腦脊液檢驗(yàn)技術(shù)講解

腦脊液檢驗(yàn)技術(shù)腦脊液（cerebrospinalfluid,CSF）主要由腦室脈絡(luò)叢主動(dòng)分泌和超濾作用以及腦室的室管膜和蛛網(wǎng)膜下腔產(chǎn)生，循環(huán)流動(dòng)于腦室、蛛網(wǎng)膜下腔和脊髓中央管中的一種無色透明液體。腦脊液（cerebrospinalfluid,CSF）生成量

★成人120～180ml★新生兒10～60ml分布

蛛網(wǎng)膜下腔占75%，腦室系統(tǒng)約占25%。腦脊液（cerebrospinalfluid,CSF）腦脊液的功能緩沖保護(hù)作用調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓和酸堿運(yùn)輸參與神經(jīng)內(nèi)分泌血腦屏障★

最易通過物質(zhì)：

氯、鈉、鎂離子及乙醇★不易通過物質(zhì)：

清蛋白、葡萄糖、鈣離子、乳酸、氨基酸、尿素和肌酐★不能通過：

纖維蛋白、補(bǔ)體、抗體、某些藥物、膽紅素、膽固醇脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞對各種物質(zhì)的選擇性腦脊液標(biāo)本采集1.適應(yīng)證有腦膜刺激征者疑有顱內(nèi)出血者中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤不明原因的劇烈頭痛、昏迷、抽搐或癱瘓2.禁忌癥顱內(nèi)壓顯著升高，視神經(jīng)乳頭水腫休克、衰竭或?yàn)l危狀態(tài)的病人穿刺部位局部皮膚有炎癥顱后窩有占位性病變或伴有腦干癥狀者腦脊液標(biāo)本采集每管2ｍL腦脊液第1管

細(xì)菌培養(yǎng)

第2管

化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查

第3管

理學(xué)及顯微鏡檢查疑有惡性腫瘤，多留1管作脫落細(xì)胞檢查。及時(shí)送檢?。?！腦脊液一般性狀檢驗(yàn)1．顏色：無色（1）紅色

123離心離心OB:+OB:-穿刺出血：病理出血：注意：不能根據(jù)紅細(xì)胞是否皺縮鑒別陳舊性或新鮮性出血。腦脊液鹽基濃度（163毫當(dāng)量/升）>血漿鹽基濃度（155毫當(dāng)量/升)1．顏色：無色（2）黃色：陳舊性出血、椎管梗阻、結(jié)核性腦膜炎（3）白色或灰白色：化膿性腦膜炎（4）褐色或黑色：腦膜黑色素瘤（5）綠色：銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌、甲型鏈球菌引起的腦膜炎腦脊液一般性狀檢驗(yàn)2．透明度：清晰透明WBC>200×106/L或RBC>400×106/L

混濁化膿性腦膜炎時(shí)，白細(xì)胞↑↑，膿樣乳白混濁結(jié)核性腦膜炎時(shí)，白細(xì)胞↑，呈輕度毛玻璃樣混濁病毒性腦膜炎時(shí)，仍清晰透明或微濁腦脊液一般性狀檢驗(yàn)3．凝固性：正常腦脊液24h不凝

蛋白質(zhì)含量>10g/L，可形成凝塊急性化膿性腦膜炎，1～2h凝塊結(jié)核性腦膜炎時(shí)，12～24h纖細(xì)的薄膜蛛網(wǎng)膜下腔梗阻：黃色膠凍狀注：Froin-Nonne綜合征：膠樣凝固、黃變癥和蛋白-細(xì)胞分離。腦脊液一般性狀檢驗(yàn)?zāi)X脊液顯微鏡檢驗(yàn)1．細(xì)胞計(jì)數(shù)

（1）細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)改良牛鮑氏計(jì)數(shù)盤（2）白細(xì)胞計(jì)數(shù)冰醋酸破壞紅細(xì)胞，其他同上（3）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞數(shù)＝細(xì)胞總數(shù)－白細(xì)胞數(shù)注：當(dāng)穿刺損傷血管導(dǎo)致血性腦脊液或出血性腦血管病時(shí)，計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)已無意義，白細(xì)胞數(shù)須經(jīng)校正（4）參考值正常腦脊液內(nèi)無紅細(xì)胞，白細(xì)胞極少成人:（0-8）×106/L、兒童：（0-15）×106/L、10-50）×106/L輕度增加。白細(xì)胞：（50-100）×106/L中度增加>200×106/L顯著增加

2．白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

（1）步驟：腦脊液離心→沉渣→涂片→瑞氏染色→油鏡（2）正常：主要是L、M（7：3）（3）臨床意義化膿性腦膜炎：白細(xì)胞顯著增加，以N為主結(jié)核性腦膜炎：白細(xì)胞中度增加，早期以N為主，中晚期以L為主病毒性腦膜炎：白細(xì)胞輕度增加，以L為主腦寄生蟲?。篧BC↑EOS↑中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤：WBC正常或稍高，以L為主腦脊液顯微鏡檢驗(yàn)化膿性腦膜炎腦脊液顯微鏡檢驗(yàn)結(jié)核性腦膜炎腦脊液顯微鏡檢驗(yàn)病毒性腦膜炎腦脊液顯微鏡檢驗(yàn)?zāi)X囊蟲病腦脊液顯微鏡檢驗(yàn)?zāi)X脊液中腫瘤細(xì)胞腦脊液顯微鏡檢驗(yàn)?zāi)X脊液病原生物學(xué)檢驗(yàn)1.細(xì)菌檢查革蘭染色：腦膜炎雙球菌等抗酸染色：結(jié)核桿菌2.真菌檢查墨汁染色：新型隱球菌3.寄生蟲檢查腦脊液化學(xué)檢驗(yàn)1.蛋白質(zhì)檢查（1）定性試驗(yàn)Pandy試驗(yàn)飽和苯酚（石炭酸）球蛋白參考范圍：陰性或弱陽性+白色云霧狀++白色混濁+++白色濃霧狀++++立即形成濃霧或沉淀飽和硫酸銨腦脊液1.蛋白質(zhì)檢查（1）定性試驗(yàn)羅－瓊（Ross-Jones）氏試驗(yàn)半飽和硫酸銨正常參考范圍：陰性球蛋白1.蛋白質(zhì)檢查（2）定量試驗(yàn)

比濁法：磺基水楊酸-硫酸鈉比色法：鄰苯三酚紅鉬絡(luò)和顯色法參考值成人腰穿0.2-0.4g/L腦脊液化學(xué)檢驗(yàn)1.蛋白質(zhì)檢查臨床意義：正常腦脊液蛋白質(zhì)含量明顯低于血漿蛋白含量，僅相當(dāng)于血漿蛋白的0.5%,其中絕大部分為白蛋白，球蛋白微量。故Pandy試驗(yàn)可為弱陽性。而硫酸銨試驗(yàn)為陰性。腦脊液化學(xué)檢驗(yàn)1.蛋白質(zhì)檢查升高見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥：化膿性腦膜炎↑↑↑定性++++定量可達(dá)50g/L

結(jié)核性腦膜炎↑↑定性++～+++定量達(dá)10g/L

病毒性腦膜炎↑定性+～++出血：腦及蛛網(wǎng)膜下腔出血時(shí)，蛋白質(zhì)多輕度↑腦部腫瘤、脊髓腫瘤、蛛網(wǎng)膜下腔粘連，蛋白質(zhì)↑↑腦脊液化學(xué)檢驗(yàn)2．葡萄糖測定測定方法：葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法參考值：約為血糖60％成人腰椎穿刺（2.5～4.4mmol/L）

臨床意義降低：細(xì)菌感染（如化腦、結(jié)腦等）、真菌感染、腫瘤

增高：腦出血、病毒性腦炎、糖尿病腦脊液化學(xué)檢驗(yàn)3．氯化物測定測定方法：離子選擇電極法、干化學(xué)分析法等。參考值：

成人120-130mmol/L，是血漿的1.2~1.3倍臨床意義降低：細(xì)菌性或真菌性腦膜炎、低氯血癥；結(jié)核性腦膜炎時(shí)氯化物降低早于葡萄糖降低，對結(jié)腦和化膿性腦膜炎有鑒別診斷意義。增高：腎炎、心力衰竭、尿毒癥、脫水等。腦脊液化學(xué)檢驗(yàn)1、髓鞘堿性蛋白（神經(jīng)組織特有）測定方法：放射免疫法、ELISA等參考值：

低于4μg/L臨床意義增高：惡性神經(jīng)鞘瘤、多發(fā)性硬化癥（90%患者增高）、神經(jīng)性梅毒、腦血管病和外傷患者。腦脊液免疫學(xué)檢驗(yàn)?zāi)X脊液檢驗(yàn)技術(shù)腦脊液標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)應(yīng)在1h內(nèi)完成。由于腦脊液中細(xì)胞或細(xì)菌分解葡萄糖，故標(biāo)本抽出后30min內(nèi)測定葡萄糖，否則葡萄糖濃度降低。腦脊液蛋白測定時(shí)標(biāo)本需經(jīng)離心沉淀，用上清液測定以排除細(xì)胞的影響。細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)注意白細(xì)胞與新型隱球菌區(qū)別，后者有芽生現(xiàn)象，不溶于乙酸，加印度墨汁或優(yōu)質(zhì)墨汁后可見不著色的莢膜。計(jì)數(shù)池使用后應(yīng)用75%乙醇消毒60min，忌用有損計(jì)數(shù)池刻度的酚類消毒。腦脊液檢驗(yàn)注意事項(xiàng)腦脊液檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用疾病外觀蛋白質(zhì)葡萄糖氯化物細(xì)胞數(shù)細(xì)胞分類病原體化膿性腦膜炎渾濁、膿性、有凝塊↑↑↓↓↓↑↑N為主可見致病菌結(jié)核性腦膜炎霧狀微渾，薄膜形成↑↓↓↓↑早期：N為主后期：L為主抗酸染色陽性或結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽性病毒性腦炎清晰或微渾↑正常正?！麹為主無乙型腦炎清晰或微渾↑正常正常↑早期：N為主后期：L為主無新型隱球菌腦膜炎清晰或微渾↑↓↓↑L為主新型隱球菌腦室及蛛網(wǎng)膜下腔出血紅色渾濁↑↑正?！黂BC為主無腦腫瘤清晰↑正常正常↑L為主無腦脊髓梅毒清晰↑正常正?！麹為主無臨床案例分析

患者，男，25歲，3天前因勞累后飲酒出現(xiàn)發(fā)熱、寒戰(zhàn)、劇烈頭痛。4h前開始出現(xiàn)意識障礙，自言自語，回答不出問題，并出現(xiàn)抽搐，抽搐時(shí)雙眼上翻，凝視，口吐白沫，唇周發(fā)紺，雙手握拳，四肢抽動(dòng)，呼之不應(yīng)，持續(xù)0.5h后停止。查體：T39℃，P106次/分，R25次/分，BP112/60mmHg，昏迷，檢查不合作，雙瞳等大約0.6cm，眼底檢查，視乳頭有水腫，光反射遲鈍，頸抵抗明顯，雙肺、心、腹、淋巴結(jié)、皮膚均無異常，膝跟腱反射亢進(jìn)，右側(cè)巴氏征陽性。綜上所述，考慮為顱內(nèi)感染，腰穿檢查腦脊液，穿刺成功，測得壓力為255mmH2O，見白色渾濁腦脊液流出，收集6ml分別裝入3只無菌試管，每管2ml，立即送檢。實(shí)驗(yàn)室檢查：腦脊液外觀白色渾濁，RBC10×106/L，WBC3600×106/L，分葉核白細(xì)胞93％，淋巴細(xì)胞7％；蛋白質(zhì)2.49g/L，葡萄糖3.1mmol/L，氯化物121.5mmol/L；腦脊液沉淀物涂片，查見革蘭陰性球菌，多成雙排列。1．根據(jù)以上內(nèi)容，該患者可初步診斷為？2．對該患者確診還需做哪些檢查？練習(xí)1.銅綠假單孢菌性腦膜炎的腦脊液呈：A.無色水樣液體B.乳白色C.紅色D.黃色E.綠色2.最有可能屬于結(jié)核感染的腦脊液外觀為：A.無色清晰B.乳白色混濁C.毛玻璃樣混濁D.紅色混濁E.綠色混濁3.腦脊液采集的第一管