王旭西安分析方法驗(yàn)證文字稿

中藥分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容和要求國(guó)家藥典委員會(huì)王旭中藥分析方法驗(yàn)證的特殊性與國(guó)際協(xié)調(diào)方法接軌（ICH）

中藥方法學(xué)驗(yàn)證的特點(diǎn)分析方法的建立與分析方法驗(yàn)證中藥提取純化技術(shù)要求提取方法提取條件提取方式分離純化液-液萃取法固液萃取法沉淀法中藥分析方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目以前方法回收率精密度（儀器精密度）重復(fù)性專屬性

線性關(guān)系和線性范圍

2005版藥典一部指導(dǎo)原則準(zhǔn)確性（回收率）精密度重復(fù)性中間精密度重現(xiàn)性專屬性檢測(cè)限定量限線性范圍耐用性驗(yàn)證的目的證明采用的方法是否適合于相應(yīng)的檢測(cè)方法新建立的檢測(cè)方法、改變?cè)瓩z測(cè)方法、工藝變更、處方變更等均須驗(yàn)證驗(yàn)證過(guò)程和結(jié)果均應(yīng)記載在標(biāo)準(zhǔn)起草或修訂說(shuō)明中需驗(yàn)證的分析方法類型鑒別限量檢查含量測(cè)定溶出度、釋放度需控制的殘留物、添加物等需驗(yàn)證的分析方法類型

①已有重現(xiàn)性驗(yàn)證，不需驗(yàn)證中間精密度。

②重現(xiàn)性只有在該分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)做。

③如一種方法不夠?qū)伲捎闷渌治龇椒ㄓ枰匝a(bǔ)充。準(zhǔn)確度(Accuracy)可用已知純度的對(duì)照品做加樣回收測(cè)定，即于已知被測(cè)成分含量的供試品中再精密加入一定量的已知純度的被測(cè)成分對(duì)照品，依法測(cè)定。用實(shí)測(cè)值與供試品中含有量之差，除以加入對(duì)照品量計(jì)算回收率。準(zhǔn)確度(Accuracy)在加樣回收試驗(yàn)中須注意對(duì)照品的加入量與供試品中被測(cè)成分含有量之和必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍之內(nèi)；加入的對(duì)照品的量要適當(dāng)，過(guò)小則引起較大的相對(duì)誤差，過(guò)大則干擾成分相對(duì)減少，真實(shí)性差回收率%=（C-A）/B×100%

式中A為供試品所含被測(cè)成分量；

B為加入對(duì)照品量；

C為實(shí)測(cè)值。準(zhǔn)確度(Accuracy)數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用6個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液進(jìn)行測(cè)定，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，一般中間濃度加入量與所取供試品含量之比控制在1:1左右。準(zhǔn)確度(Accuracy)

報(bào)告的數(shù)據(jù)：樣品中待測(cè)成分含有量對(duì)照品加入量測(cè)定量回收率計(jì)算值（%）相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）準(zhǔn)確度(Accuracy)試驗(yàn)方法：測(cè)定份數(shù)的選擇樣品取樣量和對(duì)照品加入量的計(jì)算對(duì)照品加入方法的選擇測(cè)定結(jié)果的計(jì)算結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問(wèn)題

精密度（Precision）

精密度系指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度

包括：

重復(fù)性(Repeatability)

中間精密度(Intermediateprecision)

重現(xiàn)性(Reproducibility)重復(fù)性(Repeatability)定義:

在相同操作條件下，由同一個(gè)分析人員在較短的間隔時(shí)間內(nèi)測(cè)定所得結(jié)果的精密度實(shí)驗(yàn)要求：在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的樣品，用6個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或設(shè)3個(gè)不同濃度9份樣品，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)

重復(fù)性(Repeatability)

試驗(yàn)方法：測(cè)定份數(shù)的選擇樣品取樣量的設(shè)計(jì)結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問(wèn)題中間精密度

(Intermediateprecision)

在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員,用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間的精密度，稱為中間精密度?？疾斓哪康模嚎疾祀S機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響考察的變動(dòng)因素:不同時(shí)間不同分析人員不同設(shè)備中間精密度

(Intermediateprecision)實(shí)驗(yàn)方法結(jié)果判定重現(xiàn)性(Reproducibility)定義：在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員、不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間的精密度

考察的目的：當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)報(bào)告的數(shù)據(jù)：標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或可信限

專屬性（Specificity

）專屬性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正確測(cè)定出被測(cè)成分的特性。鑒別試驗(yàn)、限量檢查、含量測(cè)定等方法均應(yīng)考察其專屬性。專屬性（Specificity）專屬性有以下含義：鑒別：確證被測(cè)物是否符合其特性。檢查：確保采用的分析方法可檢出被測(cè)物中雜質(zhì)或應(yīng)控制物的準(zhǔn)確含量，如有關(guān)物質(zhì)、有毒成分、重金屬、溶劑殘留量等。含量測(cè)定：提供樣品中被測(cè)物含量的準(zhǔn)確結(jié)果。專屬性（Specificity）鑒別應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測(cè)成分的供試品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，均不得干擾測(cè)定顯微鑒別、色譜光譜鑒別等應(yīng)附相應(yīng)的代表性圖象或圖譜。專屬性（Specificity）含量測(cè)定和限量檢查以不含被測(cè)成分的供試品（除去含待測(cè)成分藥材或不含待測(cè)成分的模擬復(fù)方）試驗(yàn)說(shuō)明方法的專屬性。并標(biāo)明相關(guān)成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。必要時(shí)可采用二極管陣列檢測(cè)或質(zhì)譜檢測(cè)進(jìn)行驗(yàn)證專屬性（Specificity）試驗(yàn)方法：陰性干擾試驗(yàn)色譜純度試驗(yàn)易混淆試驗(yàn)結(jié)果判定檢測(cè)限

（LimitofDetection，LOD)

檢測(cè)限系指供試品中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。檢測(cè)限

（LimitofDetection，LOD)實(shí)驗(yàn)方法目測(cè)法理化反應(yīng)薄層色譜法信噪比法偏差計(jì)算法定量限

（LimitofQuantitative,LOQ）

定量限系指供試品中被測(cè)成分能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。用于限量檢查的定量分析方法應(yīng)確定定量限。

定量限

（LimitofQuantitative,LOQ）實(shí)驗(yàn)方法目測(cè)法理化反應(yīng)薄層色譜法信噪比法偏差計(jì)算法線性（Linearity）

線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與供試品中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。

線性（Linearity）應(yīng)在方法允許的盡可能寬的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試品的方法進(jìn)行測(cè)定，至少制備5個(gè)濃度的供試品，其最低濃度可約為定量限濃度。以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。如響應(yīng)信號(hào)與濃度不呈線性關(guān)系，必要時(shí)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計(jì)算。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。線性（Linearity）實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定濃度的基本要求配制方式結(jié)果判定范圍（Range）

范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果及要求確定。

范圍（Range）實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目限度范圍含量測(cè)定標(biāo)示量90-110%80-120%雜質(zhì)檢查限度值限度值的50-120%溶出度限度值限度值的±20%

含量均勻度測(cè)試濃度測(cè)試濃度的70-130%

范圍（中藥和復(fù)方制劑）實(shí)驗(yàn)方法樣品和對(duì)照取樣的確定測(cè)定方法的確定結(jié)果判定

耐用性（Robustness）

耐用性系指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，為把方法用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)開(kāi)始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明

耐用性（Robustness）典型的變動(dòng)因素

被測(cè)溶液的穩(wěn)定性樣品提取方式時(shí)間分離純化耐用性耐用性（Robustness）被測(cè)溶液的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)操作和考察項(xiàng)目液相色譜和氣相色譜薄層色譜結(jié)果判定耐用性（Robustness）分離純化的耐用性實(shí)驗(yàn)操作和考察項(xiàng)目結(jié)果判定耐用性（Robustness）

薄層色譜考察項(xiàng)目和具體操作要求薄層板的考察

溫度考察濕度考察

耐用性