2025年人教A版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教A版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷705考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、生物技術(shù)安全性和倫理問題是社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.要靠確鑿的證據(jù)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪壿媮硭伎嫁D(zhuǎn)基因技術(shù)的影響B(tài).設(shè)計(jì)試管嬰兒實(shí)質(zhì)是選擇性移植體外受精形成的胚胎，應(yīng)予以禁止C.基因篩檢可能幫助人類及早預(yù)防某些遺傳性疾病，但也會(huì)引發(fā)基因歧視問題D.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)制造的新型致病菌可能讓大批受感染者突然發(fā)病而又無藥可醫(yī)2、家庭釀制的紅葡萄酒味道純正，無任何添加劑和防腐劑，干凈沒有毒性。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.為了清洗葡萄表皮殘留的農(nóng)藥，應(yīng)用自來水反復(fù)沖洗B.為了增加葡萄酒的量，需向釀制容器內(nèi)多加入些白糖C.為了防止環(huán)境中雜菌污染，發(fā)酵時(shí)應(yīng)在容器口置一紗布D.釀制時(shí)，容器應(yīng)放在陰涼處保存，不要隨意打開蓋子3、下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.以根尖、莖尖為材料利用組織培養(yǎng)技術(shù)可獲得具有抗病毒的新品種B.單倍體育種過程中的某個(gè)階段用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)C.利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得人參皂甙，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)D.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“蘿卜甘藍(lán)”，克服了生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙4、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物精子和卵子的發(fā)生以及受精作用的敘述，正確的是（）A.卵細(xì)胞膜反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障B.排卵就是從卵巢排出成熟卵子的過程C.雄性動(dòng)物排出的精子可直接與卵子結(jié)合完成受精D.受精作用的實(shí)質(zhì)是雌雄原核的融合5、下列有關(guān)微生物純培養(yǎng)技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)基被污染B.平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種逐步稀釋分散C.在相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征D.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、下圖為科學(xué)家在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡(jiǎn)要過程；下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強(qiáng)的肌肉母細(xì)胞B.生物反應(yīng)器內(nèi)應(yīng)控制好適宜的溫度，并沖入純氧保證細(xì)胞呼吸C.培養(yǎng)液中的支架提供了更多的細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)D.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，減少環(huán)境污染7、我國(guó)首例綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬的培育過程如圖所示，其中字母代表結(jié)構(gòu)或生物，數(shù)字代表過程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.為了①和②的順利完成，需要用滅活的病毒對(duì)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)B.將C的細(xì)胞核去掉，實(shí)質(zhì)上是去除紡錘體—染色體復(fù)合物C.為避免將E植入F時(shí)產(chǎn)生排斥反應(yīng)，移植前應(yīng)給F注射免疫抑制劑D.移入F的桑葚胚要經(jīng)歷囊胚、原腸胚等階段才能形成豬的幼體8、下圖為某個(gè)基因的部分片段，關(guān)于該結(jié)構(gòu)的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.①所圈定的部位是腺嘌呤B.DNA連接酶作用于②處C.限制酶作用于③處D.解旋酶作用于④處9、在進(jìn)行擬矮牽牛和矮牽牛的種間原生質(zhì)體融合時(shí)，利用親本材料對(duì)藥物抗性的差異來選擇雜種細(xì)胞的過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.只有雜種細(xì)胞能在含放線菌素D的MS培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)B.同一株植物的不同細(xì)胞經(jīng)離體培養(yǎng)獲得的再生苗基因型可能不相同C.②中的融合過程一定要在無菌水中進(jìn)行，防止雜菌污染D.通過③得到的愈傷組織等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子10、生活中常見的果酒、果醋和泡菜的制作離不開傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.家庭釀酒、制果醋和酸奶均需要選純種菌進(jìn)行發(fā)酵B.果醋制作的溫度一般控制在30～35℃，果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18～25℃C.制作泡菜壇口密封的目的是保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵時(shí)所需的無氧環(huán)境D.果醋制作中期通入氮?dú)?，有利于醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?1、某種物質(zhì)S（一種含有C；H、N的有機(jī)物）難以降解；會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲，乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y下列分析正確的是（）

A.Y物質(zhì)是瓊脂，甲和乙均需采用高壓蒸汽滅菌B.若搖瓶甲細(xì)菌細(xì)胞估算數(shù)為2×107個(gè)/mL，每個(gè)平板接種量為0．1mL，菌落平均數(shù)為200個(gè)，則搖瓶?jī)?nèi)菌液至少稀釋104倍C.③過程所使用的接種環(huán)，需采用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌D.⑤過程中若S的濃度超過某一濃度時(shí)，菌株對(duì)S的降解量可能會(huì)下降12、圖甲為培育轉(zhuǎn)基因生物時(shí)選用的載體，圖乙是含有目的基因的一段DNA序列，圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.若通過PCR技術(shù)提取該目的基因，應(yīng)該選用引物a和引物cB.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)應(yīng)選用BamHⅠ和HindⅡ這兩種限制酶C.圖乙中一個(gè)DNA分子在PCR儀中經(jīng)過四輪復(fù)制得到所需目的基因的分子數(shù)為8個(gè)D.只利用含四環(huán)素的培養(yǎng)基就可以直接篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞13、多巴胺（DA）是神經(jīng)系統(tǒng)中關(guān)鍵的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，廣泛調(diào)節(jié)多種脊椎動(dòng)物的許多復(fù)雜生理功能。為了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)體內(nèi)多巴胺濃度的動(dòng)態(tài)變化情況，我國(guó)科研人員開發(fā)出了一種新型DA熒光探針，通過將對(duì)結(jié)構(gòu)變化敏感的熒光蛋白（cpEGFP）嵌入人源多巴胺受體，使多巴膠這一化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為熒光信號(hào)，再結(jié)合現(xiàn)有的成像技術(shù)即可實(shí)現(xiàn)。這一成果解決了如何在擁有數(shù)十億個(gè)神經(jīng)細(xì)胞、數(shù)萬億個(gè)突觸連接的大腦中精確檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)釋放的一個(gè)難題。結(jié)合以上信息和所學(xué)知識(shí)判斷，以下說法正確的是（）A.神經(jīng)遞質(zhì)是一類在細(xì)胞間充當(dāng)信息分子的特殊物質(zhì)B.DA與DA受體結(jié)合后會(huì)引起后者空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化C.DA探針與基因診斷中的基因探針的化學(xué)本質(zhì)相間D.DA探針熒光強(qiáng)度的變化能夠反映出DA濃度的變化14、某對(duì)美國(guó)夫婦將用他們精子、卵子形成的胚胎冷藏在澳大利亞墨爾本一家不孕癥治療中心。在一次外出時(shí)，他們因飛機(jī)失事而去世。于是有親人提出，可以將該夫婦冷藏的胚胎植入某個(gè)受體母親子宮，生下一個(gè)孩子來繼承遺產(chǎn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.用精子、卵子形成胚胎需要借助人工授精技術(shù)B.若實(shí)施胚胎移植，需要受體母親處于合適的生理狀態(tài)C.受體母親與胚胎的主要HLA的相似程度要大于50%D.該件事反映了“胚胎冷藏”技術(shù)可能帶來倫理問題評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)15、通過統(tǒng)計(jì)平板上的________________，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。16、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

組織培養(yǎng)技術(shù)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外，還廣泛應(yīng)用于另一個(gè)重要的領(lǐng)域，即______。17、植物誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括______等?；瘜W(xué)法一般是用_____作為誘導(dǎo)劑。18、近年來，克隆技術(shù)的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過與克隆技術(shù)有關(guān)的問題嗎？_____。19、有時(shí)還需進(jìn)行______的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)______。20、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共18分)21、雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯(cuò)誤22、蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級(jí)結(jié)構(gòu)，而這種高級(jí)結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜。（選擇性必修3P95）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共12分)23、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥；但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)的過程如圖1所示，圖2是乙中的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)回答下列問題：

（1）為了獲得尿素分解菌；可在__________取樣；經(jīng)系列處理后如圖2所示培養(yǎng)基，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源的分別是___________；__________。

（2）甲中培養(yǎng)基與乙中培養(yǎng)基的成分相比；唯一的區(qū)別是___________。

（3）在涂平板前需要對(duì)甲中的菌液進(jìn)行稀釋；稀釋涂布后能得到菌落數(shù)目在___________________的平板，則說明稀釋操作比較成功。

（4）對(duì)分離得到的尿素分解菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)；可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是尿素分解菌_____________________，再結(jié)合菌落的特征等進(jìn)行確定。

（5）統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_________，除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。24、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中對(duì)水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示，請(qǐng)回答下列問題：

(1)強(qiáng)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被_______識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，如將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是_______。

(2)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細(xì)胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對(duì)沒有分化的_______團(tuán)，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。25、赤霉素與其受體GID結(jié)合后；可以促進(jìn)植物莖稈伸長(zhǎng)。藍(lán)光能夠激活藍(lán)光受體CRY，抑制赤霉素的作用，為探究該機(jī)理，研究者分別構(gòu)建了含有His-CRY和GST-GID融合基因的表達(dá)載體，表達(dá)出相應(yīng)的融合蛋白。His和GST均為短肽，它們與其他蛋白形成的融合蛋白能與His或GST抗體結(jié)合，且不影響其他蛋白的結(jié)構(gòu)和功能。

(1)構(gòu)建含上述融合基因的表達(dá)載體。

①結(jié)合圖1分析，欲使His短肽連在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，則應(yīng)在____________(填“F引物”或“R引物”)的___________(“5’”或“3’”)端加上His短肽的編碼序列，理由是________________。

②為使融合基因能與載體相連接，還需在F引物和R引物上添加相應(yīng)的酶切位點(diǎn)序列，該序列應(yīng)該位于His短肽編碼序列的_____________(填“5’”或“3’”)端。

③用同樣的方法擴(kuò)增GST-GID融合基因；并構(gòu)建相關(guān)表達(dá)載體。

(2)將兩個(gè)表達(dá)載體同時(shí)導(dǎo)人擬南芥細(xì)胞，一段時(shí)間后裂解細(xì)胞，將含有His抗體的磁珠加人裂解液中，充分孵育后收集磁珠，將磁珠上的蛋白(磁珠蛋白)分離下來，進(jìn)行抗原-抗體雜交，結(jié)果如圖2。

①對(duì)細(xì)胞裂解液蛋白進(jìn)行抗原-抗體雜交的目的是_______________。對(duì)磁珠蛋白進(jìn)行His抗體檢測(cè)的目的是_________。

②圖示結(jié)果說明，藍(lán)光的作用機(jī)理是__________。26、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機(jī)體特異性免疫，實(shí)現(xiàn)腫瘤的預(yù)防和治療。

(1)部分腸道細(xì)菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細(xì)胞。細(xì)菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達(dá)產(chǎn)物能夠與樹突狀細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，提高樹突狀細(xì)胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)的效果，研究者用健康小鼠進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時(shí)后，飲用含阿拉伯糖的水結(jié)果檢測(cè)第1組空載體+第12天，每組隨機(jī)取5只小鼠等量的脾臟細(xì)胞與黑色素瘤細(xì)胞共培養(yǎng)，檢測(cè)殺傷率，結(jié)果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時(shí)后其在腸道內(nèi)存在數(shù)量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結(jié)果說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，理由是_____。

②為進(jìn)一步驗(yàn)證上述結(jié)論，研究者進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：先加入_____（填選項(xiàng)前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項(xiàng)前字母）保溫后漂洗，檢測(cè)熒光細(xì)胞的數(shù)目，若第5組_____為最大值；則上述結(jié)論成立。

A．帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物。

B．帶有綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞毒性T細(xì)胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細(xì)胞。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)，研究者重復(fù)上表實(shí)驗(yàn)，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細(xì)胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發(fā)為不同腫瘤的精準(zhǔn)治療和預(yù)防提供了可能。依據(jù)本研究，設(shè)計(jì)針對(duì)肺癌治療的工程菌表達(dá)載體元件：_____。評(píng)卷人得分六、綜合題(共1題，共4分)27、T4溶菌酶來源于T4噬菌體，可分解細(xì)菌的細(xì)胞璧，在食品防腐、醫(yī)藥工業(yè)等方面有廣泛應(yīng)用。但該酶熱穩(wěn)定性較差，在41．9℃的環(huán)境中半數(shù)酶將失活。為提高該酶熱穩(wěn)定性，研究人員對(duì)其進(jìn)行如圖所示的改造（圖中①②③代表相關(guān)生理過程，“____”表示二硫鍵）。

請(qǐng)回答下列問題：

（1）據(jù)圖分析，改造前后T4溶菌酶的合成過程均包括①________和②________等階段。

（2）完成上述改造根本上要改變T4溶菌酶基因的堿基序列；即誘導(dǎo)其發(fā)生_________。改造后的該酶中第3位異亮氨酸被半胱氨酸取代，其密碼子變?yōu)開_______。這種改變導(dǎo)致第3位與第97位半胱氨酸之間形成一個(gè)新的二硫鍵，引起該酶________的改變，從而提高了熱穩(wěn)定性。

（3）科研工作者可選用下面的________處理組合，檢測(cè)改造后的T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性。

①分別使用同種生物合成的野生型T4溶菌酶和改造后的T4溶菌酶。

②分別使用不同生物合成的野生型T4溶菌酶和改造后的T4溶菌酶。

③60℃處理。

④37℃處理。

⑤分別檢測(cè)溶菌效果．

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)T4溶菌酶的改造顯著提高了其熱穩(wěn)定性。該研究過程對(duì)你的啟發(fā)_________（任寫一條）。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、B【分析】設(shè)計(jì)試管嬰兒∶是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前；根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個(gè)細(xì)胞取出，進(jìn)行某些基因檢測(cè)。當(dāng)檢測(cè)結(jié)果符合人們需要是，再把胚胎植入母體孕育.否定的理由∶把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠，是對(duì)生命的不尊重;早期生命也有活下去的權(quán)利，拋棄或殺死多余胚胎，無異于"謀殺"。肯定的理由∶解決了不育問題，提供骨髓中造血干細(xì)胞救治患者最好；最快捷的方法，提供骨髓造血干細(xì)胞并不會(huì)對(duì)試管嬰兒造成損傷。

【詳解】

A；人類對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)議集中在食物安全、生物安全和環(huán)境安全方面；生物技術(shù)的安全性要有確鑿的證據(jù)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪壿媮硭伎?，要有健全的法律法?guī)做約束，要有科學(xué)的輿論導(dǎo)向，A正確；

B；試管嬰兒實(shí)質(zhì)是選擇性移植體外受精形成的胚胎；應(yīng)禁止設(shè)計(jì)試管嬰兒，生殖性克隆，允許治療性生殖，B錯(cuò)誤；

C；基因篩檢可能幫助人類及早預(yù)防某些遺傳性疾??；做到早發(fā)現(xiàn)法治療，如隱私泄露，也會(huì)引發(fā)基因歧視問題，C正確；

D；利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)制造的新型致病菌；有一些人類從來沒有接觸過的致病菌，可能讓大批受感染者突然發(fā)病而又無藥可醫(yī)，這樣，施放者便可以在敵方公眾中造成極度恐慌，達(dá)到不戰(zhàn)而勝的目的，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】

2、D【分析】【分析】

在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中；起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌。在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高，紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。

20℃左右最適宜酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18℃-25℃。

【詳解】

A；為了清洗葡萄表皮殘留的農(nóng)藥；應(yīng)用自來水浸泡和沖洗，但是不要反復(fù)沖洗，這樣會(huì)洗點(diǎn)葡萄皮自帶的酵母菌，A錯(cuò)誤；

B；為了增加葡萄酒的量；需向釀制容器內(nèi)加適量白糖，加太多白糖可能會(huì)使發(fā)酵液滲透壓增大，酵母菌失水而死，B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵過程需要嚴(yán)格無氧；所以最好密封瓶口，而且定期排氣，C錯(cuò)誤；

D；釀制時(shí)；容器應(yīng)放在陰涼處保存，因?yàn)榻湍妇淖钸m溫度在18℃-25℃，不要隨意打開蓋子以免雜菌污染，D正確。

故選D。3、A【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

1；過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。

2；原理：植物細(xì)胞的全能性。

3；條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。

4；植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖；作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；以根尖、莖尖為材料；利用組織培養(yǎng)技術(shù)可獲得脫病毒的新品種，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可獲得抗病毒的新品種，A錯(cuò)誤；

B；單倍體育種過程包括花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理兩個(gè)階段；其中的花藥離體培養(yǎng)用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，B正確；

C；利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得人參皂甙；實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，這是植物組織培養(yǎng)技術(shù)在生產(chǎn)中應(yīng)用的實(shí)例，C正確；

D；利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“蘿卜-甘藍(lán)”的過程；利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該異源多倍體的培育克服了生物遠(yuǎn)緣雜親不親和的障礙，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】4、D【分析】【分析】

哺乳動(dòng)物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：

（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場(chǎng)所唯一（MⅠ和MⅡ的場(chǎng)所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場(chǎng)所不唯一。（MⅠ場(chǎng)所在卵巢，MⅡ場(chǎng)所在輸卵管中）。

（2）精子和卵子發(fā)生的時(shí)間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動(dòng)物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的；MⅡ是在受精過程中完成的。

（3）精子的形成過程需要變形；卵細(xì)胞的形成過程不需要變形。

【詳解】

A；卵細(xì)胞膜反應(yīng)是防止多精入卵的第二道屏障；A錯(cuò)誤；

B；排卵就是指卵子從卵泡中排出的過程；MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，故排卵排出的不是成熟的卵細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；雄性動(dòng)物排出的精子需要經(jīng)過獲能培養(yǎng)后才能與卵子結(jié)合完成受精；C錯(cuò)誤；

D；卵子受精的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體；但受精完成的標(biāo)志是雌雄原核融合成為合子，D正確。

故選D。5、D【分析】【分析】

細(xì)菌計(jì)數(shù)板和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)原理相同。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚；常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞；霉菌抱子等的計(jì)數(shù)。用細(xì)菌計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。

【詳解】

A；接種后的培養(yǎng)皿要倒置；以防皿蓋上的水珠滴落對(duì)培養(yǎng)基造成培養(yǎng)基，A正確；

B；平板劃線分離法是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞；B正確；

C；一般來說；在相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征，C正確；

D；血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚；常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞、霉菌抱子等的計(jì)數(shù)。用細(xì)菌計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)6、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中懸液中的細(xì)胞會(huì)很快貼附在瓶壁上。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培養(yǎng)不僅產(chǎn)量高；并可以減少成本和降低環(huán)境污染。

【詳解】

A；胰蛋白酶處理動(dòng)物組織；可以使組織分散成單個(gè)細(xì)胞，利于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，A正確。

B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%CO2；B錯(cuò)誤。

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中懸液中的細(xì)胞會(huì)很快貼附在瓶壁上。所以細(xì)胞貼附瓶壁的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑；無毒，易于貼附，如果想得到大量的產(chǎn)物，可以增大細(xì)胞吸附面積，有利于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，C正確。

D；人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)；同時(shí)也可減少對(duì)土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會(huì)減少，D正確。

故選ACD。7、A:C【分析】【分析】

分析圖解，可以看出綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬涉及了多項(xiàng)生物工程技術(shù)。圖中B表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；然后將目的基因?qū)胴i胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞的細(xì)胞核與豬的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞。重組細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成轉(zhuǎn)基因克隆豬。由此可見，該過程中利用基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；①是將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；直接采用顯微注射法，無需對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，②過程通常是將細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中，然后利用電融合法使D構(gòu)建成功，A錯(cuò)誤；

B；C是處于MⅡ期的卵母細(xì)胞；這個(gè)時(shí)期的“核”實(shí)際上是紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；

C；受體對(duì)移入的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此無需給F注射免疫抑制劑，C錯(cuò)誤；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要經(jīng)歷囊胚、原腸胚階段的發(fā)育才能成為豬的幼體，D正確。

故選AC。8、A:C:D【分析】【分析】

題圖分析：該圖為某個(gè)基因的部分片段；①不但包括腺嘌呤．還包括側(cè)鏈上的磷酸的脫氧核糖，為腺嘌呤脫氧核苷酸；②是磷酸和脫氧核糖之間的磷酸二酯鍵；③是堿基之間的氫鍵；④是含氮堿基和脫氧核糖之間的化學(xué)鍵。

【詳解】

A；圖示為DNA結(jié)構(gòu)模式圖；圖中①所圈定的部位是腺嘌呤脫氧核苷酸，A錯(cuò)誤；

B；DNA連接酶能使兩個(gè)脫氧核苷酸之間的化學(xué)鍵②磷酸二酯鍵形成；B正確；

C；刪去；圖中沒有⑤，限制酶作用于磷酸二酯鍵。

D；解旋酶作用于堿基對(duì)之間的氫鍵③處；使氫鍵斷開，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】9、C:D【分析】【分析】

人工種子是以植物組織培養(yǎng)的胚狀體；不定芽、頂芽和腋芽為原料,用人工薄膜包裝而成的種子。

【詳解】

A；由圖可知；只有雜種細(xì)胞能在含放線菌素D的MS培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)得到雜種植物，A正確；

B；同一株植物的不同細(xì)胞的基因型可能不同；比如：配子的基因型與體細(xì)胞的基因型不同，離體培養(yǎng)獲得的再生苗基因型可能不相同，B正確；

C；②是原生質(zhì)體的融合過程；原生質(zhì)體放入無菌水中可能會(huì)吸水漲破，C錯(cuò)誤；

D；通過③得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子；D錯(cuò)誤。

故選CD。10、B:C【分析】【分析】

制作果醋的菌種為原核生物中的醋酸菌。醋酸菌是一種好氧菌。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)；醋酸菌將果汁中的糖分分解成醋酸；當(dāng)氧氣充足、糖源缺乏時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；家庭制作果酒、果醋和酸奶過程中有多種微生物參與發(fā)酵過程；因此均不是純種發(fā)酵，A錯(cuò)誤；

B；果醋制作的溫度一般控制在30～35℃；果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18～25℃，B正確；

C；泡菜腌制時(shí)需要乳酸菌發(fā)酵；乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸，因此壇子加水密封的目的是營(yíng)造缺氧環(huán)境，利于乳酸菌發(fā)酵，C正確；

D；當(dāng)氧氣充足、糖源缺乏時(shí)；醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?，D錯(cuò)誤。

故選BC。

【點(diǎn)睛】

本題考查考生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決問題的能力。11、A:B:D【分析】【分析】

由題圖信息分析可知；通過過程①獲得菌懸液，此過程中的淤泥不需要滅菌操作，過程②可以使分解S的細(xì)菌大量繁殖（選擇培養(yǎng)），過程③通過稀釋涂布獲得分解S物質(zhì)的單菌落，過程④再次對(duì)各種單菌落進(jìn)行篩選，經(jīng)過過程⑤多次篩選后獲得高效降解S的菌體。

【詳解】

A；甲和乙的培養(yǎng)基均需采用高壓蒸汽滅菌；乙與甲不同的是Y，乙的培養(yǎng)基上有菌落生長(zhǎng)，說明是固體培養(yǎng)基，因此Y是凝固劑瓊脂，A正確；

B、利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，要保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)為200個(gè)，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，在每個(gè)平板上涂布100μL（0.1ml）稀釋后的菌液，則有200×a÷0.1=2×107，則稀釋倍數(shù)a=104；B正確；

C；③過程采用的是稀釋涂布平板法；其接種工具為涂布器，涂布器需采用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌，C錯(cuò)誤；

D；⑤過程中若S的濃度超過某一濃度時(shí)；會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞由于滲透作用失水過多，會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)，使得菌株對(duì)S的降解量可能會(huì)下降，D正確。

故選ABD。12、B:D【分析】【分析】

分析題圖：構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)；不能選用限制酶BamHⅠ，否則會(huì)導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞，因此應(yīng)該選擇Bc1I和HindⅢ這兩種限制酶，根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c。

【詳解】

A；PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合；根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c，A正確；

B；根據(jù)圖甲可知；BamHⅠ會(huì)導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞，同時(shí)為防止目的基因自身環(huán)化，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割，B錯(cuò)誤；

C；圖乙中一個(gè)DNA分子在PCR儀中經(jīng)過四輪復(fù)制可得到16個(gè)DNA片段；其中所需目的基因的分子數(shù)為8個(gè)，C正確；

D；由于選擇BclI和HindⅢ這兩種限制酶；破壞了氨芐青霉素抗性基因，但沒有破壞四環(huán)素抗性基因，因此應(yīng)該先用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出含有基因表達(dá)載體和普通質(zhì)粒的大腸桿菌，再用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基加氨芐青霉素含普通質(zhì)粒的大腸桿菌能生存，而含重組質(zhì)粒的不能生存，從而篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

故選BD。13、A:B:D【分析】【分析】

神經(jīng)遞質(zhì)是指由突觸前神經(jīng)元合成并在末梢處釋放；經(jīng)突觸間隙擴(kuò)散，特異性地作用于突觸后神經(jīng)元或效應(yīng)器細(xì)胞上的受體，引致信號(hào)從突觸前遞質(zhì)到突觸后的一些化學(xué)物質(zhì)。

【詳解】

A；神經(jīng)遞質(zhì)是一類充當(dāng)信息分子的特殊物質(zhì)；能引發(fā)突觸后膜興奮（傳遞興奮，如乙酰膽堿）或抑制，A正確；

B；神經(jīng)遞質(zhì)需要與突觸后膜的特異性受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用；DA與DA受體結(jié)合后會(huì)引起后者空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而使DA發(fā)揮作用，B正確；

C；由題意知；多巴胺（DA）是神經(jīng)系統(tǒng)中關(guān)鍵的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，而基因診斷中的基因探針本質(zhì)是一段DNA序列，C錯(cuò)誤；

D；由題“為了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)體內(nèi)多巴胺濃度的動(dòng)態(tài)變化情況；我國(guó)科研人員開發(fā)出了一種新型DA熒光探針”知，DA探針熒光強(qiáng)度的變化能夠反映出DA濃度的變化，D正確。

故選ABD。14、B:D【分析】【分析】

胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：①動(dòng)物發(fā)情排卵后；同種動(dòng)物的供；受體生殖器官的生理變化是相同的，這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；人工授精技術(shù)是輔助生殖技術(shù)；在臨床上利用工具把精液放置進(jìn)入子宮內(nèi)，合成受精卵，用精子、卵子形成胚胎需要借助的是體外受精技術(shù)，不是人工授精技術(shù)，A錯(cuò)誤；

B；若實(shí)施胚胎移植；需要受體母親處于受孕狀態(tài)，即處于合適的生理狀態(tài)，B正確；

C；子宮對(duì)外來胚胎一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此不需要受體母親與胚胎的主要HLA相似，C錯(cuò)誤；

D；“胚胎冷藏”技術(shù)所引起的這些爭(zhēng)論；實(shí)質(zhì)是冷凍胚胎的道德與法律地位的爭(zhēng)論，即帶來的倫理問題，D正確。

故選BD。三、填空題(共6題，共12分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30016、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】離心、振動(dòng)、電刺激聚乙二醇18、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過的與克隆技術(shù)有關(guān)的問題有：

①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國(guó)家保護(hù)動(dòng)物以及植物；我們可運(yùn)用克隆，復(fù)制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農(nóng)業(yè)克隆：應(yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域；通過轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；

③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問題；比如胚胎干細(xì)胞；

④畜牧業(yè)克隆：應(yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限?！窘馕觥坑?，比如：①瀕臨滅絕動(dòng)物的克??；②農(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，通過轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問題，比如胚胎干細(xì)胞；④畜牧業(yè)克?。簯?yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】個(gè)體生物學(xué)水平抗蟲性狀。20、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會(huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共18分)21、A【分析】【詳解】

雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。22、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級(jí)結(jié)構(gòu)，而這種高級(jí)結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜，并且蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)具有多樣性，這也在一定程度上增加了蛋白質(zhì)工程的難度，故說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共12分)23、略

【分析】【分析】

自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要分離尿素細(xì)菌應(yīng)該使用只含有尿素為唯一氮源培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基其他細(xì)菌不能生存，存活下來的細(xì)菌則是可以分解尿素。

【詳解】

（1）自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要獲得分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)到含尿素較多的土壤中去取樣，圖2中培養(yǎng)基為微生物提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素；

（2）甲為液體培養(yǎng)基；乙為固體培養(yǎng)基，唯一的區(qū)別在于甲培養(yǎng)基內(nèi)無瓊脂；

（3）為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；一般應(yīng)選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，在30-300范圍內(nèi)的菌落數(shù)說明稀釋比較成功；

（4）酚紅遇堿變紅；合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)；

（5）該小組采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土壤溶液中活菌的數(shù)目時(shí)；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低，是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，只能統(tǒng)計(jì)一個(gè)菌落，細(xì)菌還可以使用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

【點(diǎn)睛】

熟記并理解微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與計(jì)數(shù)等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，在此基礎(chǔ)上從題意中提取信息并進(jìn)行作答?！窘馕觥亢蛩剌^多的土壤中葡萄糖尿素甲中培養(yǎng)基無瓊脂30~300的平板（則說明稀釋操作比較成功）合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)低顯微鏡直接計(jì)數(shù)24、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)；能驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄；如將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，則會(huì)破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因不被破壞，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質(zhì)粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上，因此將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場(chǎng)所，線粒體是細(xì)胞有氧呼吸的主要場(chǎng)所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細(xì)胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對(duì)沒有分化的薄壁細(xì)胞團(tuán)；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染?！窘馕觥?1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細(xì)胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染25、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟包括目的基因的獲取；基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定?；蚬こ讨辽傩枰N工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。

【詳解】

（1）①由圖1可知，欲使His短肽連在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，即獲得“3’—His短肽—CRY基因—5’”的基因表達(dá)載體；由圖可知CRY基因的3’端對(duì)應(yīng)的為F引物，即要將His短肽加在CRY的氨基端，應(yīng)在CRY基因模板鏈的3’端上加His短肽編碼序列，對(duì)應(yīng)的是F引物；而且加上的His序列不與CRY轉(zhuǎn)錄模板配對(duì)，所以只能加在F引物5’端，才能保證引物與模板配對(duì)后可以正常延伸。

②為使融合基因能與載體相連接；酶切位點(diǎn)序列應(yīng)該位于F引物的3’端，His短肽編碼序列的5’端。

（2）①為確定His-CRY和GST-GID這兩個(gè)融合基因在擬南芥細(xì)胞中已正常表達(dá)；應(yīng)對(duì)細(xì)胞裂解液蛋白進(jìn)行抗原-抗體雜交，并且為了確定磁珠上的His抗體可以結(jié)合His短肽，對(duì)磁珠蛋白進(jìn)行His抗體檢測(cè)。

②由題意可知，藍(lán)光可以激活藍(lán)光受體CRY，抑制赤霉素的作用，分析圖2，對(duì)細(xì)胞裂解液蛋白進(jìn)行抗原-抗體雜交，無論黑暗或藍(lán)光條件下，均具有條帶，但含有His抗體的磁珠蛋白組，黑暗條件下沒有檢測(cè)到GST條帶，但藍(lán)光組出現(xiàn)了GST條帶，說明藍(lán)光激活CRY后，CRY與赤霉素受體GID結(jié)合，使赤霉素?zé)o法發(fā)揮作用，從而抑制赤霉素的作用?！窘馕觥?1)F引物5’要將His短肽加在CRY的氨基端；則應(yīng)在CRY基因模板鏈的3’端上加His短肽編碼序列，對(duì)應(yīng)的是F引物；而且加上的His序列不與CRY轉(zhuǎn)錄模板配對(duì)，所以只能加在F引物5’端，才能保證引物與模板配對(duì)后可以正常延伸5’

(2)確定His-CRY和GST-GID這兩個(gè)融合基因在擬南芥細(xì)胞中已正常表達(dá)確定磁珠上的His抗體可以結(jié)合His短肽光激活CRY后，CRY與赤霉素受體GID結(jié)合，使赤霉素?zé)o法發(fā)揮作用，從而抑制赤霉素的作用26、略

【分析】【分析】

樹突狀細(xì)胞為抗原呈遞細(xì)胞；可識(shí)別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細(xì)菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細(xì)胞。所以，ClyA基因的作用為表達(dá)出細(xì)菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進(jìn)而融合基因可以被免疫細(xì)胞識(shí)別。Fc表達(dá)產(chǎn)物能夠與樹突狀細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，進(jìn)而提高樹突狀細(xì)胞識(shí)別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據(jù)表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進(jìn)而激活融合基因的表達(dá)；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達(dá)。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA