2025年華東師大版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年華東師大版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、生物技術(shù)正越來越多的影響普通人的生活，下列人們對生物技術(shù)應(yīng)用相關(guān)的認(rèn)識中，正確的是（）A.應(yīng)用試管動物技術(shù)產(chǎn)下新個體的過程屬于無性生殖B.我國政府禁止一切形式的生殖性人克隆實驗C.食用轉(zhuǎn)基因食品會導(dǎo)致外源基因整合入人的基因組D.接種流感疫苗對預(yù)防變異的流感病毒感染一定無效2、我國科學(xué)家在進(jìn)行抗蟲棉的培育過程中獨創(chuàng)了“花粉管通道法”，該方法有多種操作方式。下圖表示花粉管通道法介導(dǎo)植物基因轉(zhuǎn)移。下列相關(guān)說法錯誤的是（）

A.相比于農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，花粉管通道法還適用于玉米等單子葉植物的轉(zhuǎn)基因培育B.相比于基因槍法和農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，花粉管通道法避免了植物組織培養(yǎng)這一操作C.必須在雌蕊成熟時才能進(jìn)行圖中所示的處理方法D.外源DNA不需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，就能借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞并表達(dá)3、植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞工程中所用技術(shù)或方法與原理不完全相符的是（）A.植物組織培養(yǎng)獲得幼苗和單克隆抗體技術(shù)制備抗體-細(xì)胞的全能性B.酶解法處理植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體-酶的專一性C.原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞-細(xì)胞膜的流動性D.紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)獲得相應(yīng)產(chǎn)品-細(xì)胞增殖4、由于某目的基因酶切后的末端為平末端，載體E只有產(chǎn)生黏性末端的酶切位點，需借助中間載體P將目的基因接入載體E。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（）

A.通過PCR擴(kuò)增獲取目的基因是基因工程的核心工作B.為了便于該目的基因接入載體E，可用限制酶EcoRV或SmaI切割載體PC.載體P只能作為中間載體，是因為其沒有表達(dá)該目的基因的啟動子與終止子D.若受體細(xì)胞表現(xiàn)出抗性基因的相應(yīng)性狀，表明重組載體成功導(dǎo)入受體細(xì)胞5、miRNA是一類由基因編碼的；長約22個核苷酸的單鏈RNA分子。在線蟲中，Lin-4基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)加工后形成miRNA-miRNA*雙鏈，其中miRNA與Lin-14mRNA部分配對，使其翻譯受阻，進(jìn)而調(diào)控幼蟲的正常發(fā)育模式，Lin-4miRNA的形成過程及其對Lin-14基因的調(diào)控如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.轉(zhuǎn)錄miRNA的模板鏈堿基序列與miRNA*的堿基序列相同B.用抗原—抗體雜交技術(shù)可檢測到線蟲內(nèi)Lin-4基因表達(dá)的蛋白質(zhì)C.圖中過程①、過程②分別需要RNA聚合酶、限制性核酸內(nèi)切酶D.Lin-4基因調(diào)控Lin-14基因選擇性表達(dá)的結(jié)果是Lin-14基因翻譯水平降低評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)6、科學(xué)家將4個關(guān)鍵基因移植入已分化的肌肉細(xì)胞中并表達(dá)；使這個細(xì)胞成為多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），下圖為該實驗示意圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.應(yīng)用該技術(shù)可緩解器官移植時器官供應(yīng)不足的問題B.iPS細(xì)胞所攜帶的遺傳信息與肌肉細(xì)胞相同C.關(guān)鍵基因表達(dá)使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化，降低了細(xì)胞的分化程度D.病人的iPS細(xì)胞分化而來的細(xì)胞移植回體內(nèi)后，可以避免免疫排斥7、下列實驗過程中，出現(xiàn)的正?，F(xiàn)象有（）A.制作果酒時，發(fā)酵瓶中溶液產(chǎn)生較多泡沫B.用果酒制作果醋過程中，液面出現(xiàn)一層褐色菌膜C.制作腐乳過程中，豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲D.用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面8、某些細(xì)菌能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶水解抗生素；給抗感染治療帶來很大困難。利用檢測試條可檢測細(xì)菌是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，試條左右兩側(cè)對稱含有一定濃度梯度的抗生素，并在一側(cè)添加克拉維酸（一種β-內(nèi)酰胺酶抑制劑）。將兩個含不同抗生素的檢測試條放置在涂布有待檢菌株的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時候后結(jié)果如下圖所示。下列說法正確的是（）

A.抗生素的大量使用會導(dǎo)致產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌的出現(xiàn)B.由實驗結(jié)果可知，越靠近試條兩端的抗生素濃度越大C.該菌能產(chǎn)生β-酰胺酶，試條1中克拉維酸添加在試條右側(cè)D.使用試條2中所含抗生素治療該菌感染的效果更好9、為探究不同糖源（蜂蜜、黃冰糖）對藍(lán)莓酒發(fā)酵產(chǎn)物的影響，某研究小組研發(fā)出如下的藍(lán)莓酒發(fā)酵工藝，其中“主發(fā)酵”時酵母菌會繁殖、大部分糖的分解和代謝物會生成，“后發(fā)酵”是在低溫、密閉的環(huán)境下藍(lán)莓酒會成熟。下列敘述錯誤的是（）

A.菌種甲在產(chǎn)生CO2的同時會產(chǎn)生酒精B.切片后需對發(fā)酵液進(jìn)行消毒然后再分組C.倒罐均需保留空間以促進(jìn)菌種有氧呼吸D.主發(fā)酵要控制無氧，后發(fā)酵要控制有氧10、大腸桿菌能在基本培養(yǎng)基上生長；X射線照射后產(chǎn)生的代謝缺陷型大腸桿菌不能在基本培養(yǎng)基上生長，但可以在完全培養(yǎng)基上生長。利用夾層培養(yǎng)法可篩選代謝缺陷型大腸桿菌，具體的操作是：在培養(yǎng)皿底部倒一層基本培養(yǎng)基，冷凝后倒一層含經(jīng)X射線處理過的菌液的基本培養(yǎng)基，冷凝后再倒一層基本培養(yǎng)基。培養(yǎng)一段時間后，對首次出現(xiàn)的菌落做好標(biāo)記。然后再向皿內(nèi)倒一層完全培養(yǎng)基，再培養(yǎng)一段時間后，會長出形態(tài)較小的新菌落。下列說法正確的是（）A.X射線誘發(fā)染色體變異進(jìn)而導(dǎo)致大腸桿菌代謝缺陷B.首次出現(xiàn)的菌落做標(biāo)記時應(yīng)標(biāo)記在皿蓋上C.夾層培養(yǎng)法可避免細(xì)菌移動或菌落被完全培養(yǎng)基沖散D.形態(tài)較小的新菌落可能是代謝缺陷型大腸桿菌11、自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥?；步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細(xì)胞計數(shù)板來計數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點是不添加氮源12、下圖是快速RT-PCR過程示意圖；①和②為逆轉(zhuǎn)錄酶催化的逆轉(zhuǎn)錄過程，③是PCR過程。據(jù)圖分析下列說法錯誤的是（）

A.逆轉(zhuǎn)錄酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR過程只需要引物bC.RT-PCR不能檢測基因表達(dá)水平D.RT-PCR可檢測新冠病毒等RNA病毒評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)13、一般包括______、______等技術(shù)14、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。15、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細(xì)菌，它的最適生長溫度為_______________，乳酸菌是________細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目___________，這是因為______________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細(xì)胞多采用___________固定化。16、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以將_____________水解成_________________和________________。17、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80℃的高溫，而DNA在_________℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解或破壞_______，食鹽能____________細(xì)胞膜。18、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ)，通過______，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_____，或制造一種______，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)）

19、概念：動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的______，將它分散成______，然后放在適宜的______中，讓這些細(xì)胞______。20、科學(xué)家采用定點誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術(shù)的要點是什么？_________評卷人得分四、判斷題(共3題，共21分)21、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。()A.正確B.錯誤22、我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯誤23、如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因源于自然界，則不會存在安全性問題。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共18分)24、廚余垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對較少，存在發(fā)酵周期長、效率低等缺點，極易對環(huán)境造成污染。

（1）為探究圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌處理某廚余垃圾廢液的最佳接種量比；用于制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

①將兩種菌液進(jìn)行不同配比分組處理；如下表所示：

。編號R0R1R2R3圓褐固氮菌∶巨大芽孢桿菌1∶00∶11∶12∶1將等量上表菌液分別接種于100mL_____中進(jìn)行震蕩培養(yǎng)。本實驗中對照組的處理應(yīng)為_____。

②培養(yǎng)3天后測定活菌數(shù)。取各組菌液采用_____法接種于基本培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后選取菌落數(shù)在_____范圍內(nèi)的平板進(jìn)行計數(shù)；并依據(jù)菌落的形態(tài)特征對兩種菌進(jìn)行區(qū)分，實驗結(jié)果見圖。

由實驗結(jié)果可知，兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種，從代謝產(chǎn)物角度分析，原因可能是______________。接種量比例為_____________時；廢液中兩菌的有效活菌數(shù)最多。

（2）為進(jìn)一步探究菌種比例對該廚余垃圾廢液中蛋白質(zhì)；脂肪等有機(jī)物的降解效果；測得15天內(nèi)廢液中蛋白質(zhì)、脂肪的含量變化如下圖所示：

由實驗結(jié)果可知，對該廚余垃圾廢液中蛋白質(zhì)、脂肪的降解效果最好的兩種菌接種比分別為_____、_____。

（3）固態(tài)廚余垃圾因富含粗纖維、蛋白質(zhì)、淀粉等物質(zhì)，可以通過蒸發(fā)、碾磨、干燥等方式進(jìn)行加工，使加工后的產(chǎn)物在微生物的作用下形成有機(jī)復(fù)合肥等肥料；收集微生物處理后的廚余垃圾殘渣，經(jīng)晾曬干后制成蛋白飼料；通過以上處理可實現(xiàn)_____（選填選項前的符號）。

A．物質(zhì)循環(huán)再生B．能量多級利用C．提高能量傳遞效率25、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點如圖所示，請回答下列問題：

(1)強(qiáng)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被_______識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，如將強(qiáng)啟動子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實驗中的作用是_______。

(2)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細(xì)胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對沒有分化的_______團(tuán)，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。評卷人得分六、綜合題(共4題，共40分)26、嚴(yán)重聯(lián)合性免疫缺陷癥是一種T淋巴細(xì)胞缺乏腺苷脫氨酶（ADA）引起的疾病，通過基因工程的方法將正常ADA基因?qū)牖颊呒?xì)胞中進(jìn)行治療。如圖分別表示正常ADA基因、金屬硫蛋白基因（含有該基因的細(xì)胞能在含重金屬鎘的培養(yǎng)基中生長）和質(zhì)粒（總長為3.8kb，lkb=1000對堿基），ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠ均為限制酶。

（1）嘗試寫出基因工程的兩點主要理論依據(jù)________；________。

（2）為了篩選含有目的基因的受體細(xì)胞；需要先將目的基因和標(biāo)記基因連接形成融合基因。首先用限制酶________切割正常腺苷脫氨酶基因與金屬硫蛋白基因，然后用________酶將它們連接形成融合基因。

（3）將上述融合基因與圖的質(zhì)粒構(gòu)建成重組質(zhì)粒時；應(yīng)選用的限制酶是________。

（4）若該融合基因長1.9kb，據(jù)圖分析，此重組質(zhì)粒大小為________kb。

（5）重組質(zhì)粒應(yīng)導(dǎo)入的受體細(xì)胞是病人的________細(xì)胞。為篩選出含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，需在培養(yǎng)基中添加的物質(zhì)是________。27、大熊貓是我國特有的珍稀野生動物；每只成年大熊貓每日進(jìn)食竹子量可達(dá)12~38kg。大熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖維素分解菌。回答下列問題：

（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即_________。為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以_________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于_________培養(yǎng)基。

（2）配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理，目的是_________。檢測固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是_________。

（3）簡要寫出測定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)的實驗思路_________。

（4）為高效降解農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物，研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌，在37℃條件下進(jìn)行玉米秸稈降解實驗，結(jié)果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株_________，理由是_________。菌株秸稈總重(g)秸稈殘重(g)秸稈失重（%）纖維素降解率（%）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.3228、PCR技術(shù)是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來的新技術(shù)；廣泛用于分子生物學(xué)；基因工程及其他與DNA鑒定相關(guān)的領(lǐng)域，如疾病檢測、法醫(yī)鑒定等。通過咽拭子取樣進(jìn)行RT-PCR技術(shù)檢測是目前臨床上診斷新型冠狀病毒感染疑似患者的常用方法，用于核酸檢測的RT-PCR試劑盒的部分工作原理簡圖（如圖所示）:

（1）RT-PCR是指以病毒的RNA為模板通過__________過程合成cDNA，并對cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增的過程。利用RT-PCR試劑盒對新型冠狀病毒進(jìn)行檢測時，除借助上述RT-PCR技術(shù)外，還需要有特異性探針，利用該探針對新型冠狀病毒進(jìn)行核酸檢測的原理是__________。若用RT-PCT技術(shù)擴(kuò)增胰島素基因，應(yīng)選擇__________細(xì)胞提取RNA。

（2）PCR與體內(nèi)DNA復(fù)制相比，不需要__________酶。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是__________。

（3）若將1個DNA分子拷貝10次，則需要在緩沖液中至少加入__________個引物。

（4）PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、__________三步，其中復(fù)性的結(jié)果是__________。29、請根據(jù)下列兩個資料回答相關(guān)問題：

資料1：用化學(xué)方法激活小鼠成熟的卵母細(xì)胞得到phESC（孤雌單倍體干細(xì)胞）；然后利用基因編輯技術(shù)沉默phESC中的相關(guān)基因，使phESC的細(xì)胞核狀態(tài)接近精子細(xì)胞核的狀態(tài)，如圖1．

資料2：用化學(xué)方法激活小鼠的精子得到ahESC（孤雄單倍體干細(xì)胞）；然后對ahESC中的相關(guān)基因進(jìn)行編輯，使ahESC的細(xì)胞核具有卵細(xì)胞核的特點，如圖2．

(1)體內(nèi)受精時，在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，__會迅速產(chǎn)生生理反應(yīng)阻止后來的精子進(jìn)入；精子入卵后，______也會立即發(fā)生生理反應(yīng)拒絕其他精子再進(jìn)入，接下來卵子發(fā)生的變化有__。

(2)用_______激素對雌性小鼠進(jìn)行___處理可得到較多卵母細(xì)胞。

(3)ahESC與精子和去核卵細(xì)胞融合后，得到的融合細(xì)胞的性染色體組成可能是____。融合細(xì)胞需要進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)，一般早期胚胎發(fā)育至___期才能進(jìn)行移植。

(4)據(jù)資料分析，只依賴雄性小鼠___（填“能”或“不能”）用上圖方法得到孤雄小鼠；請寫出兩個理由支持你的判斷。

理由1：________；

理由2：_______。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、B【分析】【分析】

1；試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；屬于有性生殖，A錯誤；

B；我國禁止生殖性人克隆實驗；允許治療性克隆研究，B正確；

C；用轉(zhuǎn)基因食品不會導(dǎo)致外源基因轉(zhuǎn)入人體細(xì)胞；C錯誤；

D；變異的流感病毒不是新病毒；接種流感疫苗對預(yù)防變異的流感病毒感染有一定效果，D錯誤。

故選B。

【點睛】2、D【分析】【分析】

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法：

1．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是用這種方法獲得的）（2）基因槍法：是單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法；但是成本較高。（3）花粉管通道法：這是我國科學(xué)家獨創(chuàng)的一種方法，是一種十分簡便經(jīng)濟(jì)的方法。（我國的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉就是用此種方法獲得的）；

2．將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞方法：顯微注射技術(shù)。（最有效一種方法）

3．將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：Ca2+處理法（感受態(tài)細(xì)胞法）。

【詳解】

A；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法只適用于雙子葉植物；與農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法相比，花粉管通道法還適用于玉米等單子葉植物的轉(zhuǎn)基因培育，A正確；

B；花粉管通道法可以直接實現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植物的自然生成；而基因槍法和農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，還需要對成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因植物，而花粉管通道法避免了植物組織培養(yǎng)這一操作，B正確；

C；授粉過程需要在雌蕊成熟后；因此，花粉管通道法也應(yīng)該必須在雌蕊成熟時才能進(jìn)行圖中所示的處理方法，C正確；

D；要讓目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后能穩(wěn)定存在并得到復(fù)制和表達(dá)；不管采用什么導(dǎo)入方法，都需要構(gòu)建重組載體才能實現(xiàn)，外源DNA也需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，才能借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞并表達(dá)，D錯誤。

故選D。3、A【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性；植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動性和全能性，動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性。

【詳解】

A；植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性；單克隆抗體的制備的原理是細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞的增殖，A錯誤；

B；植物細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠；用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁制備原生質(zhì)體，利用了酶的專一性，B正確；

C；用物理法或者化學(xué)法使得原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合；利用了細(xì)胞膜具有一定的流動性的特點，C正確；

D；紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)目的是獲得更多細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物；其原理只涉及細(xì)胞增殖，D正確。

故選A。4、C【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是鈣離子處理法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測；①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體；不是通過PCR擴(kuò)增獲取目的基因，A錯誤；

B；由于載體E只有產(chǎn)生黏性末端的酶切位點；要使中間載體P接入載體E，同時防止載體E自身環(huán)化，需要用兩種限制酶分別切割載體E和中間載體P，據(jù)圖可知，中間載體P和載體E均含有XhoI和PstI酶識別序列，故可選用XhoI和PstI酶進(jìn)行酶切，載體P的這兩種酶識別序列中含有EcoRV識別位點，并且其切割的為平末端，可以用于連接目的基因，SmaI酶雖然也能切割得到平末端，但是其識別位點沒有位于XhoI和PstI酶識別位點之間，故不能選擇其對中間載體P進(jìn)行切割，B錯誤；

C；由圖可知；載體P是中間質(zhì)粒，不含有有表達(dá)MT基因的啟動子和終止子，C正確；

D；受體細(xì)胞表現(xiàn)出抗性基因的相應(yīng)性狀；可能是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，也可能只導(dǎo)入了空質(zhì)粒（不含目的基因的質(zhì)粒），D錯誤。

故選C。5、D【分析】【分析】

分析題圖：圖示為線蟲細(xì)胞中Lin-4miRNA調(diào)控基因Lin-14表達(dá)的相關(guān)作用機(jī)制。圖中①表示轉(zhuǎn)錄過程；②表示miRNA前體1經(jīng)過加工形成miRNA前體2過程。miRNA與Lin-14mRNA部分配對；使其翻譯受阻。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)錄miRNA的模板鏈堿基序列與miRNA*的堿基序列可以發(fā)生堿基互補(bǔ)配對；而不是相同，A錯誤；

B；據(jù)圖可知；Lin-4基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)加工后形成miRNA-miRNA*雙鏈，其中miRNA與Lin-14mRNA部分配對，使其翻譯受阻，說明Lin-4基因?qū)儆谡{(diào)控基因，并沒有形成蛋白質(zhì)，故不能用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測到線蟲內(nèi)Lin-4基因表達(dá)的蛋白質(zhì)，B錯誤；

C；圖中過程①為轉(zhuǎn)錄；需要RNA聚合酶催化，過程②為miRNA前體1經(jīng)過加工形成miRNA前體2過程，需要剪切RNA的RNA剪切酶催化，而限制性核酸內(nèi)切酶識別的是DNA的特定序列，是對DNA的特定部位進(jìn)行剪切，C錯誤；

D；根據(jù)分析可知；Lin-4基因調(diào)控Lin-14基因選擇性表達(dá)的結(jié)果是Lin-14基因翻譯水平降低，D正確。

故選D。

【點睛】二、多選題(共7題，共14分)6、B:C【分析】【分析】

分析題圖：圖中表示將4個關(guān)鍵基因移植入已分化的肌肉細(xì)中并表達(dá)；使這個細(xì)胞成為多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）以及多能干細(xì)胞的分化過程，即圖中①②③表示細(xì)胞分化。

【詳解】

A；用iPS細(xì)胞誘導(dǎo)分化成需要的器官后進(jìn)行自體移植；沒有免疫排斥反應(yīng)，可緩解器官移植時器官供應(yīng)不足的問題，A正確；

B；將4個關(guān)鍵基因移植入已分化的肌肉細(xì)中并表達(dá)；使這個細(xì)胞成為多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），可見iPS細(xì)胞所帶遺傳信息與肌肉細(xì)胞不同，B錯誤；

C；圖中關(guān)鍵基因表達(dá)形成iPS細(xì)胞；沒有使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化，C錯誤；

D；用患者自己的體細(xì)胞通過體外誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞；所以將iPS細(xì)胞增殖分化出的不同細(xì)胞移植回病人體內(nèi)，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選BC。7、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無氧條件下，產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時；除了產(chǎn)生酒精，還會產(chǎn)生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產(chǎn)生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過程中；液面出現(xiàn)一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯誤；

C；制作腐乳過程中；豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點睛】8、B:C:D【分析】【分析】

題干分析；某些細(xì)菌能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶水解抗生素，從而產(chǎn)生抗藥性。試條兩側(cè)含有抗生素，并在試條一側(cè)添加β-內(nèi)酰胺酶抑制劑（能抑制β-內(nèi)酰胺酶的活性，從而不能水解抗生素），將其放在不含有抗生素的待測菌株上培養(yǎng)，一段時間后發(fā)現(xiàn)，試條1右側(cè)和試條2的左右兩側(cè)都出現(xiàn)了抑菌圈，說明該部位的菌株能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶。

【詳解】

A；基因突變具有不定向性；抗生素使用之前，產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的細(xì)菌已經(jīng)出現(xiàn)，抗生素只是起到選擇作用，A錯誤；

B；由實驗結(jié)果可知；越靠近試條兩端的抑菌圈較大，說明抗生素濃度較大，B正確；

C；該菌能產(chǎn)生β-酰胺酶；使用克拉維酸能抑制該菌產(chǎn)生的β-酰胺酶的活性，進(jìn)而不能抵抗抗生素，試條1右側(cè)出現(xiàn)抑菌圈，左側(cè)沒有出現(xiàn)抑菌圈，說明試條1中克拉維酸添加在試條右側(cè)，C正確；

D；試條2左右兩側(cè)的抑菌圈菌大于試條1；說明使用試條2中所含抗生素治療該菌感染的效果更好，D正確。

故選BCD。

【點睛】9、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是一類單細(xì)胞真菌；能以多種糖類作為營養(yǎng)物質(zhì)和能量的來源，因此在一些含糖量較高的水果；蔬菜表面經(jīng)?？梢园l(fā)現(xiàn)酵母菌的存在。酵母菌是兼性厭氧微生物，在無氧條件下能進(jìn)行酒精發(fā)酵，可用于釀酒、制作饅頭和面包等。溫度是影響酵母菌生長的重要因素，釀酒酵母的最適生長溫度約為28℃。

【詳解】

A、發(fā)酵產(chǎn)生果酒的菌種是酵母菌，酵母菌在有氧呼吸產(chǎn)生CO2；但不產(chǎn)生酒精，A錯誤；

B；切片后對發(fā)酵液進(jìn)行消毒；防止雜菌污染，再進(jìn)行分組，B正確；

C；壓榨倒罐用于主發(fā)酵需保留空間以促進(jìn)酵母菌的有氧呼吸；二次倒罐時菌種是進(jìn)行無氧呼吸，C錯誤；

D；主發(fā)酵先有氧促進(jìn)酵母菌大量繁殖；后無氧進(jìn)行酒精發(fā)酵，后發(fā)酵要控制無氧，D錯誤。

故選ACD。10、C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；大腸桿菌是原核生物；沒有染色體，A錯誤；

B；首次出現(xiàn)的菌落做標(biāo)記時應(yīng)標(biāo)記在皿底上；B錯誤；

C；夾層培養(yǎng)法不需要對大腸桿菌進(jìn)行再次接種；可避免細(xì)菌移動或菌落被完全培養(yǎng)基沖散，C正確；

D；由于代謝缺陷型大腸桿菌不能在基本培養(yǎng)基上生長；所以形態(tài)較小的新菌落可能是代謝缺陷型大腸桿菌，D正確。

故選CD。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應(yīng)取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細(xì)胞計數(shù)板或稀釋涂布平板法來計數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點是不添加氮源，利用的是空氣中的氮氣，D正確。

故選ACD。12、B:C【分析】【分析】

據(jù)圖可知，逆轉(zhuǎn)錄酶可以催化以RNA為模板合成cDNA，還可催化以cDNA為模板合成其互補(bǔ)DNA；RT-PCR過程中需要a、b兩種引物。

【詳解】

A；逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正確；

B、③PCR過程需要引物a、b；因為后續(xù)的模板鏈序列既有與靶RNA一致的，也有與cDNA一致的，B錯誤；

C；RT-PCR可檢測基因的轉(zhuǎn)錄情況從而推知基因的表達(dá)水平；C錯誤；

D；通過設(shè)計RNA的特異性引物進(jìn)行RT-PCR檢測新冠病毒等RNA病毒；D正確。

故選BC。三、填空題(共8題，共16分)13、略

【解析】①.動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動物細(xì)胞融合與單克隆抗體14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段15、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，它的最適生長溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細(xì)胞多采用包埋法固定化。

【點睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識記內(nèi)容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落伊紅美藍(lán)黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80細(xì)胞膜溶解18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】組織單個細(xì)胞培養(yǎng)基生長和繁殖20、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共3題，共21分)21、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。22、A【分析】【詳解】

生殖性克隆存在倫理道德等方面的問題，我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。本說法正確。23、B【分析】【詳解】

來源于自然界的目的基因?qū)胫参矬w后，可能破壞原有的基因結(jié)構(gòu)，具有不確定性，外源基因也可能通過花粉傳播，使其他植物成為“超級植物"等，所以如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，也可能存在安全性問題。本說法錯誤。五、實驗題(共2題，共18分)24、略

【分析】【分析】

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。在統(tǒng)計菌落數(shù)目時；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計數(shù)。

【詳解】

（1）①要探究圓褐固氨菌和巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液的最佳接種量比；故需要將不同配比的菌液接種在100mL某餐廚垃圾廢液中，為了保證氧氣供應(yīng)及目的菌與培養(yǎng)液充分接觸，需要進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。另外為了減小誤差，還需要設(shè)置對照組，接種等量無菌水，在相同的條件下培養(yǎng)。

②測定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時故需要取一定量菌液進(jìn)行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)?？梢愿鶕?jù)菌落的形態(tài)區(qū)分兩種菌，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計數(shù)，根據(jù)實驗數(shù)據(jù)可知，兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種，從代謝產(chǎn)物角度分析，原因可能是兩種菌可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物作為營養(yǎng)物質(zhì)。當(dāng)兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

（2）由實驗數(shù)據(jù)可知，R3接種組隨著時間的延長，蛋白質(zhì)的含量下降最明顯；R1接種組隨著處理時間的延長；脂肪的含量下降最明顯，即脂肪的降解效果最好。

（3）固態(tài)廚余垃圾因富含粗纖維；蛋白質(zhì)、淀粉等物質(zhì)；可加工形成有機(jī)復(fù)合肥、蛋白飼料等，利用了物質(zhì)循環(huán)再生、能量多級利用的生態(tài)工程的原理，AB正確。故選AB。

【點睛】

本題結(jié)合圖形和表格，主要考查微生物的分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生掌握稀釋涂布平板法的操作流程，識記微生物計數(shù)的方法，能結(jié)合所學(xué)知識和圖形信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥磕硰N余垃圾廢液加入等量無菌水稀釋涂布平板法30~300兩種菌可以相互利用對方的代謝產(chǎn)物作為營養(yǎng)物質(zhì)（一種菌的代謝產(chǎn)物是另一種菌的營養(yǎng)物質(zhì)）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB25、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點；能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄；如將強(qiáng)啟動子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，則會破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強(qiáng)啟動子和P基因不被破壞，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實驗中的作用是將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質(zhì)粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上，因此將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場所，線粒體是細(xì)胞有氧呼吸的主要場所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細(xì)胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對沒有分化的薄壁細(xì)胞團(tuán)；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細(xì)胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染六、綜合題(共4題，共40分)26、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中正常的ADA基因為目的基因，金屬硫蛋白基因為標(biāo)記基因，應(yīng)該先用限制酶ClaⅠ切割目的基因和標(biāo)記基因，形成融合基因；再用限制酶SacⅠ、XbaⅠ切割融合基因和質(zhì)粒；接著用DNA連接酶將融合基因和質(zhì)粒連接起來，形成重組質(zhì)粒。

【詳解】

（1）基因工程的理論依據(jù)是不同生物DNA結(jié)構(gòu)相似；密碼子具有通用性即所有共用同一套遺傳密碼。

（2）根據(jù)以上分析已知，將正常ADA基因與金屬硫蛋白基因形成融合基因時，應(yīng)該選擇ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠ；然后用DNA連接酶將兩者連接起來。

（3）根據(jù)以上分析已知，將融合基因與質(zhì)粒重組時，應(yīng)該選擇的限制酶是SacⅠ和XbaⅠ。

（4）質(zhì)粒長度為3.8kb，經(jīng)過限制酶切割后長度=3.8-0.4=3.4kb，融合基因長度為1.9kb，因此重組質(zhì)粒長度=3.4+1.9=5.3kb。

（5）本實驗的目的是治療T淋巴細(xì)胞缺乏腺苷脫氨酶（ADA）引起的疾?。凰孕枰獙⒅亟M質(zhì)粒導(dǎo)入病人的T淋巴細(xì)胞；金屬硫蛋白基因作為標(biāo)記基因，所以為篩選出含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，需在培養(yǎng)基中添加的物質(zhì)是重金屬鎘。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具及作用，掌握基因工程的操作步驟，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。【解析】不同生物DNA結(jié)構(gòu)相似共用同一套遺傳密碼（答案合理即可）ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠDNA連接酶SacⅠ和XbaⅠ5.3T淋巴重金屬鎘27、略

【分析】【分析】

1；分解纖維素的微生物分離的實驗原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長；

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

2、消毒和滅菌：。消毒滅菌概念使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌適用對象操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

【詳解】

（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以纖維素為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)基從功能上分類可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，故該培養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）配制培養(yǎng)基的常用高壓蒸汽滅菌；即將培養(yǎng)基置于壓力100kPa；溫度121℃條件下維持15～30分鐘，目的是為了殺死培養(yǎng)基中的所有微生物（微生物和芽孢、孢子）。為檢測滅菌效果可對培養(yǎng)基進(jìn)行空白培養(yǎng)，即將未接種的培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，若在適宜條件下培養(yǎng)無菌落出現(xiàn)，說明培養(yǎng)基滅菌徹底，否則說明培養(yǎng)基滅菌不徹底。

（3）為測定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)；常采用稀釋涂布平板法，在適宜的條件下對大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌進(jìn)行純化并計數(shù)時，對照組應(yīng)該涂布等量的無菌水。將大熊貓新鮮糞便樣液稀釋適當(dāng)倍數(shù)后，取0.1mL涂布到若干個平板（每個稀釋度至少涂布三個平板），對菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)，則可根據(jù)公式推測大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)。

（4）測定酶活力時可以用單位時間內(nèi)；單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量來表示。由表格可知；在適宜的條件下，C菌株在相同的溫度和時間下，秸稈失重最多，纖維素降解率最大，說明該菌株的纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶活力最大。

【點睛】

本題考查微生物的實驗室培養(yǎng)，要求考生識記計數(shù)微生物的方法；識記培養(yǎng)基的種類及功能；掌握纖維素分解分離和鑒別的原理，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題?！窘馕觥竣?C1酶、Cx酶