血液常規(guī)檢查

血常規(guī)檢查

BLOODROUTINE

TEST

中山醫(yī)院檢驗科

實驗診斷學（LaboratoryDiagnosis）

一、血常規(guī)項目概述

二、血細胞直接計數(shù)

三、白細胞分類計數(shù)

四、血液分析儀簡介

五、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)

六、紅細胞沉降率檢查血常規(guī)檢測項目紅細胞計數(shù)血紅蛋白紅細胞壓積紅細胞平均體積平均血紅蛋白量平均血紅蛋白濃度血小板計數(shù)白細胞計數(shù)中性粒細胞百分比淋巴細胞百分比單核細胞百分比嗜酸性粒細胞百分比嗜堿性粒細胞百分比中性粒細胞數(shù)淋巴細胞數(shù)單核細胞數(shù)嗜酸性粒細胞數(shù)嗜堿性粒細胞數(shù)紅細胞分布寬度-CV紅細胞分布寬度-SD平均血小板體積血小板分布寬度大血小板百分比血小板壓積血液有形成分

紅細胞（redbloodcell，RBC）

血液中數(shù)量最多的有形成分，其主要功能是作為呼吸載體攜帶氧氣至全身各組織，并協(xié)同維持酸堿平衡。直徑6～9μm中心淺染區(qū)不超過直徑的1/3血液有形成分白細胞（whitebloodcell，WBC）

中性粒細胞（neutrophilegranulocyte）

嗜酸性粒細胞（eosinophilegranulocyte）

嗜堿性粒細胞（basophilegranulocyte）

淋巴細胞（lymphocyte）

單核細胞（monocyte）

通過不同的方式、不同機制消滅病原體，消除過敏原、參加免疫反應、產(chǎn)生抗體等從而保證機體健康。血液有形成分血小板（platelets，PLT）血小板是從骨髓巨核細胞脫落下來的胞質(zhì)小塊，故無細胞核，但有細胞器。通過粘附功能、聚集功能、釋放反應與血管一起在止凝血過程中起重要作用血細胞直接計數(shù)原理：

用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后，滴入血細胞計數(shù)盤（改良的Neubauer計數(shù)板），然后于顯微鏡下，計數(shù)一定體積內(nèi)的細胞數(shù)，經(jīng)過換算即可求得每升血液中的細胞數(shù)。試劑紅細胞稀釋液

1.Hayem液：氯化鈉、結(jié)晶硫酸鈉、氯化高汞2.Geage氏：枸櫞酸鈉、甲醛3.生理鹽水白細胞稀釋液

冰醋酸、1%美藍操作步驟稀釋液血液

充分混勻充池靜止鏡下計數(shù)用微量吸管準確取血擦去管外余血輕輕加至稀釋液底部再輕吸上清液清洗吸管2~3次用微量吸管或玻棒將細胞懸液充入計數(shù)池，室溫下平放2~3min,待細胞下沉紅細胞：稀釋液2ml＋血液10μl低倍鏡觀察分布是否均勻高倍鏡計數(shù)白細胞：稀釋液0.38ml＋血液20μl低倍鏡計數(shù)改良的Neubauer計數(shù)板計數(shù)池支持堤正面觀側(cè)面觀支持堤支持堤計數(shù)池（0.1mm縫隙）1mm計數(shù)時需要遵循一定的方向逐格進行，以免重復或遺漏，對壓線細胞采用數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下的原則計算公式

細胞數(shù)/L=一個大方格中的細胞數(shù)×10×106×稀釋倍數(shù)

1.RBC/L=5個中方格中的紅細胞數(shù)×5×10×106×200/L

2.WBC/L=4個大方格中的白細胞數(shù)/4×10×106×20/L

注意事項采血時不能過分擠壓采血部位，針刺深度必須適當。采血應順利、準確，采血部位不得有水腫、發(fā)紺、凍瘡、炎癥等。細胞數(shù)量明顯增大時可適當加大稀釋倍數(shù)。充池時要一次完成，不能產(chǎn)生滿溢、氣泡或充池不足的現(xiàn)象。大小方格內(nèi)壓線細胞的計數(shù)遵循數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則，避免多數(shù)或漏數(shù)。注意事項紅細胞計數(shù)時，如果每個中方格之間相差超過20個以上，要重新充池計數(shù)。正常數(shù)值范圍內(nèi)，兩次紅細胞計數(shù)相差不得超過5%。白細胞計數(shù)時，一般情況下各大方格間的細胞數(shù)相差不超過

10%。如微量吸管內(nèi)壁沾有白細胞稀釋液，會使紅細胞破壞，故應先做紅細胞計數(shù)稀釋液要過濾，試管、計數(shù)板均清潔干燥，以免雜質(zhì)、微粒等被誤認為細胞。注意事項當白細胞極度增多時，將使紅細胞計數(shù)結(jié)果假性偏高，故應對紅細胞計數(shù)結(jié)果進行校正：

校正后紅細胞計數(shù)＝校正前紅細胞計數(shù)-白細胞計數(shù)外周血中有大量有核紅細胞出現(xiàn)時需校正白細胞計數(shù)：

校正后的白細胞計數(shù)＝校正前的白細胞計數(shù)數(shù)×100÷（100+分類計數(shù)100個白細胞時見到的有核紅細胞數(shù)）參考范圍紅細胞計數(shù)：成年男性：（4.0~5.5）×1012/L成年女性：（3.5~5.0）×1012/L新生兒：（6.0~7.0）×1012/L白細胞計數(shù)：成人：（4~10）×109/L新生兒：（15~20）×109/L6個月~2歲：（11~12）×109/L臨床意義一、紅細胞的增多

1.相對性增多：血漿量減少，血液濃縮

2.絕對性增多：由于缺氧而致紅細胞代償增多或造血系統(tǒng)疾病

1）生理性增多：高原居民

2）病理性增多：心肺疾病、真性紅細胞增多癥

二、紅細胞的減少

1.生理性減少：血容量增加，血液稀釋

2.病理性減少：各種原因貧血、體內(nèi)外大量出血、溶血、血液系統(tǒng)惡性腫瘤、腎功能不全臨床意義白細胞：1.生理性增多：新生兒、妊娠、月經(jīng)期、飯后、劇烈運動后、寒冷刺激、極度恐懼及疼痛等2.病理性增多：常見于急性化膿性感染、傳染性單核細胞增多癥、白血病、急性出血、組織損傷、外科手術(shù)后等3.病理性減少：常見于病毒感染、瘧疾、極度嚴重感染、再生障礙性貧血、非增生性白血病、化學藥物中毒、放化療病人等

血紅蛋白：十二烷基硫酸鈉（SLS）血紅蛋白檢測方法檢測紅細胞壓積：抗凝全血離心后，下沉的紅細胞在全血中所占容積的百分比紅細胞平均值參數(shù)MCV=每升血液中紅細胞比容×1015每升血液紅細胞數(shù)(個)MCH=每升血液中血紅蛋白濃度(g)×1012每升血液紅細胞數(shù)(個)MCHC=每升血液中血紅蛋白g數(shù)(g/L)每升血液中紅細胞比容白細胞分類白細胞粒細胞淋巴細胞（Lymphocyte）單核細胞（Monocyte）中性粒細胞（Neutrophil）嗜酸性粒細胞（Eosinophil）嗜堿性粒細胞（Basophil）桿狀核分葉核大淋巴細胞小淋巴細胞白細胞分類計數(shù)操作步驟：

1.制作血涂片

2.染色

3.顯微鏡鏡檢血涂片制作染色試劑：瑞氏-姬姆薩染液原理：染液中含甲醇、堿性染料美藍、酸性染料伊紅甲醇起固定細胞的作用在一定的PH條件下，血細胞內(nèi)的成分因等電點不同，可選擇性地吸附美蘭或伊紅而著色根據(jù)各類細胞的形態(tài)特點和顏色差異將白細胞進行分類血涂片檢查步驟肉眼：涂片血膜大小、厚薄是否適中，頭體尾是否分明，染色好壞低倍鏡：1.根據(jù)紅細胞分布及染色情況判斷涂片及染色質(zhì)量2.了解白細胞數(shù)（可大體核對WBC直接計數(shù)是否正確）高倍鏡：1.觀察片尾有無異常細胞，并注意是否由于涂片過分用力，把一些成熟粒細胞推于片尾部位，造成分類比值誤差2.選擇具有代表性的細胞鏡檢區(qū)域血涂片檢查步驟油鏡觀察：1.白細胞分類計數(shù)（100個）：選擇血涂片體尾交界處細胞分布均勻、著色良好的區(qū)域，按一定的方向順序?qū)λ姷降拿恳粋€白細胞進行分類、計數(shù)。血涂片檢查步驟油鏡觀察：2.有核紅細胞不計入分類的100個白細胞之內(nèi)，但應報告分類100個白細胞時見到的有核紅細胞數(shù)（個/100WBC）3.了解紅細胞形態(tài)4.了解血小板數(shù)量、形態(tài)及聚集性6.寄生蟲中性桿狀核粒細胞(Neutrophilicstabgranulocyte)直徑10-15微米;細胞核彎曲呈臘腸樣，兩端鈍圓，核染色質(zhì)為深紫紅色，粗糙；細胞質(zhì)中有細小、淡紫紅色的顆粒，均勻布滿胞質(zhì)。中性分葉核粒細胞(Neutrophilicsegmentedgranulocyte)細胞核分為2-5葉，以3葉為多。嗜酸性粒細胞(Eosinophil)直徑13～15微米；細胞核分為2葉，呈眼鏡樣，核染色質(zhì)為深紫紅色、粗糙；細胞質(zhì)中有圓形、橘紅色、粗大的顆粒，均勻布滿胞質(zhì)。嗜堿性粒細胞(Basophil)直徑10-12微米，圓形；細胞核結(jié)構(gòu)不清，分葉不明顯；細胞質(zhì)中有大小不均、藍黑色、分布不均的顆粒，常覆蓋在核上。淋巴細胞(Lymphocyte)直徑為6～15微米，圓形或橢圓形；核染色質(zhì)為深紫紅色、粗塊狀；細胞質(zhì)呈透明淡藍色，小淋巴細胞一般無顆粒，大淋巴細胞可有少量、粗大、不均勻、深紫紅色的嗜天青顆粒。單核細胞(Monocyte)細胞直徑14～20微米，圓形或不規(guī)則形；細胞核不規(guī)則，為腎形、馬蹄形或扭曲折疊，核染色質(zhì)淡紫紅色，細致疏松呈網(wǎng)狀；細胞質(zhì)淡灰藍色，有細小紫紅色顆粒，似灰塵樣彌散分布于胞質(zhì)中。低色素性紅細胞紅細胞染色過淺，中央淡染區(qū)擴大，提示血紅蛋白含量明顯減少。常見于缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、鐵粒幼細胞性貧血，也見于一些血紅蛋白病。紅細胞雙向性缺鐵性貧血治療過程中、或輸血后指紅細胞之間直徑相差一倍以上，常見于嚴重的增生性貧血血涂片中。巨幼細胞性貧血尤為明顯，可能與骨髓粗制濫造紅細胞有關。大紅細胞橢圓形紅細胞常見于遺傳性橢圓形紅細胞增多癥，其他各類貧血也可有不同程度增多

細胞直徑小于正常，厚度增加，中心淡染區(qū)消失，似球形，常見于遺傳性球形細胞增多癥。球形紅細胞靶形紅細胞紅細胞中心部位染色較深，外圍為蒼白區(qū)域，邊緣又深染，形如射擊之靶。常見于各種底色素性貧血，在珠蛋白生成障礙性貧血時尤易見到。口形紅細胞常見于口形紅細胞增多癥、急性乙醇中毒等

淚滴狀紅細胞細胞呈淚滴狀或手鏡狀。淚滴形紅細胞為骨髓纖維化時特點之一，也可見于珠蛋白生成障礙性貧血、溶血性貧血。嗜多色性紅細胞紅細胞呈淡灰藍或紫灰色，是一種剛脫核而未完全成熟的紅細胞，體積較正常紅細胞稍大。增多反映骨髓造血功能旺盛，紅細胞系增生活躍。見于增生性貧血，尤以溶血性貧血時最多見。胞質(zhì)內(nèi)存在嗜堿性黑藍色顆粒的紅細胞，屬于未完全成熟紅細胞，顆粒大小不一、多少不等。常作為鉛中毒的診斷篩選指標。嗜堿性點彩染色質(zhì)小體常見于增生性貧血、脾切除后、巨幼細胞性貧血、惡性貧血等在嗜多色性或堿性點彩紅細胞的胞質(zhì)中出現(xiàn)的紫紅色細線圈狀結(jié)構(gòu)，有時繞成8字形?？赡転榘|(zhì)中的脂蛋白變性所致，常與染色質(zhì)小體同時存在。見于巨幼細胞性貧血和鉛中毒患者?？úㄊ檄h(huán)有核紅細胞即幼稚紅細胞，均存在于骨髓中。正常成人外周血中不能見到，在出生1周內(nèi)的新生兒外周血中可見到少量。成人外周血中出現(xiàn)均屬病理現(xiàn)象，可見于：增生性貧血、紅血病、紅白血病、髓外造血等。紅細胞碎片紅細胞呈盔形，常見于彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）、血栓性血小板減少性紫癜（TTP）等

緡錢狀紅細胞紅細胞呈串狀疊連似緡錢狀，常見于多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥、高球蛋白血癥、高纖維蛋白原血癥。紅細胞冷凝集常見于自身免疫性疾病、淋巴瘤血小板血小板直徑2～4μm，呈雙凸圓盤狀。血涂片上，血小板(P)圓、卵圓或不規(guī)則形，常聚集成群。其中央部分含藍紫色顆粒，稱顆粒區(qū)；周邊淡染為透明區(qū)。

巨大血小板：直徑可達7-30μm，比紅細胞還大，有時甚至會誤認為點彩紅細胞或淋巴細胞。有的外形不規(guī)則，呈橢圓、桿狀、帶狀等，有的拉得較長、粗細不均。漿透明、色淡、顆粒減少，多見于ITP、骨髓纖維化和慢粒白血病、SLE、DIC、子癇及某些風心病等涂片中。

血小板聚集參考范圍白細胞分類百分比（％）絕對值（×109/L）中性桿狀核粒細胞1～5（0.04～0.5）中性分葉核粒細胞50～70（2～7）嗜酸性核粒細胞0.5～5（0.02～0.5）嗜堿性粒細胞0～1（0～1）淋巴細胞20～40（0.8～4）單核細胞3～8（0.12～0.8）臨床意義中性粒細胞增多：急性感染、大出血、中毒、組織損傷、腫瘤中性粒細胞減少：脾功能亢進、SLE、慢性理化損傷等嗜酸粒細胞增多：過敏性疾患、某些傳染?。ㄐ杉t熱）、慢粒嗜酸粒細胞減少：傷寒、副傷寒嗜堿粒細胞增多：慢粒、真性紅細胞增多淋巴細胞增多：傳單、再障、淋巴細胞性白血病，腎移植術(shù)后單核細胞增多：感染（瘧疾、亞急性感染性心內(nèi)膜炎）、血液?。ü撬柙錾惓＞C合癥）庫爾特原理血細胞直方圖血細胞直方圖白細胞三分類白細胞五分類原理前向散射（FSC）：細胞體積側(cè)向蛍光（SFL）:核酸量側(cè)向散射光（SSC）：細胞內(nèi)部信息白細胞五分類SSCSFLImmatureGranulocyte

BlastAtypicalLYMPH

異形淋巴細胞SSCSFL原幼粒細胞檢測Blast網(wǎng)織紅細胞檢測FSCSFL血常規(guī)鏡檢分片規(guī)則

紅細胞平均體積：<60fl，>120fl血小板：<60×109/L，>800×109/L白細胞：<2×109/L，>20×109/L中性粒細胞數(shù)：<1×109/L中性粒細胞百分比：>90%淋巴細胞百分比：>60%單核細胞百分比：>15%嗜酸性粒細胞百分比：>15%嗜堿性粒細胞百分比：>2%儀器報警提示：原始細胞、未成熟顆粒、核左移、異型淋巴、異常淋巴/原始淋巴、有核紅細胞、血小板聚集、紅細胞凝集在細胞形態(tài)辨識方面，自動分析儀目前仍無法完全替代人工顯微鏡檢查預防多種血液系統(tǒng)惡性腫瘤的漏檢五、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)

要求：了解網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的原理和測定方法，掌握網(wǎng)織紅細胞參考值及臨床意義。原理：網(wǎng)織紅細胞(reticulocyte)是尚未完全成熟的紅細胞，其胞質(zhì)中含有核糖體等堿性物質(zhì)，能被煌焦油藍染為藍色顆粒和網(wǎng)狀物質(zhì)，故可區(qū)別于完全成熟的紅細胞。試劑10g/L煌焦油藍生理鹽水溶液煌焦油藍1.0g

檸檬酸鈉0.4g

氯化鈉0.85g

蒸餾水加至100ml，過濾后備用操作步驟1．取干凈小試管一只，加入10g/L煌焦油藍溶液2～3滴，然后加入等量的血液?；靹蚝蠓胖?5～20分鐘，使紅細胞充分染色2．制作血涂片3．干燥后用瑞氏染液復染（也可不復染）4．在低倍鏡下選擇細胞分布均勻，著色清晰的部位，用油鏡計數(shù)1000個紅細胞內(nèi)網(wǎng)織紅細胞數(shù)再除1000計算出網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)注：嚴重貧血病人，應計算網(wǎng)織紅細胞的絕對值（網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)×每微升內(nèi)的紅細胞數(shù)）網(wǎng)織紅細胞注意事項1．網(wǎng)織紅細胞必須用新鮮血液活體染色才能顯示，染液與血液的比例1∶1為，血液與染液混合時間必須足夠長。2．紅細胞應均勻散開，如有重疊則影響結(jié)果的準確性。網(wǎng)織紅細胞體積較成熟紅細胞體積稍大，多分布于涂片的尾部及兩側(cè)，故進行計數(shù)時應巡視整個血涂片中網(wǎng)織紅細胞分布情況再進行計數(shù)。3．為便于計數(shù)，可使用米勒氏窺盤或使用縮視野方法進行計數(shù)。4．染料配制前必須過濾，放置保存過程中防止有任何沉淀以影響計數(shù)結(jié)果。參考范圍

成人0.008～0.02（0.8%～2.0%）