河北農(nóng)業(yè)大學(xué)分子生物學(xué)題庫(kù)(帶答案)_第1頁(yè)
河北農(nóng)業(yè)大學(xué)分子生物學(xué)題庫(kù)(帶答案)_第2頁(yè)
河北農(nóng)業(yè)大學(xué)分子生物學(xué)題庫(kù)(帶答案)_第3頁(yè)
河北農(nóng)業(yè)大學(xué)分子生物學(xué)題庫(kù)(帶答案)_第4頁(yè)
河北農(nóng)業(yè)大學(xué)分子生物學(xué)題庫(kù)(帶答案)_第5頁(yè)
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一、名詞解釋中心法則(CentralDogma):是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA,再?gòu)腞NA傳遞給蛋白質(zhì),即完成遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過(guò)程。也可以從DNA傳遞給DNA,即完成DNA的復(fù)制過(guò)程。反向重復(fù)序列(IR):存在于雙鏈核酸分子中排列順序方向相反的一段核苷酸序列。DNA鏈的呼吸作用:配對(duì)堿基之間的氫鍵不但處于斷裂和再生的平衡狀態(tài)中,氫鍵上的氫原子還能和水發(fā)生交換Cot曲線(xiàn)(Cot1/2):DNA復(fù)性通常符合Cot曲線(xiàn)(Cotcurve)。Cot曲線(xiàn)標(biāo)出了DNA復(fù)性的部分(1-C/C0)和橫軸上的Cot值。DNA變性,復(fù)性:核酸的變性是指核酸雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂,變成單鏈結(jié)構(gòu)的過(guò)程。變性DNA在適當(dāng)?shù)臈l件下,兩條彼此分開(kāi)的單鏈可以重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu),這一過(guò)程稱(chēng)為復(fù)性。DNA的熔解溫度(TM):最大吸光值一半時(shí)的溫度?;蚪M(Genome):生物細(xì)胞中單套染色體的所含DNA序列的全部組成。C-值矛盾:從總體上說(shuō),生物基因組的大小同生物在進(jìn)化上所處地位的高低無(wú)關(guān),這種現(xiàn)象稱(chēng)為C值矛盾基因家族(genefamily):一組功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因.可能由某一共同祖先基因(ancestralgene)經(jīng)重復(fù)(duplication)和突變產(chǎn)生?;虼兀夯蚣易逯衼?lái)源相同、結(jié)構(gòu)相似和功能相關(guān)的基因在染色體上彼此緊鄰所構(gòu)成的串聯(lián)重復(fù)單位。割裂基因,Intron內(nèi)元,Economic外元:真核生物基因的編碼序列是不連續(xù)的而是被若干個(gè)非編碼區(qū)(內(nèi)含子)分割。衛(wèi)星DNA:真核細(xì)胞染色體具有的高度重復(fù)核苷酸序列的DNA??偭靠烧既緿NA的10%以上,主要存在于染色體的著絲粒區(qū)域,通常不被轉(zhuǎn)錄。因其堿基組成中GC含量少,具有不同的浮力密度,在氯化銫密度梯度離心后呈現(xiàn)與大多數(shù)DNA有差別的“衛(wèi)星”帶而得名。半保留復(fù)制:DNA復(fù)制時(shí)以雙鏈中的每一條單鏈作為模板,分別合成一條互補(bǔ)新鏈,重新形成的雙鏈中各保留一條原有DNA單鏈。岡崎片段:DNA不連續(xù)復(fù)制產(chǎn)生的長(zhǎng)約1~2kb的片段,隨后共價(jià)連接成完整的單鏈。復(fù)制單位(replicon):作為含有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)的獨(dú)立復(fù)制單元的一個(gè)完整DNA分子或DNA分子上的某段區(qū)域。復(fù)制體(replisome):DNA復(fù)制時(shí),復(fù)制叉上結(jié)合的由多種與復(fù)制有關(guān)的酶和輔助因子組成的復(fù)合體。先導(dǎo)鏈,后隨鏈:在DNA復(fù)制過(guò)程中,以復(fù)制叉向前移動(dòng)的方向?yàn)闃?biāo)準(zhǔn),一條模板鏈?zhǔn)?′→5′走向,在其上DNA能以5′→3′方向連續(xù)合成,成為前導(dǎo)鏈;另一條模板鏈,是5′→3′走向,在其上也是從5′→3′方向合成,但是與復(fù)制叉移動(dòng)的方向正好相反,所以隨著復(fù)制叉的移動(dòng),形成許多不連續(xù)的片段。最后這些片段被連成一條完整的DNA鏈。該鏈稱(chēng)之為后隨鏈。突變(mutation):基因的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而導(dǎo)致細(xì)胞、病毒或微生物的基因型發(fā)生穩(wěn)定的、可遺傳的變化的過(guò)程。移碼突變(frame-shiftmutation):在基因編碼區(qū),核苷酸插入或缺失導(dǎo)致三聯(lián)體密碼子閱讀方式的改變,從而使該基因的相應(yīng)編碼序列發(fā)生改變。無(wú)義突變(nonsensemutation):由于某個(gè)堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子,從而使肽鏈合成提前終止。錯(cuò)義突變(missensemutation):基因中的堿基突變導(dǎo)致翻譯產(chǎn)物中相應(yīng)位置形成錯(cuò)誤的氨基酸殘基,其結(jié)果是一個(gè)不同的氨基酸參入到多肽鏈的相應(yīng)位置。同義突變(samesensemutation):編碼同一氨基酸的密碼子的核苷酸改變但不改變編碼的氨基酸,即不改變基因產(chǎn)物的突變。組成型突變(constitutitivemutation):組成型突變constitutivemutation與酶的合成有關(guān)的調(diào)節(jié)基因的一種突變。即原來(lái)酶的合成量受調(diào)節(jié)基因調(diào)節(jié)的誘導(dǎo)酶或阻遏酶,由于調(diào)節(jié)基因發(fā)生變異,酶的合成變?yōu)榻M成型(不管生長(zhǎng)條件如何,酶的合成量總是恒定的)的一種現(xiàn)象。突變熱點(diǎn)(MutationHotpoint):基因組DNA的一個(gè)片段,對(duì)自發(fā)的或某種特別誘變劑作用下的突變表現(xiàn)出較高的傾向性增変基因(mutatorgene):)能夠增加自發(fā)突變率的基因。限制-修飾系統(tǒng)(restrictionandmodification):原核細(xì)胞保護(hù)自己,選擇性降解外源DNA的一種機(jī)制。包括兩類(lèi)酶,即限制性核酸內(nèi)切酶和DNA甲基化酶。前者負(fù)責(zé)降解進(jìn)入原核細(xì)胞的外源DNA,后者則對(duì)細(xì)胞自身的DNA進(jìn)行甲基化,從而保護(hù)細(xì)胞的DNA,使其不被細(xì)胞內(nèi)的限制性核酸內(nèi)切酶降解。光裂合酶修復(fù)(photoreactivationRepair):DNA損傷修復(fù)的一種方式,由DNA光裂合酶(photolyase)催化。該酶需要光(400-700nm)才能激活,它能切除嘧啶二聚體之間的連鍵(C-C鍵),從而修復(fù)由紫外照射而造成的損傷。存在于各種生物細(xì)胞中,人體中也存在該過(guò)程。切除修復(fù)(ExcisionRepair):切除DNA一條鏈上受損傷片段,以其互補(bǔ)鏈為模板合成正常DNA片段修復(fù)DNA損傷。重組修復(fù)(recombinative-repair):DNA復(fù)制后修復(fù)。必須通過(guò)DNA復(fù)制過(guò)程中兩條DNA鏈的重組交換而完成DNA的修復(fù)。SOS修復(fù):SOS修復(fù)是指DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷、細(xì)胞處于危急狀態(tài)時(shí)所誘導(dǎo)的一種DNA修復(fù)方式,修復(fù)結(jié)果只是能維持基因組的完整性,提高細(xì)胞的生成率,但留下的錯(cuò)誤較多,故又稱(chēng)為錯(cuò)誤傾向修復(fù)(error-pronerepair),使細(xì)胞有較高的突變率。轉(zhuǎn)錄(transcription):遺傳信息從基因轉(zhuǎn)移到RNA的過(guò)程。RNA聚合酶通過(guò)與一系列組分構(gòu)成動(dòng)態(tài)復(fù)合體,并以基因序列為遺傳信息模板,催化合成序列互補(bǔ)的RNA,包括轉(zhuǎn)錄起始、延伸、終止等過(guò)程。有義鏈(sensestrand),反義鏈(antisensestrand):從概念上說(shuō)在基因的DNA雙鏈中,轉(zhuǎn)錄時(shí)作為mRNA合成模板的那條單鏈叫做模板鏈或反義鏈(templateorantisensestrand),而轉(zhuǎn)錄時(shí)不能作為mRNA合成模板的那條單鏈叫有義鏈。啟動(dòng)子(promoter):指DNA分子上被RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合形成起始轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的區(qū)域。終止子(erminator):促進(jìn)轉(zhuǎn)錄終止的DNA序列,在RNA水平上通過(guò)轉(zhuǎn)錄出的終止子序列形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)而起作用。核酶(ribozyme):具有催化活性的RNA序列,可切割特異性RNA序列。核內(nèi)不均一RNA(hnRNA):在真核生物中,最后轉(zhuǎn)錄生成的RNA,是mRNA的前體。反式拼接(trans-splicing):發(fā)生在兩種不同原初轉(zhuǎn)錄物之間的內(nèi)元切除外元連接過(guò)程。同義密碼子(synonymcodon):編碼同一氨基酸的密碼子。搖擺假說(shuō)(wobblehypothesis):密碼子第三位堿基與反密碼子第一位堿基配對(duì)不一定遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,可有一定變動(dòng)。同功tRNA(isoacceptingtRNA):攜帶氨基酸相同而反密碼子不同的一組tRNA。反密碼子(anticodon):tRNA反密碼環(huán)上的三聯(lián)體核苷酸堿基序列。開(kāi)放閱讀框架(openreadingframe,ORF):一個(gè)能夠翻譯成氨基酸序列的三聯(lián)體構(gòu)成的讀框。。。。在構(gòu)成基因的核苷酸序列中存在著一些最終翻譯成蛋白的堿基段,每三個(gè)連續(xù)堿基(即三聯(lián)“密碼子”)編碼相應(yīng)的氨基酸。其中有一個(gè)起始“密碼子”--AUG/ATG和三個(gè)終止“密碼子”,終止“密碼子”提供終止信號(hào)。當(dāng)細(xì)胞機(jī)器沿著核酸合成蛋白鏈并使其不斷延伸的過(guò)程中遇到終密碼子時(shí),蛋白的延伸反應(yīng)終止,一個(gè)成熟(或提前終止的突變)蛋白產(chǎn)生。因此開(kāi)放閱讀框是基因序列的一部分,包含一段可以編碼蛋白的堿基序列。由于擁有特殊的起始密碼子和直到可以從該段堿基序列產(chǎn)生合適大小蛋白才出現(xiàn)的終止密碼子,該段堿基序列編碼一個(gè)蛋白。SD順序(SDswquence):在mRNA分子中起始密碼子的上游8-13個(gè)核苷酸處有一段富含嘌呤核苷酸的順序,它可以與30S亞基中的16SrRNA3'端富含嘧啶的尾部互補(bǔ),形成氫鍵結(jié)合,因此有助于mRNA的翻譯從起始密碼子處開(kāi)始。上述mRNA分子的序列特征1974年由J.Shine和L.Dalgarno發(fā)現(xiàn),故稱(chēng)為SD順序。副密碼子(paracodon):是tRNA上氨酰-tRNA合成酶的識(shí)別位點(diǎn),tRNA上決定攜帶氨基酸的區(qū)域。單順?lè)醋觤RNA(monocistronicmRNA):一個(gè)mRNA僅包含一種蛋白質(zhì)的編碼信息多順?lè)醋觤RNA(polycistronicmRNA):一個(gè)mRNA包含多個(gè)蛋白質(zhì)的編碼信息分子伴侶(molecularchaperone):存在于原核生物和真核生物細(xì)胞質(zhì)以及細(xì)胞器中可協(xié)助新生肽鏈正確折疊的一類(lèi)蛋白質(zhì)。應(yīng)急因子(stringentfactor):即Rel蛋白,是E.coli中的一種具有焦磷酸轉(zhuǎn)移酶活性的蛋白質(zhì),它能生成催化magacspot反應(yīng)。弱化子:位于基因內(nèi)部的不依賴(lài)于ρ的轉(zhuǎn)錄終止子,可以使轉(zhuǎn)錄提前終止而發(fā)揮抑制基因表達(dá)作用。魔斑(magicspot):當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中,遇到氨基酸全面缺乏時(shí),細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng),停止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥(niǎo)苷四磷酸(ppGpp)和鳥(niǎo)苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp與pppGpp的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子,而是影響一大批,所以稱(chēng)他們是超級(jí)調(diào)控子或稱(chēng)為魔斑。順勢(shì)作用元件(cis-actingelement):指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān),能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別結(jié)合的特殊DNA序列,包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子等。反式作用因子(trans-actingfactor):指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過(guò)直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因泵火星的蛋白質(zhì)因子。選擇性剪接(alternativesplicing):是指從一個(gè)mRNA前體中通過(guò)不同的剪接方式(選擇不同的剪接位點(diǎn)組合)產(chǎn)生不同的mRNA剪接異構(gòu)體的過(guò)程,而最終的蛋白產(chǎn)物會(huì)表現(xiàn)出不同或者是相互拮抗的功能和結(jié)構(gòu)特性,或者,在相同的細(xì)胞中由于表達(dá)水平的不同而導(dǎo)致不同的表型。RecA蛋白:RecA蛋白是一種形如纖維,每次通過(guò)最初形成單體進(jìn)行伸長(zhǎng)和收縮活動(dòng)的蛋白,在修復(fù)受損DNA的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。轉(zhuǎn)座子(transposon):轉(zhuǎn)座元件中的一種,具有完整轉(zhuǎn)座元件的功能特征并能攜帶內(nèi)外源基因組片段(單基因或多基因)。在基因組內(nèi)移動(dòng)或在生命體之間傳播并可表達(dá)出新的表型。轉(zhuǎn)座作用:一段DNA順序可以從原位上單獨(dú)復(fù)制或斷裂下來(lái),環(huán)化后插入另一位點(diǎn),并對(duì)其后的基因起調(diào)控作用,此過(guò)程稱(chēng)轉(zhuǎn)座。增強(qiáng)子,元件序列(enhancersequence,enhancerelemenr):遠(yuǎn)距離調(diào)節(jié)啟動(dòng)子以增加轉(zhuǎn)錄速度的DNA序列。安慰誘導(dǎo)物(tratuitousinducer):能誘導(dǎo)酶的合成,但不被分解的分子。衰減子(attenuator):在有些mRNA分子的前導(dǎo)序列中,存在著一種能夠決定基因表達(dá)總量導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄提前終止的調(diào)節(jié)區(qū),亦是發(fā)生弱化作用的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)序列。同源重組(homologousrecombination):發(fā)生在DNA同源序列之間、有相同或近似堿基序列的DNA分子之間的遺傳交換。位點(diǎn)特異性重組(site-specialrecombination):位點(diǎn)特異性重組是遺傳重組的一類(lèi)。這類(lèi)重組依賴(lài)于小范圍同源序列的聯(lián)會(huì),重組也只發(fā)生在同源的短序列的范圍之內(nèi),需要位點(diǎn)特異性的蛋白質(zhì)分子參與催化,重組的蛋白不是rec系統(tǒng)而是int等RNA干擾(RNAinterference):與靶基因同源的雙鏈RNA誘導(dǎo)的特異轉(zhuǎn)錄后基因沉默現(xiàn)象。其作用機(jī)制是雙鏈RNA被特異的核酸酶降解,產(chǎn)生干擾小RNA(siRNA),這些siRNA與同源的靶RNA互補(bǔ)結(jié)合,特異性酶降解靶RNA,從而抑制、下調(diào)基因表達(dá)?;衾辖Y(jié)構(gòu)(holliday):同源重組過(guò)程中,兩個(gè)雙鏈DNA分子之間形成交換中間體,該中間體含有4股DNA單鏈,其連接處形成的交叉結(jié)構(gòu)成為霍利迪結(jié)構(gòu)。指導(dǎo)RNA(guideRNA):一種小分子RNA,約含60~80個(gè)核苷酸,在RNA編輯中起模板作用。其功能是提供核苷酸插入或刪除的信息。由小環(huán)DNA及大環(huán)DNA編碼的指導(dǎo)RNA均帶有編輯區(qū)的序列信息,可介導(dǎo)編輯過(guò)程。二、問(wèn)答1.列舉3-5位獲諾貝爾獎(jiǎng)的科學(xué)家,簡(jiǎn)要說(shuō)明其貢獻(xiàn)2.遺傳物質(zhì)必須具有的特性,DNA為什么可以做遺產(chǎn)物質(zhì)①貯存并表達(dá)遺傳信息;②能把遺傳信息傳遞給子代;③物理和化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定;④有遺傳變異的能力。3.列出最先證實(shí)DNA是遺傳物質(zhì)的2個(gè)實(shí)驗(yàn)證據(jù)肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)肺炎雙球菌的類(lèi)型:①、R型(英文Rough是粗糙之意),菌落粗糙,菌體無(wú)多糖莢膜,無(wú)毒,注入小鼠體內(nèi)后,小鼠不死亡。②、S型(英文Smooth是光滑之意):菌落光滑,菌體有多糖莢膜,有毒,注入到小鼠體內(nèi)可以使小鼠患病死亡。如果用加熱的方法殺死S型細(xì)菌后注入到小鼠體內(nèi),小鼠不死亡。格里菲斯用加熱的辦法將S型菌殺死,并用死的S型菌與活的R型菌的混合物注射到小鼠身上。小鼠死了。(由于R型經(jīng)不起死了的S型菌的DNA(轉(zhuǎn)化因子)的誘惑,變成了S型)。噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn):①噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程:吸附→侵入→復(fù)制→組裝→釋放。②DNA中P的含量多,蛋白質(zhì)中P的含量少;蛋白質(zhì)中有S而DNA中沒(méi)有S,所以用放射性同位素35S標(biāo)記一部分噬菌體的蛋白質(zhì),用放射性同位素32P標(biāo)記另一部分噬菌體的DNA。用35P標(biāo)記蛋白質(zhì)的噬菌體侵染后,細(xì)菌體內(nèi)無(wú)放射性,即表明噬菌體的蛋白質(zhì)沒(méi)有進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部;而用32P標(biāo)記DNA的噬菌體侵染細(xì)菌后,細(xì)菌體內(nèi)有放射性,即表明噬菌體的DNA進(jìn)入了細(xì)菌體內(nèi)。③結(jié)論:進(jìn)入細(xì)菌的物質(zhì),只有DNA,并沒(méi)有蛋白質(zhì),就能形成新的噬菌體。新的噬菌體中的蛋白質(zhì)不是從親代連續(xù)下來(lái)的,而是在噬菌體DNA的作用下合成的。說(shuō)明了遺傳物質(zhì)是DNA,不是蛋白質(zhì)。4.何謂C值矛盾,其表現(xiàn)在那些方面從總體上說(shuō),生物基因組的大小同生物在進(jìn)化上所處地位的高低無(wú)關(guān),這種現(xiàn)象稱(chēng)為C值矛盾(C—Valueparadox)。在同一類(lèi)生物中,不同種的基因組大小也有很大差別。1.C值不隨生物的進(jìn)化程度和復(fù)雜性而增加,如肺魚(yú)的C值為112.2,而人的是3.2,與牛相近.2.親緣關(guān)系密切的生物C值相差甚大,如豌豆為14,而蠶豆為2.3.高等真核生物具有比用于遺傳高得多的C值,如人的染色體組DNA含量在理論上包含300萬(wàn)個(gè)基因,但實(shí)際有用途的基因只有4萬(wàn)左右.5.Meseison和Stahl是如何利用氯化銫密度梯度離心法結(jié)合同位素標(biāo)記技術(shù),證明了DNA的半保留復(fù)制的機(jī)制細(xì)胞在15N標(biāo)記培養(yǎng)基中(NH4Cl)連續(xù)培養(yǎng)15代,使所有DNA分子均標(biāo)記上15N,轉(zhuǎn)入14N標(biāo)記的培養(yǎng)基CsCl密度梯度離心浮力密度15N-DNA1.742g/ml14N-DNA1.710g/ml15N/14NDNA1.717g/ml6.真核生物端粒末端及端粒酶在DNA末端復(fù)制過(guò)程中的作用機(jī)制真核生物線(xiàn)狀染色體在復(fù)制最后,5′末端RNA引物被切除后,無(wú)法向原核那樣填補(bǔ)空缺,如果沒(méi)有特殊的機(jī)制合成末端序列,將造成5′末端序列縮短,染色體就會(huì)在細(xì)胞傳代中變得越來(lái)越短。端粒酶:含有RNA和蛋白質(zhì)(起DNA聚合酶的作用)兩種組分,RNA分子約150b,含有與重復(fù)端粒結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的一個(gè)片斷,可作為端粒鏈合成的模板。7.參與原核生物DNA復(fù)制的酶和蛋白質(zhì)有那些?其功能分別是什么?DNA聚合酶I:修復(fù)紫外光引起的DNA損傷DNA聚合酶II:DNA復(fù)制的主要聚合酶,還具有3′-5′外切酶的校對(duì)功能,提高DNA復(fù)制的保真性DNA聚合酶III:主要是對(duì)DNA損傷的修復(fù);以及在DNA復(fù)制時(shí)切除RNA引物并填補(bǔ)其留下的空隙。3’——5’外切核酸酶:校對(duì)功能DNA連接酶:5’端RNA引物被置換后切刻記得連接修復(fù)、重組解螺旋酶:在A(yíng)TP的作用下將DNA鏈不斷解開(kāi)形成單鏈單鏈結(jié)合蛋白:使新解鏈的DNA保持穩(wěn)定結(jié)構(gòu)DNA旋轉(zhuǎn)酶:消除復(fù)制叉前進(jìn)過(guò)程中產(chǎn)生的正超螺旋,產(chǎn)生負(fù)超螺旋引發(fā)酶:為DNA復(fù)制提供RNA引物8.簡(jiǎn)述原核生物DNA復(fù)制的過(guò)程。(復(fù)制叉誕生的過(guò)程如何,后隨鏈上都包含那些事件)1、復(fù)制的起始解鏈:在DNA的復(fù)制原點(diǎn),雙股螺旋解開(kāi),成單鏈狀態(tài),分別作為模板,合成其互補(bǔ)單鏈。RNA引物合成:引發(fā)體在復(fù)制叉上移動(dòng),識(shí)別合成的起始位點(diǎn),引發(fā)RNA引物的合成。領(lǐng)頭鏈先引發(fā)開(kāi)始合成,以原來(lái)一條DNA單鏈為模板(3’5’),按5’3’的方向合成一段RNA引物鏈。領(lǐng)頭鏈開(kāi)始合成后,隨后鏈也開(kāi)始合成其引物。在引物的3’端為游離的羥基。2、DNA鏈的延伸在DNA聚合酶Ш的催化下,以脫氧核糖核苷酸為底物,在RNA引物的3′端加上脫氧核糖核苷酸。以復(fù)制叉向前移動(dòng)的方向?yàn)闃?biāo)準(zhǔn),一條模板鏈3’—5’走向,與之互補(bǔ)的DNA能以3’—5的方向連續(xù)合成,稱(chēng)為前導(dǎo)鏈(領(lǐng)頭鏈)。另一條模板鏈?zhǔn)?’—5走向,與其互補(bǔ)的DNA也3’—5’方向合成,與復(fù)制叉移動(dòng)方向正好相反,隨復(fù)制叉的移動(dòng),形成許多不連續(xù)的片斷,稱(chēng)為岡崎片斷。每個(gè)岡崎片段的合成也都需要引物。3、終止兩個(gè)復(fù)制叉向前移動(dòng),最后在終止區(qū)相遇并停止復(fù)制,由DNA聚合酶Ⅰ填補(bǔ)空隙,最后由連接酶封口。結(jié)果形成兩個(gè)DNA雙股螺旋分子。9.原核生物DNA復(fù)制與真核生物DNA復(fù)制有和異同點(diǎn)?原核生物的DNA的編碼區(qū)是連續(xù)的,真核生物DNA的編碼區(qū)是間斷的,即真核生物的DNA的編碼區(qū)有內(nèi)含子和外顯子,復(fù)制時(shí)同時(shí)復(fù)制內(nèi)含子和外顯子,但翻譯的最終結(jié)果是成熟的mRNA只攜帶外顯子的遺傳信息,內(nèi)含子的遺傳信息被切除.原核生物的DNA的編碼區(qū)沒(méi)有內(nèi)含子和外顯子一說(shuō),全部是有遺傳意義的片斷,是完全翻譯10.DNA復(fù)制的高度忠實(shí)性事通過(guò)那些因素來(lái)體現(xiàn)的?1、采用DNA聚合酶催化聚合反應(yīng)2、依賴(lài)DNA聚合酶核酸外切酶活性3、使用RNA引物4、依賴(lài)核苷酸代謝庫(kù)調(diào)節(jié)系統(tǒng)(保證dNTP的正常水平),多種修復(fù)系統(tǒng)11.m5C突變熱點(diǎn)形成的原因。12.以Prok.為例簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)錄起始的過(guò)程。(1)起始位點(diǎn)的識(shí)別(2)轉(zhuǎn)錄起始:RNA聚合酶全酶掃描解鏈區(qū),找到起始點(diǎn),然后結(jié)合第一個(gè)核苷三磷酸。加入的第一個(gè)核苷三磷酸常是GTP或ATP,很少是CTP,不用UTP。完成最初的幾個(gè)(2-9)核苷酸連接后,σ亞基就會(huì)被釋放脫離核心酶。(3)RNA鏈的延伸:DNA分子和酶分子發(fā)生構(gòu)象的變化,核心酶與DNA結(jié)合比較松弛,可沿DNA模板移動(dòng),并按模板順序選擇下一個(gè)核苷酸,將核苷三磷酸加到生長(zhǎng)的RNA鏈的3¢-OH端,催化形成磷酸二酯鍵。轉(zhuǎn)錄延伸方向從5¢?3¢(4)轉(zhuǎn)錄終止(終止子和終止因子)在DNA分子上(基因末端)提供轉(zhuǎn)錄停止信號(hào)的DNA序列稱(chēng)為終止子(terminators),它能使RNA聚合酶停止合成RNA并釋放出RNA。(RNA聚合酶只能感受已經(jīng)轉(zhuǎn)錄的信號(hào)序列)13.原核生物啟動(dòng)子有那些結(jié)構(gòu)及各部分功能。啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)至少由三部分組成:-35序列提供了RNA聚合酶全酶識(shí)別的信號(hào);-10序列是酶的緊密結(jié)合位點(diǎn)(富含AT堿基,利于雙鏈打開(kāi));第三部分是RNA合成的起始點(diǎn)。14.說(shuō)明RNApol全酶各個(gè)亞基的主要功能。啟動(dòng)子是DNA鏈上一段能與RNA聚合酶結(jié)合并能起始mRNA合成的序列,它是基因表達(dá)不可缺少的重要調(diào)控序列。沒(méi)有啟動(dòng)子,基因就不能轉(zhuǎn)錄。原核生物啟動(dòng)子是由兩段彼此分開(kāi)且又高度保守的核苷酸序列組成,對(duì)mRNA的合成極為重要。啟動(dòng)子區(qū)域:(1)Pribnow盒,位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游5—10bp,一般由6~8個(gè)堿基組成,富含A和T,故又稱(chēng)為T(mén)ATA盒或—10區(qū)。啟動(dòng)子來(lái)源不同,Pribnow盒的堿基順序稍有變化。(2)—35區(qū),位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游35bp處,故稱(chēng)—35區(qū),一般由10個(gè)堿基組成。啟動(dòng)子有強(qiáng)弱之分,雖然原核細(xì)胞僅靠一種RNA聚合酶就能負(fù)責(zé)所有RNA的合成,但它卻不能識(shí)別真核基因的啟動(dòng)子。為了表達(dá)真核基因,必須將其克隆在原核啟動(dòng)子的下游,才在原核表達(dá)系統(tǒng)中被轉(zhuǎn)錄。在原核生物表達(dá)系統(tǒng)中,通常使用的可調(diào)控的強(qiáng)啟動(dòng)子有l(wèi)ac(乳糖啟動(dòng)子)、trp(色氨酸啟動(dòng)子)、PL和PR(λ噬菌體的左向和右向啟動(dòng)子)以及tac(乳糖和色氨酸的雜合啟動(dòng)子)等。15.試述Prok.中轉(zhuǎn)錄終止子的類(lèi)型及終止機(jī)制。(1)不依賴(lài)于ρ因子的終止子(強(qiáng)):①在DNA中,在轉(zhuǎn)錄單位的終點(diǎn)之前都有一個(gè)回文結(jié)構(gòu),其轉(zhuǎn)錄本形成發(fā)卡結(jié)構(gòu),且柄部富含GC堿基對(duì)。②終點(diǎn)前大約有6個(gè)連續(xù)的A,它轉(zhuǎn)錄成U。(2)依賴(lài)ρ因子的終止子(弱終止子):依賴(lài)ρ的終止子,必需在ρ因子存在時(shí),才發(fā)生終止作用。終止點(diǎn)前無(wú)寡聚U序列,回文對(duì)稱(chēng)區(qū)不富含GC。16.在真核生物中有哪幾種RNA聚合酶,它們分別轉(zhuǎn)錄那種RNA分子?RNA聚合酶I:核仁中rRNA低離子強(qiáng)度,要求Mg或MnRNA聚合酶II:核質(zhì)mRNA高離子強(qiáng)度RNA聚合酶III:核質(zhì)tRNA高M(jìn)n濃度17.試比較真核生物與原核生物mRNA轉(zhuǎn)錄的主要異同。基本原則與原核相似,但真核基因的轉(zhuǎn)錄更復(fù)雜,RNA聚合酶不相同啟動(dòng)子有三類(lèi),分別由RNA聚合酶I、II、III進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。真核生物的啟動(dòng)子由轉(zhuǎn)錄因子識(shí)別,而不是RNA聚合酶識(shí)別(沒(méi)有對(duì)應(yīng)的因子)轉(zhuǎn)錄因子:RNA聚合酶在進(jìn)行轉(zhuǎn)錄時(shí),常需要一些輔助因子(蛋白質(zhì))參與作用,此類(lèi)蛋白質(zhì)統(tǒng)稱(chēng)為轉(zhuǎn)錄因子。多種轉(zhuǎn)錄因子和RNA聚合酶在起點(diǎn)形成前起始復(fù)合物,起始轉(zhuǎn)錄。18.在真核生物中tRNA、rRNA、mRNA的剪接各有何特點(diǎn)?mRNA:(1)3’端添加polyA“尾巴”;(2)5’端連接“帽子”結(jié)構(gòu)(m7G5ppp5NmpNp-);(3)hnRNA被剪接,把內(nèi)含子(DNA上非編碼序列)轉(zhuǎn)錄序列剪掉,把外顯子(DNA上的編碼序列)轉(zhuǎn)錄序列拼接上(真核生物一般為不連續(xù)基因)。(4)分子內(nèi)部的核苷酸甲基化修飾。tRNA:(1)由核酸內(nèi)切酶切除前體3和5端上多余的核苷酸;(2)由核酸外切酶逐個(gè)在3切去附加序列,進(jìn)行修剪。(3)3端添加CCAOH序列,由核苷酰轉(zhuǎn)移酶催化(4)核苷的一些特定的堿基和戊糖進(jìn)行修飾。rRNA:剛轉(zhuǎn)錄的rRNA為45,38,37S,先在特定的堿基上進(jìn)行甲基化(核糖2-羥基)修飾,后逐步裂解(核酸酶的切割)。19.真核生物的內(nèi)元主要有幾種類(lèi)型?它們是如何剪接加工的?20.酵母mRNA的大小一般與基因的大小相一致。而哺乳動(dòng)物mRNA比對(duì)應(yīng)的基因明顯小,為什么?21.終止子與終止密碼子的主要區(qū)別是什么?終止子是基因編碼區(qū)下游的非編碼區(qū)上的一段特殊序列,起到轉(zhuǎn)錄終止的作用;在雙鏈的DNA上存在;終止密碼子是信使RNA上的三個(gè)相鄰的特殊堿基組合,起到翻譯終止的作用;在單鏈的RNA上存在。22.RNA聚合酶III特異性轉(zhuǎn)錄小分子RNA,但為什么不轉(zhuǎn)錄5.8SrRNA?23.那些轉(zhuǎn)錄因子含有TBP?為什么它們被稱(chēng)為定位因子?請(qǐng)用一個(gè)模型解釋為什么所有三種RNA聚合酶都能與TBP發(fā)生作用?24.一個(gè)基因如何產(chǎn)生兩種不同類(lèi)型的mRNA分子?25.為什么在細(xì)菌轉(zhuǎn)錄終止中很少涉及到Rho因子?26.原核生物的核糖體RNA和tRNA相對(duì)比較穩(wěn)定并且半衰期長(zhǎng),而mRNA卻不穩(wěn)定,很快被降解,請(qǐng)解釋這種穩(wěn)定性的差異。27.氨基酸分子如何與正確的tRNA分子連接?28.列舉4種天然存在的具有催化活性的RNA。29.列出真核生物mRNA與原核生物mRNA的區(qū)別。30.列舉一個(gè)已知的DNA序列編碼一種以上蛋白質(zhì)的三種方法。31.蛋白質(zhì)生物合成體系包括那些組成成分?它們各起何作用?mRNA:攜帶DNA的遺傳信息,作為模板通過(guò)翻譯將遺傳信息傳遞給蛋白質(zhì),直接決定多肽鏈中AA的順序。遺傳密碼(geneticcode):一是可以減少有害的突變。二是既使DNA上堿基組成有變化,仍可保持由此DNA編碼的多肽鏈上氨基酸序列不變。tRNA(transferRNA):在蛋白質(zhì)合成中,氨基酸本身不能識(shí)別mRNA上的密碼子,它需要由特異的tRNA分子攜帶到核糖體上并由tRNA上的反密碼子去識(shí)別在mRNA上的密碼子。核糖體:是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。輔助因子:蛋白質(zhì)的合成除了需要mRNA、tRNA、核糖體外,在起始、延伸和終止階段還需要一系列蛋白輔助因子即起始因子(initiationfactor)、延伸因子(elongationfactor)釋放因子(releasefactor)等的參與。32.簡(jiǎn)述真核生物蛋白質(zhì)生物合成的基本過(guò)程。1)氨基酸活化:氨基酸在氨?!猼RNA合成酶作用下生成活化的氨基酸——AA-tRNA2)肽鏈合成的起始:在起始因子作用下相應(yīng)起始復(fù)合物進(jìn)入P位,標(biāo)志翻譯的(剛才這打錯(cuò)了…)開(kāi)始,3)肽鏈延伸:在EF-T肽酰轉(zhuǎn)移酶和EF-G等作用下,依次進(jìn)行:進(jìn)位、肽鏈形成和移位4)合成的終止:當(dāng)A位出現(xiàn)終止密碼子時(shí),被RF識(shí)別并與其結(jié)合使延伸停止,同時(shí)肽酰轉(zhuǎn)移酶發(fā)生變構(gòu),作用變?yōu)樗猓闺逆湵会尫?)蛋白質(zhì)前體的加工:有切除N端的fMet或Met和非功能片段、形成二硫鍵、特定氨基酸修飾(磷酸化、甲基化、糖基化)6)蛋白質(zhì)的折疊:正確的折疊保證了動(dòng)力學(xué)和熱力學(xué)穩(wěn)定的三維構(gòu)象至此,一個(gè)多肽形成了33.RF1、RF3、RF3的作用各是什么?34.請(qǐng)你盡可能多的列舉RNA生物功能的種類(lèi)。35.蛋白質(zhì)合成中如何保證其翻譯的正確性?36.簡(jiǎn)述乳糖操縱子的正負(fù)調(diào)控機(jī)制;E.coli在含有Glucose和Lactose的培養(yǎng)基中,Lactose不被分解利用的原因。37.為了選擇下面兩種突變型。應(yīng)對(duì)只含有葡萄糖、硫酸銨以及無(wú)機(jī)離子的基本培養(yǎng)基作何調(diào)整

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