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臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)報(bào)告:生物化學(xué)檢驗(yàn)試題
**大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)報(bào)告姓名**學(xué)號(hào)20XX141624108得分教師簽名干擾試驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆眨焊蓴_試驗(yàn)的原理及意義熟悉:干擾試驗(yàn)的操作過程了解:干擾試驗(yàn)在臨床中的應(yīng)用價(jià)值二、實(shí)驗(yàn)原理干擾試驗(yàn)可反映分析物以外其他物質(zhì)對分析方法測定分析物準(zhǔn)確度的影響,可測定特異性和干擾二者引起的誤差。
本試驗(yàn)采用抗壞血酸作為GOD-POD法測定血糖的干擾物質(zhì)。抗壞血酸可以和GOD反應(yīng)生成的H2O2發(fā)生還原反應(yīng),影響H2O2參與第二部POD的偶聯(lián)反應(yīng),從而降低顯色強(qiáng)度產(chǎn)生分析誤差。
三、實(shí)驗(yàn)試劑與器材1、樣本:血糖濃度約7mmol/L的人血清(漿)標(biāo)本或者混合血清(漿)2、250mg/L、500mg/L、750mg/維C溶液:
取維C,燒杯中溶解,轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶,定容,配成750mg/L溶液。取1ml的750mg/L維C溶液至燒杯,加蒸餾水配制成500mg/L維C溶液。取1ml的750mg/L維C溶液至燒杯,加1ml蒸餾水配制成250mg/L維C溶液。
3、生理鹽水(可用蒸餾水替代)4、GOD-POD血糖檢測試劑盒四、實(shí)驗(yàn)步驟1、標(biāo)本制備加入物ml基礎(chǔ)管干擾管IIIIII血清抗壞血酸溶液—/l/L/L生理鹽水———2、GOD-POD法測定血糖濃度:按GOD-POD試劑盒說明分別測定基礎(chǔ)管及干擾管的血糖濃度,每管做雙份檢測,結(jié)果取平均值。
加入物ml空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管蒸餾水——葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液——血清——酶酚混合試劑混勻,置37攝氏度水浴20分鐘,在波長505nm處比色,以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管及測定管吸光度。
3、計(jì)算血清漿葡萄糖(mmol/L)=測定管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管吸光度干擾物加入濃度(mmol/L)=干擾物溶液濃度x干擾物溶液量(血清量+干擾物溶液量+生理鹽水量)干擾值(mmol/L)=干擾管測定值—基礎(chǔ)管測定值干擾率%=干擾值/基礎(chǔ)值x100%標(biāo)準(zhǔn)管基礎(chǔ)管干擾管IIIIIIAC干擾物加入濃度755025干擾值---干擾率-%-%-%干擾管干擾率大于1/4Tea(/L或10%)CLIA’88能力比對試驗(yàn)的質(zhì)量要求規(guī)定,表明干擾物引起的偏差會(huì)影響測定結(jié)果的臨床應(yīng)用價(jià)值。
六、實(shí)驗(yàn)討論1、實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論與改進(jìn):
隨著干擾物濃度的增加,對葡萄糖氧化酶法測定血清葡萄糖干擾越大(見原理),顯色強(qiáng)度越低,吸光度越低,導(dǎo)致血糖濃度越來越低,干擾值越來越大,干擾率越來越大。
本試驗(yàn)中,加入可疑干擾物濃度均高于影響測定結(jié)果的臨床應(yīng)用價(jià)值的最低值,可以增加更多更細(xì)的濃度,如200mg/L、175mg/L、150mg/L……本次試驗(yàn)只加入了維生素C作為干擾物,在實(shí)際應(yīng)用中,分析方法的干擾物不只一個(gè),一定濃度的尿酸也可影響血糖的測定,而干擾物也可對多種分析方法造成干擾,因此應(yīng)對造成臨床影響的多種干擾物進(jìn)行干擾試驗(yàn)的評(píng)價(jià),可增加相同或不同濃度的尿酸作為干擾物。
試驗(yàn)中存在多種誤差,判定誤差來源于方法的特異性差還是屬于干擾,可用維生素C純?nèi)芤鹤鳛闃颖緶y定,如果存在干擾值,則誤差屬于方法的特異性差。
2、進(jìn)行干擾試驗(yàn)時(shí),首先需要確定被試可疑物質(zhì)是否可引起誤差;
若能引起誤差,還需進(jìn)一步探討其誤差的來源是屬于因方法特異性差,還是屬于干擾,若加入的物質(zhì)本身和分析試劑反應(yīng)并產(chǎn)生讀數(shù),說明方法特異性差;
若加入物質(zhì)并不與分析試劑反應(yīng),但它改變了分析物和分析試劑間的反應(yīng),說明存在干擾。
3、干擾試驗(yàn)與回收試驗(yàn)的區(qū)別與共同點(diǎn)是什么?區(qū)別:回收試驗(yàn)對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的是分析物濃度。干
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