可經輸血傳播感染病原體核酸篩查技術要求編制說明

《可經輸血傳播感染病原體核酸篩查技術要求》編制說明任務來源與項目編號、各起草單位和起草人承擔的工作、起草過程等團體標準《可經輸血傳播感染病原體核酸篩查技術產品要求》（T/CSBT009—2019）于2018年5月24日經中國輸血協(xié)會血液質量專業(yè)委員會批準立項，并于2019年4月12日正式發(fā)布和實施。北京醫(yī)院/國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗中心、北京市紅十字血液中心、河北省血液中心、深圳市血液中心和廣州血液中心共計5家單位承擔編寫工作。主要參與人員及其承擔的工作如下：姓名職稱職務專業(yè)單位任務分工王露楠研究員室主任臨床檢驗北京醫(yī)院/國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗中心整體框架編寫常樂副研究員臨床檢驗北京醫(yī)院/國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗中心適用范圍、規(guī)范性引用和術語定義葛紅衛(wèi)主任技師科主任臨床檢驗北京市紅十字血液中心通用技術要求王素玲副主任技師臨床檢驗河北省血液中心檢測性能要求鄭優(yōu)榮主任技師檢驗部主任臨床檢驗廣州血液中心通用技術要求曾勁峰主任技師科主任醫(yī)學檢驗深圳市血液中心性能驗證方法黃力勤副主任技師臨床檢驗臨床檢驗北京市紅十字血液中心性能驗證方法鄭欣主管技師細胞生物學深圳市血液中心性能驗證方法根據(jù)《中國輸血協(xié)會團體標準管理辦法（2019）》規(guī)定，2023年11月，經輸血傳播疾病專業(yè)委員會組織專家評審。2024年8月，北京醫(yī)院/國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗中心牽頭承擔該標準的修訂工作，編寫組成員充分考慮專家評審意見結合現(xiàn)實情況對該標準進行了修訂。二、與相關規(guī)范性文件和其他標準的關系本標準是《血站質量管理規(guī)范》、《血站實驗室質量管理規(guī)范》（以下簡稱“兩規(guī)”）、《血站技術操作規(guī)程》在血液檢測方面的補充。國家藥監(jiān)局分別于2013年5月7日頒布《乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸定量檢測試劑注冊技術審查指導原則》和《人類免疫缺陷病毒檢測試劑臨床研究注冊技術審查指導原則》，2015年11月26日《丙型肝炎病毒核糖核酸測定試劑技術審查指導原則》，這幾個指導原則均是從技術審批的角度，范圍僅涵蓋臨床使用的核酸檢測試劑。因此目前針對核酸血液篩查試劑還沒有明確的技術要求，血站在選擇和使用核酸檢測試劑是缺乏依據(jù)，不能全面地考量核酸試劑的質量，本團體標準明確核酸血液篩查試劑的技術要求，更好地保證血液篩查質量。三、國外相關規(guī)定和標準情況的比對說明本標準在編寫時部分參考美國臨床和實驗室標準協(xié)會（CLSI）MM03《MolecularDiagnosticMethodsforInfectiousDiseases》文件要求，并充分考慮了我國的國情和現(xiàn)有技術水平。MM03文件有樣本采集、運輸和處理、假陰性結果原因和控制、核酸檢測方法和選擇、建立和評估分子診斷試驗的性能特點、質量保證、結果報告、生產廠家和臨床實驗室的建議等部分。本標準根據(jù)我國相關法規(guī)要求、血站實驗室現(xiàn)有檢測技術和檢測項目，結合實驗室特點，對實驗室管理和技術人員關心的影響檢測結果的關鍵因素、核酸檢測試劑性能、試劑批質檢及常見問題等方面進行詳細闡述，并提供了可供參考的分析靈敏度建立和驗證的基本方案，可供血站核酸檢測實驗室直接使用。四、各項技術內容的依據(jù)（一）影響檢測結果的關鍵因素本部分內容本部分內容參照CLSIMM03等文件，強調了影響檢測結果的關鍵環(huán)節(jié)，包括核酸純化、引物探針、反應抑制物和干擾物等，明確了各環(huán)節(jié)的技術要求。（二）核酸檢測試劑的性能本部分內容《血站技術操作規(guī)程（2019版）》、CLSIEP17-A2和MM03等文件規(guī)定，包括分析靈敏度、分析特異性、穩(wěn)定性和重復性的具體驗證方法。（三）應用常見問題本部分內容參照CLSIEP17-A2和MM03等文件內容，包括結果分析、假陽性原因分析及處理方式問題。征求意見和采納情況、不采納的理由無重大意見分歧的處理結果和依據(jù)無。實施標準的建議用于經輸血傳播感染病原體核酸篩查試劑是按藥品管理的檢測試劑，目前已獲批準的檢測試劑分別基于聚合酶鏈反應或轉錄介導的擴增原理，檢測模式有單人份檢測和混合樣本檢測。我國雖然沒有全面地對不同血液篩查方法的殘余風險度進行評估，但是2010年血站核酸檢測試點工作以來累計核酸檢測1.4億人份的數(shù)據(jù)已充分表明核酸檢測的必要性。由于檢測環(huán)節(jié)較為復雜，影響檢測結果的因素多，特別是檢測設備和試劑的穩(wěn)定性、精密度是關鍵性能指標，但是無論是試劑注冊報批還是進口檢驗均無相應技術要求。此外核酸檢測無論是環(huán)境要求、設備投入、試劑成本，還是人員要求都高于傳統(tǒng)的ELISA方法，其檢測性能驗證的費用也相對較高。實驗室在選擇和使用核酸試劑時應該關注哪些性能指標，如何進行驗證一直是實驗室技術人員困惑的問題。目前我國采用核酸技術進行篩查的病原體包括丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒、和乙型肝炎病毒。與亞太和歐美國家相類似，我國處于丙型肝炎中度流行區(qū)域，多數(shù)感染無任何體征和癥狀，核酸檢測可以及時甄別早期感染，對血液安全至關重要。HIV的感染“窗口期”威脅血液安全是客觀存在，而隨著對外開放以及人們行為方式的變化，男男同性戀者獻血，不斷挑戰(zhàn)核酸檢測的極限。此外，我國不同地區(qū)乙型肝炎流行率和基因型分布不同，乙型肝炎的各種治療藥物和治療方法導致HBV變異株的發(fā)生等因素，乙肝核酸低含量樣本（50IU/mL）在80