球菌，直徑0.5～1um。

（1）液體培養(yǎng)基中鏈狀排列，長短不一。短由4～8個(gè)菌組成，長者可達(dá)20～30個(gè)細(xì)菌組成。（2）在固體培養(yǎng)基或膿汁標(biāo)本中，呈短鏈、成雙或單個(gè)散在排列。一、生物學(xué)特性A群鏈球菌肺炎鏈球菌B群鏈球菌鏈球菌屬細(xì)菌鑒定鏈球菌幼齡時(shí)可見莢膜，繼續(xù)培養(yǎng)莢膜消失。肺炎鏈球菌常常呈雙排列，故又稱為肺炎雙球菌。在動(dòng)物體內(nèi)它可形成較厚的莢膜。鏈球菌屬無鞭毛、無芽胞。肺炎鏈球菌莢膜鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

2.培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高，兼性厭氧菌，在含葡萄糖、血清、血液培養(yǎng)基中生長良好。最適pH值7.4～7.6，溫度35～37℃（22～42℃）。在5%～10%CO2環(huán)境下生長更好。

（1）液體培養(yǎng)基（血清肉湯）：沉淀生長（上清液澄清/微混）。（2）血平板：菌落小，灰白色，半透明，不同菌種的溶血現(xiàn)象不同，有α-溶血、β-溶血和γ-溶血（不溶血）。鏈球菌屬細(xì)菌鑒定α-溶血β-溶血γ-溶血鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

3.生化反應(yīng)生化活性較活躍：觸酶陰性，葡萄糖+，菊糖－。

（1）A群鏈球菌：桿菌肽S

A、B和D群鏈球菌桿菌肽試驗(yàn)

A群桿菌肽S鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

3.生化反應(yīng)

（2）B群鏈球菌：CAMP+，馬尿酸鈉+

（3）D群鏈球菌：PYR+，七葉苷+B群CAMP+D群鏈球菌七葉苷+（上）A群鏈球菌七葉苷-（下）CAMP原理？鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

3.生化反應(yīng)（4）肺炎鏈球菌：OptochinS，膽汁溶菌+，菊糖+肺炎鏈球菌OptochinS膽汁溶菌（平板法）膽汁溶菌（試管法）鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

4.分類根據(jù)下述鏈球菌的溶血特征和Lancefield血清學(xué)等傳統(tǒng)的分類法，目前仍然是臨床實(shí)驗(yàn)室鑒定鏈球菌的常規(guī)使用方法。

（1）根據(jù)培養(yǎng)基上溶血特性分類：

1）甲型溶血性鏈球菌（甲鏈/草綠色鏈球菌）：綠色、α-溶血環(huán)：菌落周圍1～2mm草綠色溶血環(huán)（不完全溶血）。甲鏈為咽喉部正常菌群。

2）乙型溶血性鏈球菌（β-溶血環(huán)，透亮）：菌落周圍寬大（2～4mm）透明的溶血環(huán)，致病菌以溶血現(xiàn)象為主，主要為溶血毒素所致。

鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

3）丙型鏈球菌（無溶血環(huán)）（溶血鏈球菌或不溶血性鏈球菌）：亦稱γ-溶血現(xiàn)象。菌落較甲鏈、乙鏈大，不溶血。分類菌落特征甲型（α）溶血性鏈球菌灰色、針尖狀菌落、周圍有草綠色溶血環(huán)（α溶血）乙型（β）溶血性鏈球菌灰白色細(xì)小菌落、周圍有寬大透明溶血環(huán)（β溶血）丙型（γ）鏈球菌灰白色小菌落、無溶血環(huán)鏈球菌屬細(xì)菌鑒定（2）根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)分類：鏈球菌Ag結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，含多種抗原，主要有：

1）多糖抗原（群特異性抗原）：位于細(xì)胞壁上，Lancefield將乙鏈（溶血性）分成A、B、C、D等20個(gè)群。鏈球菌Ag群中，對(duì)人類致病者90%屬A群，B、C、D、F、G群也常感染致化膿性疾患。2）蛋白抗原（型特異性抗原）：位于菌體表面，有M、T、R和S蛋白。3）核蛋白抗原（P抗原）鏈球菌屬細(xì)菌鑒定（3）根據(jù)鏈球菌對(duì)氧的需求分為三類：需氧、厭氧、微需氧鏈球菌，還有噬菌體及細(xì)菌素分型等方法。（4）綜合溶血性、抵抗力、生化反應(yīng)性狀作為綜合分類：1）化膿性鏈球菌（廣義溶血性鏈球菌）：A群、B、C、G、H群。2）草綠色鏈球菌：（甲鏈）3）乳鏈球菌：N群，易污染牛奶4）腸鏈球菌：D群5）厭氧鏈球菌鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

5.抵抗力對(duì)外界抵抗力不強(qiáng)，對(duì)各種的常用消毒劑均很敏感，60℃30min即可將其殺死。對(duì)紅霉素、霉素、氯霉素、磺胺等藥物均敏感。鏈球菌屬細(xì)菌鑒定1.致病物質(zhì)（1）酶和菌體成分：①透明質(zhì)酸酶：又稱擴(kuò)散因子；②鏈激酶：溶纖維蛋白酶；③鏈道酶：脫氧核糖核酸酶；④M蛋白：引起超敏反應(yīng)的異嗜性抗原。二、臨床意義（2）毒素：①溶血毒素：具有溶解RBC、殺WBC及毒害心臟作用。②紅疹毒素：引起猩紅熱。溶血毒素主要分為O，S兩種。

鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

B．溶血毒素S：多肽，分子量少，無抗原性，對(duì)氧穩(wěn)定。

2.所致疾病A群鏈球菌(化膿性鏈球菌)、B群鏈球菌(無乳鏈球菌)和肺炎鏈球菌是本屬的3種重要致病菌。

A群鏈球菌臨床上?？梢鸺毙匝恃?、丹毒、膿皰病、猩紅熱、醫(yī)源性傷口感染和產(chǎn)后感染等。此外，A群鏈球菌感染后亦可發(fā)生急、慢性風(fēng)濕熱和急性腎小球腎炎等嚴(yán)重變態(tài)反應(yīng)性后發(fā)癥。

A．溶血毒素O：耐熱，含-SH基的蛋白質(zhì)，對(duì)氧敏感，易被氧化成-S-S，失去溶血能力。其抗原性很強(qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗“O”抗體，可輔助診斷鏈球菌性疾病如風(fēng)濕熱及鏈球菌感染后的腎小球腎炎。鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

B群鏈球菌是導(dǎo)致新生兒敗血癥和腦膜炎的主要病原菌。

其它溶血性鏈球菌亦可引起上呼吸道、皮膚、創(chuàng)傷部位和生殖道的感染。

肺炎鏈球菌是急性肺炎、化膿性腦膜炎、胸膜炎、腹膜炎以及中耳炎、鼻竇炎等疾病的常見病原菌。

草綠色鏈球菌群常為口腔和鼻咽部的正常菌叢，其毒力雖低，但可因刷牙、拔牙等原因造成局部損傷后侵入血流，在有慢性心瓣膜損害的病人如風(fēng)濕性心臟病患者中引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎。

鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

D群鏈球菌也稱為腸球菌所致的感染中最常見者為尿路感染，其中大部分為醫(yī)院感染，多與尿路器械操作、保留導(dǎo)尿管和病人的尿路結(jié)構(gòu)異常等有關(guān)。其次為腹部和盆腔等部位的創(chuàng)傷和外科術(shù)后感染。鏈球菌屬細(xì)菌鑒定微生物檢驗(yàn)程序標(biāo)本血液、尿液、創(chuàng)傷標(biāo)本、膿性分泌物等

直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)*注意與葡萄球菌屬、腸球菌屬鑒別，鏈球菌分群鑒定生長現(xiàn)象溶血類型生化反應(yīng)：觸酶、PYR、七葉苷、菊糖、膽汁溶菌等形態(tài)染色：革蘭陽性球菌藥敏試驗(yàn)報(bào)告血清學(xué)試驗(yàn)抗“O”試驗(yàn)Lancefield分群鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

1.標(biāo)本采集：根據(jù)臨床癥狀及體征采集標(biāo)本，如血液、尿液、創(chuàng)傷標(biāo)本、膿性分泌物等。

三、微生物學(xué)檢驗(yàn)2.直接涂片：形態(tài)與染色。標(biāo)本或增菌液直接涂片，革蘭染色鏡檢見革蘭陽性呈鏈狀排列球菌，或見革蘭陽性矛頭狀球菌成雙排列，菌體周圍有透明環(huán)，即可做出“查見革蘭陽性球菌，鏈狀排列，疑為鏈球菌”；或“查見革蘭陽性矛頭狀球菌，成雙排列，疑為肺炎鏈球菌”的初步報(bào)告。3．分離培養(yǎng)：1）增菌培養(yǎng)：A.需氧：MgSO4肉湯；B．厭氧：皰肉基。鏈球菌屬細(xì)菌鑒定

增菌液中生長現(xiàn)象：

A．產(chǎn)生β-溶血的鏈球菌：沉淀生長，從下而上的溶血現(xiàn)象。

B．產(chǎn)生α-溶血的鏈球菌：混濁生長，產(chǎn)生草綠色熒光。

C．D群鏈球菌：混濁生長。

D．厭氧鏈球菌：在皰肉基中生長呈混濁現(xiàn)象。一般菌培養(yǎng)7天，無現(xiàn)象則要盲目傳代2次。亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎血培養(yǎng)4周，每周移種平板一次。鏈球菌屬細(xì)菌鑒定2）血平板：培養(yǎng)條件：需加血清、血液等營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基—羊血平板（有助于其溶血特征的識(shí)別和進(jìn)一步鑒定）。初代分離應(yīng)置5％～10％的二氧化碳環(huán)境下培養(yǎng)。如采用二氧化碳孵箱或燭缸。需氧、厭氧各一塊培養(yǎng)經(jīng)37℃培養(yǎng)1～2天。觀察菌落特征、溶血現(xiàn)象。

*溶血性檢查要點(diǎn)：溶血毒素“O”與“S”，A群鏈球菌大多產(chǎn)生“S”，一般鏈球菌只產(chǎn)生“O”。檢查“O”時(shí)降低氧分壓：厭氧培