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限時規(guī)范訓(xùn)練(十四)細胞工程(限時:45分鐘)一、選擇題1.(2023·遼寧沈陽二模)人參是一種名貴中藥材,其有效成分主要是人參皂苷,利用植物細胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如圖。下列敘述正確的是()A.培養(yǎng)前人參根切塊要經(jīng)過嚴格的滅菌處理B.誘導(dǎo)后得到的①的分化程度高于外植體C.可用射線處理①獲得人參皂苷高產(chǎn)的細胞D.進行過程②時常需要用胰蛋白酶處理①解析:C培養(yǎng)前人參根切塊要經(jīng)過消毒,但不進行嚴格的滅菌處理,A錯誤;誘導(dǎo)后得到的①為愈傷組織,分化程度低于外植體,B錯誤;可用射線處理①愈傷組織,促使其發(fā)生突變,從中篩選人參皂苷高產(chǎn)的細胞,C正確;進行過程②時需要用酶水解細胞壁,植物細胞壁成分為纖維素和果膠,因此應(yīng)該用纖維素酶和果膠酶,D錯誤。2.(2023·山東泰安二模)胞質(zhì)雜種是指兩個原生質(zhì)體融合產(chǎn)生的雜種細胞,其中一個細胞的細胞核消失后,兩個原生質(zhì)體的細胞質(zhì)雜交得到的個體??蒲腥藛T利用雄性不育的品種A與可育的品種B通過植物體細胞雜交技術(shù)獲得了雄性不育的胞質(zhì)雜種“華柚2號”,制備過程如圖所示,其中GFP(綠色熒光蛋白)基因轉(zhuǎn)入了品種A的細胞核基因組中。經(jīng)檢測,“華柚2號”的細胞核和葉綠體基因來自品種B,線粒體基因來自品種A,下列說法正確的是()A.制備原生質(zhì)體時需用胰蛋白酶或纖維素酶去除細胞壁B.聚乙二醇或滅活的病毒可用于誘導(dǎo)原生質(zhì)體A和B的融合C.“華柚2號”的獲得說明控制雄性不育的基因可能位于線粒體中D.應(yīng)篩選發(fā)綠色熒光的雜種細胞C經(jīng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得“華柚2號”解析:C制備原生質(zhì)體時需用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,A錯誤;滅活的病毒不能用于植物原生質(zhì)體的誘導(dǎo),B錯誤;雄性不育的胞質(zhì)雜種華柚2號的細胞核和葉綠體基因來自品種B,線粒體基因來自品種A,融合后品種A的細胞核消失,控制雄性不育的基因可能位于線粒體中,C正確;GFP(綠色熒光蛋白)基因轉(zhuǎn)入了品種A的細胞核基因組中,而融合后的華柚2號不含品種A的細胞核,因此發(fā)綠色熒光的雜種細胞應(yīng)被淘汰,D錯誤。3.(2023·山東日照三模)乳腺癌、胃癌細胞表面有大量的HER2蛋白,T細胞表面有CD3蛋白和CD28蛋白。研究人員將上述三種蛋白作為抗原分別制備單克隆抗體,然后將其在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)制備得到三特異性抗體,簡稱三抗(如圖)。下列說法錯誤的是()A.同時注射3種抗原蛋白,可刺激B細胞增殖分化為分泌三抗的漿細胞B.利用抗原—抗體雜交的原理篩選圖示三抗時需要3種相應(yīng)抗原蛋白C.與植物原生質(zhì)體融合相比,制備單抗時可采用滅活的病毒進行誘導(dǎo)融合D.與單抗相比,三抗增加了兩個特異性抗原結(jié)合位點,對癌細胞的殺傷更強解析:A同時注射3種抗原會刺激B細胞分化形成不同的漿細胞,進而產(chǎn)生三種抗體,一種漿細胞只能產(chǎn)生一種抗體,并不能產(chǎn)生三抗,A錯誤;由于抗體具有特異性,所以利用抗原—抗體雜交的原理篩選圖示三抗時需要3種相應(yīng)抗原蛋白,B正確;動物細胞融合與原生質(zhì)體融合相比特有的融合方式是滅活的病毒進行誘導(dǎo),C正確;抗體具有特異性,三抗可以結(jié)合癌細胞不同的部位,所以與單抗相比,三抗增加了兩個特異性抗原結(jié)合位點,對癌細胞的殺傷更強,D正確。4.(2023·江蘇南京二模)6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G-6PD)有F和S兩種類型,分別由一對等位基因XF和XS編碼?;蛐蜑閄FXS的女性體細胞中的兩個X染色體,會有一個隨機失活。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理后先進行細胞的原代培養(yǎng),再對不同的細胞分別進行單克隆培養(yǎng)。分別對原代培養(yǎng)和單克隆培養(yǎng)的細胞進行G-6PD蛋白電泳檢測,結(jié)果如圖所示。下列說法錯誤的是()A.該過程用到的主要細胞工程技術(shù)是動物細胞培養(yǎng)B.用胰蛋白酶處理皮膚組織可使其分散成單個細胞C.原代培養(yǎng)細胞電泳圖有2個條帶是因為同時檢測了多個細胞D.單克隆培養(yǎng)的細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因不同解析:D無論是原代培養(yǎng)還是單克隆培養(yǎng),用到的主要細胞工程技術(shù)是動物細胞培養(yǎng),A正確;動物細胞之間的蛋白質(zhì),被胰蛋白酶或膠原蛋白酶分解,分散成單個細胞,B正確;結(jié)合題干,基因型為XFXS女性體細胞中的兩個X染色體會有一個隨機失活,故一個細胞中6-磷酸葡萄糖脫氫酶,電泳后只顯示一個條帶,原代培養(yǎng)的細胞電泳有2個條帶,故同時檢測了多個細胞,C正確;單克隆培養(yǎng)的細胞,是通過有絲分裂得到的增殖的細胞,故單克隆培養(yǎng)的細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7,所含基因相同,表達的基因不相同,D錯誤。5.(2023·遼寧東北育才學(xué)校???為解決雜交瘤細胞在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)來自B淋巴細胞的染色體丟失問題,研究者將抗原刺激后的B淋巴細胞,用EBV(一種病毒顆粒)感染,獲得“染色體核型穩(wěn)定”的EBV轉(zhuǎn)化細胞。EBV轉(zhuǎn)化細胞能夠在HAT培養(yǎng)基中存活,但對Oua敏感。骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)基中不能存活,但對Oua不敏感。如圖表示操作過程。下列分析錯誤的是()A.B淋巴細胞可從多次間歇注射某種抗原的動物脾臟中獲得B.HAT培養(yǎng)基和Oua篩選去除的是未融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞C.雜交瘤細胞染色體丟失可能會導(dǎo)致抗體的產(chǎn)生能力下降D.圖中獲得的雜交瘤細胞需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測篩選后才可用于生產(chǎn)解析:B對動物進行間歇注射抗原處理,以刺激動物機體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細胞,B淋巴細胞在骨髓中發(fā)育成熟,可分布于淋巴結(jié)和脾臟等處,故B淋巴細胞可從多次間歇注射某種抗原的動物脾臟中獲得,A正確;由題干可知,HAT培養(yǎng)基去除的是未與EBV轉(zhuǎn)化細胞融合的骨髓瘤細胞和自身融合的骨髓瘤細胞,Oua篩選去除的是未與骨髓瘤細胞融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞和自身融合的EBV轉(zhuǎn)化細胞,B錯誤;抗體是由漿細胞分泌的,雜交瘤細胞若丟失來自B淋巴細胞的染色體,可能會導(dǎo)致抗體產(chǎn)生能力下降,C正確;圖示獲得的雜交瘤細胞還需要經(jīng)過進一步的篩選,需經(jīng)克隆化培養(yǎng),并用專一抗體檢測呈現(xiàn)陽性的雜交瘤細胞才能直接用于生產(chǎn)單克隆抗體,D正確。6.細胞內(nèi)DNA合成的途徑有正常途徑和補救途徑(如圖所示),HGPRT缺陷型骨髓瘤細胞只能通過正常途徑合成DNA,而氨基蝶呤(A)能阻斷DNA的正常合成途徑;補救合成途徑則是利用從環(huán)境中獲取的次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T),經(jīng)激酶和轉(zhuǎn)移酶的催化合成DNA。某生物興趣小組利用HGPRT缺陷型骨髓瘤細胞進行單克隆抗體的制備,下列有關(guān)該過程的敘述,錯誤的是()A.滅活的病毒能誘導(dǎo)已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞發(fā)生融合B.篩選雜交瘤細胞的特定培養(yǎng)基中需添加H、A、T三種物質(zhì)C.若篩選時僅添加H和T,則培養(yǎng)基上只有骨髓瘤細胞能連續(xù)增殖D.生產(chǎn)出的單克隆抗體特異性強、靈敏度高解析:C誘導(dǎo)動物細胞的融合可采用滅活的病毒,A正確;篩選雜交瘤細胞的特定培養(yǎng)基中需添加H、A、T三種物質(zhì),則只有雜交瘤細胞能長期存活與繁殖,B正確;由B選項分析可知,不加A物質(zhì),則自相融合的骨髓瘤細胞也能連續(xù)增殖,C錯誤;生產(chǎn)出的單克隆抗體特異性強、靈敏度高,D正確。7.(2023·山東師范大學(xué)附中???基因組印記(通過甲基化實現(xiàn)受精卵中來自雙親的兩個等位基因一個表達另一個不表達)阻礙了哺乳動物孤雌生殖的實現(xiàn)。某研究團隊利用甲基化酶、去甲基化酶和基因編輯技術(shù),改變了小鼠生殖細胞的“基因組印記”,使其“變性”,然后將一個極體注入修飾后的次級卵母細胞(類似受精作用),最終創(chuàng)造出“孤雌生殖”的小鼠。實驗過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是()A.體外培養(yǎng)卵母細胞時,為防止污染,需將培養(yǎng)皿置于二氧化碳培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)B.甲基化可能會關(guān)閉基因的活性,對某些基因進行去甲基化處理有利于其表達C.“孤雌小鼠”的誕生過程沒有精子參與,其基因型與提供卵母細胞的雌鼠相同D.移植后的囊胚進一步擴大,會導(dǎo)致滋養(yǎng)層破裂,胚胎從其中伸展出來解析:B動物細胞培養(yǎng)時加入抗生素,防止培養(yǎng)過程中的污染,A錯誤;由題干可知,基因組印記是通過甲基化使一個基因不表達,對某些基因進行去甲基化處理有利于其表達,然后促進了細胞的全能性的表現(xiàn),獲得孤雌小鼠,B正確;“孤雌小鼠”是由兩個生殖細胞(修飾后的次級卵母細胞和另一個卵子的極體)結(jié)合后發(fā)育形成,同時由于配子在形成過程中會經(jīng)歷減數(shù)分裂的基因重組,或發(fā)生基因突變,將導(dǎo)致兩個生殖細胞結(jié)合后的“孤雌小鼠”其基因型不一定與提供卵母細胞的雌鼠相同,C錯誤;囊胚進一步擴大,會導(dǎo)致透明帶破裂,胚胎從其中伸展出來,這一過程叫做孵化,D錯誤。8.(2023·山東青島二模)細胞質(zhì)雄性不育基因?qū)е履承┓?2N=24)品種不能產(chǎn)生可育花粉,這種特性是細胞核基因組和線粒體之間不相容的結(jié)果。細胞核中有多種控制優(yōu)良性狀的核基因,通過植物體細胞雜交技術(shù)能培育番茄新品種,育種過程如圖所示。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.該技術(shù)能將不同種、屬植物,甚至科間的原生質(zhì)體通過人工誘導(dǎo)融合B.圖中過程①②利用的生物學(xué)原理有相關(guān)酶的專一性和細胞膜的流動性C.與普通番茄相比,品種丙為多倍體,具有莖稈粗壯,葉、花、果實、種子較大等優(yōu)點D.雜種細胞在植物組織培養(yǎng)過程中需要添加一定量的生長素和細胞分裂素來調(diào)節(jié)發(fā)育解析:C該技術(shù)為植物體細胞雜交技術(shù),植物體細胞雜交技術(shù)能將不同種、屬植物,甚至科間的原生質(zhì)體通過人工誘導(dǎo)融合,A正確;圖中①使用纖維素酶和果膠酶將細胞壁分解,利用的生物學(xué)原理為酶具有專一性,過程②為原生質(zhì)體融合過程,利用的生物學(xué)原理為細胞膜的流動性,B正確;與普通番茄相比,品種丙為異源多倍體,由于細胞質(zhì)雄性不育基因?qū)е履承┓哑贩N不能產(chǎn)生可育花粉,因此,品種丙無種子,C錯誤;雜種細胞在植物組織培養(yǎng)過程中需要添加一定量的生長素和細胞分裂素來誘導(dǎo)愈傷組織、芽和根的生長等調(diào)節(jié)發(fā)育,D正確。9.脂多糖(LPS)是傷寒沙門氏菌的主要致病毒素。在研發(fā)傷寒沙門氏菌LPS疫苗的過程中,利用多肽模擬細菌LPS,多肽模擬LPS抗原特征的相似程度越高,其與LPS競爭抗體結(jié)合位點的能力越強。為初步鑒定多肽A、B模擬LPS抗原特征的相似程度,研究人員利用抗LPS單克隆抗體進行檢測,部分實驗步驟見圖1,實驗結(jié)果如圖2。下列相關(guān)敘述不正確的是()圖1圖2A.抗LPS單克隆抗體的制備過程中利用了細胞膜的流動性和細胞增殖原理B.圖1步驟c中與多肽結(jié)合的抗體會被洗脫掉,與LPS結(jié)合的抗體未被洗脫C.過程b利用的原理是抗原和抗體的特異性結(jié)合D.圖2表明多肽B模擬LPS效果更好解析:D抗LPS單克隆抗體的制備過程中應(yīng)用了動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術(shù),其原理分別是細胞膜的流動性和細胞增殖,A正確;圖1步驟c中,與多肽結(jié)合的抗體會被洗脫掉,而LPS固定在檢測板上,則未被洗脫的抗體就與LPS結(jié)合而殘留在檢測板上,B正確;b為加入多肽和抗體混合液以鑒定多肽A、B模擬LPS抗原特征的相似程度,該過程利用了抗原和抗體的特異性結(jié)合的原理,C正確;由題干可知,多肽模擬LPS抗原特征的相似程度越高,其與LPS競爭抗體結(jié)合位點的能力越強,與多肽結(jié)合的抗體會被洗脫掉,而未被洗脫的抗體因與LPS結(jié)合而殘留在檢測板上,未被洗脫的抗體越少的多肽效果越好,圖2顯示加入多肽A,清洗后檢測板上檢出的抗體數(shù)量比加入多肽B的少,因此模擬LPS效果更好的多肽是多肽A,D錯誤。10.(2023·遼寧營口二模)VanderWoude綜合征是一種常見的唇腭裂綜合征,一對表型健康的夫婦生育了一位該病患兒。為幫助該夫婦生育健康的孩子,醫(yī)生通過試管嬰兒技術(shù)得到4枚發(fā)育正常的胚胎,并檢測相應(yīng)細胞的基因,結(jié)果如下表。胚胎編號極體類型突變基因檢測結(jié)果2號第一極體突變型第二極體野生型4號第一極體野生型第二極體突變型5號第一極體野生型第二極體突變型6號第一極體突變型第二極體突變型下列敘述不正確的是()A.需對妻子注射促性腺激素以促進排卵B.可將受精卵細胞直接移植入母體子宮C.人工授精前需對精子進行獲能處理D.移植2號胚胎得到健康孩子的可能性最高解析:B需對妻子注射促性腺激素促進排卵,獲得卵母細胞,A正確;體外受精之后的受精卵需要在體外培養(yǎng)到一定階段才能移入到母體子宮,B錯誤;采集到的精子不能直接受精,需要在體外進行獲能處理,C正確;2號胚胎的第二極體為野生型,所以得到健康孩子的可能性最高,D正確。二、非選擇題11.(2023·云南保山二模)水母雪蓮屬于我國傳統(tǒng)中草藥,其有效成分為粗毛豚草素。因臨床上需求量大,但自然資源有限,難以滿足。因此,利用雪蓮細胞大量培養(yǎng)技術(shù)獲得粗毛豚草素具有重要意義。請回答下列問題:(1)粗毛豚草素屬于水母雪蓮的__________代謝物,這類有機化合物,在植物____________方面發(fā)揮作用。利用植物細胞工廠化生產(chǎn)該有效成分,其優(yōu)點是_________________________________________。(2)研究表明不同光質(zhì)對水母雪蓮愈傷組織生長、轉(zhuǎn)化有效成分的中間物質(zhì)和粗毛豚草素的形成有影響,研究結(jié)果如圖:①本實驗的自變量是____________。由圖可知____________對愈傷組織中中間物質(zhì)合成的促進作用最強;而____________條件下的中間物質(zhì)含量最低。②在____________條件下利于愈傷組織的生長,而____________條件對愈傷組織的生長無明顯作用。③有人提出,“培養(yǎng)過程中愈傷組織越大,生產(chǎn)的有效成分越多”。請你據(jù)圖判斷這種說法是否合理,為什么?____________________________。(3)植物細胞培養(yǎng)過程中需要不斷通入無菌空氣,并進行攪拌,其目的是_____________________________(寫出兩點即可)。解析:(1)水母雪蓮的有效成分為粗毛豚草素,故粗毛豚草素屬于水母雪蓮的次生代謝物,次生代謝物是一類小分子化合物,在植物的抗性(抗病、抗蟲)方面可發(fā)揮作用。植物細胞工廠化生產(chǎn)該有效成分不占用耕地,且?guī)缀醪皇芗竟?jié)、天氣等的限制,對于社會、經(jīng)濟、環(huán)境保護具有重要意義。(2)①本實驗探究不同的光質(zhì)對水母雪蓮愈傷組織生長、轉(zhuǎn)化有效成分的中間物質(zhì)和粗毛豚草素的形成有影響,故自變量為光質(zhì),由圖可知,使用藍光組愈傷組織中中間物質(zhì)含量最高,使用紅光愈傷組織中中間物質(zhì)含量最低,說明藍光對愈傷組織中中間物質(zhì)合成的促進作用最強;而紅光條件下的中間物質(zhì)含量最低。②由圖可知,與黑暗條件下對比,使用紅光組愈傷組織生長的最好,使用藍光組愈傷組織生長的最差,故在紅光條件下利于愈傷組織的生長,而藍光條件對愈傷組織的生長無明顯作用。③由圖可知,紅光組愈傷組織最大,但生產(chǎn)的有效成分最低,故不合理。(3)植物細胞需進行有氧呼吸,植物細胞培養(yǎng)過程中需要不斷通入無菌空氣,并進行攪拌,其目的是保證氧氣供應(yīng)充足,使培養(yǎng)液與細胞充分接觸。答案:(1)次生抗性不占用耕地,幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制,對于社會、經(jīng)濟、環(huán)境保護具有重要意義(2)①光質(zhì)藍光紅光②紅光藍光③不合理,由圖可知紅光組愈傷組織最大,有效成分的含量最少(3)保證氧氣供應(yīng)充足,使培養(yǎng)液與細胞充分接觸12.(2023·江蘇徐州校考)S棘突蛋白是新冠病毒侵染細胞的關(guān)鍵蛋白質(zhì),其結(jié)構(gòu)域S-RBD能與人細胞表面的ACE2受體結(jié)合,介導(dǎo)病毒進入宿主細胞??蒲腥藛T制備抗S-RBD單克隆抗體并進行了相關(guān)實驗(見圖甲)。過程中獲得四種雜交瘤細胞并進行抗體陽性檢測(結(jié)果見圖乙),(注:酶標抗體攜帶的酶與底物反應(yīng),產(chǎn)物越多,顯色越深吸光值越大。)請回答下列問題:甲乙(1)生產(chǎn)抗S-RBD單克隆抗體的過程,需要用到動物細胞工程中的_____________________(答出兩點)技術(shù)。在體外大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細胞時,為防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害,應(yīng)采取的措施是__________。(2)圖甲中,抗原是________________,待測抗體是______________。(3)獲取雜交瘤細胞時,誘導(dǎo)體系中除含有未融合的B細胞和雜交瘤細胞外,可能還有其他相互融合形成的細胞,出現(xiàn)多種類型細胞的原因是____________。(4)分析實驗結(jié)果,雜交瘤細胞__________(填序號)產(chǎn)生的抗體為“最佳抗體”,理由是__________________________________________。解析:(1)培養(yǎng)抗S-RBD單克隆抗體時,需要培養(yǎng)B細胞、骨髓瘤細胞、雜交瘤細胞等細胞,需要將B細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合。在體外大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細胞時,為防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害,及時更換培養(yǎng)液,使代謝廢物濃度降低,減少對細胞傷害。(2)圖甲中,抗原和待測的抗S-RBD單克隆抗體特異性結(jié)合,抗原是S-RBD,待測抗體即是制得的抗S-RBD單克隆抗體。(3)誘導(dǎo)體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是,誘導(dǎo)融合時,動物細胞融合是隨機的,如果只考慮兩兩融合,會出現(xiàn)B細胞+B細胞、骨髓瘤細胞+骨髓瘤細胞、B細胞+骨髓瘤細胞的融合。(4)據(jù)圖乙,①雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體在各個稀釋比時吸光值最高,酶標抗體攜帶的酶與底物反應(yīng),產(chǎn)物越多,顯色越深吸光值越大,說明其產(chǎn)生的單克隆抗體濃度最高。答案:(1)動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合定期更換培養(yǎng)液(2)S-RBD抗S-RBD單克隆抗體(3)動物細胞融合時是隨機融合的(4)①圖乙中①雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體在各個稀釋比時吸光值最高,單克隆抗體濃度最高13.(2023·湖南長沙二模)荷斯坦奶牛的產(chǎn)奶量很高,某良種公司引進了純種荷斯坦奶牛,欲利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖,其操作流程設(shè)計如圖,請回答下列問題:(1)胚胎工程的理論基礎(chǔ)是____________________________________。(2)為了充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力,通過途徑1繁育小牛時,可以對供體進行____________處理,但畢竟供體母牛提供的卵子總量有限,因而可通過途徑2,對早期胚胎進行____________以提高胚胎的利用率,相對于途徑1、2,途徑3在提供胚胎數(shù)量方面具有更大優(yōu)勢的理由是___________________。(3)為了繁育更多的母牛,除了途徑3外,途徑1、2都需要對早期胚胎進行性別鑒定。LAMP法是利用可特異性識別牛胚胎細胞中存在的雄性特異核酸序列的引物及可特異性識別雌雄共同核酸序列的引物進行核酸的擴增反應(yīng),根據(jù)擴增產(chǎn)物的有無進行性別鑒定的方法。LAMP法胚胎性別鑒定結(jié)果判定類別反應(yīng)液Ⅰ管反應(yīng)液Ⅱ管結(jié)果判定樣品1++雄性樣品2-+雌性樣品3+-需重做樣品4--需重做注:“+”表示有擴增產(chǎn)物,“-”表示無擴增產(chǎn)物。根據(jù)LAMP法性別鑒定的原理,在反應(yīng)液Ⅰ管中加入的是___________________的引物,反應(yīng)液Ⅱ管中加入的是
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