2025年外研版選擇性必修三生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年外研版選擇性必修三生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷388考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、單克隆抗體制備過(guò)程中；對(duì)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活；增殖的細(xì)胞是()

①B淋巴細(xì)胞②骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③2、對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，關(guān)于其原因的描述，不正確的是（）A.微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)B.微生物具有生長(zhǎng)繁殖快的優(yōu)點(diǎn)C.微生物具有適應(yīng)性強(qiáng)、對(duì)環(huán)境因素不敏感的優(yōu)點(diǎn)D.微生物具有容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點(diǎn)3、紫杉醇是紅豆杉屬植物產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運(yùn)動(dòng)的作用，可用于某些癌癥的治療。某研究小組利用含3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷（3H-TdR）細(xì)胞培養(yǎng)液、紫杉醇對(duì)乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行了培養(yǎng)，如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.紫杉醇對(duì)正常的細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生毒副作用B.甲、乙兩瓶中，核DNA含量為4N的占比較高的是乙瓶C.甲瓶中大量的3H-TdR會(huì)在S期進(jìn)入細(xì)胞核D.甲乙在培養(yǎng)時(shí)應(yīng)提供5%的CO2濃度環(huán)境，以調(diào)節(jié)培養(yǎng)過(guò)程中的pH4、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物，會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加B.轉(zhuǎn)基因作物被動(dòng)物食用后，目的基因會(huì)轉(zhuǎn)入動(dòng)物體細(xì)胞中C.種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴(kuò)散而影響野生植物的遺傳多樣性D.轉(zhuǎn)基因植物的目的基因可能轉(zhuǎn)入根際微生物5、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞的發(fā)生以及受精作用的敘述，正確的是（）A.透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的唯一屏障B.性成熟后卵原細(xì)胞形成初級(jí)卵母細(xì)胞C.卵細(xì)胞形成時(shí)的分裂過(guò)程均在卵巢內(nèi)完成D.受精完成的標(biāo)志是雌原核和雄原核的相互融合6、基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)操作的，在基因工程操作的基本步驟中，一定不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的是A.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因B.目的基因與運(yùn)載體的黏性末端結(jié)合C.抗原-抗體雜交檢測(cè)目的基因表達(dá)D.DNA探針檢測(cè)受體細(xì)胞的目的基因7、基因治療是指（）A.對(duì)全身所有的細(xì)胞進(jìn)行基因改造，以達(dá)到根治疾病的目的B.把健康的外源基因?qū)氲接谢蛉毕莸募?xì)胞中，使其表達(dá)而達(dá)到治療疾病的目的C.運(yùn)用人工誘變的方法，使有缺陷的基因突變回正?；駾.運(yùn)用基因工程技術(shù)，把有缺陷的基因切除，達(dá)到治療疾病的目的8、藍(lán)莓酒工業(yè)化生產(chǎn)的大致流程如下：藍(lán)莓→破碎→酶解→榨汁過(guò)濾→滅菌→主發(fā)酵→后發(fā)酵→分離提純。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.將藍(lán)莓破碎后加果膠酶可提高出汁率B.對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備滅菌的目的是防止雜菌污染C.菌種繁殖和酒精生成均在主發(fā)酵階段完成D.用顯微鏡檢測(cè)發(fā)酵過(guò)程中活菌數(shù)量，結(jié)果比實(shí)際值偏低評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、營(yíng)養(yǎng)缺陷性菌株是野生型菌株經(jīng)過(guò)人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種成長(zhǎng)因子的能力；只能在補(bǔ)充了相應(yīng)的生長(zhǎng)因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長(zhǎng)的變異菌株。某研究小組對(duì)酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時(shí)間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙；丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進(jìn)一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。

下列分析正確的是（）A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)皿都可能存在營(yíng)養(yǎng)缺陷型10、如圖為體細(xì)胞核移植過(guò)程流程圖；下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞核B.核移植的供體細(xì)胞一般都選傳代10~50代左右的細(xì)胞C.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中使用的去核方法只有顯微操作法D.上述過(guò)程能夠體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性11、為有效防范由各類生物因子、生物技術(shù)誤用濫用等引起的生物性危害，生物安全已納入國(guó)家安全體系。下列不符合生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題的是（）A.利用生物技術(shù)改造工程菌獲得大量的抗生素B.克隆技術(shù)可應(yīng)用到器官移植但不能進(jìn)行人體克隆C.中國(guó)反對(duì)生物武器，但在特殊情況下可以生產(chǎn)生物武器D.基因編輯技術(shù)不僅可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究，也可用于編輯嬰兒12、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)基一般為固體培養(yǎng)基B.培養(yǎng)結(jié)果只能獲得大量細(xì)胞及生物制品，而不能獲得生物體C.需要氧氣來(lái)滿足細(xì)胞代謝的需要，不需要二氧化碳D.通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)可以檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某物質(zhì)的毒性13、下列有關(guān)利用不同材料進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是（）A.雞血細(xì)胞液中，加入0．14mol/L的NaCl溶液有利于瓦解細(xì)胞膜B.洋蔥鱗片葉碎片中，加入沐浴液和食鹽后研磨有利于去除細(xì)胞壁C.魚(yú)白（精巢）提取的DNA濾液中，加入嫩肉粉有利于去除蛋白質(zhì)D.菜花提取的DNA濾液中，加入冷酒精有利于析出DNA14、多巴胺（DA）是神經(jīng)系統(tǒng)中關(guān)鍵的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，廣泛調(diào)節(jié)多種脊椎動(dòng)物的許多復(fù)雜生理功能。為了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)體內(nèi)多巴胺濃度的動(dòng)態(tài)變化情況，我國(guó)科研人員開(kāi)發(fā)出了一種新型DA熒光探針，通過(guò)將對(duì)結(jié)構(gòu)變化敏感的熒光蛋白（cpEGFP）嵌入人源多巴胺受體，使多巴膠這一化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為熒光信號(hào)，再結(jié)合現(xiàn)有的成像技術(shù)即可實(shí)現(xiàn)。這一成果解決了如何在擁有數(shù)十億個(gè)神經(jīng)細(xì)胞、數(shù)萬(wàn)億個(gè)突觸連接的大腦中精確檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)釋放的一個(gè)難題。結(jié)合以上信息和所學(xué)知識(shí)判斷，以下說(shuō)法正確的是（）A.神經(jīng)遞質(zhì)是一類在細(xì)胞間充當(dāng)信息分子的特殊物質(zhì)B.DA與DA受體結(jié)合后會(huì)引起后者空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化C.DA探針與基因診斷中的基因探針的化學(xué)本質(zhì)相間D.DA探針熒光強(qiáng)度的變化能夠反映出DA濃度的變化評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、______——“分子縫合針”16、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起的絲狀物的顏色是____________。獲取的絲狀物后加入到質(zhì)量濃度為_(kāi)_____________mol/L濃度的NaCL溶液的試管中，使絲狀物重新溶解。17、通過(guò)____________的方式，來(lái)控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。18、請(qǐng)回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問(wèn)題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。19、最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成______，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取______，用相應(yīng)的______進(jìn)行______。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共20分)20、要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終必須通過(guò)改造氨基酸序列來(lái)完成。()A.正確B.錯(cuò)誤21、治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來(lái)修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共21分)22、單克隆抗體特異性強(qiáng)；靈敏度高，用于診療疾病具有準(zhǔn)確；高效等特點(diǎn)。下圖表示單克隆抗體制備過(guò)程。

回答下列問(wèn)題：

（1）若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；則A是_________________細(xì)胞，誘導(dǎo)d過(guò)程常用的因素是_________________（答出一個(gè)即可）。

（2）用于篩選細(xì)胞D的培養(yǎng)基必需滿足兩個(gè)條件：一是_________________細(xì)胞都會(huì)死亡；二是保證_________________細(xì)胞能生長(zhǎng)。

（3）使用合成培養(yǎng)基體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（4）制備抗新冠病毒單克隆抗體檢測(cè)試劑，可用_________________（選填數(shù)字標(biāo)號(hào)：①新冠病毒滅活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以獲得圖中的A細(xì)胞。23、如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的一些重要操作示意圖；請(qǐng)分析回答有關(guān)問(wèn)題：

（1）正確的操作順序是_______________________（用字母和箭頭表示）。

（2）圖中C、E步驟都加入了蒸餾水，但其目的不同，分別是_______________________和_______________________。

（3）為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可將其溶解后，滴加________________試劑后沸水浴加熱，如果出現(xiàn)___________________；則證明該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是_________________________________________。24、利用乳腺生物反應(yīng)器獲取藥用蛋白具有產(chǎn)量高；成本低等優(yōu)點(diǎn)。如圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白的流程。

請(qǐng)回答：

（1）PCR擴(kuò)增人血清白蛋白基因使用的酶是_____________。要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)將其與____________基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組。

（2）基因工程的核心步驟是________________________，將目的基因?qū)肱Ｊ芫阉玫姆椒ㄊ莀___________________。

（3）體外受精前精子要進(jìn)行____________處理，過(guò)程②包括__________技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；可用___________技術(shù)獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢。

（4）若要檢測(cè)牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用_________________技術(shù)。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共20分)25、我國(guó)已出臺(tái)鼓勵(lì)農(nóng)作物秸稈還田的政策；但是秸稈腐化時(shí)間長(zhǎng)；易發(fā)病蟲(chóng)害等問(wèn)題限制其推廣。某研究小組進(jìn)行了利用玉米秸稈發(fā)酵制備微生物菌肥的系列實(shí)驗(yàn)。

（1）從植物根際土壤中篩選出具有高效固氮、釋放不溶性無(wú)機(jī)磷和水解有機(jī)磷能力的三種菌株N3、Y1、W3；需選用的培養(yǎng)基分別為下表中的_______。

。類型組成甲葡萄糖、NaCl、MgSO4、CaSO4、CaCO3、KH2PO4，pH7．0乙葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、植酸鈣，pH7．0丙葡萄糖、NaCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、Ca3(PO4)2，pH7．0注：植酸鈣分子式為C6H6Ca6O24P6；可溶于水，微溶于丙酮或乙醇。

（2）將粉碎后的玉米秸稈進(jìn)行_______滅菌，冷卻后接種一定濃度的里氏木霉菌懸液。發(fā)酵一定時(shí)間后，再接種等量的N3、Y1、W3菌懸液。繼續(xù)發(fā)酵一定時(shí)間后；稱取10g固態(tài)發(fā)酵物，梯度稀釋后，用_______法統(tǒng)計(jì)有效活菌數(shù)。推測(cè)加入里氏木霉菌懸液的用途是：_______。

（3）分別在不同的_______；_______、接種量和發(fā)酵時(shí)間等條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；最終確定最佳發(fā)酵條件后就可以進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。

（4）用發(fā)酵得到的復(fù)合微生物菌肥進(jìn)行煙草幼苗盆栽實(shí)驗(yàn)；測(cè)得栽培40天時(shí)葉片的凈光合速率如下表所示?？傻贸龅慕Y(jié)論是：_______。

。盆栽基質(zhì)土肥比例凈光合速率（μmol·m-2·s-1）珍珠巖57g泥炭土150g0．5珍珠巖57g泥炭土145g、菌肥5g2．6珍珠巖57g泥炭土140g、菌肥10g4．0珍珠巖57g泥炭土120g、菌肥30g2．1（5）將玉米秸稈發(fā)酵制備的微生物菌肥用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，其優(yōu)越性是：_______。（寫出2點(diǎn)即可）26、如圖是運(yùn)用生物工程技術(shù)培育“轉(zhuǎn)基因試管?！钡膱D解。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：

（1）圖中①過(guò)程采集到的良種公牛精子需進(jìn)行_________________處理。精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別是哺乳動(dòng)物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲(chǔ)備是在_________________完成的。

（2）圖中③過(guò)程通常選擇發(fā)育到_________________階段的胚胎進(jìn)行移植，移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是_____________________________________________________。

（3）構(gòu)建藥用蛋白基因表達(dá)載體需要將藥用蛋白基因與_____________的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，通過(guò)___________方法導(dǎo)入到性染色體組成為_(kāi)__________的受精卵中。

（4）若得到的藥用蛋白不穩(wěn)定，在體外保存期短。為解決這一問(wèn)題，可通過(guò)對(duì)藥用蛋白基因進(jìn)行_________________來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)現(xiàn)有藥用蛋白的改造。27、螢火蟲(chóng)發(fā)光是體內(nèi)熒光素酶催化一系列反應(yīng)所產(chǎn)生的現(xiàn)象。如果熒光素酶存在于植物體內(nèi)；也可使植物體發(fā)光。一直以來(lái)熒光素酶的惟一來(lái)源是從螢火蟲(chóng)腹部提取。但加利福尼亞大學(xué)的一組科學(xué)家成功地通過(guò)轉(zhuǎn)基因工程實(shí)現(xiàn)了將熒光素酶基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi)，并在大腸桿菌體內(nèi)產(chǎn)生熒光素酶。

請(qǐng)你根據(jù)已有的知識(shí)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

（1）在此轉(zhuǎn)基因工程中；目的基因是________，具體操作過(guò)程中下圖所示的黏性末端是由________種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的。

（2）將此目的基因?qū)氲酱竽c桿菌體內(nèi)需要載體的幫助。下列各項(xiàng)是選取載體時(shí)必須考慮的是________。

【選項(xiàng)A】能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存。

【選項(xiàng)B】具有特定的限制酶切割位點(diǎn)。

【選項(xiàng)C】具有與目的基因相同的堿基片段。

【選項(xiàng)D】具有某些標(biāo)記基因。

（3）本實(shí)驗(yàn)中將目的基因?qū)氪竽c桿菌的載體可以是________。

【選項(xiàng)A】質(zhì)?！具x項(xiàng)B】動(dòng)物病毒。

【選項(xiàng)C】噬菌體衍生物【選項(xiàng)D】植物病毒。

（4）在此轉(zhuǎn)基因工程中；將體外重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)，并使其在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存和表達(dá)的過(guò)程稱為_(kāi)_______。最常用的方法是首先用________處理大腸桿菌得到___________細(xì)胞。

（5）目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，用____________技術(shù)來(lái)檢測(cè)。目的基因是否表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，除了通過(guò)大腸桿菌是否發(fā)光來(lái)確定外，還可以通過(guò)________________特異性反應(yīng)來(lái)判斷。28、科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)刖d羊細(xì)胞內(nèi)；經(jīng)培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因綿羊的生長(zhǎng)速率比一般綿羊提高30%，體型增大50%。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)刖d羊細(xì)胞前，需先獲得生長(zhǎng)激素基因，可從人的__________細(xì)胞中提取總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，cDNA中___________（填“包含”或“不包含”）啟動(dòng)子。使用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，可用獲得的cDNA作為模板，此外，還需在PCR反應(yīng)體系中加入根據(jù)__________設(shè)計(jì)的兩種引物、四種脫氧核苷酸和___________等。

(2)人生長(zhǎng)激素基因能與質(zhì)粒重組的基礎(chǔ)是__________；人生長(zhǎng)激素基因在受體細(xì)胞中能夠表達(dá)的基礎(chǔ)是___________。

(3)在培育轉(zhuǎn)基因綿羊的過(guò)程中，__________是基因工程的核心，常用___________法將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)刖d羊體細(xì)胞內(nèi)，然后經(jīng)___________技術(shù)能獲得大量的轉(zhuǎn)基因綿羊。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、A【分析】【分析】

單克隆抗體的制備：

1；細(xì)胞來(lái)源：B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性抗體；在體外不能無(wú)限繁殖；骨髓瘤細(xì)胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無(wú)限繁殖。

2；雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖；又能產(chǎn)生特異性抗體。

3；兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。

4；兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性。

5；提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。

6；單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高；并可能大量制備。

【詳解】

特定培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的目的是篩選出既能大量增殖、又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，因此其他的細(xì)胞都不能在此培養(yǎng)基上生存。在這種培養(yǎng)基上不能存活和繁殖的細(xì)胞有：①B淋巴細(xì)胞、②小鼠骨髓瘤細(xì)胞、③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞、④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞。故選A。2、C【分析】【分析】

對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早；最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域；這是因?yàn)槲⑸锞哂猩斫Y(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)繁殖快、對(duì)環(huán)境因素敏感和容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作等優(yōu)點(diǎn)。

【詳解】

A；微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)；便于研究，A正確；

B；微生物的生長(zhǎng)周期短；具有生長(zhǎng)繁殖快的優(yōu)點(diǎn)，B正確；

C；微生物對(duì)環(huán)境因素敏感；如在某種抗生素的環(huán)境中不能生存，C錯(cuò)誤；

D；微生物的遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單；具有容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點(diǎn)，D正確。

故選C。3、A【分析】【分析】

有絲分裂間期分為G1（DNA合成前期）、S（DNA合成期）、G2（DNA合成后期）三個(gè)階段，其中G1期與G2期進(jìn)行RNA（即核糖核酸）的復(fù)制與有關(guān)蛋白質(zhì)的合成；S期進(jìn)行DNA的復(fù)制。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：無(wú)菌；無(wú)毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；通常還要在培養(yǎng)液中加入一定量的的抗生素，以防被污染，此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物累積對(duì)細(xì)胞自身產(chǎn)生危害；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：無(wú)機(jī)物（無(wú)機(jī)鹽、微量元素等），有機(jī)物（糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子等）血清和血漿(提供細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份)；溫度和pH：（36.5±0.5℃，7.2～7.4）；氣體環(huán)境：（95%的空氣+5%CO?的混合氣體），其中5%CO?氣體是為保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定。

【詳解】

A；對(duì)于正常細(xì)胞而言；分裂增殖是正?，F(xiàn)象之一，根據(jù)題干“紫杉醇是紅豆杉屬植物產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運(yùn)動(dòng)的作用”可知：若用紫杉醇處理正常的細(xì)胞，會(huì)影響正常細(xì)胞增殖過(guò)程中染色體的運(yùn)動(dòng)從而影響細(xì)胞的正常分裂，具有毒副作用，A錯(cuò)誤；

B；甲、乙的區(qū)別在于乙瓶中加了紫杉醇處理；根據(jù)題干“紫杉醇是紅豆杉屬植物產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運(yùn)動(dòng)的作用”可知紫杉醇可以抑制進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞正常分裂成兩個(gè)子細(xì)胞，由于核DNA的復(fù)制是正常的，經(jīng)過(guò)間期復(fù)制核DNA數(shù)量為4N，甲瓶中細(xì)胞分裂正常，乙瓶中細(xì)胞核DNA復(fù)制后無(wú)法分配到子細(xì)胞中去，仍留在原來(lái)的細(xì)胞中，導(dǎo)致乙瓶中核DNA為4N含量的細(xì)胞占比高于乙瓶，B正確；

C、3H-TdR作為DNA的合成原料之一；會(huì)在分裂間期的S（DNA合成期）進(jìn)入細(xì)胞核，以供核DNA的復(fù)制使用，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件之一：氣體環(huán)境：（95%的空氣+5%CO?的混合氣體）；其中5%CO?氣體是為保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定，D正確。

故選A。4、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物；植物對(duì)昆蟲(chóng)進(jìn)行選擇，會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加，A正確；

B；動(dòng)物取食轉(zhuǎn)基因作物后；要經(jīng)過(guò)消化吸收才進(jìn)入身體，目的基因不可能直接進(jìn)入動(dòng)物細(xì)胞中，B錯(cuò)誤；

C；轉(zhuǎn)基因植物可能與野生植物發(fā)生雜交而出現(xiàn)基因交流；影響野生植物的遺傳多樣性，C正確；

D；目的基因被微生物攝入細(xì)胞內(nèi)后；可能進(jìn)入這些微生物中，D正確。

故選B。5、D【分析】【分析】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段準(zhǔn)備階段；精子獲能，剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動(dòng)物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力準(zhǔn)備階段，卵子的準(zhǔn)備，動(dòng)物排出的可能是初級(jí)卵母細(xì)胞也可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力。

卵細(xì)胞形成過(guò)程；其中減數(shù)第一次分裂是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，場(chǎng)所在卵巢;減數(shù)第二次分裂是在受精過(guò)程中完成的，場(chǎng)所在輸卵管中。受精作用完成的標(biāo)志:在卵黃膜和透明帶之間的間隙可以觀察到兩個(gè)極體(一個(gè)是第一極體，還有一個(gè)是第二極體)。

【詳解】

A；透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞質(zhì)膜反應(yīng)是防止多精入卵的兩道屏障；A錯(cuò)誤；

B；在胎兒期性別分化后卵原細(xì)胞就可以形成初級(jí)卵母細(xì)胞；B錯(cuò)誤；

C；卵細(xì)胞形成時(shí)的分裂過(guò)程在卵巢和輸卵管中完成；C錯(cuò)誤；

D；雌原核和雄原核的相互融合標(biāo)志著受精過(guò)程的完結(jié)；D正確。

故選D。6、C【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。其中人工合成目的基因；基因表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因的檢測(cè)都進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。

【詳解】

A；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的原理是DNA的雙鏈復(fù)制；DNA復(fù)制過(guò)程中遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)，A不符合題意；

B；目的基因與運(yùn)載體的粘性末端之間的堿基通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)連接在一起；形成基因表達(dá)載體，B不符合題意；

C；抗原與抗體都不含堿基；所以抗原抗體雜交不存在堿基互補(bǔ)配對(duì)，C符合題意；

D；用DNA探針檢測(cè)目的基因時(shí)需要進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)；D不符合題意。

故選C。7、B【分析】【分析】

本題主要考查基因治療的概念?；蛑委煟╣enetherapy）是指將外源正?；?qū)氚屑?xì)胞；以糾正或補(bǔ)償缺陷和異?；蛞鸬募膊?，以達(dá)到治療目的。其中也包括轉(zhuǎn)基因等方面的技術(shù)應(yīng)用，也就是將外源基因通過(guò)基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將其插入病人的適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞中，使外源基因制造的產(chǎn)物能治療某種疾病。從廣義說(shuō)，基因治療還可包括從DNA水平采取的治療某些疾病的措施和新技術(shù)。

【詳解】

通過(guò)分析可知；基因治療是指把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，達(dá)到治療疾病的目，B正確；ACD錯(cuò)誤。

故選B。8、D【分析】【分析】

植物細(xì)胞壁主要成分是纖維素和果膠；可在果汁加工過(guò)程中加入纖維素酶和果膠酶以破壞細(xì)胞壁，提高出汁率。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，需要對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行滅菌。果酒的發(fā)酵過(guò)程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段，菌種的繁殖；大部分糖的分解和酒精生成在主發(fā)酵階段完成。用顯微鏡檢測(cè)酵母菌數(shù)量時(shí)，因?yàn)闊o(wú)法區(qū)分活菌和死菌，會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏高。

【詳解】

A；植物細(xì)胞壁主要成分是纖維素和果膠；可在果汁加工過(guò)程中加入纖維素酶和果膠酶以破壞細(xì)胞壁，提高出汁率，A正確；

B；獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染；需要對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行滅菌，B正確；

C；果酒的發(fā)酵過(guò)程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段；菌種的繁殖、大部分糖的分解和酒精生成在主發(fā)酵階段完成，C正確；

D；用顯微鏡檢測(cè)酵母菌數(shù)量時(shí)；因?yàn)闊o(wú)法區(qū)分活菌和死菌，會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏高，D錯(cuò)誤。

故選D。二、多選題(共6題，共12分)9、A:C【分析】【分析】

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)足夠稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后，可形成單菌落。

【詳解】

A；甲培養(yǎng)皿的菌落均勻分布；接種方法應(yīng)為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲、丙培養(yǎng)基菌落數(shù)目多；包括野生型酵母菌菌株和某種營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，乙培養(yǎng)皿菌株是某種營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，甲和丙是加入了同種營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C；由于基因突變具有不定向性；接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營(yíng)養(yǎng)缺陷型，且有些菌落不一定由一個(gè)酵母菌形成，所以，甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少，C正確；

D；乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D錯(cuò)誤。

故選AC。10、B:C【分析】【分析】

分析題圖：該圖為動(dòng)物體細(xì)胞核移植過(guò)程和胚胎移植過(guò)程。動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。

【詳解】

A；生物的性狀主要受核基因控制；去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞核，A正確；

B；核移植時(shí)做供核一方的一般是傳代10代以內(nèi)細(xì)胞；原因是細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變，B錯(cuò)誤；

C；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法；也可采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法，C錯(cuò)誤；

D；核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物能夠體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；D正確。

故選BC。11、C:D【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；可以通過(guò)生物合成法、全化學(xué)合成法、半化學(xué)合成法來(lái)產(chǎn)生抗生素；其中生物合成法中可以通過(guò)工程菌制造法來(lái)產(chǎn)生，A正確；

B；克隆技術(shù)是可以克隆器官的；但是不可以人體克隆，禁止生殖性克隆，B正確；

C；中國(guó)聲明：在任何情況下；不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散，C錯(cuò)誤；

D；基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究；但不能用于編輯嬰兒，D錯(cuò)誤。

故選CD。12、A:C【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境；②營(yíng)養(yǎng)；③溫度和pH；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞一般用液體培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)；需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境、基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、適宜的溫度和pH、一定量的氧氣和二氧化碳等，A錯(cuò)誤；

B；由于動(dòng)物細(xì)胞分化程度高；雖然細(xì)胞核內(nèi)具有該物種的全套遺傳物質(zhì)，但單個(gè)細(xì)胞不能形成完整生物體，所以目前還不能通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得生物體，B正確；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中；需要氧氣滿足細(xì)胞代謝，需要二氧化碳維持培養(yǎng)液的pH，C錯(cuò)誤；

D；通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以生產(chǎn)生物制品；可以培養(yǎng)皮膚移植的材料，還可以檢測(cè)有毒物質(zhì)等，D正確。

故選AC。13、C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

2；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

3；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；雞血細(xì)胞液加入蒸餾水；使得雞血細(xì)胞的細(xì)胞膜吸水漲破，A錯(cuò)誤；

B；洋蔥鱗片葉碎片中；加入沐浴液有利于去除細(xì)胞膜，食鹽能溶解DNA，B錯(cuò)誤；

C；向DNA粗提取物中加入嫩肉粉；嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能破壞其中的蛋白質(zhì)，有利于去除蛋白質(zhì)，獲得較純凈DNA，C正確；

D；由于DNA不溶于酒精；蛋白質(zhì)溶于酒精，因此需向DNA濾液中加入冷酒精有利于析出DNA，一步純化DNA，D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】14、A:B:D【分析】【分析】

神經(jīng)遞質(zhì)是指由突觸前神經(jīng)元合成并在末梢處釋放；經(jīng)突觸間隙擴(kuò)散，特異性地作用于突觸后神經(jīng)元或效應(yīng)器細(xì)胞上的受體，引致信號(hào)從突觸前遞質(zhì)到突觸后的一些化學(xué)物質(zhì)。

【詳解】

A；神經(jīng)遞質(zhì)是一類充當(dāng)信息分子的特殊物質(zhì)；能引發(fā)突觸后膜興奮（傳遞興奮，如乙酰膽堿）或抑制，A正確；

B；神經(jīng)遞質(zhì)需要與突觸后膜的特異性受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用；DA與DA受體結(jié)合后會(huì)引起后者空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而使DA發(fā)揮作用，B正確；

C；由題意知；多巴胺（DA）是神經(jīng)系統(tǒng)中關(guān)鍵的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，而基因診斷中的基因探針本質(zhì)是一段DNA序列，C錯(cuò)誤；

D；由題“為了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)體內(nèi)多巴胺濃度的動(dòng)態(tài)變化情況；我國(guó)科研人員開(kāi)發(fā)出了一種新型DA熒光探針”知，DA探針熒光強(qiáng)度的變化能夠反映出DA濃度的變化，D正確。

故選ABD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】冷酒精白色217、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液18、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無(wú)機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確分析，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)抗體抗原－抗體雜交四、判斷題(共2題，共20分)20、B【分析】【詳解】

要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造；最終必須通過(guò)改造基因中的堿基序列來(lái)完成，因?yàn)榛蚰苤笇?dǎo)蛋白質(zhì)的生物合成。

故錯(cuò)誤。21、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來(lái)修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。本說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共21分)22、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：

（1）原理：細(xì)胞增殖。

（2）培養(yǎng)基性質(zhì)：液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無(wú)菌環(huán)境。

（3）需要使用動(dòng)物血清。

（4）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（5）無(wú)菌條件下進(jìn)行。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（6）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

2；單克隆抗體的制備：

（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體。②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（3）制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無(wú)限增殖。②骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖。

（4）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等；結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。

【詳解】

（1）若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；則此過(guò)程可以為單克隆抗體的制備過(guò)程。故A是已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段（誘導(dǎo)d過(guò)程）有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。

（2）一般來(lái)說(shuō)；誘導(dǎo)A細(xì)胞和B細(xì)胞融合，形成C細(xì)胞后，必須利用選擇培養(yǎng)基來(lái)篩選出目的細(xì)胞。那么滿足的條件必須是：未融合的（親本）細(xì)胞和融合的同種（核的）細(xì)胞都會(huì)死亡，而雜交（瘤）細(xì)胞（或雜種細(xì)胞）能夠在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。

（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：一是液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無(wú)菌環(huán)境。二是氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

（4）選用免疫原性好的細(xì)菌；病毒、立克次體、螺旋體等；經(jīng)人工培養(yǎng)，再用物理或化學(xué)方法將其殺滅制成疫苗，即為滅活疫苗。而新冠病毒為RNA病毒，選用RNA疫苗都可以。故選③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，對(duì)某些現(xiàn)實(shí)生活中的生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論?！窘馕觥拷?jīng)過(guò)（抗原、病原體）免疫的（小鼠）B（淋巴）細(xì)胞（或漿細(xì)胞，或已免疫的B細(xì)胞，或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞）聚乙二醇（PEG）、滅活的（仙臺(tái)）病毒、電激（或電融合）未融合的（親本）細(xì)胞和融合的同種（核的）細(xì)胞雜交（瘤）細(xì)胞（或雜種細(xì)胞））血清（或血漿）95%空氣和5%CO2③23、略

【分析】【分析】

1；利用動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理：①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的．當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低．利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液．利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水?。?huì)染成藍(lán)色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

2；利用動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)步驟是：①制備雞血細(xì)胞液；②提取雞血細(xì)胞和物質(zhì)，③細(xì)胞核物質(zhì)中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤過(guò)濾獲取紗布上的粘稠物，⑥D(zhuǎn)NA的再溶解，⑦加冷卻酒精使DNA析出，⑧二苯胺鑒定DNA分子。

【詳解】

（1）DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水；破碎細(xì)胞→過(guò)濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質(zhì)→DNA的析出→鑒定．所以正確的操作順序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破；釋放細(xì)胞核物質(zhì)；E步驟甲蒸餾水是降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出。

（3）鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA；可滴加二苯胺試劑，在沸水浴加熱的條件下如果出現(xiàn)藍(lán)色則該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是獲取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查DNA的粗提取和鑒定，要求考生識(shí)記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實(shí)驗(yàn)中采用的試劑及試劑的作用等，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，難度適中?！窘馕觥緾→B→E→D→A使雞血細(xì)胞吸水漲破，釋放出細(xì)胞核物質(zhì)降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出二苯胺藍(lán)色提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA24、略

【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因奶牛的產(chǎn)生采用了體外受精（精子的采集和獲能；卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、受精）、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

（1）參與PCR的主要物質(zhì)：引物；熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）、原料（dNTP）、模板和緩沖液（其中需要Mg2+）等；故主要使用熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等，故要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)將其與（牛）乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法。

（3）體外受精是指哺乳動(dòng)物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過(guò)程的技術(shù)。成熟的精子在受精前需獲能處理；過(guò)程②包括早期胚胎培養(yǎng)（動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)）技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。為了獲得多只與該轉(zhuǎn)基因奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢；可進(jìn)行胚胎分割，操作時(shí)的注意事項(xiàng)是將囊胚階段的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。

（4）若要檢測(cè)牛奶中是否含有人血清白蛋白；根據(jù)抗原特異性結(jié)合原理，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟；蛋白質(zhì)工程是通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。能根據(jù)題干信息設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，綜合考察運(yùn)用生物學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力?！窘馕觥繜岱€(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）（牛）乳腺蛋白基因表達(dá)載體的構(gòu)建顯微注射法獲能早期胚胎培養(yǎng)（動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)）胚胎分割抗原—抗體雜交六、綜合題(共4題，共20分)25、略

【分析】【分析】

在微生物培養(yǎng)中；各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無(wú)機(jī)鹽。另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

【詳解】

（1）固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)?，因此菌株N3的培養(yǎng)基中不需要氮源，N3對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基甲；水解有機(jī)磷的菌株W3，在培養(yǎng)基中應(yīng)含有有機(jī)磷（植酸鈣），故W3對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基乙；丙培養(yǎng)基中有Ca3(PO4)2，對(duì)應(yīng)釋放不溶性無(wú)機(jī)磷的Y1。

（2）粉碎后的玉米秸稈滅菌采用高壓蒸汽滅菌法；要統(tǒng)計(jì)有效活菌數(shù)；用稀釋涂布平板法；推測(cè)在粉碎的秸稈溶液中加入里氏木霉菌懸液的用途是，初步分解玉米秸稈中的物質(zhì)，使其容易被目的菌吸收利用。

（3）分別在不同的溫度和pH；接種量和發(fā)酵時(shí)間等條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；最終確定最佳發(fā)酵條件后就可以進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。

（4）從表格數(shù)據(jù)可以看出；加了菌肥后，凈光合速率都比對(duì)照組要高，故可以得出結(jié)論：復(fù)合微生物菌肥能促進(jìn)煙草的光合作用，且在土肥比為14∶1時(shí)促進(jìn)作用最強(qiáng)。

（5）將玉米秸稈發(fā)酵制備的微生物菌肥用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)；其優(yōu)越性是：降低或替代化學(xué)肥料的使用；可有效利用秸稈廢棄物；減少秸稈直接還田導(dǎo)致的病蟲(chóng)害。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物的培養(yǎng)和篩選的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分等，能挖掘題干信息，分析題干情境準(zhǔn)確作答?！窘馕觥考?、丙、乙高壓蒸汽涂布平板初步分解玉米秸稈中的物質(zhì)，使其容易被目的菌吸收利用溫度pH復(fù)合微生物菌肥能促進(jìn)煙草的光合作用，且在土肥比為14∶1時(shí)促進(jìn)作用最強(qiáng)降低或替代化學(xué)肥料的使用；可有效利用秸稈廢棄物；減少秸稈直接還田導(dǎo)致的病蟲(chóng)害26、略

【分析】【分析】

由圖可知：①是體外受精；②是早期胚胎培養(yǎng)、③是胚胎移植、④是用顯微注射法把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。

（1）

精子需要進(jìn)行獲能處理；才能進(jìn)行受精。精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別是哺乳動(dòng)物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲(chǔ)備是在出生前（或胎兒時(shí)期）完成的。

（2）

圖中③為胚胎移植過(guò)程；該過(guò)程通常選擇發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段的胚胎進(jìn)行移植。移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

（3）

要使目的基因只在乳腺中表達(dá)；在構(gòu)建藥用蛋白基因表達(dá)載體時(shí)需要將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，由于只有雌性個(gè)體能產(chǎn)生乳汁，因此要導(dǎo)入到性染色體組成為XX的受精卵中。

（4）

為了解決藥用蛋白在體外保存期短的問(wèn)題；可通過(guò)對(duì)藥用蛋白基因進(jìn)行基因修飾來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)現(xiàn)有藥用蛋白的改造，產(chǎn)生自然界原本不存在的蛋白質(zhì)，屬于蛋白質(zhì)工程的范疇。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程、胚胎工程等相關(guān)知識(shí)，要求考生熟悉基因工程的應(yīng)用和相關(guān)流程，熟記受精過(guò)程和理解胚胎移植的原理也是解決此類問(wèn)題的關(guān)鍵?！窘馕觥浚?）獲能出生前（或胎兒時(shí)期）

（2）桑椹胚或囊胚受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

（3）乳腺蛋白基因顯微注射