DB4452T 19-2024“普薯32號(hào)”甘薯脫毒種苗繁育技術(shù)規(guī)范

ICS65.020.20CCSB05DB/4452Technicalcodeofpracticeforvirus-freesweetpotatoseedlingsof"PushuNo.32"揭陽(yáng)市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB4452/T19-2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由揭陽(yáng)市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件起草單位：普寧市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所。本文件主要起草人：馮順洪、陳曉瓊、張松鑫、鐘俊昌、陳嘉玲、謝漫麗、方潔麗、謝江麗、翁淑芬、黃林珊。1DB4452/T19-2024“普薯32號(hào)”甘薯脫毒種苗繁育技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了“普薯32號(hào)”鮮食型甘薯脫毒種苗繁育技術(shù)的術(shù)語(yǔ)和定義、脫毒組培苗繁育、溫網(wǎng)室繁育、脫毒種苗大田擴(kuò)繁、脫毒健康種苗繁育、采苗、種苗運(yùn)輸、種苗管理檔案等方面的要求。本文件適用于揭陽(yáng)市區(qū)域“普薯32號(hào)”脫毒種苗的繁育，亦可供廣東省其他栽培條件相近的地區(qū)參考。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB7413-2009甘薯種苗產(chǎn)地檢疫規(guī)程N(yùn)Y/T402-2016脫毒甘薯種薯(苗)病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1200-2006甘薯脫毒種薯NY/T2789-2015薯類(lèi)貯藏技術(shù)規(guī)范NY/T3537-2020甘薯脫毒種薯(苗)生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范DB44/T1803-2016下錄甘薯生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)和定義NY/T3537-2020界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1甘薯健康種苗sweetpotatohealthyseedlings經(jīng)按GB7413-2009進(jìn)行產(chǎn)地檢疫，未發(fā)現(xiàn)檢疫對(duì)象和危險(xiǎn)性病蟲(chóng)害的甘薯薯塊和薯苗。4“普薯32號(hào)”脫毒組培苗繁育4.1品種來(lái)源2001年用“普薯24號(hào)”為母本，“徐薯94/47-1”為父本人工雜交獲得該品系。該品種于2012年6月通過(guò)了廣東省農(nóng)作物品種審定，2020年6月通過(guò)國(guó)家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部非主要農(nóng)作物品種登記。4.2品種主要特征特性株型半直立，分枝性中等，蔓長(zhǎng)中等，頂葉紫色，葉心形，葉片較大，葉脈綠色，莖較粗、呈綠色，結(jié)薯集中，單株結(jié)薯數(shù)5個(gè)-7個(gè)，薯塊紡錘形，薯皮紅色，薯肉桔紅色，薯塊干物率30%左右。適應(yīng)2DB4452/T19-2024性廣，豐產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)；早熟，可提早上市供應(yīng)淡季；優(yōu)質(zhì)，胡蘿卜素含量高，熟食味優(yōu)；美觀度好，賣(mài)相好，商品價(jià)值高；糯甜型，表現(xiàn)為肉質(zhì)細(xì)膩、軟糯無(wú)絲；耐貯藏。4.3組培種苗的選擇挑選具有“普薯32號(hào)”品種典型性狀，莖葉生長(zhǎng)健壯，無(wú)任何病癥的薯苗或薯塊。4.4莖尖材料準(zhǔn)備4.4.1預(yù)備苗培育將“普薯32號(hào)”薯塊或薯苗種植于已消毒的泥炭土或營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的花盆中，在溫度25℃~30℃,光照2000lx～2500lx，光照時(shí)間12h/d條件下進(jìn)行培養(yǎng)。按照采用NY∕T402-2016的規(guī)定對(duì)薯苗或薯塊培育的嫩苗進(jìn)行病毒檢測(cè)。4.4.2莖尖脫毒材料剪取預(yù)備苗再生能力強(qiáng)、生長(zhǎng)健康的長(zhǎng)約4cm的莖尖部位作為莖尖脫毒材料。4.5衛(wèi)生要求4.5.1組培實(shí)驗(yàn)室消毒提前7d對(duì)實(shí)驗(yàn)室空間進(jìn)行消毒，每1m3用40%甲醛10ml高錳酸鉀5g，先將高錳酸鉀放入容器內(nèi)，再注入甲醛溶液，密閉重蒸24h，通風(fēng)無(wú)異味后使用。4.5.2器具消毒超凈工作臺(tái)使用前用紫外燈照射30min，臺(tái)面和內(nèi)壁用75%酒精消毒。將用于組培的所有器具在1.1kg/cm2、121℃條件下高壓滅菌20min。操作過(guò)程中使用的鑷子、剪刀、解剖針等工具，每次使用前用酒精燈火焰或高溫滅菌器消毒。4.5.3操作前消毒操作人員應(yīng)用肥皂仔細(xì)清洗雙手和手臂，更換消過(guò)毒的工作服、工作鞋、工作帽、口罩。進(jìn)入操作臺(tái)用75%酒精嚴(yán)格擦拭雙手或戴無(wú)菌手套進(jìn)行操作。4.6組培苗培育4.6.1莖尖消毒處理莖尖脫毒材料除去葉片，自來(lái)水連續(xù)沖洗10min～15min后，在超凈臺(tái)中，用0.1%氯化汞浸泡5min～6min，然后用無(wú)菌水清洗4次～5次。4.6.2莖尖剝離將莖尖脫毒材料在40倍解剖鏡下，用解剖針剝離帶1個(gè)～2個(gè)葉原基的莖尖分生組織。4.6.3組培苗誘導(dǎo)將剝離的莖尖分生組織放入添加0.5mg/L～1.5mg/L6-BA的MS培養(yǎng)基上，在溫度25℃~30℃,光照2000lx～2500lx，光照時(shí)間12h/d條件下培養(yǎng)50d～60d后，莖尖成苗。3DB4452/T19-20244.6.4組培苗擴(kuò)繁將莖尖苗切成一葉一節(jié)或兩葉兩節(jié)的莖段在MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件同4.6.3，擴(kuò)繁至20株左右時(shí)進(jìn)行病毒檢測(cè)。4.7組培苗病毒檢測(cè)按NY∕T402-2016中的血清檢測(cè)法、PCR、RT-PCR和指示植物檢測(cè)對(duì)同一個(gè)莖尖苗擴(kuò)繁的株系進(jìn)行SPFMV、SPLV、SPVG、SPCFV、SPCSV和Sweepoviruses等6個(gè)病毒進(jìn)行檢測(cè)。4.8脫毒組培苗擴(kuò)繁將確認(rèn)的脫毒組培苗切成一葉一節(jié)或兩葉兩節(jié)的莖段，扦插在MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件同4.6.3，40d～45d進(jìn)入下一輪擴(kuò)繁，擴(kuò)繁代數(shù)不高于13代，直至移栽。5溫網(wǎng)室繁育5.1苗圃準(zhǔn)備脫毒組培苗在60目防蟲(chóng)網(wǎng)室和溫室擴(kuò)繁，隔離條件好，周邊無(wú)甘薯以及無(wú)旋花科、十字花科和茄科等作物。中等肥力地塊每667m2施生物有機(jī)肥150kg、磷酸二銨20kg～25kg、硫酸鉀18kg～20kg，深翻、整細(xì)、耙平。5.2移栽時(shí)間氣溫穩(wěn)定16℃以上開(kāi)始移栽。5.3脫毒組培苗準(zhǔn)備長(zhǎng)至5片～6片葉的組培苗用鑷子輕輕從培養(yǎng)瓶中夾出，去掉老葉、用無(wú)菌水洗掉殘留培養(yǎng)基；放在室內(nèi)常溫下煉苗12h。5.4脫毒組培苗移栽組培苗按行距10cm和株距10cm移栽，保持棚內(nèi)溫20℃~25℃。氣溫上升至30℃以上時(shí)，需覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)。5.5表型鑒定觀察脫毒組培苗表型，檢驗(yàn)是否發(fā)生變異，淘汰變異的株系，保留符合原品種的典型性狀株系。5.6溫網(wǎng)室管理按照DB44/T1803-2016的規(guī)定殺滅煙粉虱和蚜蟲(chóng)等害蟲(chóng)。常規(guī)水肥管理，防止干旱濕澇。按照NY/T1200-2006的規(guī)定淘汰感染病蟲(chóng)害植株。6脫毒種苗大田擴(kuò)繁6.1原原種苗4DB4452/T19-2024將移栽成活的脫毒組培苗剪成20cm～30cm長(zhǎng)的莖段，栽插至40目防蟲(chóng)網(wǎng)棚，或周邊無(wú)旋花科、十字花科和茄科等作物，隔離條件好的無(wú)病田進(jìn)行原原種苗擴(kuò)繁。原原種苗用于擴(kuò)繁生產(chǎn)原種苗或生產(chǎn)脫毒種薯。6.2原種苗將原原種苗剪成20cm～30cm長(zhǎng)的莖段，栽插至周邊無(wú)旋花科、十字花科和茄科等作物，隔離條件好的無(wú)病田進(jìn)行原種苗擴(kuò)繁。原種苗用于大田種植或生產(chǎn)脫毒種薯。6.3脫毒種薯利用原原種苗、原種苗種植，按NY/T1200-2006的規(guī)定生產(chǎn)脫毒種薯。6.4種薯貯藏分品種、分級(jí)單收、單運(yùn)、單貯，做到輕拿、輕起運(yùn)，避免損傷。加強(qiáng)管理，控制溫濕度，防止凍害。剔除病爛傷壞以及變異薯塊，并按NY/T2789-2015的規(guī)定進(jìn)行貯藏。6.5質(zhì)量控制觀察原原種苗、原種苗表型特征，檢驗(yàn)是否發(fā)生變異，淘汰變異的種苗，保留符合原品種的典型性狀種苗。原原種苗、原種苗和脫毒種薯的病毒檢測(cè)及質(zhì)量要求應(yīng)分別符合NY/T402-2016和NY/T1200-2006的規(guī)定。7脫毒健康種苗繁育7.1種薯準(zhǔn)備7.1.1種薯質(zhì)量選用原原種苗和原種苗栽培生產(chǎn)的脫毒健康種薯，其質(zhì)量符合NY/T1200-2006的規(guī)定。7.1.2種薯處理種薯排種前應(yīng)進(jìn)行消毒，采用藥劑浸種。選用皮色鮮明、活力強(qiáng)、大小適中、無(wú)病蟲(chóng)、無(wú)傷口的健康種薯。薯塊在70%甲基托布津800倍～1000倍液或50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液浸種10min。7.2種苗繁育7.2.1苗地選擇選擇背風(fēng)向陽(yáng)、地勢(shì)較高、排水良好、管理方便、土壤肥沃疏松的新苗床做苗地。7.2.2整地起壟疏松土壤、平整苗地，清除雜草，按易排水方向起壟。壟距90cm～120cm，壟高30cm～35cm，根據(jù)土壤地力水平施用N、P、K含量為15:15:15的復(fù)合肥15kg～20kg，較肥沃耕地酌減或不施。7.2.3排種連續(xù)3d最低溫度高于8℃時(shí)，可以安排排種；在壟上開(kāi)1條～2條深約10cm溝，將消毒過(guò)的種薯按薯頭朝向一致的方式排放在溝內(nèi)，薯塊間隔8cm～10cm。排種后覆土2cm～3cm，然后澆足水，若遇低溫再用塑料薄膜覆蓋。5DB4452/T19-20247.2.4苗地管理保持苗地土壤濕潤(rùn)，相對(duì)濕度70%～80%。苗高25cm～30cm（8個(gè)～10個(gè)節(jié)）以上時(shí)，即可采苗。采苗時(shí)苗頭留2個(gè)～3個(gè)節(jié)，每667m2苗床內(nèi)撒施7.5kg尿素或當(dāng)量高氮復(fù)合肥并澆水，促側(cè)芽生長(zhǎng)。每次采苗后，重復(fù)上述管理過(guò)程。按照DB44/T1803-2016規(guī)程防治主要病蟲(chóng)害。7.3假植擴(kuò)繁7.3.1苗地選擇7.3.2整地起壟7.3.3假植將溫室大棚或大田育苗中采的種苗，經(jīng)70%甲基托布津800倍～1000倍液或50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液基部消毒后按單行或雙行方式栽插在壟上，淋足定根水。7.3.4苗期管理在假植苗節(jié)數(shù)達(dá)到6個(gè)～10個(gè)節(jié)位時(shí)進(jìn)行摘心打頂促分枝。采苗前5d～8d薄施速效氮肥，培育壯苗，采苗時(shí)苗頭留2個(gè)～3個(gè)節(jié)，每667m2苗床內(nèi)撒施7.5kg尿素或當(dāng)量高氮復(fù)合肥并澆水，促側(cè)芽生長(zhǎng)。每次采苗后，重復(fù)上述管理過(guò)程。按照DB44/T1803-2016規(guī)程防治主要病蟲(chóng)害。