2025年蘇人新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年蘇人新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷675考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.我國(guó)已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B.國(guó)際上大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C.目前對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性的爭(zhēng)論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上D.開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提2、在利用葡萄自然發(fā)酵產(chǎn)生果酒的過(guò)程中，未經(jīng)殺菌，但其他雜菌不能生長(zhǎng)的原因是（）A.經(jīng)沖洗后的葡萄上只有野生型酵母菌無(wú)其他雜菌B.其他雜菌不能利用葡萄汁中的糖作碳源C.在缺氧和呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌能生存，其他雜菌不適應(yīng)環(huán)境而被抑制D.酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生大量酒精，殺死了其他雜菌3、關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的表達(dá)哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的（）A.向離心沉淀的血細(xì)胞中加水是為了讓血細(xì)胞破裂，提取核物質(zhì)B.氯化鈉溶液的物質(zhì)的量濃度為2mol/L時(shí)，DNA溶解度最大C.向溶解的DNA燒杯中加蒸餾水是漂洗DNAD.離心后除去血液中的上清液是為了除去血漿4、下列關(guān)于DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定步驟的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）A.PCR過(guò)程中，需要加入兩種引物B.所有組分加入微量離心管后，需要放入離心機(jī)離心約10sC.將電泳樣液加入電泳槽中，電泳緩沖液沒(méi)過(guò)凝膠1mm為宜D.電泳出現(xiàn)位置不等的幾條條帶，說(shuō)明鑒定的PCR產(chǎn)物比較純凈5、利用單克隆抗體可以制備大量靈敏度高的特異性抗體。下列敘述正確的是（）A.向動(dòng)物體內(nèi)注射特定抗原不經(jīng)過(guò)篩選即可獲得特異性抗體B.雜交瘤細(xì)胞具有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的所有性狀C.利用選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞可直接用于大量生產(chǎn)單克隆抗體D.克隆化培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中必須保證小孔內(nèi)有且僅有一個(gè)細(xì)胞6、研究人員欲從土壤中篩選纖維素分解菌以用于農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物的高效降解。下列說(shuō)法正確的是（）A.在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入纖維素以制備選擇培養(yǎng)基B.取回的土壤樣品要進(jìn)行滅菌后再用無(wú)菌水溶解后進(jìn)行接種C.為驗(yàn)證培養(yǎng)基的滅菌效果，應(yīng)使用不接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照D.對(duì)篩選出的纖維素分解菌可進(jìn)行玉米秸稈降解實(shí)驗(yàn)以測(cè)定纖維素酶活性7、土壤中重金屬鉻（Cr6+）污染對(duì)植物的影響較大，并可通過(guò)食物鏈富集進(jìn)入人和動(dòng)物體內(nèi)，危害人畜健康。科研人員期望通過(guò)實(shí)驗(yàn)篩選出對(duì)重金屬Cr6+污染具有耐受性和修復(fù)能力的細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是（）

A.處理培養(yǎng)基甲和培養(yǎng)基乙需要添加重鉻酸鈉等使Cr6+達(dá)到一定濃度B.培養(yǎng)I能篩選耐受Cr6+的菌株，培養(yǎng)Ⅱ能篩選修復(fù)Cr6+污染能力強(qiáng)的菌株C.固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基在成分上的主要差異是前者添加了瓊脂D.采樣土壤、接種工具、培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等工具與材料都需要進(jìn)行濕熱滅菌8、檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，應(yīng)通過(guò)何種分子雜交方法實(shí)現(xiàn)？A.DNA—DNA雜交B.DNA—RNA雜交C.RNA—蛋白質(zhì)雜交D.蛋白質(zhì)—蛋白質(zhì)雜交9、天然玫瑰沒(méi)有生成藍(lán)色翠雀花素所需的“黃酮類化合物3、5—?dú)溲趸浮钡幕?，因此藍(lán)玫瑰被認(rèn)為是不可能培育成功的.但日本科研人員將藍(lán)三葉草中的合成藍(lán)色翠雀花素的相關(guān)基因植入天然玫瑰而成功培育出了藍(lán)玫瑰.下列有關(guān)敘述正確的是（）A.將該基因植入天然玫瑰體細(xì)胞后成功培育出藍(lán)玫瑰，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性B.該基因在玫瑰細(xì)胞中表達(dá)的產(chǎn)物是藍(lán)色翠雀花素C.藍(lán)色翠雀花素分布于藍(lán)玫瑰花瓣細(xì)胞的液泡和葉綠體中D.藍(lán)玫瑰的培育成功意味著人類創(chuàng)造了一個(gè)新的物種評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)10、大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來(lái)做基因工程中的載體，這與它的哪項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)有關(guān)()A.具有黏性末端B.分子呈環(huán)狀，便于限制酶切割C.對(duì)宿主細(xì)胞的生存沒(méi)有決定性作用D.分子小，能自主復(fù)制，有標(biāo)記基因11、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問(wèn)題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病，不會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響C.我國(guó)禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細(xì)胞的研究D.世界各國(guó)都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲(chǔ)存和發(fā)展生物武器12、下列關(guān)于植物基因工程應(yīng)用的說(shuō)法，正確的是（）A.將某種含必需氨基酸多的蛋白質(zhì)導(dǎo)入植物體中以提高該植物體內(nèi)氨基酸的含量B.植物基因工程可用來(lái)培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物C.利用基因工程可以改造植物細(xì)胞的基因，使其能夠生產(chǎn)人類所需要的藥物D.通過(guò)植物基因工程培育的抗蟲植物必然可以抗病毒13、甲圖為牛胚胎移植示意圖，乙圖為胚胎發(fā)育某時(shí)期示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.甲圖中沖卵的目的是獲取受精卵B.對(duì)供體母牛和受體母牛注射性激素，進(jìn)行同期發(fā)情處理C.性別鑒定時(shí)需將圖乙②處細(xì)胞做染色體分析D.受精卵形成乙的過(guò)程中進(jìn)行卵裂，每個(gè)細(xì)胞的體積變小14、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過(guò)程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時(shí)含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項(xiàng)正確的是（）

A.過(guò)程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種15、下列有關(guān)小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲得能量B.分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)，發(fā)育成的個(gè)體沒(méi)有形態(tài)學(xué)差異C.胚胎干細(xì)胞具有自我更新能力和分化潛能，可以分化形成各種組織D.囊胚期細(xì)胞開(kāi)始分化，其增殖過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生基因突變和染色體變異16、CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯是一種對(duì)靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)；其原理是由一個(gè)向?qū)NA(sgRNA)分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。受此機(jī)制啟發(fā)，科學(xué)家們通過(guò)設(shè)計(jì)sgRNA中堿基的識(shí)別序列，即可人為選擇DNA上的任一目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行切割（如圖所示）。CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成脫靶。下列相關(guān)錯(cuò)誤的是（）

A.Cas9蛋白通過(guò)破壞目標(biāo)DNA的氫鍵實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA的切割，與解旋酶的作用類似B.若脫靶率與sgRNA序列的長(zhǎng)度有關(guān)，則sgRNA的序列越短脫靶率越高C.利用此技術(shù)對(duì)目標(biāo)基因部分DNA片段進(jìn)行切除可能導(dǎo)致染色體變異D.sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與目標(biāo)基因的雙鏈區(qū)域不同17、新冠病毒通過(guò)刺突蛋白（S蛋白）的活性域（RBD）與人體細(xì)胞表面的ACE2受體相互作用感染細(xì)胞。科學(xué)家設(shè)計(jì)了一種自然界中不存在的蛋白質(zhì)LCB1，可與S蛋白的RBD緊密結(jié)合，以干擾新冠病毒的感染。下列說(shuō)法合理的是（）A.LCB1可能與S蛋白的抗體在結(jié)構(gòu)上類似B.S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)可為設(shè)計(jì)LCB1提供信息C.設(shè)計(jì)LCB1時(shí)，需避免在結(jié)構(gòu)上與ACE2類似D.生產(chǎn)LCB1涉及到基因工程的某些操作技術(shù)評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)18、在課題1中，我們學(xué)習(xí)了稀釋涂布平板法。這一方法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中_________________的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，____________________。19、平板劃線法是通過(guò)____________在_______________培養(yǎng)基表面______________的操作，將__________的菌種______________分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由____________繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的_______________，這就是_______________________。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的______________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到_____________培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成____________，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________________。20、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有______能力的_____。21、植物基因工程：______。22、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起的絲狀物的顏色是____________。獲取的絲狀物后加入到質(zhì)量濃度為_(kāi)_____________mol/L濃度的NaCL溶液的試管中，使絲狀物重新溶解。23、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ)，通過(guò)______，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_____，或制造一種______，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)）

24、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。25、植物誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括______等。化學(xué)法一般是用_____作為誘導(dǎo)劑。26、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過(guò)蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請(qǐng)教或通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____評(píng)卷人得分四、綜合題(共4題，共24分)27、CEA是一種糖蛋白；在腸癌；肺癌等患者的血清中其含量常常異常升高，也常見(jiàn)于正常人體胎兒早期的消化管等器官組織中。常用CEA抗體檢測(cè)血清中的CEA含量，進(jìn)行相關(guān)疾病的臨床診斷。下圖是CEA單克隆抗體的制備流程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題∶

（1）過(guò)程①表示從cDNA文庫(kù)中擴(kuò)增獲取大量目的基因的過(guò)程，該過(guò)程中利用添加入反應(yīng)體系中的____________將A特異性擴(kuò)增，獲得的A與人體細(xì)胞內(nèi)的CEA基因在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是____________。制備重組質(zhì)粒過(guò)程時(shí)，為確保目的基因與質(zhì)粒準(zhǔn)確連接，應(yīng)采用圖示中的____________酶的切割位點(diǎn)。過(guò)程②常用____________法。

（2）過(guò)程③在融合處理后需要利用____________方法獲取能產(chǎn)生所需的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。在過(guò)程③中發(fā)現(xiàn)小鼠被抗原蛋白免疫后，從脾臟中分離出B淋巴細(xì)胞卻包含有多種能產(chǎn)生不同抗體的細(xì)胞，原因是____________。

（3）在將該雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)的過(guò)程④前，需要先將其進(jìn)行____________過(guò)程，應(yīng)用獲得的單克隆抗體搭載抗癌藥物制成“生物導(dǎo)彈”治療癌癥，具有的優(yōu)點(diǎn)有____________。28、下圖為大腸桿菌及質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)模式圖；據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）a代表的物質(zhì)和質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)相同，都是________（寫中文名字）。自然情況下大腸桿菌能發(fā)生的可遺傳變異有________________________。

（2）下列常在基因工程中用作載體的是（______）

A．蘇云金芽孢桿菌抗蟲基因B．土壤農(nóng)桿菌環(huán)狀RNA分子。

C．大腸桿菌的質(zhì)粒D．動(dòng)物細(xì)胞的染色體。

（3）氨芐青霉素抗性基因在質(zhì)粒DNA上稱為_(kāi)_______，其作用是________________重組質(zhì)粒上終止子的作用是________________。

（4）若質(zhì)粒DNA分子的切割末端為則與之連接的目的基因切割末端應(yīng)為_(kāi)_______________；切割形成以上片段的限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列是________________?？墒褂胈_______把質(zhì)粒和目的基因連接在一起。

（5）某種內(nèi)切酶識(shí)別的序列及切點(diǎn)為GGG↓CCC，那么含該序列的DNA片段被切割后形成的結(jié)果是_____________。29、我國(guó)研究人員在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA；經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長(zhǎng)類動(dòng)物食蟹猴（流程如圖所示，①-⑥表示過(guò)程），該動(dòng)物可作為研究癌癥等人類疾病的動(dòng)物模型。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題：

（1）獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，原因是：__________。

（2）進(jìn)行過(guò)程①時(shí)，培養(yǎng)成纖維細(xì)胞所需的條件有：營(yíng)養(yǎng)、氣體環(huán)境以及__________、__________。

（3）過(guò)程③中利用__________法，將成纖維細(xì)胞注入去核的__________期的卵母細(xì)胞細(xì)胞膜與透明帶之間；經(jīng)過(guò)過(guò)程⑤移植到其他雌性動(dòng)物體內(nèi)。

（4）向融合細(xì)胞注射Kd4d的mRNA，可提高胚胎的形成率，其作用主要是通過(guò)基因表達(dá)的__________過(guò)程實(shí)現(xiàn)的。

（5）胚胎移植的方法包括__________和__________。受體子宮對(duì)移入的胚胎基本不發(fā)生__________反應(yīng)，為胚胎在受體內(nèi)存活提供了可能。30、實(shí)驗(yàn)小組將啟動(dòng)子rd29A和擬南芥植株的抗寒累因DREBI相連后導(dǎo)入大豆，獲得了抗寒轉(zhuǎn)基因植株，下圖1表示構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)所用的載體，已知Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ為四種不同的限制酶，其各自識(shí)別的DNA序列如下表所示，回答下列問(wèn)題：。限制酶ⅠⅡⅢⅣ識(shí)別序列及。

切割位點(diǎn)

(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒過(guò)程中最好同時(shí)使用______兩種限制酶切割質(zhì)粒，原因是______________，培養(yǎng)基中需要加入______（填“四環(huán)素”或“氨芐青霉素”），其作用是________________。

(2)實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)一步研究了不同的溫度誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)基因植株中抗寒基因DREBI的表達(dá)情況；實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示：

試根據(jù)檢測(cè)結(jié)果闡述目的植株導(dǎo)入DREB7基因的優(yōu)點(diǎn)在于______________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、B【分析】【分析】

我國(guó)針對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)；頒布和實(shí)施了一系列法規(guī)和政策，既維護(hù)了消費(fèi)者對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的知情權(quán)和選擇權(quán)，又最大程度地保證了轉(zhuǎn)基因技術(shù)和已經(jīng)上市的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性。

【詳解】

AB；我國(guó)農(nóng)業(yè)部頒布了《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)識(shí)管理辦法》；要求對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品及其加工品加貼標(biāo)注，以方便消費(fèi)者自主選擇；國(guó)際上并非大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明了可能的危害，A正確，B錯(cuò)誤。

C；目前對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性的爭(zhēng)論主要集中在轉(zhuǎn)基因食物的安全性和轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品對(duì)環(huán)境安全的影響上；C正確。

D；風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理等是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提；D正確。

故選B。2、C【分析】【分析】

酵母菌發(fā)酵釀酒的原理：在有氧條件下酵母菌大量繁殖；在無(wú)氧條件下酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精。缺氧和呈酸性的發(fā)酵液抑制雜菌的生長(zhǎng)。

【詳解】

A；沖洗的目的是洗去浮塵；在沖洗過(guò)程中，雜菌和酵母菌被洗掉的機(jī)會(huì)是均等的，A錯(cuò)誤；

B；異養(yǎng)微生物都能利用糖；B錯(cuò)誤；

C；在缺氧和呈酸性的發(fā)酵液中；酵母菌能生存，其他雜菌不能生長(zhǎng)的根本原因是其他微生物不適應(yīng)缺氧和酸性環(huán)境，C正確；

D、酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生大量酒精和CO2；缺氧和呈酸性的發(fā)酵液殺死了其他雜菌，D錯(cuò)誤。

故選C。3、C【分析】【分析】

1；DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉濃度的變化而變化的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。

2；DNA不溶于酒精溶液；但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。

3；DNA遇二苯胺（沸水?。?huì)染成藍(lán)色；因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；離心沉淀的血細(xì)胞中加水是為了使血細(xì)胞破裂釋放DNA；從而提取DNA，A正確；

B；氯化鈉溶液的物質(zhì)的量濃度為2mol/L時(shí)；DNA溶解最大，B正確；

C；向溶解DNA的燒杯中加蒸餾水是為了降低氯化鈉溶液的濃度；從而使DNA析出，C錯(cuò)誤；

D；離心后除去血液中的上清液是為了除去血漿；獲得血細(xì)胞，D正確。

故選C。4、D【分析】【分析】

1、引物是人工合成的兩段寡核苷酸序列，一個(gè)引物與目的基因一端的一條DNA模板鏈互補(bǔ)，另一個(gè)引物與目的基因另一端的另一條DNA模板鏈互補(bǔ)；

2；在PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)中；已知一段目的基因的核苷酸序列，根據(jù)這一序列合成引物，利用PCR擴(kuò)增技術(shù)，目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸，如此重復(fù)循環(huán)，延伸后得到的產(chǎn)物同樣可以和引物結(jié)合。

【詳解】

A；PCR需要兩種引物；其中一個(gè)引物與目的基因一端的一條DNA模板鏈互補(bǔ)，另一個(gè)引物與目的基因另一端的另一條DNA模板鏈互補(bǔ)，因此引物是PCR過(guò)程中與模板DNA部分序列互補(bǔ)的核苷酸序列，A正確；

B；反應(yīng)液混合均勻；將微量離心管放在離心機(jī)上，離心約10s，使反應(yīng)液集中在離心管底部，再放入PCR儀中進(jìn)行反應(yīng)，B正確；

C；將電泳樣液加入電泳槽中；電泳緩沖液沒(méi)過(guò)凝膠1mm為宜，電泳緩沖液太多則電流加大，C正確；

D；電泳出現(xiàn)位置不等的幾條條帶；說(shuō)明存在長(zhǎng)短不一的DNA片段，鑒定的PCR產(chǎn)物不純凈，D錯(cuò)誤。

故選D。5、D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；向動(dòng)物體內(nèi)注射特定抗原還需要經(jīng)過(guò)篩選才能獲得特異性抗體；A錯(cuò)誤；

B；雖然雜交瘤細(xì)胞由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而來(lái)；但雜交瘤細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞是三種不同的細(xì)胞，由于基因的選擇性表達(dá)，雜交瘤細(xì)胞不可能具有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的所有性狀，B錯(cuò)誤；

C；利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞后；還需要克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選后才能用于大量生產(chǎn)單克隆抗體，C錯(cuò)誤；

D；克隆化培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中必須保證小孔內(nèi)有且僅有一個(gè)細(xì)胞才能獲得單克隆抗體；D正確。

故選D。6、D【分析】【分析】

培養(yǎng)基一般含有水；碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽。培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需添加維生素；培養(yǎng)霉菌時(shí)需將pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性。選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。

【詳解】

A；在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入纖維素；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是完全培養(yǎng)基，不是選擇培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；

B；取回的土壤樣品如進(jìn)行滅菌將殺死所有微生物；B錯(cuò)誤；

C；為驗(yàn)證培養(yǎng)基的滅菌效果；應(yīng)使用不接種的以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基作對(duì)照，C錯(cuò)誤；

D；對(duì)篩選出的纖維素分解菌可進(jìn)行玉米秸稈降解實(shí)驗(yàn)；測(cè)定秸稈的分解速率，以測(cè)定纖維素酶活性，D正確。

故選D。7、D【分析】【分析】

培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。微生物培養(yǎng)基需要為微生物繁殖提供碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足微生物對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，pH和O2的需求。篩選目的微生物最好應(yīng)該到目的微生物含量豐富的地方取樣；如果沒(méi)有這樣的環(huán)境，應(yīng)該人為創(chuàng)造適宜其生長(zhǎng)的環(huán)境。

【詳解】

A、進(jìn)行處理A之前為無(wú)重金屬污染的土壤，需要向土壤中添加重鉻酸鈉至Cr6+達(dá)到一定離子濃度，來(lái)創(chuàng)造有利于該微生物生長(zhǎng)的環(huán)境，培養(yǎng)基甲、乙要用于篩選或研究對(duì)重金屬鉻具有耐受性和修復(fù)能力的細(xì)菌，也需要添加重鉻酸鈉至Cr6+達(dá)到一定離子濃度；A正確；

B、培養(yǎng)Ⅱ用于進(jìn)一步篩選耐鉻菌株中對(duì)土壤中Cr6+的修復(fù)污染能力強(qiáng)的菌株；B正確；

C；固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基在成分上的主要差異是前者添加了瓊脂作為凝固劑；C正確；

D；接種工具、培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等工具和材料都需要高壓滅菌；但是采樣土壤不需要滅菌，D錯(cuò)誤。

故選D。8、B【分析】目的基因分子水平的鑒定方法有：DNA分子雜交技術(shù)；分子雜交技術(shù)和抗原—抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

A；DNA—DNA雜交是檢測(cè)目的基因的方法；A錯(cuò)誤；

B；DNA—RNA雜交是檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的分子雜交方法；B正確；

C；RNA—蛋白質(zhì)雜交方法是不存在的；C錯(cuò)誤；

D；抗原—抗體雜交技術(shù)是檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法；D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】9、A【分析】【分析】

葉綠體中含有光合色素；是進(jìn)行光合作用的場(chǎng)所，被稱為“養(yǎng)料制造工廠”和“能量轉(zhuǎn)換站”。液泡是植物細(xì)胞之中的泡狀結(jié)構(gòu)，液泡內(nèi)有細(xì)胞液，其中含有糖類；無(wú)機(jī)鹽、色素和蛋白質(zhì)等物質(zhì)，對(duì)細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境起著調(diào)節(jié)作用，保持一定滲透壓。

【詳解】

A；將該基因植入天然玫瑰體細(xì)胞后成功培育出藍(lán)玫瑰；體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，A正確；

B；分析題意可知；該基因在玫瑰細(xì)胞中表達(dá)的產(chǎn)物是黃酮類化合物3、5-氫氧化酶，B錯(cuò)誤；

C；藍(lán)色翠雀花素分布于藍(lán)玫瑰花瓣細(xì)胞的液泡中；葉綠體中不含該色素，C錯(cuò)誤；

D；藍(lán)玫瑰與天然玫瑰之間不存在生殖隔離；屬于同一個(gè)物種，故藍(lán)玫瑰的培育成功不意味著人類創(chuàng)造了一個(gè)新的物種，D錯(cuò)誤。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)10、C:D【分析】【分析】

1；作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)；②要有標(biāo)記基因（如抗性基因）；以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)；

2；大腸桿菌的質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

【詳解】

A；質(zhì)粒是一種獨(dú)立于細(xì)菌擬核外的環(huán)狀DNA分子；沒(méi)有切割時(shí)不含具有黏性末端，A錯(cuò)誤；

B；基因工程的運(yùn)載體必須要有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)；便于與目的基因連接形成重組DNA分子，B錯(cuò)誤；

C；質(zhì)粒對(duì)宿主細(xì)胞的生存沒(méi)有決定性作用；C正確；

D；作為載體的質(zhì)粒分子?。荒茏灾鲝?fù)制，且常含有抗生素抗性基因，可以作為標(biāo)記基因，對(duì)重組后重組子進(jìn)行篩選，D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】11、B:C【分析】【分析】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病；但有可能被濫用，如用于設(shè)計(jì)嬰兒性別等，可能會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響﹔進(jìn)行基因檢測(cè)時(shí)，可通過(guò)基因進(jìn)行檢測(cè)，也可通過(guò)測(cè)定基因的表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)來(lái)進(jìn)行;對(duì)于基因歧視現(xiàn)象，可通過(guò)正確的科學(xué)知識(shí)傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒如專門用來(lái)設(shè)計(jì)嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會(huì)存在負(fù)面影響，B錯(cuò)誤；

C；我國(guó)禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細(xì)胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進(jìn)行，C錯(cuò)誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國(guó)都應(yīng)禁止生物武器，D正確。

故選BC。12、B:C【分析】【分析】

基因工程是指按人們的意愿；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外重組DNA分子和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，獲得人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。其基因改變的方向是認(rèn)為決定的。

【詳解】

A；科學(xué)家將必需氨基酸含量多的的蛋白質(zhì)相關(guān)基因?qū)胫参镏校换蛘吒淖冞@些氨基酸合成途徑中某種關(guān)鍵酶的活性，以提高氨基酸的含量，A錯(cuò)誤；

B；可以將某些比如抗逆性、高產(chǎn)等基因?qū)胫参矬w內(nèi)；培育出高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物，B正確；

C；利用基因工程可以改造植物細(xì)胞的基因；使其能夠生產(chǎn)人類所需要的藥物，比如紫草寧等藥品，C正確；

D；用基因工程培育的抗蟲植物只含有抗蟲特性；但不能抗病毒，D錯(cuò)誤。

故選BC。13、A:B:C【分析】【分析】

分析甲圖：甲圖為牛胚胎移植示意圖；胚胎移植的具體過(guò)程為：對(duì)供；受體的選擇和處理；配種或人工授精；對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存；胚胎進(jìn)行移植；移植后的檢查；對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。分析乙圖：①是滋養(yǎng)層；②是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；③是囊胚腔。

【詳解】

A；沖卵是指把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)；甲圖中沖卵的目的是獲取早期胚胎，A錯(cuò)誤；

B；為使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)；通常需要注射孕激素等激素使其同期發(fā)情，B錯(cuò)誤；

C；進(jìn)行性別鑒定需要取囊胚的①滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析；C錯(cuò)誤；

D；受精卵形成乙囊胚的過(guò)程中進(jìn)行卵裂；每個(gè)細(xì)胞的體積變小，細(xì)胞總體積不變或略有減少，D正確。

故選ABC。14、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開(kāi)來(lái)，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據(jù)I號(hào)培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過(guò)程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應(yīng)為無(wú)菌水，B錯(cuò)誤；

C；由Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號(hào)培養(yǎng)基上挑選的菌落進(jìn)行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍(lán)色，因此周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。15、A:B【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞（1）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)。（2）具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

2；胚胎分割的特點(diǎn)：來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A、精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能；具有受精“能力”，而不是獲得能量，A錯(cuò)誤；

B；分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)；但個(gè)體的性狀還受到環(huán)境的影響，因此發(fā)育成的個(gè)體有形態(tài)學(xué)差異，B錯(cuò)誤；

C；胚胎干細(xì)胞是從哺乳動(dòng)物的早期胚胎或原始性腺中獲得的；具有發(fā)育的全能性，具有自我更新能力和分化潛能，可以分化形成各種組織，C正確；

D；囊胚期細(xì)胞開(kāi)始分化；其增殖過(guò)程中進(jìn)行的是有絲分裂，該過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生基因突變和染色體變異，D正確。

故選AB。16、A:C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：①限制酶；能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；②DNA連接酶，連接兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；③運(yùn)載體，質(zhì)粒是最常用的運(yùn)載體，除此之外，還有λ噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒。

2；基因治療：把正常的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細(xì)胞中；使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的?；蛑委煼譃轶w外基因治療和體內(nèi)基因治療兩種類型。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息“由一個(gè)向?qū)NA（sgRNA）分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割”；再結(jié)合圖解可知能夠行使特異性識(shí)別DNA序列并切割特定位點(diǎn)功能的分子是向?qū)NA（sgRNA）分子和Cas9蛋白，其類似于基因工程中限制酶，作用的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；

B；非基因編輯對(duì)象也可能含有與sgRNA配對(duì)的堿基序列；造成sgRNA選錯(cuò)對(duì)象與之錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶，sgRNA的序列長(zhǎng)短影響成功率，序列越短，脫靶率越高，B正確；

C；染色體變異會(huì)引起基因的數(shù)目或排列順序改變；利用此技術(shù)對(duì)目標(biāo)基因部分DNA片段進(jìn)行切除屬于基因內(nèi)部堿基對(duì)的改變，不改變基因的數(shù)目和排列順序，故不屬于染色體變異，C錯(cuò)誤；

D；sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則遵循的是DNA與RNA之間的配對(duì)關(guān)系；而目標(biāo)基因的雙鏈區(qū)域遵循的是DNA之間的配對(duì)方式，故兩者不同，D正確。

故選AC。17、A:B:D【分析】【分析】

1；蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

2；蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。

3；蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來(lái)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)；又稱為第二代的基因工程。

4；基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)；設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑。

【詳解】

A；S蛋白的抗體能與S蛋白R(shí)BD特異性結(jié)合；而根據(jù)題干可知：LCB1可與S蛋白R(shí)BD緊密結(jié)合，說(shuō)明LCB1可能與S蛋白的抗體在結(jié)構(gòu)上類似，A正確；

B；由于LCB1可與S蛋白R(shí)BD緊密結(jié)合；故LCB1可依據(jù)S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)，B正確；

C；由題干信息分析可知；新冠病毒是通過(guò)其表面的S蛋白的RBD與人體細(xì)胞表面的ACE2受體相互作用；而人工合成的LCB1可識(shí)別并緊密結(jié)合S蛋白的RBD，阻止S蛋白的RBD與ACE2受體結(jié)合，由此說(shuō)明LCB1可能與ACE2受體的某些區(qū)域結(jié)構(gòu)類似，C錯(cuò)誤；

D；可用蛋白質(zhì)工程進(jìn)行LCB1的設(shè)計(jì)和生產(chǎn)；而蛋白質(zhì)工程是建立在基因工程的基礎(chǔ)之上的，因此生產(chǎn)LCB1用到了基因工程的操作技術(shù)，D正確。

故選ABD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共9題，共18分)18、略

【解析】①.活菌②.培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌19、略

【解析】①.接種環(huán)②.瓊脂固體③.連續(xù)劃線④.聚集⑤.逐步稀釋⑥.一個(gè)細(xì)胞⑦.子細(xì)胞群體⑧.菌落⑨.梯度稀釋⑩.瓊脂固體?.單個(gè)細(xì)胞?.單個(gè)的菌落20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質(zhì)粒自我復(fù)制雙鏈環(huán)狀DNA分子21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】冷酒精白色223、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）25、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】離心、振動(dòng)、電刺激聚乙二醇26、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過(guò)蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過(guò)程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥四、綜合題(共4題，共24分)27、略

【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）從cDNA文庫(kù)中擴(kuò)增獲取大量目的基因可以采用PCR技術(shù)；該技術(shù)的前提是需要加入特異性引物將其擴(kuò)增；

從cDNA文庫(kù)中獲得目的基因和人體內(nèi)CEA基因的結(jié)構(gòu)區(qū)別是從cDNA文庫(kù)中擴(kuò)增獲得的目的基因中無(wú)啟動(dòng)子；終止子、內(nèi)含子；

制備重組質(zhì)粒過(guò)程時(shí)；為確保目的基因與質(zhì)粒準(zhǔn)確連接，且在啟動(dòng)子和終止子之間插入目的基因，應(yīng)選擇用AscⅠ酶和BamHⅠ酶切割；

將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌常用Ca2+溶液處理大腸桿菌；使其成為感受態(tài)細(xì)胞。

（2）在將B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后；需要用選擇性培養(yǎng)基篩選出產(chǎn)生特定單一抗體的細(xì)胞，和專一抗體檢測(cè)才能獲取能產(chǎn)生所需的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞；由于小鼠在用該抗原免疫前曾經(jīng)接觸過(guò)其他多種抗原，所以從脾臟中分離出B淋巴細(xì)胞有多種，能夠產(chǎn)生多種抗體。

（4）在將該雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)前；需要先將其進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)有定向原位殺死癌細(xì)胞，不損傷正常細(xì)胞，減少用藥劑量。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合單克隆抗體制備和基因工程的相關(guān)知識(shí)，考查單克隆抗體制備的原理及具體過(guò)程，考查學(xué)生提取信息和分析問(wèn)題的能力，學(xué)生需要能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥浚?）特異性引物無(wú)啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子AscI和BamHI感受態(tài)細(xì)胞（Ca2+溶液處理）（2）選擇性培養(yǎng)基篩選和專一抗體檢測(cè)小鼠在用該抗原免疫前曾經(jīng)接觸過(guò)其他多種抗原（3）克隆化培養(yǎng)定向原位殺死癌細(xì)胞，不損傷正常細(xì)胞，減少用藥劑量28、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中a是大腸桿菌的擬核中的DNA；質(zhì)粒是擬核以外的小型環(huán)狀DNA，質(zhì)粒上有復(fù)制原點(diǎn)；目的基因的插入位點(diǎn)、還有標(biāo)記基因（氨芐青霉素抗性基因）。

【詳解】

（1）a代表的物質(zhì)是擬核中的DNA分子；質(zhì)粒是細(xì)胞質(zhì)中的DNA分子，二者都是環(huán)狀DNA分子，即本質(zhì)都是脫氧核糖核酸，都能夠自我復(fù)制；具有遺傳效應(yīng)、也都具有雙螺旋結(jié)構(gòu)等。大腸桿菌為原核生物，不能進(jìn)行有性生殖，也沒(méi)有染色體，所以只能發(fā)生基因突變。

（2）基因工程常用的運(yùn)載體包括：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒；即選項(xiàng)中大腸桿菌的質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體。C正確；ABD錯(cuò)誤。

（3）氨芐青霉素抗性基因在質(zhì)粒DNA上稱為標(biāo)記基因；其作用是鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)，重組質(zhì)粒上終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止下來(lái)。

（4）已知質(zhì)粒DNA分子的切割末端為根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，則與之連接的目的基因切割末端應(yīng)為切割形成以上片段的限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列是-A↓CGCG-?？墒褂肈NA連接酶