植物品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南裸花紫珠編制說明_第1頁
植物品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南裸花紫珠編制說明_第2頁
植物品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南裸花紫珠編制說明_第3頁
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文檔簡介

《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南裸花紫珠》編制說明一、工作簡況(一)任務(wù)來源裸花紫珠(CallicarpanudifloraHook.etArn.)為唇形科紫珠屬植物,通常以干燥葉片或帶葉的嫩枝入藥,主要分布于我國南部的海南、廣西、廣東等省及東南亞地區(qū)的印度、越南和新加坡等地,主要生長于山坡、路邊、溪邊或灌木叢等向陽的地方,為海南省道地藥材,也是海南黎藥大品種。收載于1977、2015和2020版的《中國藥典》。具有止血散瘀、抗菌消炎之功效,是海南省重要民族藥(黎藥)品種“裸花紫珠片、裸花紫珠分散片、裸花紫珠膠囊、裸花紫珠顆粒、裸花紫珠栓”等近40余種中成藥的主要原料。這些以其消炎、止血活性開發(fā)的各種劑型的中成藥,年產(chǎn)值10億元以上。裸花紫珠主要規(guī)?;N植在海南白沙和五指山等中部貧困山區(qū),種植面積約1.5萬畝,對(duì)鄉(xiāng)村振興和農(nóng)民增收意義重大。裸花紫珠作為國家醫(yī)保乙類、中藥保護(hù)品種以及多省地方的基藥,是海南、湖南、江西等近10家藥品生產(chǎn)企業(yè)的主要品種,其市場需求量較大,應(yīng)用前景較為廣闊。裸花紫珠種質(zhì)資源群體變異豐富,不同產(chǎn)地的裸花紫珠有效成分差異較大。但裸花紫珠種質(zhì)資源系統(tǒng)鑒定關(guān)鍵技術(shù)匱乏、優(yōu)(特)異種質(zhì)資源不足,對(duì)裸花紫珠的研究多集中在藥理活性,成分分析、規(guī)范化種植技術(shù)等方面,在優(yōu)良品種選育方面基本無涉及,藥農(nóng)所用種苗大部分均來自于自留種,市場上并無裸花紫珠優(yōu)勢品種出現(xiàn)。而優(yōu)良的裸花紫珠品種是質(zhì)量穩(wěn)定的基礎(chǔ),也是實(shí)現(xiàn)裸花紫珠規(guī)范化生產(chǎn)的保證。通過人工定向選育良種是提高和穩(wěn)定裸花紫珠質(zhì)量的根本途徑。但是目前藥農(nóng)種植的均為野生馴化的栽培種,優(yōu)良品種缺乏的現(xiàn)狀仍未改變,裸花紫珠產(chǎn)業(yè)的品種需求與種質(zhì)資源發(fā)掘利用明顯滯后的矛盾突出。綜上所述,裸花紫珠市場需求量增長很快,為保護(hù)并開發(fā)裸花紫珠種質(zhì)資源,促進(jìn)裸花紫珠新品種選育、新品種保護(hù),需盡快啟動(dòng)裸花紫珠新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南的研制工作。這不僅可以為裸花紫珠品種權(quán)益保護(hù)提供技術(shù)支撐,激勵(lì)裸花紫珠種質(zhì)資源的挖掘、利用,同時(shí)可以促進(jìn)裸花紫珠新品種選育與保護(hù),這對(duì)推動(dòng)和維護(hù)我國裸花紫珠產(chǎn)業(yè)的安全發(fā)展極為重要。本指南是受農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展中心委托開展裸花紫珠DUS測試指南的研制工作。2024年9月申報(bào)了中國熱帶作物學(xué)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制定項(xiàng)目,于2024年10月立項(xiàng)。(二)起草單位本指南的承擔(dān)單位為中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所,協(xié)作單位為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部植物新品種測試(儋州)分中心、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部科技發(fā)展中心、海南九芝堂藥業(yè)有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)起草人由以上單位的9人組成,具體姓名、單位及分工見表1。表1主要起草人及項(xiàng)目分工姓名性別工作單位職務(wù)/職稱項(xiàng)目分工(三)主要工作過程1.起草階段自任務(wù)下達(dá)后,中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所牽頭成立了標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組,確定了起草組成員,由長期從事裸花紫珠種質(zhì)資源收集評(píng)價(jià)、品種選育、規(guī)范化生產(chǎn)相關(guān)專業(yè)及專門從事DUS測試相關(guān)的成員組成,并明確了工作小組職責(zé)和任務(wù)分工,制定了工作原則和詳細(xì)實(shí)施方案。在標(biāo)準(zhǔn)制定過程中,始終堅(jiān)持科研與實(shí)踐相結(jié)合的原則,對(duì)裸花紫珠種質(zhì)資源進(jìn)行收集,性狀調(diào)查,經(jīng)過科學(xué)的方法進(jìn)一步加以驗(yàn)證、補(bǔ)充、完善,使之規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化。經(jīng)過查閱文獻(xiàn)資料,DUS測試相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),構(gòu)建測試框架,設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案,制定測試性狀表,篩選標(biāo)準(zhǔn)品種,進(jìn)行田間試驗(yàn)分析結(jié)果,設(shè)計(jì)技術(shù)問卷,編寫。于2022年6月初步完成了裸花紫珠的測試指南征求意見稿。二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和確定標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容的依據(jù)(一)編制原則1、總體原則遵循UPOV的總則(TG/1/3)和相關(guān)TGP文件(TGP/7、TGP/9、TGP/10、TGP/11)的原理,以《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測試指南總則》(GB/T19557.1—2004)為總體原則。2、科學(xué)實(shí)用的原則在符合性狀選擇原則的前提下,優(yōu)先選用植物的表型性狀,直觀且節(jié)約成本。明確測試性狀的觀測時(shí)期和方法,便于記載和數(shù)據(jù)交流。測試性狀以植物生長進(jìn)程為序且相對(duì)集中,方便實(shí)際操作性;指南中部分性狀的表達(dá)狀態(tài)給出了標(biāo)準(zhǔn)品種,用于性狀的狀態(tài)描述和不同年份和不同生態(tài)區(qū)的校正。標(biāo)準(zhǔn)品種盡量采用國內(nèi)公知公用、性狀表達(dá)穩(wěn)定且易于獲得或繁殖提純的品種。3、結(jié)構(gòu)規(guī)范的原則依據(jù)TGP/7中指南模板的總體框架,結(jié)合中國的標(biāo)準(zhǔn)編寫要求起草。(二)主要內(nèi)容及確定依據(jù)1、性狀選擇與分級(jí)(1)性狀選擇在DUS測試指南中,測試性狀的選擇是其核心內(nèi)容。在性狀選擇上,編制小組遵循了下列原則:能被準(zhǔn)確定義,準(zhǔn)確識(shí)別和清晰的被描述;便于操作,費(fèi)用低,可靠性與重復(fù)性強(qiáng);表現(xiàn)穩(wěn)定,不受或受環(huán)境影響??;多選易于定性分析的質(zhì)量性狀,如外觀形態(tài),減少或盡量避免難于權(quán)衡的數(shù)量性狀,盡量少與產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)性狀相聯(lián)系;能體現(xiàn)育種的選育水平和發(fā)展方向。該指南在研制過程中,選用我國裸花紫珠主要分布區(qū)的裸花紫珠種質(zhì)資源103份,建立裸花紫珠種質(zhì)資源圃,于同一環(huán)境下,進(jìn)行統(tǒng)一管理。由于國內(nèi)外目前沒有裸花紫珠及裸花紫珠屬的DUS測試指南,因此在參考了三七、枸杞等藥用植物,及楊梅、柑橘等果樹,及茶樹等用葉類植物的DUS測試指南的同時(shí),收集了國內(nèi)外的裸花紫珠種質(zhì)資源及育種相關(guān)文獻(xiàn)及參考植物志中關(guān)于裸花紫珠的描述,初步選擇候選性狀29個(gè),包括22個(gè)基本性狀:“植株:高度”、“植株:冠幅”、“莖:皮孔”、“葉片:長度”、“葉片:寬度”、“葉片:厚度”、“葉片:形狀”、“葉片:背面茸毛疏密程度”、“葉片:葉背面茸毛顏色”、“葉片:綠色程度”、“葉片:光滑度”、“葉片:邊緣波緣狀程度”、“葉片:伸展?fàn)顟B(tài)”、“葉片:先端形狀”、“葉片:基部形狀”、“葉片:前端邊緣缺刻深度”、“葉片:側(cè)脈明顯程度”、“葉:葉柄長度”、“花:始花期”、“花冠:顏色”、“花:花萼頂端”、“花:苞片”。由于裸花紫珠為藥用植物,有效成分含量的高低是評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的重要指標(biāo),因此將其7個(gè)主要的活性成分有效成分作為選測性狀:“葉片:咖啡酸含量”、“葉片:連翹酯苷B含量”、“葉片:木犀草苷含量”、“葉片:毛蕊花糖苷含量”、“葉片:異毛蕊花糖苷含量”、“葉片:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量”、“葉片:木犀草素含量”。然后通過在不同時(shí)期對(duì)以上性狀進(jìn)行觀測,對(duì)29個(gè)目標(biāo)性狀進(jìn)行了兩年的評(píng)價(jià)和篩選,取得數(shù)據(jù)4000余個(gè),充分征求了國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域?qū)<业囊庖姾徒ㄗh,確定了27個(gè)測試性狀。刪除了“花:花萼頂端”、“花:苞片”兩個(gè)性狀,原因如下:——花:花萼頂端根據(jù)《中國植物志》描述,花萼頂端可能有截平或齒狀兩種表達(dá)狀態(tài),但根據(jù)收集的供試材料發(fā)現(xiàn),齒狀并不明顯,而且由于裸花紫珠花很小,觀察花萼頂端時(shí)十分費(fèi)力,不利于準(zhǔn)確識(shí)別,因此在做指南時(shí)刪除了此性狀?!ǎ喊鶕?jù)《中國植物志》描述,苞片呈線形或披針形。根據(jù)收集的供試材料發(fā)現(xiàn),裸花紫珠的花非常小,苞片更小,觀察十分費(fèi)力,不利于準(zhǔn)確識(shí)別,不利于準(zhǔn)確識(shí)別,因此在做指南時(shí)刪除了此性狀。(2)性狀分級(jí)12個(gè)數(shù)量性狀的分級(jí)情況,如表2、表3所示。表2裸花紫珠種質(zhì)資源數(shù)量性狀分級(jí)的分點(diǎn)值性狀分值點(diǎn)1234植株:高度152.0192.9249.4290.3植株:冠幅131.4173.3231.3273.2葉片:長度17.819.722.324.2葉片:寬度—7.078.05—葉柄:長度—2.062.44—葉片:咖啡酸含量—0.070.09—葉片:連翹酯苷B含量—1.201.96—葉片:木犀草苷含量—1.351.97—葉片:毛蕊花糖苷含量10.4717.9228.2435.69葉片:異毛蕊花糖苷含量—1.723.01—葉片:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量—0.340.45—木犀草素含量—0.210.32—表312個(gè)數(shù)量性狀的分級(jí)情況性狀分級(jí)123456789植株:高度≤152.0(152.0,192.9](192.9,249.4](249.4,290.3]>290.3植株:冠幅≤131.4(131.4,173.3](173.3,231.3](231.3,273.2]>273.2葉片:長度≤17.8(17.8,19.7](19.7,22.3](22.3,24.2]>24.2葉片:寬度≤7.07(7.07,8.05]>8.05葉柄:長度≤2.06(2.06,2.44]>2.44葉片:咖啡酸含量≤0.07(0.07,0.09]>0.09葉片:連翹酯苷B含量≤1.20(1.20,1.96]>1.96葉片:木犀草苷含量≤1.35(1.35,1.97]>1.97葉片:毛蕊花糖苷含量≤10.47(10.47,17.92](17.92,28.24](28.24,35.69]>35.69葉片:異毛蕊花糖苷含量≤1.72(1.72,3.01]>3.01葉片:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量≤0.34(0.34,0.45]>0.45木犀草素含量≤0.21(0.21,0.32]>0.322、標(biāo)準(zhǔn)品種的選擇LINKExcel.Sheet.12"工作簿1""Sheet1!R1C1:R24C8"\a\f4\h根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品種選擇的原則,本指南選了2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品種,即1608-24種質(zhì)和1611-09種質(zhì)。目前裸花紫珠暫未培育出品種,這兩個(gè)種質(zhì)為篩選出來的優(yōu)異種質(zhì),且已經(jīng)布置了品比實(shí)驗(yàn),據(jù)觀測,這兩個(gè)種質(zhì)的數(shù)量性狀的表達(dá)狀態(tài)多數(shù)為“中”,因此比較適宜作為標(biāo)準(zhǔn)品種。3、判定標(biāo)準(zhǔn)(1)特異性判定嚴(yán)格遵循TGP/9文件,待測品種應(yīng)明顯區(qū)別于所有已知品種。在測試中,當(dāng)待測品種至少在一個(gè)性狀上與最為近似的品種具有明顯且可重現(xiàn)的差異時(shí),即可判定待測品種具備特異性。(2)一致性判定嚴(yán)格遵循TGP/10文件,一致性判定時(shí),采用1%的總體標(biāo)準(zhǔn)和至少95%的接受概率。當(dāng)樣本數(shù)量為24~30株時(shí),允許有1株異型株。(3)穩(wěn)定性判定嚴(yán)格遵循TGP/11文件,如果一個(gè)品種具備一致性,則可認(rèn)為該品種具備穩(wěn)定性。一般不對(duì)穩(wěn)定性進(jìn)行測試。必要時(shí),可以種植該品種再繁殖的下一代種苗或該品種的另一批種苗,與以前提供的種苗相比,若性狀表達(dá)無明顯變化,則可判定該品種具備穩(wěn)定性。4、其他指標(biāo)的確定(1)測試周期裸花紫珠由于花柱長于雄蕊,不利于自花授粉,通常依靠蟲媒和風(fēng)媒進(jìn)行授粉,因此在品種選育的時(shí)候?yàn)榱吮3帜副拘誀畹姆€(wěn)定,一般采用扦插等無性繁殖。通過參考其他的作物,以及作為葉類藥材種植的特殊性,確定本指南的測試周期至少為1個(gè)生長周期。1個(gè)生長周期是指可量產(chǎn)后的一個(gè)完整的生長周期。由于種植后的第一年植株較小,無法量產(chǎn),部分性狀測試不穩(wěn)定,因此在第一年的盛花期到坐果前期將地上部分砍掉后開始計(jì)算生長周期,即1個(gè)完整的生長周期指砍掉地上部分后,使其新枝萌發(fā)至坐果的整個(gè)時(shí)期。(2)試驗(yàn)設(shè)計(jì)通過考察裸花紫珠的主要種植地,參考當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)的種植習(xí)慣,確定裸花紫珠的試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案為:每個(gè)小區(qū)不少于8株,小區(qū)設(shè)2行,株距為100~150cm,行距為100~150cm,共3個(gè)重復(fù)。待測品種和近似品種相鄰擺放。三、主要試驗(yàn)或驗(yàn)證的分析、綜述報(bào)告,技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證,預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果(一)主要試驗(yàn)或驗(yàn)證的分析、綜述報(bào)告1、供試材料將收集的103份不同的裸花紫珠種質(zhì)分別種植于裸花紫珠資源圃,種質(zhì)信息見表4,于2020年開始調(diào)查相關(guān)性狀,見表5。表4供試材料表序號(hào)編號(hào)來源材料類型序號(hào)編號(hào)名稱材料類型11605-03海南白沙縣野生資源531608-39海南屯昌縣野生資源21605-04海南白沙縣野生資源541608-17海南樂東縣野生資源31605-07海南白沙縣野生資源551608-38海南屯昌縣野生資源41605-09海南白沙縣野生資源561608-06海南東方市野生資源51605-12海南白沙縣野生資源571608-49海南??谑幸吧Y源61605-15海南白沙縣野生資源581608-24海南瓊中縣野生資源71605-17海南白沙縣野生資源591608-48海南??谑幸吧Y源81605-19海南白沙縣野生資源601608-15海南樂東縣野生資源91706-10海南澄邁縣半野生資源611608-20海南瓊中縣野生資源101605-35海南五指山市野生資源621608-30海南屯昌縣野生資源111605-33海南五指山市野生資源631608-14海南樂東縣野生資源121605-31海南五指山市野生資源641608-07海南東方市野生資源131706-01海南臨高縣野生資源651608-13海南樂東縣野生資源141605-25海南五指山市野生資源661611-13海南萬寧市野生資源151605-22海南五指山市野生資源671608-21海南文昌市野生資源161605-20海南白沙縣野生資源681706-02海南東方市野生資源171605-37海南五指山市野生資源691706-03海南東方市野生資源181608-28海南白沙縣野生資源701706-05海南白沙縣半野生資源191608-29海南白沙縣野生資源711611-12海南萬寧市野生資源201608-04海南東方市野生資源721611-02海南瓊中縣野生資源211608-02海南東方市野生資源731611-11海南陵水縣半野生資源221608-19海南瓊中縣野生資源741611-06海南保亭縣半野生資源231608-36海南定安縣野生資源751611-09海南陵水縣野生資源241608-03海南東方市野生資源761608-05海南東方市野生資源251608-54海南臨高縣野生資源771709-28廣東湛江市野生資源261608-45海南??谑幸吧Y源781709-10廣西欽州市野生資源271608-52海南臨高縣野生資源791709-23廣東茂名市野生資源281608-53海南臨高縣野生資源801709-22廣東茂名市野生資源291608-08海南東方市野生資源811709-16廣西北海市野生資源301608-09海南東方市野生資源821704-11廣西南寧市半野生資源311608-41海南定安縣野生資源831709-02廣西欽州市野生資源321608-51海南臨高縣野生資源841709-03廣西欽州市野生資源331608-11海南樂東縣野生資源851709-22廣東茂名市野生資源341608-56海南臨高縣野生資源861709-25廣東茂名市野生資源351706-06海南五指山市半野生資源871810-17海南陵水縣半野生資源361608-55臨高縣野生資源881811-01海南儋州市野生資源371608-57臨高縣野生資源891811-04海南儋州市野生資源381608-40屯昌縣野生資源901810-01海南昌江縣野生資源391608-46??谑幸吧Y源911810-10海南三亞市野生資源401608-16樂東縣野生資源921810-23海南萬寧市野生資源411608-32定安縣野生資源931810-03海南昌江縣野生資源421608-34定安縣野生資源941810-21海南萬寧市半野生資源431608-50海口市野生資源951810-20海南萬寧市野生資源441608-35定安縣野生資源961811-03海南儋州市野生資源451706-07五指山市半野生資源971811-02海南儋州市野生資源461608-23瓊中縣野生資源981810-08海南昌江縣野生資源471608-33定安縣野生資源991810-28海南瓊海市野生資源481608-47??谑幸吧Y源1001810-07海南昌江縣野生資源491608-31屯昌縣半野生資源1011810-09海南昌江縣野生資源501608-10東方市野生資源1021810-11海南三亞市野生資源511608-26瓊中縣野生資源1031810-11海南三亞市野生資源521608-44海口市野生資源表5候選性狀表性狀代號(hào)性狀名稱Chr1植株:高度Chr2植株:冠幅Chr3莖:皮孔Chr4葉片:長度Chr5葉片:寬度Chr6葉片:厚度Chr7葉片:形狀Chr8葉片:背面茸毛疏密程度Chr9葉片:背面茸毛顏色Chr10葉片:綠色程度Chr11葉片:光滑度Chr12葉片:邊緣波緣狀程度Chr13葉片:伸展?fàn)顟B(tài)Chr14葉片:先端形狀Chr15葉片:基部形狀Chr16葉片:前端邊緣缺刻深度Chr17葉脈:側(cè)脈明顯程度Chr18葉柄:長度Chr19花:始花期Chr20花:花冠顏色Chr21花:苞片Chr22花:花萼頂端形狀Chr23葉片:咖啡酸含量Chr24葉片:連翹酯苷B含量Chr25葉片:木犀草苷含量Chr26葉片:毛蕊花糖苷含量Chr27葉片:異毛蕊花糖苷含量Chr28葉片:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量Chr29葉片:木犀草素含量性狀觀察(1)數(shù)量性狀的分級(jí)1)調(diào)查方法在營養(yǎng)生長末期,每個(gè)小區(qū)選取4個(gè)植株,每個(gè)植株取生長于中部相同區(qū)位的成熟且未衰老的葉片6片,分別測量葉片長度,葉片寬度,葉柄長度,計(jì)算平均值;在盛花期,對(duì)植株高度、植株冠幅進(jìn)行測量,并采集成熟功能葉用于咖啡酸含量、連翹酯苷B等7種有效成分的含量測定。2)性狀調(diào)查結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)調(diào)查性狀的極值、極差、平均值(X)、標(biāo)準(zhǔn)差(S)和變異系數(shù)(CV),結(jié)果如表6所示。12個(gè)數(shù)量性狀的變異系數(shù)范圍在11.81%~52.13%。變異系數(shù)均大于10%,說明供試材料的數(shù)量性狀間存在較大變異,遺傳多樣性豐富。用SPSS19.0檢驗(yàn)各性狀的分布是否為正態(tài)分布類型,并繪制分布直方圖,發(fā)現(xiàn)此12個(gè)性狀基本上呈正態(tài)分布(圖1)。采用(X–1.2818S)、(X–0.5246S)、(X+0.5246S)、(X+1.2818S)4個(gè)分值點(diǎn)來分為5級(jí),或用(X–0.5246S)和(X+0.5246S)2個(gè)分值點(diǎn)分為3級(jí)。12個(gè)數(shù)量性狀的分級(jí)情況見表7。其中株高、植株冠幅、葉片長度、毛蕊花糖苷含量分為5級(jí),其余測量性狀則分為3級(jí)。植株高度分為5級(jí),其中中間等級(jí)即高度在192.9~249.4cm間所占比例最大,為43%,矮這一等級(jí)(152.0~192.9cm)次之,為28%。極矮等級(jí)(≤152.0cm)所占比例最小,為5.8%。冠幅也分為5級(jí),其中,中間等級(jí)(173.3~231.3cm)所占比例最大,為37.9%,小這一等級(jí)(131.4~173.3cm)次之,為30.1%。極小等級(jí)(≤131.4cm)所占比例最小,為5.8%。因此收集的種質(zhì)大多均為中小型種,大型種和極小型種較少。葉的變異也較為豐富,葉片長度可分為5個(gè)等級(jí),長度為中的(19.7~22.3cm)的所占比例最大,為37.9%,短和長分別占21.4%和20.4%,極短和極長分別占9.7%和10.7%。葉片寬度分為3級(jí),窄、中、寬所占比例分別為29.1%,41.7%和29.1%。葉柄長也分為3級(jí),短、中、長所占比例分別為29.1%,39.8%和31.1%。葉片中7中有效成分含量變異較大,毛蕊花糖苷為其含量最高的成分,變化范圍為6.69~52.53mg/g,變異系數(shù)達(dá)42.63%,變異較大,因此分為5級(jí),其中中含量的(17.92~28.24)最多,占45.68%,低含量和高含量分別占23.46%,12.35%。其余6個(gè)成分由于成分含量較低,均分為3級(jí),也基本為中間含量所占比值最多,占40%左右,低含量所占比例為29.63%~34.57%,高含量所占比例為18.52%~28.40%。綜上所述,以上12個(gè)數(shù)量性狀,分成5級(jí)的性狀,1~5級(jí)出現(xiàn)的概率大部分接近10%,20%,40%,20%,10%的規(guī)律,而分成3級(jí)的性狀,1~3級(jí)出現(xiàn)的概率大部分接近30%,40%,30%的規(guī)律,即說明數(shù)量性狀的分組較為合理。表612個(gè)數(shù)量性狀的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)調(diào)查性狀極小值極大值極差均值標(biāo)準(zhǔn)差變異系數(shù)/%植株:高度/cm95346251221.153.9424.39植株:冠幅/cm112360248202.355.2827.33葉片:長度/cm13.627.413.821.02.4811.81葉片:寬度/cm4.8310.35.477.560.9412.36葉柄:長度/cm1.373.171.82.250.3616.05葉片:咖啡酸含量/mg/g0.040.160.120.080.0228.70葉片:連翹酯苷B含量/mg/g0.514.123.611.580.7300446.21葉片:木犀草苷含量/mg/g0.563.552.991.660.5935.55葉片:毛蕊花糖苷含量/mg/g6.6952.3545.6623.089.8442.63葉片:異毛蕊花糖苷含量/mg/g0.46.696.292.361.2352.13葉片:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量/mg/g0.180.70.520.390.1026.02葉片:木犀草素含量/mg/g0.030.480.450.270.1139.90圖1裸花紫珠12個(gè)數(shù)量性狀的次數(shù)分布圖表7部分裸花紫珠供試材料測量性狀分析性狀單位評(píng)價(jià)分級(jí)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)份數(shù)百分比(%)參考品種植株:高度cm極矮≤152.065.8矮(152.0,192.9]2827.2中(192.9,249.4]4341.71611-09、1608-24高(249.4,290.3]1312.6極高>290.31312.6植株:冠幅cm極小≤131.465.8小(131.4,173.3]3130.1中(173.3,231.3]3937.91611-09、1608-24大(231.3,273.2]87.8極大>273.21918.4葉片:長度cm極短≤17.8109.7短(17.8,19.7]2221.4中(19.7,22.3]3937.91611-09長(22.3,24.2]2120.4極長>24.21110.71608-24葉片:寬度cm窄≤7.073029.11608-24中(7.07,8.05]4341.71611-09寬>8.053029.1葉柄:長度cm短≤2.063029.11611-09中(2.06,2.44]4139.8長>2.443231.11608-24葉片:咖啡酸含量mg/g低≤0.072429.631608-24中(0.07,0.09]3846.91高>0.091923.461611-09葉片:連翹酯苷B含量mg/g低≤1.202733.33中(1.20,1.96]3138.271608-24高>1.962227.161611-09葉片:木犀草苷含量mg/g低≤1.352530.861611-09中(1.35,1.97]3745.681608-24高>1.971923.46葉片:毛蕊花糖苷含量mg/g極低≤10.4767.41低(10.47,17.92]1923.46中(17.92,28.24]3745.681608-24高(28.24,35.69]1012.35極高>35.69911.111611-09葉片:異毛蕊花糖苷含量mg/g低≤1.722632.1中(1.72,3.01]4049.381608-24高>3.011518.521611-09葉片:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量mg/g低≤0.342834.57中(0.34,0.45]3441.981611-09、1608-24高>0.451923.46葉片:木犀草素含量mg/g低≤0.212632.11608-24中(0.21,0.32]3239.511611-09高>0.322328.43)數(shù)量性狀相關(guān)性分析通過計(jì)算各數(shù)量性狀間的相關(guān)系數(shù),結(jié)果表明株高與冠幅、葉長、葉寬、葉柄長呈極顯著性正相關(guān),與芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷呈顯著性負(fù)相關(guān),與木犀草素呈極顯著性負(fù)相關(guān),冠幅與株高、葉長、葉寬、葉柄長呈極顯著性正相關(guān),與葉寬呈顯著性正相關(guān)。葉長與株高、冠幅、葉柄長呈極顯著正相關(guān),與葉寬、木犀草苷、毛蕊花糖苷呈顯著性正相關(guān)。葉寬與株高呈極顯著性正相關(guān),與冠幅、葉長呈顯著性正相關(guān),與毛蕊花糖苷、木犀草素呈極顯著性負(fù)相關(guān),與咖啡酸呈顯著性負(fù)相關(guān)。葉柄長與株高、冠幅和葉長呈極顯著性正相關(guān)。咖啡酸與葉寬、連翹酯苷B呈顯著性負(fù)相關(guān),與木犀草素呈極顯著性正相關(guān)。連翹酯苷B與咖啡酸呈顯著性負(fù)相關(guān),與木犀草苷、毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷呈極顯著性正相關(guān),與芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷呈顯著性正相關(guān)。木犀草苷與葉長呈顯著性正相關(guān),與連翹酯苷B、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷呈極顯著性正相關(guān)。毛蕊花糖苷與葉長呈顯著性正相關(guān),與葉寬呈極顯著負(fù)相關(guān),與連翹酯苷B、木犀草苷、異毛蕊花糖苷和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷呈極顯著正相關(guān)。異毛蕊花糖苷與連翹酯苷B、木犀草苷和毛蕊花糖苷呈極顯著正相關(guān)。芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷與株高呈顯著性負(fù)相關(guān),與連翹酯苷B呈顯著性正相關(guān),與毛蕊花糖苷、木犀草素呈極顯著性正相關(guān)。木犀草素與株高、葉寬呈極顯著負(fù)相關(guān),與咖啡酸和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷呈極顯著正相關(guān)。表8各數(shù)量性狀間的相關(guān)系數(shù)性狀株高冠幅葉長葉寬葉柄長咖啡酸連翹酯苷B木犀草苷毛蕊花糖苷異毛蕊花糖苷芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷木犀草素株高1.748**.594**.341**.522**-0.178-0.0320.083-0.045-0.009-.199*-.300**冠幅0.748**1.426**.250*.404**0.081-0.188-0.045-0.086-0.114-0.131-0.118葉長0.594**.426**1.197*.719**-0.1130.122.237*.197*0.193-0.024-0.089葉寬0.341**.250*.197*10.156-.200*-0.041-0.146-.317**-0.13-0.16-.260**葉柄長0.522**.404**.719**0.1561-0.057-0.0540.1380.0980.067-0.02-0.088咖啡酸-0.1780.081-0.113-.200*-0.0571-.231*-0.0990.112-0.1330.188.384**連翹酯苷B-0.032-0.1880.122-0.041-0.054-.231*1.573**.589**.763**.199*-0.147木犀草苷0.083-0.045.237*-0.1460.138-0.099.573**1.520**.529**0.1610.059毛蕊花糖苷-0.045-0.086.197*-.317**0.0980.112.589**.520**1.833**.326**0.141異毛蕊花糖苷-0.009-0.1140.193-0.130.067-0.133.763**.529**.833**10.184-0.141芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷-.199*-0.131-0.024-0.16-0.020.188.199*0.161.326**0.1841.365**木犀草素-.300**-0.118-0.089-.260**-0.088.384**-0.1470.0590.141-0.141.365**1**在0.01水平上極顯著相關(guān);*在0.05水平上顯著相關(guān)(2)裸花紫珠目測性狀分析1)材料與方法在裸花紫珠營養(yǎng)生長中期,對(duì)葉片綠色程度這一性狀進(jìn)行觀測,在營養(yǎng)生長末期對(duì)莖的皮孔,葉片形狀,葉片厚度、葉片背面茸毛疏密程度、葉背面茸毛顏色、葉片光滑度、葉片邊緣波緣狀程度、葉片伸展?fàn)顟B(tài)、葉片先端形狀、葉片基部形狀、葉片前端邊緣缺刻深度、葉片側(cè)脈明顯程度等性狀進(jìn)行觀測,在盛花期觀察花冠顏色。2)結(jié)果與分析對(duì)各觀測性狀進(jìn)行調(diào)查與分類,結(jié)果如表9所示。莖的皮孔分為少、中、多3個(gè)等級(jí),其中少為47.57%,中為33.98%,多為18.45%。葉片形狀有披針形、卵圓形、橢圓形和倒卵形4種,其中橢圓形最多,占61.17%,披針形占27.18%,卵圓形占7.77%,倒卵形占3.88%。葉背面茸毛疏密程度分為疏、中、密3個(gè)等級(jí),其中疏占25.24%,中占32.04%,密為42.72%,葉背面茸毛顏色分為灰白、灰黃和灰褐三種顏色,其中灰白占比較多,為57.28%,灰黃色33.01%,灰褐色最少,為9.71%。葉片綠色程度分為淺、中、深,中占比最多,為65.02%,淺和深分別占比15.53%、19.42%。葉片光滑度分為弱、中、強(qiáng)3個(gè)等級(jí),其中弱這一等級(jí)最多,占66.02%,強(qiáng)最少,為3.88%。葉片邊緣波狀程度分為弱、中強(qiáng)三種等級(jí),分別占比11.65%,52.43%和35.92%。葉片伸展?fàn)顟B(tài)分為平展和下垂2種,其中平展較多,為63.11%,下垂占36.89%。葉片先端形狀,分為窄銳角、中等銳角和寬銳角,分別占比40.78%,44.66%和14.56%。葉基形狀包括楔形、寬楔形和偏斜3種,其中寬楔形占比最多,為75.73%,楔形和偏斜分別占16.50%和7.77%。葉片前端邊緣缺刻深度則分為低、中、高三個(gè)等級(jí),中占比最多,為48.57%,低為27.18%,高為24.27%。葉片側(cè)脈明顯程度分為不明顯和明顯兩個(gè)等級(jí),其中,明顯較多,為73.79%。始花期則分為早、中、晚3個(gè)等級(jí),分別為37.25%、50.98%和11.76%?;ü陬伾譃榘咨⒎凵妥仙齻€(gè)類型,其中多數(shù)為紫色花,占比81.82%,白色花較少,103份種質(zhì)中只有1份為白色。表9各觀測性狀的鑒定與分類情況性狀名稱性狀描述份數(shù)百分比(%)參考品種莖:皮孔少4947.571611-09中3533.981608-24多1918.45葉片:形狀披針形2827.181611-09、1608-24卵圓形87.77橢圓形6361.17倒卵形43.88葉片:厚度薄3332.04中5048.5416

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